CC BY
106
© Т.С. Хайнасова, О.О. Левенец, Ю.П. Трухин, 2016
УЛК 550.72
Т.С. Хайнасова, О.О. Левенец, Ю.П. Трухин
ПРИМЕНЕНИЕ ИММОБИЛИЗАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ В БИОВЫЩЕЛАЧИВАНИИ
Представлен краткий обзор данных по иммобилизации хемолито-трофных микроорганизмов, принимающих участие в биовышелачива-нии, и использованию иммобилизованной биомассы клеток в окислении двухвалентного железа.
Ключевые слова: иммобилизация, биовышелачивание, биоокисление, трехвалентное железо, железоокисляюшие микроорганизмы, АсИНИко-ЪасШиэ {еттоох^Иапэ.
Вопросы эффективности бактериально-химической переработки сульфидных руд остаются актуальными. Известно, что биовышелачивание и биоокисление - это сложные процессы, представляюшие собой совокупность биологически катализируемых химических реакций. Сульфиды металлов окисляются до сульфатов, в частности, с помошью трехвалентного железа (Ре3+). В реакциях взаимодействия Ре3+ с рудой происходит восстановление металла до Ре2+ (реакция 1), которое затем окисляется хемолитотрофными бактериями и археями (табл. 1) до ионов трехвалентного железа. Полученное биологическим путем Ре3+ снова вовлекается в реакции разложения сульфидов. Таким образом, обнаруживается регенерация Ре3+. Интенсивность данного процесса может определять эффективность вышелачивания в целом.
МеБ + Ре2(304)3 ^ МеБ04 + 2Ре504 + Б0 (1) [1].
Путем использования иммобилизованных микроорганизмов решается один из важных вопросов в области биовышела-чивания - повышение микробной окислительной активности в ходе вышеописанных процессов. В частности, за счет прикрепленных на носителе микроорганизмов, характеризуюшихся повышенной плотностью клеток в сравнении со свободной в растворе биомассой, можно добиться значительного увеличения скорости биоокисления Ре2+ до Ре3+. Иммобилизованные бактерии
м Таблица 1
Некоторые жепезоокиспяюшие мезофипьные и умеренно термофильные хемопнтотрофные микроорганизмы (бактерии и археи) и их краткая характеристика
Вид микроорганизма Клеточная форма1 Способ питания2 Способ дыхания3 рН (оптимум) Т, °С (оптимум) г+ц, мол% Ссылка на литературу
Семейство $/"{-Pюteobacteria, род АасШЫоЬасШш
A. ferrooxidans б- а а, ан 1,2-6,0 (2,5-2,8) 5-40 (28-35) 57-59 [9]
Семейство М&ОБр1гасеае, род Leptospiп7ium
L. ferrooxidans б- а а 1,3-4,0 (2,5-3,0) (28-30) 51,7 [Ю]
L. ferriphilum б- а а (1,4-1,8) (30-70) 55-58 [И]
«L. ferrodiazotrophum» б- а а < 1,2 <37 - [12]
L. thermoferrooxidans б- а а - (45-50) - [Ю]
Семейство Геггор1азтасеае, род Геггор1азта
F. acidiphilum а - а, г, м а, ф ан 1,3-2,2 (1,7) 20-45 (35) 36,5 [13]
«F. acidarmanus» а - г, м а, ф ан <0-2,5 (1,2) 23-46 (42) 36,8 [14]
F. cupricumulans а - м - 0,4-1,8 (1,0-1,2) 22-63 (53,6) - [15]
F. thermophilum а - м - (1,0) (45) - [16]
Семейство АИсусЬЬасШасеае, род ЗиМоЬасШиэ
S. acidophilus б + а, г, м а, ф ан (~2) <30-55 (45-50) 55-57 [17]
вЯзшсив б + а, г а 1,1-3,5 (2,2-2,5) 17-60 (55) 48,2 [18]
«Б. атЬмакт» б + а, г, м а 1-2 (1,5) 25-37 (33) - [19]
«Б. тогЛэегггЛепзгэ» б + а, г а 0,7-2 (1,6) <30-43 (37) 52 [19]
Б. ^егтоШегапэ б + а, м, о а 1,2-2,4 (2,0) 20-60 (40) 48,2± 0,5 [20]
«Э. \jellowstonensis» б + - ф ан 1,7—>3 (2,5) <35->60 (55) 56 [19]
Семейство АИсусЬЬасШасеае, род АИсусЬЬасШиз
А. сИзиШс1оох1с1апз б + а, г а 0,5-6,0 (1,5-2,5) 4-40 (35) 53 [21]
А. Ыегат б + о, м а 1,5-5,0 (2,5-2,7) <20-50 (37-42) 48,7± 0,6 [21]
«Са1сИЬасШиз {егтогив» б + а, м ф ан (1,8) <35->55 (45) 51 [19]
Примечание. 1 - «-» - грамотрицательный микроорганизм, «+» - грамположительный микроорганизм, «б» - бактерия, «а» -архей; 2 - «а» - автотроф, «г» - гетеротроф, «м» - миксотроф, «о» - органотроф; 3 - «а» - аэроб, «ан» - анаэроб, «ф» - факультативный.
могут найти активное применение в двустадийном подходе переработки руд, который подразумевает аппаратное разделение химического процесса (окисление сульфидов металлов) от биологического (окисление двухвалентного железа) [2-5]. Применение иммобилизованной биомассы на стадии биорегенерации железа существенно интенсифицирует процесс образования Ре3+.
Под иммобилизацией подразумевается фиксация микроорганизмов на определенном носителе [6]. Иммобилизованные клетки имеют ряд преимуществ перед свободными в растворе: 1) высокая концентрация биомассы; 2) более высокая активность и стабильность работы микроорганизмов; 3) возможность применения биомассы в непрерывных и полунепрерывных автоматизированных процессах; 4) исключение необходимости частого пересева микробных культур. Для иммобилизации могут быть использованы микроорганизмы в различном состоянии: целые живые и поврежденные. Одностадийные же реакции могут осуществлять любые клетки [7].
Большинство исследований в области биогидрометаллургии связано с изучением иммобилизации и окисления железа прикрепленными клетками Ас1Л1ЬюЬасШиз ¡еттоохбапв. Природная тенденция бактерий этого вида к росту на поверхностях не только инертных носителей, но и на минералах, делает их подходящими объектами для данных целей. При этом А. ¡еттоохбапв способна расти при высоких скоростях разбавления среды и высокой концентрации образующегося трехвалентного железа [8].
В исследованиях в качестве иммобилизата обычно применяются следующие типы носителей: стеклянные шарики, активированный уголь, песок, полистирол, полиуретан, ионообменная смола, нити сплава никеля, поливинилхлорид, керамзит, диатомовая земля и др. В работе С.И. Гришина и О.Х. Ту-винена [22] исследована кинетика окисления железа с помощью ТЫоЬасШт ¡еттоохбапв (сейчас - Ас1Л1ЬюЬасШиз /епоохбапв), иммобилизованной на стеклянных шариках, ионообменной смоле и активированном угле. Последний вариант субстрата с бактериями показывал наилучшие результаты. По данным М.С. Гусакова и соавторов [2], помимо угля, подходящими материалами для иммобилизации могут служить полиуре-тановая пена и керамзит.
Р. Гонзалес с соавторами и A.C. Майрсон и П. Кляйн изучали адсорбцию A. ferrooxidans на твердых частицах золотых упорных концентратов. Исследовательские группы подтвердили, что химический состав поверхности носителя имеет большое значение для прикрепления клеток, при этом отметили положительное влияние высоких концентраций железа на количество иммобилизованных бактерий [23]. Зависимость адгезии от физико-химических особенностей поверхности носителя также была отмечена в работе И.Р. Донати [8]. Исследователем подчеркивалась положительная роль ярозита, образующегося в ходе окисления железа. Формирование этого минерала в биовыщелачивании обычно рассматривается как отрицательное явление, приводящее к снижению скорости диффузии реагирующих соединений и, в конечном итоге, к торможению кинетики процессов. Однако, благодаря высокой пористости минерала, его отложения могут содействовать увеличению площади поверхности для биопленок. В случае A. ferrooxidans явление адгезии тесно связано с образованием ярозита. Окисляя Fe2+ с большей скоростью у поверхности субстрата, бактерии способствуют локализованному увеличению значений рН и дополнительному формированию и осаждению минерала.
Температура играет немаловажную роль в активности не только свободных, но и прикрепленных бактерий, что может быть использовано в процессе контроля концентрации клеток в биореакторе с иммобилизованной биомассой. М. Немати и Ч. Вебб [24] опровергли существующее ранее мнение об отсутствии влияния данного фактора среды на активность иммобилизованной биомассы. Они обнаружили, что повышение температуры с 20 до 30 °C положительно влияет на кинетику окисления железа прикрепленными клетками A. ferrooxidans.
Таким образом, химические и физические свойства питательной среды и носителя могут оказывать существенное влияние на иммобилизацию микроорганизмов и процесс окисления ими железа.
Механизм иммобилизации был исследован достаточно подробно. Согласно модели К.И. Зоубеля существуют две стадии иммобилизации: первичная обратимая адгезия и независящая от времени необратимая адгезия. Прикрепление микроорганизмов происходит благодаря образованию ими экзополисахаридных
веществ (ЭПВ), которые служат электростатическим барьером, удерживающим клетки на необходимом расстоянии от поверхности. Т. Герке и его коллеги продемонстрировали отсутствие ЭПВ в ходе культивирования А. ¡еттоохбапв в среде с двухвалентным железом. Однако А. Шеудель и соавторы при подсчете количества бактерий все же отметили наличие экскретов ЭПВ. Более того, Л. Караманев предложил модель иммобилизации для А. ¡еггоох1ёапз, которая предполагает, что монослой микроорганизмов формируется от центра к периферии при образовании биопленки на неорганической среде (ярозите).
При изучении иммобилизации и окислении железа пользуются несколькими типами биореакторов: вращающие биологические контакторы, ферментеры с уплотненным слоем носителя (рис. 1) и реакторы с псевдоожиженным слоем иммобилиза-та (рис. 2). Ланные конструкции удовлетворяют основным требованиям для иммобилизации - увеличение полезной площади
Рис. 1. Принципиальная схема ферментера с уплотненным слоем носителя [24]
Рис. 2. Принципиальная схема проточного биопленочного реактора с псевдоожиженным слоем [23]: 1 - обогащенная Ре2+ питательная среда, 2 - биореактор с псевдоожиженным слоем и обогащенной Ре3+ питательной средой с А. {еггоох1<1апБ, 3 - полистироловые шарики с иммобилизованными на них бактериями, 4 - водяная баня для биореактора и инокуляцион-ного сосуда, 5 - инокуляционный сосуд, 6 - инокуляционный сосуд на выходе, 7 - перистальтический насос
поверхности для прикрепления биомассы и уменьшение ее потери в условиях непрерывных процессов. Наиболее привлекательным выбором служат ферментеры с уплотненным слоем носителя, поскольку они простые и дешевые в эксплуатации. В качестве иммобилизата для них обычно выбирают никзосорт-ные сульфидные минералы, альгинат кальция, поливинилхло-ридные кольца, полиуретановую пену, стеклянные бусы, активированный уголь, кремниевые камни. Эти носители сочетают в себе ряд достоинств, однако, промышленное их применение остается еще под вопросом [25]. При организации и проведении окислительных процессов необходимо помнить, что основным недостатком использования иммобилизованной биомассы в условиях непрерывного режима, является открепление и вымывание клеток [23].
На основе работы [25] и других авторов ниже приведены краткие сравнительные сведения о достигнутых скоростях окисления железа свободными клетками и иммобилизованной био-
массой микроорганизмов при использовании различных типов биореакторов и видов носителей (табл. 2). Из табл. 2 видно, что в среднем иммобилизованные клетки позволяют увеличить скорость окисления двухвалентного железа в 14 раз.
Таблица 2
Сравнительные данные по скорости окисления железа при использовании различных типов биореакторов и видов носителей для иммобилизации микроорганизмов
№ Тип реактора Тип носителя Скорость окисления Ре2+, г/л-ч Ссылки на литературу
1 Хемостат со свободными клетками - 0,12 [25]
2 Хемостат со свободными клетками - 0,20 [25]
3 Хемостат со свободными клетками - 2,20 [25]
4 Вращающий биологический контактор Поливинилхлоридные диски 1,46 [25]
5 Вращающий биологический контактор Поливинилхлоридные диски 1,64 [25]
6 Биореактор с псев-доожиженным слоем П енополистирол 1,68 [25]
7 Биореактор с псев-доожиженным слоем Активированный уголь 17 [25]
8 Биореактор с уплотненным слоем Стеклянные шары 8,1 [25]
9 Биореактор с уплотненным слоем Стеклянные шары 15 [25]
10 Биореактор с уплотненным слоем Кремниевые частицы 11,25 [25]
11 Биореактор с уплотненным слоем Альгинат кальция 0,52 [25]
12 Биореактор с уплотненным слоем Поливинилхлоридные витки 1,8 [25]
13 Биореактор с уплотненным слоем Полиуретановая пена 4 [25]
14 Биореактор с уплотненным слоем Полиуретановая пена 1,56 [25]
15 Биореактор с уплотненным слоем Полиуретановая пена 35 [25]
16 Биореактор с уплотненным слоем Полиуретановая пена 31,7 [24]
Окончание табл. 2
№ Тип реактора Тип носителя Скорость окисления Fe2+, г/л-ч Ссылки на литературу
17 Биореактор с уплотненным слоем Хитозан, хитозан в виде поперечно связанных шариков 1,1-1,5 [26]
18 Биореактор с уплотненным слоем Криогель поливинилового спирта 2,3 [27]
19 Биореактор с уплотненным слоем Бусины поливинилового спирта с добавлением нитрата кальция 4,6 [28]
20 Биореактор с уплотненным слоем Активированный уголь 21,3 [2]
Полиуретановая пена 16,8 [2]
Керамзит 6,9 [2]
21 Биореактор с погруженным мембранным модулем Ультра микрополое волокно из полиэтилена 21,7 [25]
22 Биореактор с фиксированной биопленкой Активированный уголь 78 [22]
23 Сосуды для иммобилизации Активированный уголь с добавлением волокнистого носителя 0,9 [23]
24 Стеклянная колонка Керамическое волокно, огнеупорная глиняная плитка 0,81 [8]
На основании анализа имеющихся данных можно заключить следующее. Вопросы изучения механизма иммобилизации хемолитотрофных микроорганизмов остаются до сих пор актуальными. Ввиду потребности в интенсификации бактериально-химических процессов в ходе переработки сульфидных руд применение иммобилизованной биомассы клеток значительно увеличивает продуктивность окисления железа (в несколько раз) в сравнении со свободными в растворе микроорганизмами и служит перспективным решением для использования в дву-стадийной технологии биовыщелачивания.
- СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Crundwell F.K. How do bacteria interact with minerals // Hydrometal-lurgy. 2003. N 71. P. 75-81.
2. Гусаков М.С., Крылова Л.Н., Адамов Э.В. Выщелачивание никеля из пирротиновых концентратов железом, окисленным иммобилизованной биомассой // Цветные металлы. 2011. № 4. С. 15-19.
3. Nurmi P. 2009. Oxidation and control of iron in bioleaching solutions // Thesis for the degree of Doctor of Technology. Tampere University of technology, Tampere, Finland, 2009. р. 83.
4. Хайнасова Т.С., Левенец O.O., Балыков А.А. Исследование иммобилизации микроорганизмов и окисления железа иммобилизованной биомассой клеток// Горный информационно-аналитический бюллетень (научно-техниеский журнал) № 11. Специальный выпуск № 31 «Камчатка-3». М.: Горная книга, 2016. - С. 247-253.
5. Левенец O.O., Хайнасова Т.С., Балыков А.А., Трухин Ю.П. Высокотемпературное выщелачивание сульфидной руды месторождения Шануч растворами трехвалентного железа // Горный информационно-аналитичесий бюллетень (научно-технический журнал) № 11. Специальный выпуск № 31 «Камчатка-3». М.: Горная книга, 2016. - С. 254-259.
6. Лекция 10 иммобилизация. [Электронный ресурс]. URL: http://www.studfiles.ru/preview/4597164 (дата обращения: 29.02.2016).
7. Биотехнология. [Электронный ресурс]. URL: http://www.biotechnolog.ru/ prombt/prombt10_1.htm (дата обращения: 29.02.2016).
8. Donati E.R. Ferrous iron oxidation by Acidithiobacillus ferrooxidans immobilized on refractory clay tiles // The Open Biotechnol. J. 2008. N 2. P. 190-194.
9. Kelly D.P., Wood A.P. Reclassification of some species of Thiobacillus to the newly designated genera Acidithiobacillus gen. nov., Halothiobacillus gen. nov. and Ther-mithiobacillus gen. nov. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2000. Vol. 50. P. 511-516.
10.Hippe H. Leptospirillum gen. nov. (ex Markosyan 1972), nom. rev., including Leptospirillum ferrooxidans sp. nov. (ex Markosyan 1972), nom. rev. and Leptospirillum thermoferrooxidans sp. nov. (Golovacheva et al. 1992) // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2000. Vol. 50. P. 501-503.
11. Coram N.J., Rawlings D.E. Molecular relationship between two groups of the genus groups of the genus Leptospirillum and the findings that Leptospirillum ferriphilum sp. nov. dominates South African commercial biooxidation tanks that operate at 40 °C // Appl. Environ. Microbiol. 2002. Vol. 68, N 2. P. 838-845.
12. Tyson G.W., Lo I., Baker B.J., Men E.E., Hugenholtz P., Banfield J.F. Genome-directed isolation of the key nitrogen fixer Leptospirillum ferrodiazotro-phum sp. nov. from an acidophilic microbial community // Appl. Environ. Microbiol. 2005. Vol. 71, N 10. P. 6319-6324.
13.Golyshina O.V., Pivovarova T.A., Karavaiko G.I., Kondrat'eva T.F., Moore E.B., Abraham W.-R., Lbnsdorf H., Timmis K.N., Yakimov M.M., Golyshin P.N. Ferroplasma acidiphilum gen. nov., sp. nov., an acidophilic, autotrophic, ferrous-iron-oxidizing, cell-wall-lacking, mesophilic member of the Ferroplacmaceae fam. nov., comprising a distinct lineage of the Archaea // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2000. Vol. 50. P. 997-1006.
14.Dopson M., Baker-Austin C., Hind A., Bowman J.P. , Bond P.L. Characterization of Ferroplasma isolates and Ferroplasma acidarmanus sp. nov., extreme acidophiles from acid mine drainage and industrial bioleaching environments // Appl. Environ. Microbiol. 2004. Vol. 70, N 4. P. 2079-2088.
15. Hawkes R.B., Franzman P.D., O'hara G., Plumb J.J. Ferroplasma cupricumu-lans sp. nov., novel moderately thermophilic, acidophilic archaeon isolated from an industrial-scale chalcocite bioleach heap // Extremophiles. 2006. Vol. 10. P. 525-530.
16.Zhou H., Zhang R., Hu P., Zeng W., Xie Y., Wu C., Qiu G. Isolation and characterization of Ferroplasma thermophilum sp. nov., a novel extremely acidophilic, moderately thermophilic archaeon and its role in bioleaching of chalcopy-rite // J. Appl. Microbiol. 2008. Vol. 105, N 2. P. 591-601.
17.Norris P.R., Clark D.A., Owen J.P., Waterhouse S. Characteristics of Sul-fobacillus acidophilus sp. nov. and other moderately thermophilic mineral-sulfide-oxidizing bacteria // Microbiol. 1996. Vol. 142. P. 775-783.
18.Melamud V.S., Pivovarova T.A., Tourova T.P., Kolganova T.V. , Osipov G.A., Lysenko A.M., Kondrat'eva T.F., Karavaiko G.I. Sulfobacillus sibiricus sp. nov., a new moderately thermophilic bacterium // Microbiol. (Moscow). 2003. Vol. 72, N 5. P. 605-612.
19. Schippers A., Sand W., Glombitza F., Willscher S. Biohydrometallurgy: from the single cell to the environment // Adv. Mater. Res. Trans. tech. publications. 2007. Vol. 20-21. 680 p.
20.Bogdanova T.I., Tsaplina I.A., Kondrat'eva T.F., Duda V.I., Suzina N.E., Melamud V.S., Tourova T.P., Karavaiko G.I. Sulfobacillus thermotolerans sp. nov., thermotolerant, chemolithotrophic bacterium // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2006. N 56. P. 1039-1042.
21.Karavaiko G.I., Bogdanova T.I., Tourova T.P., Kondrat'eva T.F., Tsaplina I.A., Egorova M.A. , Krasil'nikova E.N., Zakharchuk L.M. Reclassification of 'Sulfobacillus thermosulfidooxidans subsp. thermotolerans' strain K1 as Alyciclobacillus tolerans sp. nov. and Sulfobacillus disulfidooxidans Dufresne et al. 1996 as Alyciclobacillus disulfidooxidans comb. nov., and emended description of the genus Alyciclobacillus // Int. J Syst. Evol. Microbiol. 2005. N 55. P. 941-947.
22. Grishin S.I., Tuovinen O.H. Fast kinetics of Fe2+ oxidation in packed-bed reactors // Appl. Environ. Microbiol. 1988. Vol. 54, N 12. P. 3092-3100.
23.Ginsburg M. A., Penev K., Karamanev D. Immobilization and ferrous iron bio-oxidation studies of a Leptospirillum sp. mixed-cell culture // Minerals Engineering. 2009. N 22. P. 140-148.
24.Nemati M., Webb C. 1997. Does immobilization of Thiobacillus fer-rooxidans really decrease the effect of temperature on its activity? // Biotechnol. Let. Vol. 19, N 1. P. 39-43.
25.Park D., Lee D.S., Joung J.Y., Park J.M. Comparison of different biore-actor systems for indirect H2S removal using iron-oxidizing bacteria // Proc. Biochem. 2005. N 40. P. 1461-1467.
26. Giaveno A., Lavalle L., Guibal E., Donati E. Biological ferrous sulfate oxidation by A. ferrooxidans immobilized on chitosan beads // J. of Microbiol. Methods. 2008. Vol. 72, N 3. P. 227-234.
27. Zhong-er L., Yunhong H., Zhaoling C., Wei C., Fan O. Kinetics of continuous ferrous ion oxidation by Acidithiobacillus ferrooxidans immobilized in poly(vinyl alcohol) cryogel carriers // Hydrometallurgy. 2004. Vol. 74, N 3-4. P. 181-187.
28. Wang Y., Yang X., Tu W., Li H. High-rate ferrous iron oxidation by immobilized Acidithiobacillus ferrooxidans with complex of PVA and sodium alginate // J. of Microbiol. Methods. 2007. Vol. 68, N 2. P. 212-217.
КОРОТКО ОБ АВТОРАХ
Хайнасова Татьяна Сергеевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, кЬатаБОУа@уа)^ех.ги,
Левенец Ольга Олеговна - кандидат технических наук, старший научный сотрудник, [email protected],
Трухин Юрий Петрович - доктор геолого-минералогических наук, главный научный сотрудник, [email protected],
Научно-исследовательский геотехнологический центр Лальневосточного отделения Российской академии наук (НИГТЦ ЛВО РАН).
UDC 550.72
THE USE OF MICROORGANISMS IMMOBILIZATION IN BIOLEACHING
Khainasova T.S., Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, [email protected], Research Geotechnological Center, Far Eastern Branch of Russian Academy of Sciences, Russia, Levenets O.O., Candidate of Technical Sciences, Senior Researcher, [email protected], Research Geotechnological Center, Far Eastern Branch of Russian Academy of Sciences, Russia, Trukhin Y.P., Doctor of Geological and Mineralogical Sciences, Professor, Principal researcher, Research Geotechnological Center, Far Eastern Branch of Russian Academy of Sciences, Russia.
A brief review of data on immobilization of chemolithotrophic microorganisms participating in bioleaching and use of the immobilized biomass of cells in the ferrous iron oxidation is presented in the article.
Key words: immobilization, bioleaching, biooxidation, ferric iron, iron-oxidizing microorganisms, Acidithiobacillus ferrooxidans. REFERENCES
2. Gusakov M.S., Krylova L.N., Adamov Je.V. Vyshhelachivanie nikelja iz pirroti-novyh koncentratov zhelezom, okislennym immobilizovannoj biomassoj (Leaching of Nickel from concentrates of pyrrhoite iron, oxidized immobilized biomass) // Cvetnye metally. 2011. No 4. pp. 15-19.
4. Hajnasova T.S., Levenec O.O., Balykov A.A. Issledovanie immobilizacii mikroor-ganizmov i okislenija zheleza immobilizovannoj biomassoj (Study of the immobilization of microorganisms and iron oxidation by immobilized biomass) // Gornyj informacionno-analiticheskij bjulleten' (nauchno-tehnieskij zhurnal). Special'nyj vypusk No 31 «Kamchatka-3». Moscow: Gornaja kniga, 2016. No 11. pp. 247-253.
5. Levenec O.O., Hajnasova T.S., Balykov A.A., Truhin Ju.P. Vysokotemperaturnoe vyshhelachivanie sul'fidnoj rudy mestorozhdenija Shanuch rastvorami trehvalentnogo zheleza (High temperature leaching of sulfide ore deposits Sanus solutions of ferric iron) // Gornyj informacionno-analitichesij bjulleten' (nauchno-tehnicheskij zhurnal). Special'nyj vypusk No 31 «Kamchatka-3». Moscow: Gornaja kniga, 2016. No 11, pp. 254-259.
6. Lekcija 10 immobilizacija. [Jelektronnyj resurs]. URL: http://www.studfiles.ru/preview/ 4597164 (data obrashhenija: 29.02.2016).
7. Biotehnologija. [Jelektronnyj resurs]. URL: http://www.biotechnolog.ru/ prombt/ prombt10_1.htm (data obrashhenija: 29.02.2016).
