CC BY
46
жение концентрации диеновых конъюгат и повышение активности каталазы в сыворотке крови, повышение количества Т-лимфоцитов (СЭ3) и нормализация количества В-лимфоцитов и клеток-индукторов апоптоза, снижается концентрация ФНОа, ИЛ-1р и С4-компонента системы комплемента (табл. 2).
the disturbed parameters of the immune status and a status of lipid peroxidation.
Key words: the immune status, essential hypertension
Таблица 2
Концентрация цитокинов и компонентов системы комплемента у больных гипертонической болезнью до
и после лечения
Показатели Единицы измерения Здоровые Больные
До лечения Традиц. лечение Традиц. лечение +мексикор Традиц. лечение +милдронат
ФТОа пкг/мл 245,7±20,7 7б0,4±5,0*1 702,5±31,7*1 454,5±30,б*1-3 57б,7±28,1*1-4
ИЛ-1Р пкг/мл 141,7±17,1 25б,3±12,9*1 220,1±10,3*1,2 184,3±13,0*1-3 145,7±18,б*2-4
ИЛ-б пкг/мл 307,8±37,1 404,б±12,1*1 321,5±20,7*2 Зб5,б±15,8*2 371,4±27,2
ИЛ-4 пкг/мл 302,7±31,б 34б,7±8,8 341,б±3б,2 298,2±22,5*2 275,4±13,9*2,3
ИЛ-10 пкг/мл 15,1±1,3 22,0±2,4*1 38,1±3,3*1,2 5б,1±3,9*1-3 42,8±4,9*1-4
Сз мг/мл 91,7±12,б 241,4±18,3*1 200,7±14,1*1 193,3±15,1*1 18б,4±21,7*1
С4 мг/мл 334,7±31,5 54б,8±21,9*1 477,5±30,9*1 401,5±20,5*1-3 581,0±40,5*1д4
Добавление в качестве иммунокорректора милдроната в отличие от мексикора не повышает активности каталазы в сыворотке крови, однако эффективнее снижает концентрацию как про-, так и противовоспалительных цитокинов, не влияя на концентрацию компонентов системы комплемента (табл. 2). Видимо, в условиях умеренной гипоксии или ишемии сукцинат, входящий в состав мексикора, препятствует развитию недостаточности окислительного фосфорилирования, повышает утилизацию лактата и пирувата, что предотвращает возникновение или усугубление энергодефицита кардиомиоцитов и соответствующее расстройство их функций. Если выраженность гипоксии значительна, определяющей становится его антиоксидантная активность, благодаря которой снижается накопление высокоактивных форм и соединений кислорода, уменьшается проницаемость и разрушение биомембран, предупреждается гибель клетки. Милдронат стимулирует альтернативный путь энергопродукции, в первую очередь гликолиз, что за счет ослабления ингибирования цитратом ключевого фермента гликолиза: фосфофруктокиназы-2.
Особенно это касается лимфоцитов, гепатоцитов и миоцитов.
Ииспользование мексидола и милдроната в качестве антиоксидантов и иммунокорректоров оправданно у пациентов, страдающих гипертонической болезнью сердца II-III степени.
Литература
1. Бенисевич В.И., Идельсон Л.И. // Вопр. мед. химии.-1973.- Т. 19, Вып. 6.- С. 596-599.
2. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. // Лаб. дело.- 1983.-№3.- С.33-36.
3. Лазарева Г.А. и др. Иммунометаболические эффекты регуляторов энергетического обмена при нарушении гомеостаза.-Курск: КГМУ, 2006.- 329 с.
4. Паранич А.В. и др. // Вопросы медицинской химии.-2000.- №6.- С. 12-14.
5. Подильчак М.А. Клиническая энзимология.- Киев: Здоровье, 1967.- 292 с.
6. Katz S.D. et al. // Circulation.- 1994.- Vol. 90.- P. 26262632.
7. Lagoo A.S.et al. // J. Heart Lung Transplantation.- 1996.-Vol. 15.- P. 106-217.
INFRINGEMENTS OF THE IMMUNE STATUS AND IMMUNOCORRECTION IN PATIENTS WITH ESSENTIAL HYPERTENSION
V.P. GAVTILIOUK, M.O. GORETAYA, E.N. KONOPLYA, V.P. MIHIN Summary
In the patients, suffering essential hypertension II-III of a degree, reveals infringements in a status of lipid peroxidation, the immune status and concentration of pro- and anti-inflammatory cytokines. It is established, that inclusion mexicor and mildronat in complex therapy at the given category of patients effectively normalizes
УДК: 615.37:616.37-002
ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОКОРРЕКТОРОВ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА
А. Л. ЛОКТИОНОВ, А.И. КОНОПЛЯ, Д.П. НАЗАРЕНКО, Д.А. ПЕХОВ*
Проблема острого панкреатита (ОП) является одной из актуальнейших в экстренной хирургии. Это связано и с распространенностью заболевания, и с тем, что оно сложно в диагностике и в выборе лечебной тактики. До настоящего времени не разработаны стандарты лечения этой патологии. В резолюции IX Всероссийского съезда хирургов (Волгоград, 2000) обозначены лишь основные моменты комплексной терапии заболевания, при этом всеобщее внимание акцентируется на ряде спорных вопросов, в частности, на целесообразности применения иммунокорректоров при данной патологии. Использование препаратов с иммунотропной активностью у больных ОП открыло новые возможности для повышения эффективности проведения консервативной терапии, оперативных вмешательств, уменьшения летальности и сроков пребывания в стационаре [2-5].
Большой интерес представляют препараты полипептидной природы - полиоксидоний и имунофан. Первый обладает выраженной иммуномодулирующей, детоксикационной, мембраностабилизирующей и антиоксидантной активностью, снижает цитотоксичность химических, лекарственных веществ и инфекционных агентов. Применение полиоксидония в комплексном лечении ряда хирургических заболеваний позволяет повысить эффективность терапии, снизить дозу антибактериальных и противовирусных средств, сократить длительность лечения [6]. Имунофан обладает иммунорегулирующим, детоксикационным, гепатопротективным действием и вызывает инактивацию свободнорадикальных и перекисных соединений [1].
Цель работы - изучение иммунокорригирующих эффектов полиоксидония и имунофана у больных ОП.
Материал и методы. Под постоянным наблюдением находилось 83 пациента, находившихся на стационарном лечении в МУЗ ГБ №4 г. Курска. В исследуемую группу включались больные с острым отечным или мелкоочаговым панкреатитом на основании осознанного информированного согласия пациента. С билиарным панкреатитом в анализируемой совокупности был 61 больной (34 - с отечным и 27 - с мелкоочаговым), с небилиарным
- 22 человека (3 - с отечным и 19 - с мелкоочаговым).
Все больные были разделены на 3 рандомизированные по полу, возрасту и проводимому лечению группы: 1-ю группу составили 27 пациентов (12 - с отечным панкреатитом и 9 - с мелкоочаговым панкреонекрозом), получавших лечение, не включавшее иммунокорригирующих препаратов (инфузионная терапия со спазмолитиками и аналгетиками; блокаторы Н2-гистаминовых рецепторов - омез; антибактериальная терапия -гентамицин, цефазолин); 2-ю группу - 28 пациентов (11- с отечным панкреатитом и 9 - с мелкоочаговым панкреонекрозом), дополнительно получавших полиоксидоний (100 мг внутримышечно 10 раз через 24 часа); в 3-ю группу вошло 28 больных (11
- с отечным панкреатитом и 9 - с мелкоочаговым панкреонекро-зом), которые в составе комплексного лечения получали имуно-фан (0,005% - 1 мл, внутримышечно 10 раз с интервалом 24 часа). Контрольная группа пациентов состояла из 15 здоровых доноров-добровольцев того же возраста.
В работе исследован иммунный статус больных и здоровых лиц с помощью наборов тестов I и II уровней по Р.В. Петрову.
* Курский государственный медицинский университет
Фенотип лимфоцитов определялся методом иммуноферментного анализа с помощью моноклональных антител (ООО «Сорбент», г. Москва) к структурам CD3 (общие Т-лимфоциты), CD22 (В-лимфоциты), CD4 (Т-хелперы), CD8 (цитотоксические клетки), CD16 (NK-клетки), CD25 (рецептор к ИЛ-2). Содержание иммуноглобулинов классов M, G, A и секреторного иммуноглобулина А, C3-, C4-компонентов комплемента определяли методом радиальной иммунодиффузии, используя диагностический набор ООО HПЦ «Медицинская иммунология» (г. Москва). Количественная оценка уровней ФHОa• ИЛ-1р, ИЛ-б, ИЛ-4 в сыворотке крови проводилась с помощью набора реагентов ProCon (ООО «Протеиновый контур», г. Санкт-Петербург) методом твердофазного иммуноферментного анализа. Кроме того, определяли функциональную активность нейтрофилов периферической крови. Полинуклеары выделяли из цельной крови с помощью фиколл-верографина (d=l,077). Фагоцитарную активность ней-трофилов оценивали по фагоцитарному индексу (ФИ, процент фагоцитирующих из 100 подсчитанных нейтрофилов), фагоцитарному числу (ФЧ, среднее количество поглощенных частиц латекса на один фагоцит) и индексу активности фагоцитоза (ИАФ). Кислородзависимую активность по спонтанному и стимулированному зимозаном тесту восстановления нитросинего тетразолия (HCT-сп. и HCT-ст■)• индексу стимуляции (ИСЩ и функциональному резерву нейтрофилов (ФРЩ
Результатні. Результатні исследования иммунного статуса больных ОП показали, что до лечения достоверно сниженным было абсолютное и относительное содержание общих Т-лимфоцитов (CD3+), T-хелперной (CD4+) и цитотоксической (CD8+) субпопуляций, относительного содержание NK-клеток (CD16+), повышенным оказался процент клеток, экспрессирующих ранние (CD25+) маркеры активации, а также относительный и абсолютный уровень В-лимфоцитов (CD22+). Ш фоне традиционного лечения установлено повышение процентного и абсолютного числа общих Т-лимфоцитов даже по сравнению со здоровыми донорами, нормализация содержания CD4+ и CD8+-лимфоцитов, при этом уровень CD 1 б+, CD25+, CD22+-лимфоцитов оставался таким же, как и у больных до лечения. Применение имунофана нормализовало относительный и абсолютный уровень CD3+-клеток• абсолютное количество B-лимфоцитов и процентное содержание T-хелперов, NK-клеток и клеток, экспрессирующих ранние маркеры активации, при этом, сниженным, даже по сравнению с традиционным лечением, оставалось абсолютное содержание CD4+ и CD8+-лимфоцитов• процентный уровень Т-хелперов и В-лимфоцитов был таким же, как и после традиционного лечения. После применения полиок-сидония относительное и абсолютное содержание CD3+ CD4+, CD8+, CD22+-клеток не отличалось от показателей здоровых доноров, исключение составляли CD16+ и CD25+-лимфоциты• уровень которых был ниже, чем в контрольной группе (рис. 1).
Ш момент поступления в клинику отмечалось снижение фагоцитарной активности нейтрофилов (ФП, ФЧ и ИАФ), при этом, в отношении кислородзависимых механизмов активности (спонтанный и стимулированный зимозаном HCT-тесты, ФРЩ, было выявлено повышение, исключение составлял ИС^ который не отличался от группы здоровых доноров (рис. 1). Данная ситуация, по нашему мнению, объясняется тем, что на фоне воспаления выделяется большое количество медиаторов, которые активируют нейтрофилы, а последние проявляют свою активность за счет кислородзависимых механизмов стресса, так как они по сравнению с процессом фагоцитоза менее энергоемки. Традиционное лечение не нормализовало функциональную активность нейтрофилов периферической крови: из всех предложенных схем лечения, на его фоне отмечалось максимальное снижение фагоцитарной и кислородзависимой активности полинуклеаров. Ш фоне применения имунофана отмечалось повышение ФП, нормализация ФЧ и ИС^ HCT-сп. теста, HCT-ст тест снижался, но не до уровня здоровых доноров, чем объясняется уменьшение резервов кислородзависимой активности клеток, проявляющихся в снижении ФРH и ИСК После включения в терапию полиоксидо-ния показатели функциональной активности нейтрофилов периферической крови не отличались от контрольной группы (рис. 1).
Ш момент поступления в стационар, а также после различных схем лечения, концентрация IgM достоверно не изменялась. Содержание IgG, IgA и sIgA было повышенным. Традиционная терапия снижала уровень IgG, sIgA и повышала концентрацию IgA по сравнению с показателями больных до лечения, но при
этом нормализации показателей не происходило (рис. 2). Включение имунофана в комплексную консервативную терапию снижало до уровня здоровых доноров концентрацию 1§0, содержание 1§Д изменялось так же, как и в группе больных, получавших традиционное лечение, а уровень б^А был такой же, как на момент поступления. Полиоксидоний нормализовал концентрации 1§0, 1§А и б^А. На момент поступления у больных ОП обнаружено существенное повышение в плазме крови уровня основной доминирующей секреторной формы ИЛ-1, а именно, ИЛ-1р (в 2,1 раза), который является основным медиатором развития местной воспалительной реакции, острофазного ответа на уровне организма, способный запустить продукцию около 100 цитокинов, многих гормонов, ферментов, ростовых факторов, других биологически активных веществ и их рецепторов [9]. Традиционное лечение и с включением имунофана не изменяло повышенный уровень плазменного ИЛ-1р. Нормализация показателя происходила только под влиянием полиоксидония (рис. 2).
Лимфоциты
Рис. 1. Изменение показателей иммунофенотипированных лимфоцитов и функциональной активности нейтрофилов периферической крови до и после различных схем лечения. Обозначения: 1 - радиус окружности -показатели здоровых доноров; 2 - - показатели больных ОП
после традиционного лечения (1 группа); 3 - - показатели больных ОП после традиционного лечения + имунофан (2 группа); 4 - -
показатели больных ОП после традиционного лечения + полиоксидоний (3 группа); 5 - # - р < 0,05 по отношению к показателям здоровых доноров
Еще в большей степени у больных ОП повышался (в 6,6 раза) уровень ФНОа - первичного медиатора воспаления, играющего значительную роль в координации воспалительного ответа и цитокинового каскада, например, ИЛ-1р, ИЛ-6 и ИЛ-8. Традиционное лечение почти на 50% снижало концентрацию ФНОа, применение имунофана аналогичным образом влияло на изученный показатель, более эффективным оказался полиокси-доний, на фоне которого концентрация ФНОа повышалась в большей степени, но не до уровня здоровых доноров (рис. 2). Выявлено повышение ИЛ-6 в плазме крови больных на момент поступления в 2,7 раза. Традиционное лечение снижало его содержание, но не до уровня контрольной группы. В группах больных, получавших в составе комплексной терапии имунофан и полиоксидоний концентрация ИЛ-6 нормализовалась (рис. 2).
Многочисленные биологические функции ИЛ-4 включают индукцию переключения продукции иммуноглобулинов плазматическими клетками на продукцию 1§Б и стимуляцию субпопуляции Т-хелперов (ТЬ2) второго типа, которые регулируют формирование ГИО. Дисрегуляция секреции ИЛ-4 является ключевой в развитии аллергопатологии. В наших наблюдениях уровень ИЛ-4 у больных ОП на момент поступления был выше в 5,7 раз, чем у здоровых доноров. Также как и в предыдущих случаях после традиционного лечения концентрация снижалась, но не до уровня нормы, после комплексной терапии, включавшей имуно-фан или полиоксидоний, уровень цитокина не отличался от показателей здоровых доноров (рис. 2). Исследование содержания С3- и С4-компонентов комплемента выявило при поступлении их значительное снижение по сравнению со здоровыми донорами. Традиционная терапия повышает их уровень, но не до нормы. На фоне имунофана содержание Сз-компонента комплемента не отличалось от предыдущей группы больных, а концентрация С4-компонента комплемента достигала значений здоровых доноров.
Максимальный эффект был на фоне полиоксидония, применение которого повышало до нормы оба показателя (рис. 2).
ДО
Рис. 2. Изменение концентраций иммуноглобулинов, цитокинов и компонентов комплемента до и после различных схем лечения. Примечание: в связи с большим разбросом значений здесь использована логарифмическая шкала. Обозначения: 1 - радиус окружности - показатели здоровых-деноров; 2 - - показатели больных ОП
после традиционного лечения (1 группа); 3 - - показатели
больных ОП после традиционного лечения + имунофан (2 группа); 4 -- показатели больных ОП после традиционного лечения + полиоксидоний (3 группа); 5 - - р < 0,05 по отношению к показателям здоровых
® доноров.
Таким образом, у больных с острым отечным и мелкоочаговым панкреатитом обнаружены значительные нарушения иммунного статуса. Возможная цепочка изменений обусловлена активацией процесса воспаления: повышение уровня активированной амилазы в крови вызывает повреждение мембран клеток, в ответ на это «запускается» каскад арахидоновой кислоты, выделяется большое количество биологически активных веществ (простагландинов, лейкотриенов), в результате чего, в очаг воспаления мигрирует большое количество активных нейтрофилов [7, 8], последние, выделяют провоспалительные цитокины и еще больше стимулируют воспаление, за счет кислородзависимого метаболизма усиливают процессы перекисного окисления липидов, что дополнительно является причиной развития иммунопатологических реакций [1]. Полученные данные во многом перекликаются с работами отечественных и зарубежных авторов и вписываются в картину системного воспалительного ответа [10].
Полученные результаты исследований позволили нам включить в комплексную консервативную терапию больных ОП имунофан и полиоксидоний с целью иммунокоррекции.
Литература
1. Аверкиев В.Л. и др. // Тегга Ме&са.- 2003.- №3.- С.9.
2. Ашрафов А.А., Алиев С.А. // Мат-лы 1-го Москов. меж-дунар. конгр. хирургов.- М.,1995.- С.188-189.
3. Благовестников Д.А. // Хир.- 2004.- №5.- С.68-75.
4. Боровкова Н.В. и др. // Соврем. проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакол.-М.,2001.- Т.2.- С.317.
5. Доценко А.П., Вансович В.Е. // Клинич. хирургия.-1996.- №11.- С.48-64.
6. Станулис А.И. и др. // IX Всерос. съезд хирургов.-Волгоград, 2000.- С.130.
7. Трухан Д.И. // Топ медицина.- 1999.- №6.- С.83-85.
8. Трухан Д.И., Полуэктов В.Л. // Вестн. хирургии.-2000.- Т.159, №1.- С.17-20.
9. Шабалин В.Н. и др. // Хирургия.- 1989.- №7.- С.76-79.
10. Шабанов В. // Вестн. РАМН.- 2003.- №9.- С.44-47.
THE USE OF IMMUNOCORRECTORS IN COMPLEX THERAPY OF ACUTE PANCREATITIS
A.I. KONOPLYA, A.L. LOCTIONOV, D.P. NAZARENKO. D.A. PEKHOV Summary
The use immunophan and polyoxydonia allows to correcting the disturbed data of immune status in different degrees. In the pathology polyoxydoni was more effective in reference to the data of immuno-phenotyping lymphocytes, antibodies and cytokines, and immunophan was more effective in reference to the neutrophilic link of anti-infectious protection.
Key words: acute pancreatitis, immune response
УДК: 615.15:616.97-097
BЗAИMОCBЯЗЬ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИMMУHHОГО СТАТУСА, ГРУПП
КРОBИ И РЕЗУС-ФАКТОРА У БОЛЬ^ІХ С CОЧETAHHОЙ ИHФEКЦИEЙ, ПЕРЕДАЮЩЕЙСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ
А.С. ВАВИЛОВА*
Урогенитальная герпесвирусная инфекция (УГВИ) является одной из наиболее социально-значимых проблем в клинической вирусологии, еще большее число составляют больные, имеющие генитальный герпес наряду с инфекциями, передаваемыми половым путем [2]. Особенностью моно- и ассоциированных инфекций является иммунологическая перестройка организма [1]. Есть сведения о роли группы крови и резус-фактора в регуляции иммунологической реактивности организма при патологии [3].
Цель работы - установление особенностей изменений иммунного статуса на системном и местном уровне у больных УГВИ в сочетании с хламидиозом, уреаплазмозом и трихомониа-зом у лиц с различными группами крови и резус-фактором.
Материалы и методы. Проанализировано 1493 амбулаторных карты пациентов, страдающих как УГВИ, так и в сочетании с другими инфекциями, наблюдающихся Областным кожновенерологическим диспансером г. Белгорода за 2000-2004 гг. Под постоянным наблюдением находилось б7 больных УГВИ в сочетании с хламидиозом, 37 - с уреаплазмозом и 37 - с хрихомониа-зом. Контрольная группа состояла из 23 здоровых доноров-добровольцев того же возраста. Диагноз УГВИ и хламидиоза, уреаплазмоза и трихомониаза устанавливался на основании клинической картины и подтверждался результатами лабораторных исследований крови, содержимого везикул, соскобов слизистой половых органов, отделяемого уретры у мужчин, вагинально-цервикального секрета у женщин методами иммунофермент-ного анализа, прямой иммунофлюоресценции и полимеразной цепной реакции. Лабораторные методы исследования крови проводились по общепринятым методикам [б]. Помимо этого определяли содержание в крови иммунофенотипированных лимфоцитов, IgG, IgA, sIgA, ФHGa• ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-1р. В крови, в вагинально-цервикальном секрете женщин и отделяемом уретры мужчин устанавливали функционально-метаболическую активность нейтрофилов [4, 5].
Статобработку результатов вели, используя непараметрические методы: критерии Вилкоксона, Крускала - Уоллиса, Фридмана и непараметрический вариант критерия Люмена - Кейлса. Статистически значимыми считали различия с p<0,05.
Результаты. Анализируя амбулаторные карты больных только УГВИ и УГВИ в сочетании с хламидиозом, уреаплазмо-зом и трихомониазом по носительству маркеров крови по системе АВО и Rh, установлено, что среди больных моно- и сочетанной инфекцией чаще встречается 1-я и 2-я группа крови (32,3 и 50,9% соответственно) с положительным резус-фактором (81,5%) по сравнению с распространенностью 4-й группы (4,5%) по системе АВО с резус-отрицательным (18,5%). При этом у лиц с УГВИ достоверно чаще (42,3±4,9%), чем у здоровых людей (31,7±5,3%), определялась 2-я группа крови, при этом больных УГВИ в сочетании с хламидиозом и уреаплазмозом, имеющих 2-ю группу крови (61,1±6,4% и 55,1±6,0%, соответственно), больше, чем больных УГВИ. Встречаемость 1-й группы крови одинакова в группе здоровых доноров и больных УГВИ и не зависит от сочетания инфекций. Пациентов с 3-й группой крови среди лиц, сочетающих УГВИ с другими инфекциями, меньше, чем среди здоровых и больных только УГВИ. Можно сделать вывод, что УГВИ выявляется преимущественно у лиц, имеющих 2-ю группу крови, при этом они же чаще подвержены сочетанию УГВИ с другими инфекциями, а лица с 3-й группой крови реже имеют сочетанные инфекции. Полученные результаты диктуют необходимость углубленного изучения роли генетических маркеров крови в патогенезе УГВИ. Для этого нами изучались показатели иммунного статуса в зависимости от группы крови.
При оценке больных УГВИ в сочетании с хламидиозом с фенотипом О (I) зарегистрировано достоверное изменение 8 показателей иммунного статуса из 26 исследованных (рис. 1). При этом все эти показатели были достоверно снижены: количество общих лимфоцитов и Т-хелперов, HCT-теста спонтанного на местном и системном уровне, концентрации ИЛ-6, ИHФa и
* Курский ГМУ (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3; тел. (4712) 51-44-97)
