Прогностическое значение интерлейкина-4 при аллергических ринитах Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

5. Титановые имплантаты с покрытием биоситаллом в ре-конструктивно-пластической хирургии околоносовых пазух и носовой перегородки / Н. Ю. Михайленко [и др.] // Российская оториноларингология. — 2005. — № 3 (16). — С. 53 — 57.

6. Крюков, А. И. Оптимизация реконструктивных операций на лобной пазухе / А. И. Крюков, А. А. Агафонов // Вестник оториноларингологии. — 2010. — № 3. — С. 71 — 72.

7. Абдулкеримов, Х. Т. Применение металлоконструкций в восстановлении дефектов кранио-фасциально-орбитальной зоны / Х. Т. Абдулкеримов, Р. С. Давыдов // Российская оториноларингология. — 2010. — № 3. — С. 35.

8. Металлоконструкции из титана в реконструктивной хирургии костных дефектов основания черепа и лицевой зоны / Х. Т. Абдулкеримов [и др.]. // Материалы II Петербургского форума оториноларингологов России. — СПб., 2013. — С. 229.

ПОКРОВСКАЯ Елена Михайловна, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры фундаментальных основ клинической медицины Казанского федерального университета.

КРАСНОЖЕН Владимир Николаевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой оториноларингологии Казанской государственной медицинской академии. Адрес для переписки: [email protected]

Статья поступила в редакцию 08.07.2014 г. © Е. М. Покровская, В. Н. Красножен

№

УДК б12.°17.1:б1б.211-002 с. Ф. КУДАЙБЕРГЕНОВА

Г. К. ДЖАРКИНБЕКОВА Д. Е. ЖАЙСАКОВА

Казахский национальный медицинский университет им. С. Д. Асфендиярова, г. Алма-Ата, Республика Казахстан

ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

ИНТЕРЛЕЙКИНА-4

ПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ РИНИТАХ

Проведено исследование содержания «атопического» цитокина интерлейки-на-4 1^-4) в сыворотке крови, а также его концентрации в смывах с мазков-отпечатков со слизистой носа при различных формах аллергического ринита, сезонного и круглодичного, методом твердофазного иммуноферментного анализа. Смывы с мазков-отпечатков со слизистой носа при аллергическом рините взяты по предложенной авторами методике. Для дифференциального диагноза и предварительного подтверждения аллергического генеза ринитов можно использовать неинвазивный, физиологичный, достаточно информативный метод определения ^-4 в носовом секрете.

Ключевые слова: аллергический ринит, формы аллергического ринита, ^-4.

Аллергические риниты (АР) составляют % всех аллергических заболеваний. Это одно из наиболее широко распространенных заболеваний человека, связанное с различными ограничениями в физических, психологических и социальных аспектах жизни, являющееся причиной существенного снижения качества жизни, нарушений сна, и в тяжелых случаях создающее проблемы в обучении и профессиональной карьере больного. При этом слизистая оболочка носовой полости первой вступает в контакт и при повторном попадании аллергена сенсибилизируется. Аллергический ринит — это хроническое заболевание, в основе которого лежит воспалительная, IgE — опосредованная реакция на аллерген. Клинически он проявляется выделениями из носа, затруднением носового дыхания, чиханием и жжением в полости носа [1—3]. В Казахстане в настоящее время АР страдает более 25 % взрослого и более 16 % детского населения (около 5 млн человек). Для определения формы АР мы пользовались предложенной ARIA (Allergic Rhinitis

and Its Impacton Asthma) схемой классификации ринитов: сезонный аллергический ринит (САР) и круглогодичный аллергический ринит (КАР) [4].

Цель работы — изучение содержания IL-4 в сыворотке крови, а также его концентрации в смывах с мазков-отпечатков со слизистой носа при различных формах аллергического ринита — сезонного и круглодичного.

Материал и методы исследования. Мы провели исследование сывороточного IL-4 у 80 пациентов, а в смывах с мазков-отпечатков со слизистой оболочки носовой полости у 44 пациентов с различными формами АР — САР и КАР в период обострения заболевания в возрасте от 14 до 59 лет. А также у 23 больных с инфекционно-аллергическими заболеваниями носовой полости и околоносовых пазух. Контрольную группу составили 22 условно здоровых лица. Взятие мазков-отпечатков со слизистой оболочки носовой полости проведено по усовершенствованной и предложенной авторами методике [5].

Таблица 1

Показатели иммунного статуса у больных с САР (М ± m)

Показатели САР (n = 40) Контроль (n = 22)

Лейкоциты 4,50 ± 0,12 6,1 ± 0,35

Нейтрофилы п/я 3,02 ± 0,15 3,5 ± 0,17

Нейтрофилы с/я 53,21 ± 0,62 53 ± 1,21

Моноциты 4,35 ± 0,02 5,2 ± 0,09

Эозинофилы 10,01 ± 0,38* 4 ± 1,45

Лимфоциты, % 25,64 ± 0,36 30 ± 0,07

Лимфоциты абс. 1,01 ± 0,02 1,2 ± 0,64

Примечание, здесь и далее * — p < 0,05.

Таблица 2

Содержание иммунокомпетентных клеток у больных САР (М ± m)

Показатели САР (n = 40) Контроль (n = 22)

СД-3 Т-лимф., % 59,71 ± 0,26 65,8 ± 2,91

СД-4 Т-хелп., % 39,01 ± 0,34 39,6 ± 2,1

СД-8 Т-супр. цит., % 29,95 ± 0,54 26,2 ± 2,33

СД-16 МК, % 11,25 ± 0,06 18,5 ± 0,54

СД-72 В-лимф., % 15,82 ± 0,38 16,5 ± 1,3

СД-4/СД-8, % 1,59 1,5

1дМ, г/л 2,38 ± 0,07 0,9 ± 0,1

1дС, г/л 15,11 ± 0,01 9,4 ± 0,1

1дА, г/л 3,51 ± 0,14 0,8 ± 0,2

1дЕ, МЕ/мл 804,19 ± 53,80* 95,32 ± 5,28

ЦИК (ед. отн. плотн.) 45,9 ± 6,2 30,1 ± 2,7

П.-4, пг/мл в сыворотке крови 22,3 ± 3,2* 1,7 ± 2,2

П.-4, пг/мл в назальном секрете (п = 22) 14,5 ± 2,2* Отсутствует

Таблица 3

Показатели иммунного статуса у больных с КАР (М ± m)

Показатели КАР (n = 40) Контроль (n = 22)

Лейкоциты, % 5,48 ± 0,27 6,1 ± 0,35

Нейтрофилы п/я, % 2,96 ± 0,19 3,5 ± 0,17

Нейтрофилы с/я, % 51,41 ± 0,44* 53 ± 1,21

Моноциты, % 3,06 ± 0,19 5,2 ± 0,09

Эозинофилы, % 8,89 ± 0,2* 4 ± 1,45

Лимфоциты, % 35,32 ± 0,47 30 ± 0,07

Лимфоциты абс. 2,22 ± 0,038 1,2 ± 0,64

Для взятия отпечатков с поверхности слизистой использовали фильтровальную бумагу (обычную) размером 1 см2 (отрезанную ножницами), которую прикладывали на передний край нижней носовой раковины. Время аппликации составляло в среднем 15 секунд. После этого пропитанную фильтровальную бумагу полностью с помощью стерильного носового пинцета погружали в эпендорф с 0,1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида (больший объем брать нецелесообразно, поскольку это усложняет определение цитокинов при постановке теста). 0,1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида отмеряли строго с помощью дозатора пипетки 100—1000 мкл. Время экспозиции равнялось 1 часу. Затем фильтровальную бумагу удаляли из эпендорфа стерильным пинцетом и эпендорф (маркированный) с полученным раствором цитокинов замораживали при температуре минус 35 0С. Непосредственно перед проведением теста на содержание данного цитокина пробирки размораживали.

Цифровые данные обработаны и вычислены на персональном компьютере IBM с помощью программы Microsoft Excel. Стандартная обработка вариационного ряда включала расчет среднего арифметического М и ошибки среднего арифметического m.

Достоверность различий средних значений оценивалась с использованием t-критерия Стью-дента. Значимость различий в группах сравнений оценивалась при постоянно выбранном уровне значимости p < 0,05. Для определения направления и силы связи между количественными признаками вычисляли параметрический коэффициент линейной корреляции Пирсона (r), а также ошибку коэффициента корреляции (m) и критерий t.

Результаты и их обсуждение. Значительное (более чем в 2 раза) повышенное количество эозинофилов является характерным для атопиче-ского аллергического процесса (табл. 1).

Несмотря на незначительные изменения в количественном содержании иммунокомпетентных клеток, функциональная составляющая — содержание сывороточного IgE, основного «атопи-ческого» цитокина IL-4 значительно повышено. Так, содержание сывороточного IgE в исследуемой группе повышено в более чем 7 раз, содержание IL-4 — более чем в 4 раза (табл. 2).

Сегментоядерный нейтрофилез характерен для имеющего место воспалительного процесса со стороны лор-органов. Увеличенное количество эозинофилов (почти в 2 раза) свидетельствует о сенсибилизированности организма больных (табл. 3).

В результате проведенного исследования было выявлено повышение содержания IL-4 как в сыворотке крови, так и в смывах с мазков-отпечатков у больных с САР и КАР. Причем при САР содержание IL-4 в сыворотке крови составило в среднем 22,3 пг/мл, а секретах — 14,5 пг/мл (p < 0,05). Показатели сывороточного и секреторного IL-4 положительно коррелировали между собой. Значимая корреляция (средняя корреляция) между этими показателями составила r = +0,7. В то же время при КАР эти показатели оказались ниже: в сыворотке крови IL-4 почти в 4 раза (5,6 пг/мл; p < 0,05), а в секретах почти в 2 раза (7,3 пг/мл; p < 0,05). Частота содержание сывороточного IL-4 в случае КАР положительно коррелировала с изменением его

Таблица 4

Содержание иммунокомпетентных клеток у больных КАР (М ± m)

Показатели КАР (n = 40) Контроль (n = 22)

СД-3 Т-лимф., % 47,01 ± 0,79 65,8 ± 2,91

СД-4 Т-хелп., % 28,4 ± 0,7 39,6 ± 2,1

СД-8 Т-супр/кил., % 21,4 ± 0,75 26,2 ± 2,33

СД-16 Ж, % 13,22 ± 0,56 18,5 ± 0,54

СД-4/СД-8 1,6 1,5

СД-72 В-лимф., % 10,9 ± 1,6 10,4 ± 1,7

1дМ, г/л 1,7 ± 0,076 0,9 ± 0,1

1дС, г/л 10,24 ± 0,22 9,4 ± 0,1

1дА, г/л 4,50 ± 0,011 4,8 ± 0,2

1дЕ, МЕ/мл 646,67 ± 26,271* 60,0 ± 35,5

ЦИК (ед. отн. плотн.) 50,9 ± 6,2 30,1 ± 2,7

И.-4 в сыворотке крови, пг/мл 5,6 ± 0,7 * 1,2 ± 0,5

И-4 в назальном секрете, пг/мл (п = 22) 7,31 ± 0,5 * Отсутствует

Спонтанный НСТ-тест 18,91 ± 0,469 23,73 ± 0,51

Индуцированный НСТ-тест 50,41 ± 3,234 45,65 ± 1,043

>

в назальных смывах. Между этими показателями выявлена значимая корреляция — сильная корреляция (г = +0,9).

Показатели содержания 1Ь-4 у больных ринитами неаллергического генеза оказались очень низкими, наблюдались следовые концентрации этого цитокина как в сыворотке, так и в носовом секрете (0,012 и 0,51 пг/мл соответственно).

Показатели контрольной группы были сопоставимы с показателями больных неаллергическим ринитом (табл. 4).

Заключение. Доказана высокая информативность определения 1Ь-4 в смывах с мазков-отпечатков со слизистой оболочки носовой полости для дифференциальной диагностики различных форм аллергического ринита.

Был подтвержден атопический генез САР и КАР. Вместе с тем было показано, что определение уровней сывороточного 1Ь-4 и в секретах с мазков-отпечатков со слизистой носа является ценным диагностическим критерием для дифференциальной диагностики аллергических ринитов.

Учитывая прямую корреляцию показателей сывороточного и секреторного 1Ь-4 при САР и КАР, можно рекомендовать для практического применения использовать только один из показателей.

В частности, для дифференциального диагноза и предварительного подтверждения аллергического генеза ринитов можно использовать неинвазивный, физиологичный, достаточно информативный метод определения 1Ь-4 в носовом секрете.

Это позволит провести эффективный скрининг-отбор аллергобольных для дальнейшего проведения адекватного обследования и, соответственно, адекватного лечения.

Библиографический список

1. Patients with allergic rhinitis and allergic asthma share the same pattern of eosinophil and neutrophil degranulation after allergen challenge / M. KAmpe [et al.] // J. Clinical and Molecular Allergy. - 2009. - Vol. 9, № 1. - Р. 3-10.

2. Effects of a dual CCR3 and Hl-antagonist on symptoms and eosinophilic inflammation in allergic rhinitis / L. Greiff [et al.] // J. Respiratory Research. - 2010. - Vol. 11, № 1. - Р. 17-19.

3. TLR3 in Human Eosinophils: Functional Effects and Decreased Expression during Allergic Rhinitis / A. Mensson [et al.] // J. International Archives of Allergy and Immunology. -2010. - Vol. 151, № 2. - Р. 118-128.

4. Allergic rhinitis and its impact on asthma (ARIA) 2008 Update (in collaboration with World Health Organization, GA2LEN and AllerGen) // Allergy. - 2008. - Suppl. 86. - P. 8-160.

5. Комплексная терапия аллергического ринита с сопутствующей лор-патологией / А. А. Шортанбаев [и др.] // Моле-кулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и патологии : материалы Всерос. науч. конф. -Новосибирск, 2010. - С. 1.

КУДАИБЕРГЕНОВА Сауле Фазыловна, доктор медицинских наук, доцент кафедры оториноларингологии. ДЖАРКИНБЕКОВА Гульзахира Калжешовна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры оториноларингологии.

ЖАЙСАКОВА Дамиля Едигеевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой оториноларингологии.

Адрес для переписки: [email protected]

Статья поступила в редакцию 18.09.2014. © С. Ф. Кудайбергенова, Г. К. Джаркинбекова, Д. Е. Жайсакова