CC BY
68
СПАСОВА НАТАЛИЯ ВЛАДИМИРОВНА - доктор медицинских наук, заведующая кафедрой рефлексотерапии, Институт усовершенствования врачей, Россия, Чебоксары.
SPASOVA NATALIYA VLADIMIROVNA - doctor of medical sciences, head of Reflexo-therapy Chair, Postgraduating Doctors’ Training Institute, Russia, Cheboksary.
ЛЮБОВЦЕВ ВЯЧЕСЛАВ БОРИСОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделением традиционных методов лечения, Российский научный центр медицинской реабилитации и курортологии, Россия, Москва.
LYUBOVTSEV VYACHESLAV BORYSOVICH - doctor of medical sciences, professor, head of Traditional Medicine Department, Russian Research Center of Medical Rehabilitation and Balneology, Russia, Moscow.
САПОЖНИКОВА АНТОНИНА АЛЕКСЕЕВНА - доктор медицинских наук, профессор кафедры пропедевтики внутренних болезней с курсом лучевой диагностики, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары.
SAPOZHnIkOVA ANTONINA ALEKSEEVNA - doctor of medical sciences, professor of Internal Diseases Propaedeutics Chair with a Beam Diagnostics Course, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
ПАВЛОВ АНАТОЛИИ ФЕДОРОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор кафедры терапевтической стоматологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары.
PAVLOV ANATOLIY FEDOROVICH - doctor of medical sciences, professor of Therapeutic Stomatology Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 612.438:612.8 (075.8)
И.Л. САРИЛОВА, В.Е. СЕРГЕЕВА
ПРИМЕР НЕЙРОИММУННЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ В ТИМУСЕ
Ключевые слова: антигенпредставляющие клетки (АПК), субстанция Р (SP), тимус.
Изучены распределение SP-позитивных структур в тимусе и их связь с антигенпред-ставляющими (МНС-П-экспрессирующими) клетками. Установлено, что МНС-II- и SP-позитивные структуры тимуса представляют собой контактирующие между собой популяции клеток. Результаты исследования демонстрируют наличие тесного сотрудничества между нейропептидной и иммунокомпетентной системами.
I.L. SARILOVA, V.E. SERGEEVA THE SAMPLE OF NEUROIMMUNE INTERACTION IN THYMUS Key words: antigenpresenting cell (APC), substanceP (SP), thymus.
The spread of SP-positive structures in thymus and their connection with antigenpre-senting cells (MHC-II-expressing) has been studied. MHC-II- and SP-positive structures of thymus been established to present themselves as contacting cells population with each other. Investigation results demonstrate the presence of close cooperation between neuropeptide and immunocompetent systems.
Тимус является органом, в котором наиболее ярко проявляются тесные клеточные нейроиммуноэндокринные взаимодействия, что обусловлено наличием в нем клеток, вырабатывающих либо экспрессирующих рецепторы практически для всех известных нейромедиаторов и нейропептидов. Важную роль посредников во взаимодействиях иммунной и нейроэндокринной систем выполняют макрофаги и дендритные клетки, способные секретировать ключевые иммунорегуляторные факторы. Макрофаги, дендритные клетки и В-лимфоциты относят к антигенпредставляющим клеткам (АПК), объединенным в эту группу благодаря способности экспрессировать на своей поверхности белки главного комплекса гистосовместимости второго класса (MHC-II) [1. С. 5]. За последние годы накопилось большое количество сведений о
важной роли АПК тимуса, являющихся одним из компонентов микроокружения тимоцитов и активно участвующих в процессах их развития и дифференцировки [2. С. 134]. АПК ответственны за позитивную и негативную селекцию Т-лимфоцитов, в ходе которых происходит взаимодействие между Т-клеточными рецепторами и молекулами МНС комплекса. На АПК экспрессируются все необходимые корецептор-ные молекулы и цитокины, необходимые для активации Т-лимфоцита к иммунному ответу.
Нейропептиды, широко представленные в тимусе, выполняют роль регуляторов разнообразных физиологических функций и принимают активное участие в нейро-иммуноэндокринных взаимодействиях. Одним из их представителей является вещество Р (SubstanceP, SP). Известно, что SP обладает широким спектром физиологической активности: индуцирует синтез провоспалительных медиаторов (интерлейкина-1, фактора некроза опухоли), усиливает действие брадикинина, гистамина, серотонина, стимулирует выброс вазоинтестинального пептида и фактора роста нервов тучными клетками, повышает фагоцитоз [6. С. 1271]. SP участвует в стимуляции клеточного и гуморального иммунитета, усиливая пролиферацию Т-лимфоцитов, активирует макрофаги, тучные клетки. Экспрессия SP и ее рецепторы описаны в тимусных эпителиальных клетках и на Т- и В-лимфоцитах человека [5. С. 416]. С учетом совокупности приведенных данных нами были изучены антигенпредставляющие клетки и SP-позитивные структуры тимуса, их морфологические особенности, распределение и взаиморасположение. Наши исследования помогут раскрыть и объяснить некоторые механизмы нейроиммуноэндокринных взаимодействий, имеющих место в целостном организме и обеспечивающих его гомеостаз.
Материал и методы. Эксперименты выполнены на 20 половозрелых самцах белых беспородных крыс линии Вистар массой 150 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Все процедуры в работе с крысами осуществляли согласно нормам и правилам обращения с лабораторными животными. Срезы ткани тимуса обрабатывались непрямым иммунофлуоресцентным методом по стандартному протоколу с использованием антител анти-MHc класс II (1:4; ratantirat RT1Bu, Class II polymorphic; Serotec) и анти-SP (1:500; Rabbitanti-Substance P; Chemicon International) [4. С. 945]. Микроскопию препаратов проводили с помощью флуоресцентного микроскопа Olympus, снабженного диги-тальной камерой и набором светофильтров. Статистическая обработка полученных цифровых данных проводилась с помощью программы Microsoft Office Excel с оценкой достоверности различия средних величин по t-критерию Стьюдента. Вычислялись среднеарифметическая величина и стандартная ошибка среднего значения.
Результаты исследования и их обсуждение. В срезах тимуса MHC-II-пози-тивные клетки (АПК) в большем количестве выявляются в кортикомедуллярной зоне, где они располагаются по всей ее протяженности плотно в один-два ряда. Многие клетки имеют неправильно-полигональную отросчатую форму, но среди них встречаются единичные клетки округлой формы. Размер их в среднем колеблется между 7,5±0,5 и 8,8±0,6 мкм. В центре большинства клеток хорошо видны темные контуры округлого ядра. В корковом и мозговом веществе долек железы АПК располагаются диффузно, преобладая в корковом веществе.
Популяция SP-позитивных клеток располагается в тимусной дольке диффузно. Это клетки размером до 7,05±0,15 мкм, характеризующиеся вытянутой, веретенообразной, чаще угловато-неправильной формой, без отростков. Флуоресцентный сигнал распределяется в цитоплазме неравномерно, образуя гранулярные скопления. Количество SP-содержащих клеток в тимусной дольке преобладает в кортикомедуллярной зоне, меньше их содержится в корковом веществе и минимально - в мозговом.
Двойное флуоресцентное окрашивание МНС-II- и SP-содержащих клеток четко показывает, что эти популяции клеток контактируют друг с другом, располагаясь
либо плотно друг к другу, либо на небольшом расстоянии, не превышающем размеры самих клеток. Наибольшее количество подобных контактов на единицу площади отмечается в кортикомедуллярной зоне долек тимуса.
В научной литературе имеются данные о наличии функциональных рецепторов SP на поверхности лимфоцитов, макрофагов, тучных клеток [3. С. 146]. Описаны SP-позитивные нервные волокна у крыс в окружающей тимус жировой и соединительной ткани, в капсуле тимуса, в междольковых септах, от которых они разветвляются вглубь коркового вещества и кортикомедуллярной зоны между тимоцитами и тучными клетками [6. С. 419], что, по мнению авторов, свидетельствует об участии SP в процессе развития и функционирования тимоцитов, тучных клеток и других иммуно-компетентных клеток тимуса. Наше исследование, характеризуя тесное расположение друг относительно друга антигенпредставляющих и SP-содержащих клеток, подтверждает активное участие данных клеток в процессах пролиферации и дифферен-цировки развивающихся тимоцитов.
Выводы. 1. Антигенпредставляющие клетки и субстанция P-позитивные структуры тимуса представляют собой взаимоблизко располагающиеся популяции клеток.
2. Изучаемые клетки демонстрируют наличие тесного сотрудничества между иммунокомпетентной и нейропептидной системами в тимусе.
Литература
1. Хаитов Р.М., Алексеев Л.П. Физиологическая роль главного комплекса гистосовместимости человека // Иммунология. 2001. № 3. С. 4-11.
2. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структуры тимуса и дифференцировка Т-лим-фоитов. Киев: Наукова думка, 1991. 244 с.
3. Jurjus S.R., More N., Walsh R.J. Distribution of substance P positive cells and nerve fibers in the rat thymus // J. Neuroimmunol. 1998. № 90. P. 143-148.
4. Momburg F. Differential expression of Ia and Ia-associated invariant chain in mouse tissues after in vivo treatment with IFN-gamma // J. Immunol. 1986. № 136. P. 940-948.
5. Silva A.B., Aw D., Palmer D.B. Functional analysis of neuropeptides in avian thymocyte development // J. Immunol. 2008. № 32. P. 410-420.
6. Substance P Innervation of the rat thymus / D. Lorton, D.L. Bellinger, S.Y. Felten et al. // J. Peptides. 1990. № 11. P. 1269-1275.
САРИЛОВА ИРИНА ЛЕОНИДОВНА - кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары ([email protected]).
SARILOVA IRINA LEONIDOVNA - candidate of medical sciences, senior teacher of Medical Biology Chair with the Microbiology and Virology Course, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
СЕРГЕЕВА ВАЛЕНТИНА ЕФРЕМОВНА - доктор биологических наук, профессор кафедры медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары ([email protected]).
SERGEEVA VALENTINA EFREMOVNA - doctor of biological sciences, professor of Medical Biology Chair with the Microbiology and Virology Course, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
