CC BY
65
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИИ - 2016 - Т. 23, № 2 - С. 164-170 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
УДК: 616.314-084:615.327 DOI: 10.12737/20443
ПРИМЕНЕНИЕ МИНЕРАЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ В ЭНДОГЕННЫХ И ЭКЗОГЕННЫХ МЕТОДАХ ПРОФИЛАКТИКИ С ЦЕЛЬЮ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ РАЗВИТИЯ ПЕРВИЧНОЙ ДЕМИНЕРАЛИЗАЦИИ ТВЕРДЫХ ТКАНЕЙ ЗУБА
Ю.А. ИППОЛИТОВ*, Я.А. ПЛОТНИКОВА*, Е.О. АЛЁШИНА*, Т.В. МАРКИНА**
*ГБОУ ВПО Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко Минздрава России,
ул. Студенческая, 10, г. Воронеж, 394036, Россия **ГБОУ ВПО Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава России,
ул. Мира, 310, г. Ставрополь, 355017, Россия
Аннотация. Актуальность - одна из самых распространенных задач в современной профилактике кариеса является разработка методики повышения сопротивления зубов к воздействию кариесо-генных факторов. Поэтому необходимы исследования по изучению химического состава как тканей зуба, так и биологических жидкостей, омывающих зуб, с целью предупреждения процессов деминерализации. Цель работы - определение эффективности экзогенных и эндогенных методов ремине-рализации зубной эмали invivo, а также изучение механизмов для повышения качества профилактики первичной деминерализации твёрдой ткани зуба. Материал и методы. У 100 пациентов проанализирован химический состав и строение ротовой жидкости методом ИК-спектроскопии. Для сбора ИК-спектров использовали спектрометр Vertex-70 (Bruker, Германия) и приставка нарушенного полного внутреннего отражения PLATINUMATR с алмазной призмой. Результаты и ихобсуждение. Обнаружены корреляции между использованием эндо и экзогенных методов профилактики кариеса, в пользу первых, а также изменения в минерал-органическом и фосфат-углеродном соотношении в сухих остатках ротовой жидкости.
Ключевые слова: ротовая жидкость, ИК-спектры, глицерофосфат кальция, деминерализация.
ТЖ USE OF MINERAL COMPLEXES IN ENDOGENOUS AND EXOGENOUS METHODS TO PREVENT THE DEVELOPMENT OF PRIMARY DEMINERALIZATION
OF DENTAL HARD TISSUES
Y.A. IPPOLITOV*, J.A. PLOTNIKOVA*, E.O. АЬЁБНША*, T.V. MARKINA**
* Voronezh State N.N. Burdenko Medical University of the Russian Ministry of Health Studencheskaya str., 10, Voronezh, 394036, Russia ** Stavropol State Medical University of the Ministry of Health of Russia Mira str., 310, Stavropol, 355017, Russia
Abstract. One of the most common problems in modern caries prevention is the development of techniques increase tooth resistance to the effects cariogenic factors. Therefore, research is required to study the chemical composition of tissues like teeth and body fluids surrounding the tooth to prevent demineraliza-tion process. The purpose of the work is to determine the effectiveness of exo- and endogenous methods of remineralization of tooth enamel in vivo, as well as to explore mechanisms to improve the quality of primary prevention of demineralization of hard dental tissues. Material and methods. The authors analyzed the chemical composition and structure of the oral fluid in 100 patients by IR spectroscopy. To collect IR spectra, Verteh-70 spectrometer (Bruker, Germany) and the prefix of frustrated total internal reflection PLATINUM ATR diamond prism are used. Results and discussion. It is found a correlation between the use of endo- and exogenous methods of caries prevention, in favor of the former, as well as changes in the mineral-organic and carbon-phosphate ratio in dry residues of oral fluid.
Key words: oral fluid, IR spectra, calcium glycerophosphate, demineralization.
10ШМАЬ ОБ ШШ МБЭТСАЬ ТБСНМОШСТББ - 2016 - V. 23, № 2 - Р. 164-170
Актуальность. Предупреждение кариеса зубов является одним из основных научных направлений в профилактической стоматологии. Несмотря на широкий круг исследований, факторы, приводящие к условиям возникновения и развития кариеса зубов, имеют различную природу и требуют долговременного изучения [1]. В тоже время, известно, что восприимчивость к кариесу связана со структурой и свойствами твердой ткани зуба, строением зубных рядов и челюстей, диетой, составом ротовой жидкости, уровнем проводимой профилактики и состоянием всего организма в целом [1-4]. Поэтому возникновение кариеса зубов целесообразно изучать на различных уровнях: молекулярном, тканевом, органном, системном и ор-ганизменном [12].
В повседневной практике обнаружение кариеса эмали происходит лишь в тот момент, когда он наблюдается визуально в стадии белого пятна [4]. Данная форма заболевания наступает при накоплении многочисленных циклов, включающих процессы деминерализации и реминерализации, когда в результате жизнедеятельности бактерий, удаления части биопленки с поверхности эмали, повышенной кислотности, нарушенного органо-минерального обмена в слюне и отсутствия необходимой профилактики, баланс в циклах сдвинут в сторону первого процесса [1,7,8]. Единовременные, обратные к деминерализации процессы восстановления зубной эмали, в целом называются реминерализацией и осуществляются за счет ротовой жидкости, перенасыщенной по отношению к зубной эмали ионами (Са2+, НРО42-, Ыа+, МС1-, Г-, ОН- и т.д.). Суть реминерализа-ции состоит в насыщении данными ионами и комплексами поверхностных слоев эмали, последующей их кристаллизации, и формировании в пораженных областях утраченных минеральных форм [6,11].
Разработка методики повышения кариесре-зистентности т.е. сопротивления твердых тканей зубов к воздействию кариесогенных факторов, является одной из самых актуальных задач в современной профилактике кариеса [1]. В настоящее время наиболее действенным из способов предотвращения развития кариозного процесса на начальных стадиях является реминерали-зующая терапия. Она базируется, во-первых, на способности ряда различных веществ проникать
в эмаль зуба и образовывать химически стабильные соединения, а во-вторых на возможности целенаправленного изменения и поддержания состояния ротовой жидкости (ее кислотности, минерального и органического состава) на таком уровне, при котором организм сам может восполнять все минеральные потери [4].
Создание условий, при которых организм человека смог бы самостоятельно препятствовать развитию кариеса, требует рассмотрения процесса реминерализации эмали как разно-уровнего, включающего ионобменные реакции, которые протекают в эмали после прорезывания зубов. Условия данных физико-химических процессов зависят от состава и свойств ротовой жидкости, взаимодействующих с поверхностным слоем эмали, через сформировавшуюся на нем сложную многослойную структуру т.е. биопленку, которая включает в себя различные органические вещества и минеральные ионы, бактерии и воду [10].
Оптимальная реминерализация начального кариеса эмали и искусственно вызванных ка-риесоподобных поражений эмали осуществляется при малых концентрациях кальция и фосфата (1-2 миллимоля на литр) в ротовой жидкости. В то время как в деминерализованной области в подповерхностном слое эмали эти значения достигают 0.1 миллимоль на литр [11]. Движущей силой реминерализации является градиент по концентрации для кальция и фосфата, содержание которых в перенасыщенной биопленке в 30 раз превосходит содержание данных элементов в подповерхностных деминерализованных областях эмали [1,5]
На наш взгляд восстановление уровня естественной реминерализации до необходимого зависит от длительного воздействия на поверхность эмали оптимальными концентрациями кальция, фосфатов и фторидов. Эндогенный, биологически доступный кальций, производные фосфора и фтора могут повысить кариес-резистентность и будут способствовать активной минерализации поверхностной эмали в областях подвергшихся деминерализации [1].
К сожалению, в огромной совокупности возможных ситуаций, приводящих к возникновению кариеса, детальные механизмы процессов реминерализации либо не рассматриваются, либо несут теоретический характер. Поэтому востребованы и необходимы исследования
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
по изучению химического состава тканей зуба, особенно эмали, с целью эффективного управления процессами ее развития и реминерали-зации, позволяющими успешно проводить лечение и профилактику кариеса [4].
Цель исследования - определение эффективности и корреляционных взаимоотношений между эндогеннымии экзогеннымиметодами насыщения ротовой жидкости минеральными комплексами.
Материалы и методы исследования. Исследования, описанные в данной работе, были-проведены нами в пять этапов, при этом в них приняли участие 95 человек (33 мужчины и 62 женщины), в возрасте 22-30 лет, физически здоровые, без вредных привычек, предоставившие для исследования свою ротовую жидкость, а также информированное согласие на участие в исследованиях.
За неделю до начала исследований и во время их проведения пациенты находились в обычном для них режиме питания, вели стандартный водный режим, не принимали лекарственные препараты, не употребляли алкоголь и не курили.
Регламент проведения забора ротовой жидкости был следующий. На восьмой день после начала наблюдений, без изменения условий гигиены ротовой полости, в утреннее время до приема пищи, пациенты в первый раз собрали ротовую жидкость методом сплевывания в пробирку без стимуляции. Данная ротовая жидкость являлась контрольным образцом сравнения. В этом заключался первый этап исследования. Для определения характера эффективности экзогенных методов профилактики нами была выбрана зубная паста с мульти-минеральным комплексом «Рокс активный кальций» ООО «Артлайф», включающим глицерофосфат кальция, глицерофосфат натрия, кремний, магний. В тот же день, после сбора контрольной порции ротовой жидкости, пациенты использовали для чистки зубов предложенную зубную пасту. После гигиены полости рта ротовую жидкость собирали в пробирку повторно через 5 минут после использования пасты. В этом заключался второй этап исследования. На третьем этапе спустя 30 мин, ротовая жидкость собиралась в пробирку у пациентов в третий раз. На следующий день после приема пищи пациенты стали принимать таблетки «РоксМедикал» ООО «Артлайф» (минеральный комплекс, в составе которого глицерофосфат кальция, магния сульфат, ламинария, витами-
ны В1, В6). Пациенты принимали по одной таблетке 3 раза в день в течение трех суток.
На четвертом этапе после трех дневного приема жевательных таблеток на четвертый день утром до приема пищи методом сплевы-вания была собрана в пробирки ротовая жидкость. В течение двух недель всем пациентам было предложено не чистить зубы, находиться в обычном режиме питания и вести тот же образ жизни, как и в начале исследования. После истечения двух недель на пятом этапе исследования у всех пациентов также утром натощак методом сплевывания в пробирки был произведен забор ротовой жидкости. Ротовая жидкость, собранная в пробирки на всех этапах исследования центрифугировалась на скорости 3000 оборотов в минуту, для получения осадка. Надосадочная жидкость удалялась с помощью микропипетки, а осадок высушивали в термостате при температуре 36°С.
Исследования особенностей строения и химического состава осадка ротовой жидкости, после указанной пробоподготовки образцов, в нашей работе были проведены методом инфракрасной (ИК) спектроскопии). Для сбора ИК-спектров мы использовали спектрометр Vertex-70 (Bruker, Германия) и приставку нарушенно-гополного внутреннего отражения PLATINUM ATR с алмазной призмой. Статистический анализ материалов, полученных в результате выполнения статьи, проводился с использованием математического пакета программ
«STATISTICA 6.Х», «BIOSTAT», которые являются интегрированной средой статистического анализа и обработки данных. Спектры были записаны в диапазоне 4000-500 см-1. Интегральные площади характерных полос колебания, а также расчет их отношений был произведен с использованием программного обеспечения OPUS (Bruker), включающий в себя широкий спектр функциональных возможностей для различных типов измерений, обработки и оценки данных, полученных методами ИК-спектроскопии. Анализ полученных спектров мы провели на основе данных целого ряда литературных источников, в которых методом ИК-спектроскопии исследовались ротовая жидкость, твердые ткани человеческого зуба, а также фосфаты, имеющие отношение к образованию эмали и дентина [8,9]. Список активных колебаний в полученных спектрах проведенных исследований, области и частоты, в которых расположены максимумы колебательных полос, а также их принадлежности к группам ко-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
лебаний приведены в табл. 1.
Таблица 1
Результаты и их обсуждение. Первичный анализ всех данных показал, что все полученные спектры, независимо от способа их регистрации, содержат абсолютно один и тот же набор колебательных мод и незначительно отличаются друг от
друга в интенсивностях тех или иных колебаний (рис. 1,2).
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
/Av*numb«r cm'
Рис. 1. ИК-спектры пропускания электромагнитного излучения через исследуемый образец ротовой жидкости: 1 - ИК-спектр ротовой жидкости, забранной до использования зубной пасты (спектр контрольного образца), 2 - спектр ротовой жидкости, забранной у пациентов через пять минут после использования зубной пасты, 3 -спектр ротовой жидкости, забранной спустя 30 мин после использования зубной пасты, 4 -спектр использованной зубной пасты
4СОО 3500 ЗООО 2Я0 2000 1500 1000 500
Vftvenjmbercm"'
Рис. 2. ИК-спектры пропускания электромагнитного излучения через исследуемый образец ротовой жидкости: 1 - ИК-спектр от ротовой жидкости, забранной на четвертый день, после трехдневного приема таблеток, 2 - ИК-спектр ротовой жидкости, забранной на 15 день после трехдневного приема таблеток, 3 - спектр таблетки на основе глицерофосфата кальция
Из полученных нами данных (рис. 1,2), (табл. 1) следует, что основные колебательные полосы в ИК-спектрах пропускания всех образцов сухих остатков ротовой жидкости, полученных в ходе выполнения этапов исследования, принадлежат следующим группам и комплексам. Первая и наиболее наглядная группа высокоинтенсивных колебаний, расположенная во всех спектрах в области 9001200 см-1 принадлежит модам, появление кото-
Активные колебания в ИК-спектрах ротовой жидкости в соответствии с Международными стандартами
Substance Vibration modes Wavenumberes, cmr1
Phosphates P-O bandof P2O7 730-770
Oligo, polysaccharides, glycosilated proteins and phosphorus derivatives 1025-1078
Monoandoligosaccharides 1029
Derivative of phosphate, glycerophosphate and phosphatase. Phospholipids, C-O-P-O-C 1054
- Proteins (a-Amylase; Albumin; Cystatins; Mucins; Proline-rich proteins; sIgA) -Hormones (Cortisol; Testosterone) P=O str (asym) of >PO2- phospho-diesters Stretching vibrations of C=O groups (Amide I) 1240-1244
Amide III (CN stretching, NH bending) band components of proteins 1316
Amide II (CN stretching, NH bending) 1378
C=O str (sym) of COO- 1401
CH2/CH3 1397-1410, 1452
Amide II (CN stretching, NH bending) 1548 -1553
(HNH)(NH2) Amide II (CN stretching, NH bending vibrations) (aminoacids, peptides, protein 1570
Amide I (C=O stretching) of fi-pleated sheet structures Amide I (C=O stretching) and (COO) stretching vibration 1645-1650
C-H str (sym) of > CH2 in fatty acids 2852
Stretching vibrations of SCN, unique to saliva, converted by salivary perox-idases to hypothiocyanate, a local antibacterial age 2137-2140
C-H str (sym) of > CH2 in fatty acids 2925
C-H str (sym) of > CH2 in fatty acids 2964
- Proteins (a-Amylase; Albumin; Cystatins; Mucins; Proline-rich proteins; sIgA) -Hormones (Cortisol; Testosterone) Primary and secondary amines (H2 and NHR) 3067
N-H str (Amide A) of proteins 3130
N-H str (amide A) of proteins 3204
N-H str (amide A) of proteins 3290-3293
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
рых связанно с присутствием в образцах производных фосфора, таких как фосфаты, глицерофосфаты и фосфолипиды. Необходимо отметить, что основываясь на полученных результатах и анализе литературных данных можно утверждать, что обнаруживаемая схожесть спектров крови и слюны в отношении мод с максимумом в области 1050 cm-1 позволяет отнести данные колебания к органическим производным фосфатов, глицерофосфатам и фосфотазы, а именно комплекса C-O—P-O-C.
Следующая большая группа колебательных полос, локализованных в области 1240-1700 см-1 может быть соотнесена с вторичными амидами: Amide I (80% C=O stretchvibr. в области 1615-1675 см-1), Amid II (60% N-H bendand 40% C-N stretch в области 1520-1575 см-1) и Amid III (40% C-N stretch, 30% N-H bend в области 1270-1315 см-1). Моды, расположенные в спектрах в области 1400-1430 см-1 принадлежат C=O str (sym) колебаниям COO и CH2/CH3 групп.
Группа полос в ИК-спектрах, локализованные в области 2750-2950 см-1 соответствует колебаниям C-H связей. Широкая колебательная полоса в области 3250-3450 см-1 соотносится с N-H связями протеинов, гормонов, а также может быть связана с присутствием в образцах O-H гидроксильных групп (т.е. воды).
Следует отметить, что в ИК-спектрах ротовой жидкости, собранной на четвертый день, после трехдневного приема таблеток на основе глицерофосфата кальция и спектре таблетки на основе глицерофосфата кальция, присутствует еще одна дополнительная группа колебаний, с максимумами в области 730-770 см-1, которая может быть соотнесена с производной фосфатной группы Р2О7 (рис. 2).
На рис. 1 вместе с образцами ротовой жидкости также приведены ИК-спектры пропускания зубной пасты с мультиминеральным комплексом на основе глицерофосфата кальция и таблетки на основе минерально-витаминного комплекса и глицерофосфата кальция на рис. 2. Анализ данных и их сопоставление со спектрами сухих остатков ротовой жидкости показывает, что в ИК-спектрах профилактических средств присутствуют группы колебаний, идентичные тем, что мы наблюдаем в спектрах ротовой жидкости. Это связано с наличием в составе профилактических средств аналогичных органо-минеральных групп и комплексов, то есть применение выбранных
профилактических средств должно отразиться на изменении органо-минерального баланса ротовой жидкости и найти свое проявление в ИК-спектрах образцов.
Таблица 2
Результаты расчета изменений минерал-органического и фосфат-углеродного соотношений в ротовой жидкости на различных стадиях исследования
До проведения профилактики Минерал-органическое соотношение Фосфат-углеродное соотношение
Контрольный образец 0,922 6,54
Через пять минут после использования зубной пасты с мультимине-ральным комплексом комплекс (экзогенная профилактика) 1,53 12,66
30 мин после использования зубной пасты с мультиминеральным комплексом комплекс (экзогенная профилактика) 0,91 6,60
После трехдневного приема таблетированно- го минерального комплекса на основе глицерофосфата кальция (экзогенная профилактика) 1,01 13,25
Спустя 2 недели после приема последней таблетки 0,967 7,71
Основываясь на высказанных предположениях, а также используя данные ИК-спектроскопии, упомянутые выше изменения органо-минерального баланса могут быть изучены путем расчета и анализа минерал-органического и фосфат-углеродного соотношений между минеральной и органической составляющими в сухом остатке ротовой жидкости. Для расчета первого из них, достаточно взять отношение интегральной площади фосфатных полос в ИК спектре (области спектра 900-1200 см-1 и 730-770 см-1), к интегральной площади полосы колебаний 1615-1775 см-1, соотносимой с Amid I. Фосфат-углеродное отношение может быть рассчитано из отношения интенсивности полосы колебаний C=O и CH2/CH3 связей, локализованных в области 1430-1400 см-1 к интенсивности фосфатных полос в ИК спектре (900-1200 см-1 и 730-770 см-1). Результаты расчетов приведены в табл. 2.
В табл. 2 приведены относительные изменения минерал-органического и фосфат-
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2016 - Т. 23, № 2 - С. 164-170 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
углеродного соотношений (относительно усредненных показателей до использования зубной пасты и жевательных таблеток). Как видно из полученных данных на первом этапе исследования (табл. 2), использование зубной пасты приводит к значительному увеличению минерал-органического соотношения (в среднем практически в 1,7 раза), а также двукратному увеличению фосфат-углеродного соотношения. Это свидетельствует о том, что после гигиены полости рта с применением зубной пасты на основе глицерофосфата кальция в ротовой жидкости значительно увеличивается содержание фосфатов, полученных из экзогенного источника. Однако, как следует из полученных данных, уже через 30 минут величины этих соотношений приходят к уровню, который они имели до применения зубной пасты, что свидетельствует о краткосрочном эффекте такого способа реминерализации эмали.
Анализируя результаты изменения минерал-органического и фосфат-углеродного соотношений после применения таблеток на основе глицерофосфата кальция можно сделать вывод о том, что на четвертые сутки после трехдневного употребления таблеток отмечалось в среднем 9% увеличение минерал-органического соотношения по сравнению с исходным (контрольным) образцом ротовой жидкости. Что касается фосфат-углеродного соотношения, то, после употребления таблеток на основе глицерофосфата кальция, оно увеличивается в среднем практически в два раза, за счет повышения в ротовой жидкости фосфатных групп.
Через две недели после трехдневного приема таблеток минерал-органическое и фосфат-углеродные соотношения в ротовой жидкости практически вернулись к исходным значениям, но при этом отмечалось в среднем на 4% увеличение минерал-органического соотношения по сравнению с исходным (контрольным) образцом ротовой жидкости. Что касается фосфат-углеродного соотношения, то после
Литература
1.
употребления таблеток на основе глицерофосфата кальция оно превышает исходные значения в среднем на 17%, при констатации наличия следов фосфатных групп.
Все вышеописанные факты свидетельствуют о том, что органо-минеральный баланс ротовой жидкости после употребления таблеток минерально-витаминного комплекса с глицерофосфатом кальция сдвигается в сторону увеличения содержания в ней минеральных групп и комплексов.
Подводя итоги, мы можем говорить о том, что нами обнаружены корреляции между использованием эндогенных и экзогенных методов насыщения минеральными комплексами ротовой жидкости и изменениями в минерал-органическом и фосфат-углеродном соотношениях в сухих остатках ротовой жидкости у испытуемых лиц. Данные изменения позволяют предположить, что экзогенные методы профилактики дают краткосрочный эффект поддержания баланса необходимых для реминерали-зации в ротовой жидкости, в то время как эндогенные приводят к долговременному присутствию необходимых для условий реминерализа-ции групп и комплексов.
Заключение. Эндогенные методы профилактики создают условия для повышенного и долговременного содержания минеральных групп и комплексов в ротовой жидкости для активации процессов реминерализации, являясь предпосылкой для их концентрации в биопленке на долгосрочной основе. При этом условия активного насыщения ротовой жидкости в оптимальных концентрациях, а также увеличение сроков приема эндоминеральных комплексов с целью увеличения сроков реминерали-зующей функции ротовой жидкости являются темой наших последующих исследований.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 16-15-00003).
References
Ippolitov YuA. Razrabotka i otsenka effektivnosti me-todov normalizatsii obmennykh protsessov tverdoy tkani zuba v usloviyakh razvitiya karioznogo protsessa [Development and evaluation of methods for normalization of metabolic processes hard tooth tissue under caries process development] [dissertation]. Voronezh
Ипполитов Ю.А. Разработка и оценка эффективности методов нормализации обменных процессов твердой ткани зуба в условиях развития кариозного процесса: автореф. дис. ...д-ра мед. Наук. Воронеж, 2012.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 2 - P. 164-170
2. Бавыкина Т.В., Павлова Т.Ю. Сравнительная оценка минерального состава и ультрамикроструктуры тканей зуба в норме и при кариесе // Современные наукоемкие технологии. 2009. №12. Р. 15-18.
3. Гордецов А.С. Инфракрасная спектроскопия биологических жидкостей и тканей // Современные технологии в медицине. 2010. №1. Р. 84-89.
4. Леонтьев В.К., Пахомов Г.Н. Профилактика стоматологических заболеваний. М.: КМК-ИНВЕСТ, 2006. 450 с.
5. Maske T.T., Isolan C.P., Sande F.H. van de, Peixoto A.C., Faria-e-Silva A.L., Cenci M.S. A biofilm cariogenic challenge model for dentin demineralization and dentin bonding analysis // Clin. Oral Investig. 2014. Vol.19. P. 1047-1053. DOI: 10.1007/s00784-014-1331-1.
6. Jenson L., Budens A.W, Featherstone J.D.B, Ramos-Gomes FJ, Spolsky VW, Young D.A. Clinical protocols for caries management by risk assessment // J. Calif. Dent. Assoc. 2007. Vol. 35. P. 714-723.
7. Featherstone J.D.B. Caries prevention and reversal based on the caries balance // Pediatr. Dent. 2006. Vol. 28. P. 128-132.
8. Garcia-Godoy F., Hicks M.J. Maintaining the integry of the enamel surface: The role of dental biofilm,saliva and preventive agents in enamel demineralization and re-mineralization // J.Am.Dent.Assoc. 2008. Vol. 139, Supplement 2. P. 25S-34S.
9. Kutsch V.K., Prosthet J. Dental caries: An updated medical model of risk assessment // Dent. 2014. Vol. 111. P. 280-285. D0I:10.1016/j.prosdent.2013.07.014
10. Seredin P.V.,Goloshapov D., Prutskij T., IppolitovYu.A. Phase Transformations in a Human Tooth Tissue at the Initial Stage of Caries // PLoSONE. 2015. Vol.10. P. e0124008. D0I:10.1371/journal.pone.0124008
11. Pretty I.A., Ellwood R.P. The caries continuum: Opportunities to detect, treat and monitor the re-mineralization of early caries lesions // J. Dent. 2013. Vol. 41, Suppl. 2. P. S12-S21. DOI: 10.1016/ j.jdent.2010.04.003.
12. West N.X., Joiner A. Enamel mineral loss // J. Dent. 2014. Vol. 42. P. S2-S11. DOI:10.1016/S0300-5712(14)50002-4
(Voronezh region); 2012. Russian.
Bavykina TV, Pavlova TYu. Sravnitel'naya otsenka mineral'nogo sostava i ul'tramikrostruktury tkaney zu-ba v norme i pri kariese [Comparative evaluation of mineral composition and structure ultramikro tooth tissues under normal and caries]. Sovremennye naukoemkie tekhnologii.2009;12:15-8 Russian. Gordetsov AS. Infrakrasnaya spektroskopiya biologi-cheskikh zhidkostey i tkaney [Infrared spectroscopy of biological fluids and tissues]. Sovremennye tekhnologii v meditsine. 2010;1:84-9 Russian.
Leont'ev VK, Pakhomov GN. Profilaktika stomatologi-cheskikh zabolevaniy [Prevention of dental diseases]. Moscow: KMK-INVEST; 2006. Russian. Maske TT, Isolan CP, Sande FH van de, Peixoto AC, Faria-e-Silva AL, Cenci MS. A biofilm cariogenic challenge model for dentin demineralization and dentin bonding analysis. Clin. Oral Investig. 2014;19:1047-53. DOI: 10.1007/s00784-014-1331-1.
Jenson L, Budens AW, Featherstone JDB, Ramos-Gomes FJ, Spolsky VW, Young DA. Clinical protocols for caries management by risk assessment. J. Calif. Dent. Assoc. 2007;35:714-23.
Featherstone JDB. Caries prevention and reversal based on the caries balance. Pediatr. Dent. 2006;28:128-32.
Garcia-Godoy F, Hicks MJ. Maintaining the integry of the enamel surface: The role of dental biofilm,saliva and preventive agents in enamel demineralization and re-mineralization. J.Am.Dent.Assoc. 2008;139(2):25S-34S.
Kutsch VK, Prosthet J. Dental caries: An updated medical model of risk assessment. Dent. 2014;111:280-5. DOI: 10.1016/j.prosdent.2013.07.014
Seredin PV, Goloshapov D, Prutskij T, Ippolitov YuA. Phase Transformations in a Human Tooth Tissue at the Initial Stage of Caries. PLoSONE. 2015;10:e0124008. DOI: 10.1371/journal.pone.0124008 Pretty IA, Ellwood RP. The caries continuum: Opportunities to detect, treat and monitor the re-mineralization of early caries lesions. J. Dent. 2013;41(2):S12-S21. DOI:10.1016/j.jdent.2010.04.003.
West NX, Joiner A. Enamel mineral loss. J. Dent. 2014;42:S2-S11. DOI:10.1016/S0300-5712(14)50002-4
