CC BY
35
www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24673253». - 2014. Vol. 53, № 4. P. 397-403.
10. Josephine M., Branka Horvat. [Animal models for human herpesvirus 6 infection] // Front Microbiol. 2013. № 4. P. 174.
11. Epstein L.G., Shinnar S., Hesdorffer D.C., Nordli D.R., Hamidullah A. [et al.]. [Human herpesvirus 6 and 7 in febrile status epilepticus: the FEBSTAT study] // Epilepsia. 2012. Vol. 53, № 9. P. 1481 — 1488.
12. Gentile I., Talamo M., Borgia G. [Is the drug-induced hypersensitivity syndrome (DIHS) due to human herpesvirus 6 infection or to allergy-mediated viral reactivation? Report of a case and literature review] // BMC Infect Dis. 2010. doi: 10.1186/1471-2334-10-49.
1 3. Hall C.B., Caserta M.T., Schnabel K.C. [et al.]. [Characteristics and acquisition of human herpesvirus [HHV] 7 infections in relation to infection with HHV-6] // J Infect Dis. 2006. Vol. 193. P. 1 0631069.
Профилактика аденовирусной инфекции в детских дошкольных учреждениях с помощью препарата рекомбинантного интерферона a2b
Л. В. Осидак, М. А. Янина, В. В. Зарубаев, Е. С. Гончарова, О. А. Алексеева
ФГБУ Научно-исследовательский институт гриппа МЗ России, Санкт-Петербург
Представлены результаты экспериментального (на клеточных культурах) и клинического (в детских коллективах) изучения способности рекомбинантного интерферона a2b (Гриппферона) оказывать вирусингибирующее (по отношению к аденовирусу) и профилактическое (по отношению к возбудителям ОРВИ) действие, позволяющее использовать данный препарат как средство профилактики аденовирусной (как и любой другой) инфекции в детских коллективах. Ключевые слова: Гриппферон, детские коллективы, аденовирус, индекс эффективности
Prevention of Adenovirus Infection
with Recombinant Interferon a2b Medication in Preschool Institutions
L. V Osidak, M. A. Yanina, V. V. Zarubaev, E. S. Goncharova, O. A. Alexeeva
Research Institute of Influenza, Ministry of Health of Russia, St. Petersburg
This article presents the results of experimental (on cell cultures) and clinical (in children's groups) studies of recombinant interferon alpha-2b medication (Grippferon). Our aim was to examine the virus-inhibitory activity of this medication (against adenovirus) and its preventive effect (on causative agents of ARVI), which allows us to use this medication as a preventive measure against adenovirus (as well as any other) infection in children's groups. Key words: Grippferon, children's groups, adenovirus, efficacy index
Контактная информация: Осидак Людмила Викторовна — д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник отделения РВИ у детей ФГБУ «НИИ гриппа» МЗ РФ; 196237, Санкт-Петербург, ул. проф. Попова, 15/17; (812) 499-15-40; [email protected]
Osidak Lyudmila — Dr Med. Sci., Professor, leading researcher, division of respiratory viral infections in children, Research Institute of Influenza, Ministry of Healthcare of the Russian Federation; 196237, St. Petersburg, 15/17 Prof. Popov st.; +7(812) 499-15-40; [email protected]
УДК 616.98:578.831:615.37
Известно, что аденовирусная инфекция занимает одно из значимых мест среди возбудителей ОРВИ в детских и юношеских коллективах, составляя примерно 7,0—14,0% в этиологическом спектре этих заболеваний. Для возбудителя этой инфекции характерно повсеместное круглогодичное распространение с сезонным подъемом заболеваемости в зимне-весенний период с вовлечением всех возрастных групп населения. Чаще всего аденовирус вызывает вспышки в недавно сформированных детских и юношеских коллективах круглосуточного пребывания (интернаты, летние лагеря). Кроме того, вспышки с высоким риском заражения нередко возникают после коллективного посещения бассейна с ненадлежащим обеззараживанием воды или водоемов с непроточной водой.
Обладая характерной эпителиотропностью, аденовирусы вызывают воспалительную реакцию экссудативного характера с резко выраженным отеком слизистых оболочек. Наиболее типичные «точки приложения» аденовирусов — респираторный и кишечный тракты, органы зрения, но могут затрагиваться кардиоваскулярная и нервная
системы, кожный покров, почки и печень. Описан даже случай аденовирусной инфекции с шокоподобным синдромом и полиорганным поражением [1] .
Как правило, большинство известных генотипов аденовируса, относящихся к 6 подгруппам (А, В, С, D, Е, F), вызывают манифестные формы заболевания (табл.1).
Так, представители подгрупп В (генотипы 3, 7, 21, 35), С (генотипы 1, 2, 5, 6), D (8, 9) и Е (4 генотип) вызывают острое поражение верхних отделов респираторного тракта, подгрупп А и F — желудочно-кишечного тракта, однако эти же подгруппы вирусов (В, С и А) нередко являются причиной развития тяжелых пневмоний, бронхитов и бронхиолитов у больных с хроническими заболеваниями и иммунодефицитными состояниями, в т.ч. у ВИЧ-инфицированных. Известно также, что все 4 представителя подгруппы С в 50—90% случаев являются причиной длительной бессимптомной персистенции в лимфоидных образованиях носоглотки и кишечного тракта ребенка [2, 3]. Представители подгруппы D (8, 9, 19, 37), В (3 и 7), С (5) и Е (4) вызывают поражение глаз: конъюнктивит, керато-
Таблица 2. Противовирусная активность препарата «Гриппферон» в отношении аденовируса человека
Таблица 1. Основные клинические синдромы, вызываемые аденовирусами
Подгруппа Генотипы Ведущий синдром Прочие возможные синдромы
А 12,18, 31 Поражение ЖКТ ОРВИ Возможно участие в канцерогенезе
В 3, 7, 14,16, 21, 35 Поражение носоглотки Поражение нижних отделов респираторного тракта, глаз
11 Острый геморрагический цистит
С 1, 2, 5, 6 Поражение носоглотки, гортани, трахеи Латентная персистенция Поражение бронхов, бронхиол, альвеол. Мезентериальный аденит и кишечная инвагинация
D 8, 9, 10, 13, 15, 17, 19, 20, 22—30, 32, 33, 36—39, 42—49, 51 Фарингоконъюнктивальная лихорадка, поражение глаз ОРВИ
Е 4 Поражение респираторного тракта Поражение глаз
F 40, 41 Поражение ЖКТ ОРВИ
Концентрация ^Ы, МЕ/мл Титр вируса в присутствии препарата, lgCTD50 Снижение титра вируса по сравнению с контролем, 1дСГО50 Инфекционность вирусного потомства при разведении вируса, 1дСГО50 Снижение инфекционного титра по сравнению с контролем при разведении вируса, 1дСГО50
1:10 1:100 1:10 1:100
2000 0 2.7 0 0 4.5 3.5
1000 0 2.7 1.5 0 3.0 3.5
500 0.3 2.4 2.0 1.5 2.5 2.0
250 1.0 1.7 2.5 1.5 2.0 2.0
125 2.0 0.7 3.5 1.5 1.0 2.0
63 2.3 0.4 3.5 2.0 1.0 1.5
32 2.7 0 3.5 3.0 1.0 0.5
16 2.7 0 4.0 3.5 0.5 0
0 2.7 0 4.5 3.5 0 0
конъюнктивит, в том числе эпидемический кератоконъ-юнктивит [4]. Аденовирусы (генотипы 40—41 подгруппы F) являются вторыми после ротавирусов возбудителями вирусной диареи, вызывая 5—15% случаев гастроэнтеритов у детей раннего возраста, требующих стационарного лечения [5]. Больные значительно чаще, чем при других вирусных гастроэнтеритах, отмечали боль в животе, обусловленную реакцией мезентериальных лимфоузлов. Зачастую желудочно-кишечные (ЖКТ) проявления развиваются на фоне уже имевшихся до этого симптомов поражения респираторного тракта или фарингоконъюнкти-вальной лихорадки. Мезентериальный аденит и кишечная инвагинация ассоциируются с 1, 2, 3, 5, 6 генотипами аденовируса, что подтверждается их обнаружением в образцах стула и тканей мезентериальных лимфоузлов примерно у 40% детей с кишечной инвагинацией. У пациентов с иммуносупрессией, новорожденных и больных с хроническим поражением сердечно-сосудистой и легоч-
ной систем аденовирусы могут вызывать тяжелые полиорганные процессы [6].
По нашим данным, наиболее частыми возбудителями вспышек ОРВИ в детских и юношеских коллективах являются 4 и 7 генотипы вирусов [7].
Одним из способов лечения и профилактики аденовирусной инфекции детей в настоящее время является применение рекомбинантных интерферонов I типа (IFN а и Р), обладающих прямым противовирусным действием: блокирование транскрипции и предотвращение распространения вирусов, а также активация функций NK клеток, вызывающих лизис клеток, инфицированных вирусом [8—10]. Кроме того, IFN I типа обладают иммунорегуля-торными свойствами, активируя защитные реакции, направленные на выполнение одной цели — элиминацию вируса [11].
Целью работы была оценка вирусингибирую-щих свойств препарата рекомбинантного IFN а2Ь
Таблица 3. Противовирусное действие препарата «Гриппферон» в отношении аденовируса по данным иммуноферментного анализа
Концентрация препарата, МЕ/мл Показатели оптической плотности (х1000) при разведении вируса Титр вируса, lg TID Снижение титра вируса, IgTID
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
2000 309 342 357 352 325 330 0 5,0
1000 408 379 365 372 349 364 1,0 4,0
500 448 449 378 366 348 284 2,0 3,0
250 447 470 418 373 351 386 3,0 2,0
125 514 484 441 378 317 320 3,0 2,0
63 412 492 480 373 341 338 3,0 2,0
32 501 530 445 448 356 346 4,0 1,0
16 476 571 440 430 389 376 5,0 0,0
0 (контроль вируса) 515 517 458 417 402 369 5,0 0
Контроль клеток 190
«Гриппферон®» в отношении аденовируса человека in vivo, а также профилактической эффективности в детских дошкольных учреждениях (ДДУ).
Материалы и методы исследования
Препарат «Гриппферон» (биотехнологическая компания «ФИРН-М», Россия) выпускается по 10 мл во флаконах с капельницей для интраназального использования или в виде спрея. В 1 мл препарата содержится не менее 10 000 МЕ IFN а2Ь и наполнитель, состоящий из трило-на-В, поливинилпирролидона и полиэтиленоксида. Применение препарата с лечебной (2 капли 3—4 раза в день интраназально в течение 5—7 дней) и профилактической (2 капли 2 раза в день интраназально ^10 дней) целями разрешено детям любого возраста.
Была осуществлена оценка вирусингибирующих свойств препарата «Гриппферон» в отношении аденовируса человека на клеточной культуре МА-104, а также исследована его профилактическая эффективность в детских дошкольных учреждениях, о которой судили по показателям заболеваемости детей в сравниваемых (получавших препарат и контрольных) группах детей. Показателями эффективности были: Индекс эпидемической эффективности (ИЭЭ) и Коэффициент эпидемической эффективности/защищенности (КЭЭ) препарата. ИЭЭ показывал, во сколько раз заболеваемость детей, получивших препарат, была меньше заболеваемости в контрольных группах; КЭЭ показывал какой процент лиц, получавших препарат, защищен от заболевания.
КЭЭ = (Ь - а) х 100 : Ь, где а — заболеваемость детей, получивших препарат, Ь — в группе контроля.
Статистическая обработка материалов исследования проводилась с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows (версия 6.0) в соответствии с общепринятыми стандартами математической статистики. Критерием статистической достоверности получае-
мых выводов считали общепринятую в медицине величину
р < 0,05.
Результаты и их обсуждение
При исследовании способности препарата «Гриппферон» оказывать ингибирующее действие по отношению к аденовирусу клеточную культуру заражали серийными десятикратными разведениями вируса от 10-1 до 10-4, инкубировали в термостате при 37,5°С в течение 1 — 1,5 часов (период адсорбции вируса), затем в пробирки вносили препарат в двукратных разведениях, начиная с 1:5 (2000 МЕ/мл препарата), и инкубировали в термостате до проявления цитопатогенного действия (ЦПД) в контрольных пробирках. Инфекционность вирусного потомства оценивали по титру вируса, выращенного в присутствии препарата и в контроле (табл. 2).
Противовирусную активность препаратов определяли по разнице титров вируса в опыте и контроле, которую выражали в 1дСЮ50. Было показано, что препарат «Гриппферон» подавлял как прямую репликацию аденовируса в культуре, так и снижал инфекционность вирусного потомства. Этот эффект сохранялся до концентраций препарата 63 и 16 МЕ/мл соответственно. В использованных концентрациях препарат оказался нетоксичным для клеток МА-104. Химиотерапевтический индекс (ХИ) препарата (отношение максимальной переносимой его концентрации к минимальной действующей концентрации) составил минимум 32, что является относительно высоким показателем для лекарственных препаратов.
Полученные данные подтверждались при помощи им-муноферментного анализа с использованием монокло-нальных антител к вирусному белку (табл. 3). Было доказано существенное дозозависимое снижение продукции вирусного белка под действием препарата.
Экстренная профилактика ОРВИ в организованных ДДУ Санкт-Петербурга при помощи препарата
Таблица 4. Характеристика детей при изучении профилактической эффективности препарата «Гриппферон»
Признак Наблюдаемые группы детей (абс./%),
Гриппферон, п = 218 Контроль, п = 178
Возраст до 1 года 66/30,3 62/34,8
1—2 года 120/55,0 96/53,9
3—6 лет 32/14,7 20/11,2
л о с Мальчики 118/54,1 107/60,1
Девочки 110/45,9 71/39,9
Фоновое состояние ЧБД 154/70,6 106/59,5
Хронические инфекции 55/25,3 38/21,3
Аллергопатология 42/19,3 34/19,1
Патология беременности 84/38,5 72/40,4
Родовая травма, врожденные пороки ЦНС, сердца 68/31,2 45/25,3
Таблица 5. Заболеваемость детей в течение 1 года, предшествующего наблюдениям
Препарат Число детей Число случаев ОРЗ до начала наблюдений абс./%
за 1 месяц за 6 месяцев за 1 год
Гриппферон 218 42/19,3 208/95,4 397/182,1
Контроль 178 27/15,2 135/75,8 252/206,6
«Гриппферон» осуществлялась во время локальных вспышек (6), этиология которых определялась при помощи ПЦР в режиме реального времени. В трех случаях вспышки были обусловлены аденовирусом, в двух — сочетанием аденовируса с вирусом гриппа типа А и аденовируса с парагриппом, и лишь одна вспышка была вызвана сочетанием вирусов гриппа А и парагриппа. При возникновении заболевания у ребенка профилактическая схема введения препаратов заменялась на лечебную.
При изучении профилактической эффективности препарата под наблюдением было 396 детей в возрасте 1 — 6 лет, в том числе 21 8 детей получали «Гриппферон» по профилактической схеме, 178 — вошли в состав контрольных групп (табл. 4).
Наблюдавшиеся дети преимущественно были первых двух лет жизни, число мальчиков преобладало над числом девочек. У большинства детей сравниваемых групп имел место отягощенный фон: хронические инфекции, в том числе и ЛОР-органов, патология беременности у матери. А у детей — перинатальная патология и пороки раз-
вития, проявления дермато- или респираторного аллер-гоза.
Заболеваемость детей ОРЗ в течение 1 года, предшествующего наблюдениям, зарегистрированная в медицинских документах детей, в сравниваемых группах была аналогичной (табл. 5).
Как показали результаты наблюдения, влияние профилактического приема препарата было различным в зависимости от этиологии вспышки и от времени начала приема препарата (табл. 6). Если дети начинали получать препарат хотя бы за несколько дней до начала вспышки, всегда ИЭЭ был выше 2,1, а КЭЭ — выше 57,2. При этом различия в заболеваемости по группам сравнения всегда были статистически значимыми, в том числе и во время вспышек, обусловленных аденовирусом (моно, микст).
За весь период наблюдения среди детей, получавших «Гриппферон», ни разу не заболело 129 детей (59,2%), в контроле — 30 детей (16,8%), различия были также статистически значимыми, а 4 человека в контрольных группах болели дважды.
Таблица 6. Результаты изучения профилактической эффективности препарата «Гриппферон»
Этиология вспышки Число вспышек данной этиологии Препарат Число детей Заболело во время вспышки, абс./% Индекс Коэффициент
эффективности
Грипп Н3№ + ПГ 1 Гриппферон 63 27/42,8* 2,5 60,8
Контроль 43 47/109,3
Адено + ПГ 1 Гриппферон 19 6/31,6* 2,8 64,6
Контроль 19 17/89,4
Грипп Н3Ш 1 Гриппферон 47 16/34,0* 2,3 57,2
Контроль 44 35/79,5
Адено 3 Гриппферон 10 2/20,0* 2,7 63,3
Контроль 11 6/54,5
Гриппферон 73 36/49,3* 1,6 36,6
Контроль 54 42/77,8
Гриппферон 6 2/33,3* 2,1 53,4
Контроль 7 5/71,4
Всего 6 Гриппферон 218 89/40,8* 2,1 52,2
Контроль 178 152/85,4
* — различия показателей статистически значимы по отношению к контролю
При сравнении клинической симптоматики оказалось, что среди получивших Гриппферон заболевания имели легкую степень тяжести, протекая в виде ринита и рино-фарингита, без интоксикации и осложнений, отмечавшихся в 6,6% случаев у детей контрольных групп (табл. 7). В 38,2% случаев у них температура тела была нормальной (в группе сравнения — в 12,5%), у остальных субфеб-рильной (в группе сравнения — в 13,2% случаев отмечалось повышение I тела ^ 38,0°С на фоне плаксивости, снижения аппетита и других симптомов интоксикации, различия статистически значимы). Число конъюнктивитов, развившихся у пациентов обеих групп, было также более редким у получивших рекомбинантный интерферон. Следует отметить также статистически значимую разницу продолжительности выявленных симптомов ОРВИ, которая оказалась короче у получавших препарат, чем в группе сравнения.
Вместе с тем, следует отметить, что средства профилактики, в том числе и Гриппферон, не предотвращают развития ОРВИ в случае их применения в продромальном периоде инфекций, особенно обусловленных аденовирусом (табл. 8).
Первые единичные случаи заболеваний у детей были зарегистрированы за 4 дня до начала наблюдений, в течение которых заболело 6,3% коллектива (8,2% списочного состава групп, дети которых начали получать препарат и 3,7% состава контрольных групп). Несмотря на начало приема препарата, заболевания продолжали регистрироваться. Максимальное их число было зафиксировано в первые сутки от начала наблюдений (в 34,2% спи-
сочного состава среди получивших препарат), практически заболели почти все дети, входящие в состав двух групп из 5, взятых под наблюдение. В остальных группах в последующие дни заболеваемость была невысокой, а к 5 дню — заболевания среди получавших препарат прекратились, в отличие от контрольных групп, где продолжали регистрироваться ОРВИ с пиком заболеваемости на 6—10 день наблюдения (заболело 74,0% списочного состава этих групп).
В целом, не заболевшие аденовирусной инфекцией во время этой вспышки на фоне приема Гриппферона составили 39,7%, в контрольной группе — 22,2%, р < 0,05. Кроме того, прием препарата способствовал более легкому течению заболевания, в 36,7% случаев имела место легкая форма заболевания без повышения температуры тела.
Полученные результаты свидетельствуют о возможности применения рекомбинантного интерферона «Гриппферон» с целью профилактики ОРВИ, в том числе и аденовирусной этиологии у детей раннего возраста, независимо от преморбидного фона пациентов.
Выводы
1. Экспериментально была доказана противовирусная активность Гриппферона в отношении аденовируса человека. Ингибирование вирусной репродукции показано при учете ЦПД в культуре клеток и подтверждено при помощи иммуноферментного анализа.
2. Профилактическое применение отечественного препарата «Гриппферон» способствует предотвраще-
Таблица 7. Клиническая симптоматика ОРВИ у заболевших на фоне препарата «Гриппферон»
Признак Наблюдаемые группы детей
Гриппферон, n = 218 Контроль, n = 178
абс./% Продолжительность в днях, (М ± m) абс./% Продолжительность в днях, (М ± m)
Не заболели 129/59,2* 30/16,8
Число ОРВИ 89/40,8* 3,4 ± 0,7* 152/83,2 6,1 ± 0,6
T тела < 37,0 'С 34/38,2* 19/12.5
37,0-37,9 'С 32/14,7* 2,5 ± 0,6* 113/74,3 4,4 ± 1,1
> 38,0'С 0 20/13,2
Нозологические формы Ринит 89/100,0* 2,6 ± 0,12* 152/100,0 5,0 ± 0,15
Фарингит 54/60,7* 4,6 ± 0,7* 126/82,9 6,1 ± 0,6
Конъюнктивит 15/16,8* 2,6 ± 0,1* 38/25,0 5,5 ± 0,1
Отит 0 10/6,6
* — различия показателей статистически значимы по отношению к группе сравнения
Таблица 8. Профилактическая эффективность препарата «Гриппферон» во время вспышки аденовирусной инфекции в Доме ребенка
Препарат Число детей Заболеваемость по дням (абс./%) Без повышения t° (абс./%)
До приема На фоне препарата
Всего 1 2-3 4-5 6-10 не заболело
Гриппферон 73 6 8,2 30 41,1 25 34,2 3 4,1 2 2,8 0 37 39,7 11 36,7
Контроль 54 2 3,7 40 74,0 4 7,4 4 7,4 3 5,6 29 53,7 12 22,2 0
р < 0,05 + ■■■■ + +
нию заболеваемости аденовирусной инфекцией, как и другими ОРВИ, в детских коллективах.
3. Использование изученного препарата более эффективно при начале проведения мероприятий до появления первых симптомов аденовирусной инфекции в коллективе.
Литература/ References:
1. K. Bojang, MDS. Walters. [Toxic shock-like syndrome caused by adenovirus infection] // Archives of Disease in Childhood: short reports. 1992. P. 1112-1114.
2. Garnett C.T., Talekar G., Mahr J.A. [Latent Species C Adenoviruses in Human Tonsil Tissues] // Journal of Virology. Mar. 2009. P. 2417-2428.
3. Jin A. Lee, Nam Hee Kim, Sun Jung Kim. [Rapid Identification of Human Adenovirus Types 3 and 7 from Respiratory Specimens via Multiplex Type-Specific PCR] // Journal of Clinical Microbiology. Nov. 2005. P. 5509-5514.
4. Andria M. Pihos. [Epidemic keratoconjunctivitis: A review of current concepts in management] // Journal of Optometry. V. 6, Issue 2, April-June 2013. P. 69-74.
5. G. Cukor, Human R.N. Blacklow. [Viral Gastroenteritis] // Microbiological Reviews. June 1984. P. 157-179.
6. Tram T.N. et al. [Fatal Disseminated Adenovirus Infections in Immunocompromised Patients] // American Journal of Clinical Pathology. 2003/120:575-583.
7. Янина М.А., Комиссаров А.Б, Осидак Л.В., Львов Н.И. Определение генотипов аденовируса в образцах, полученных от боль-
ных ОРВИ / Молекулярная диагностика: Сб. трудов. — Изд. МБА. — 2014. Т.1. 336 с.
Yanina M.A., Komissarov A.B., Osidak L.V, Lvov N.I. [Detection of adenoviral genotypes in specimens from patients with ARVI] / Molecular diagnostic: Collection of research papers. — pub. MBA.
2014. V.1. p. 336. (In Russ.)
8. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). — М «ГЭОТАР-Медиа», 2005. 368 с. Ershov F.I., Kiselev O.I. [Interferons and immune modulation (from molecule to remedy)]. — М.: «GEOTAR -Меdia», 2005. — 368 p. (In Russ.)
9. Острые респираторные инфекции у детей и подростков: Практическое руководство для врачей / под редакцией Л.В. Осидак, 3-ое издание, дополненное. — С.-Пб.: ИнформМед, 2014. 255 с.
[Acute respiratory infections in children and adolescents]: Practice guidelines for physicians. Under the editorship of L.V. Osidak. — S-Pb.: Inform.Med, 2014. p. 255. (In Russ.)
10. Goodbourn S., Didcock L., Randall R.E. [Interferons: cell signalling, immune modulation, antiviral responses and virus countermeasures] // J. Gen.Virol. 2000. 81:2341-2364.
1 1. Головачева Е.Г. Концептуально-диагностические закономерности иммунного ответа при гриппе. Иммунокоррекция в терапии и вакцинопрофилактике: Автореф. дисс. ... д.м.н. — Спб,
2015.
Golovacheva E.G. [Conceptually-diagnostic trends of immune response in case on influenza. Immunocorrection in therapy and vaccine prophylaxis]: Review ... DMS. — S-Pb., 2015. (In Russ.).
