CC BY
108
УДК 6Э6.9Э
ПРИМЕНЕНИЕ ХОРИОНИЧЕСКОГО ГОНАДОТРОПИНА ДЛЯ СТИМУЛИРОВАНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ САМОК СУРКОВ
К.В. ХАРЛАМОВ, доктор сельскохозяйственных наук, директор
Г.А. ФЕДОСЕЕВА, кандидат сельскохозяйственных наук, зав. лабораторией
И.Е. ЧЕРНОВА, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник
НИИ пушного звероводства и кролиководства имени В.А. Афанасьева Россельхозакадемии
E-mail: [email protected]
Резюме. Развитие сурководства затруднено поздней половой зрелостью животных (более ТО % зверей начинают размножаться в Э-летнем возрасте). Кроме того, большая часть самок размножается через год или в течение 5...6 лет остается без приплода. Цель нашей работы - установить влияние хорионического гонадотропина (ХГ) на репродуктивную способность самок сурков.
Работу проводили на сурковой ферме ОАО «Племзавод «Пушкинский» Московской области. Домики открывали с 1 февраля. В это время проводили проверку петель у самок и семенников у самцов.
При наблюдении за развитием эстрального цикла (стадиями охоты и овуляции) после выхода самок из спячки, наряду с оценкой внешнего изменения петли и поведения зверей, использовали метод влагалищных мазков.
Для проведения эксперимента сформировали две группы животных, которым вводили разные дозы ХГ: в I группе - 100 МЕ: во II группе - 200 МЕ. Препарат применяли однократно при оценке петли в 5 баллов и по мазку в стадии эструса. Предварительный анализ, проведенный по данным, полученным в условиях Московской области в 1995-2011 гг., показал, что пик гона у сурков приходится на 25 февраля - 4 марта, щенения - на Э1 марта -Т апреля. Репродуктивный период у самок длится от 2 до 8 лет. Плодовитость самок, обработанных хорионическим гонадотропином в среднем составила 4,ТТ, у не обработанных - 3,0 щенка, число щенков зарегистрированных в возрасте 45 дн. в расчете на благополучно ощенившуюся самку - соответственно 4,22 и 2,44 гол. Кроме того, применение ХГ в период гона способствовало получению приплода от ранее не щенившихся самок. Ключевые слова: сурок, размножение, гормональная стимуляция, гон, щенение, плодовитость.
В публикациях по различным проблемам морфологии и физиологии сурков вопросам размножения уделено недостаточно внимания. Хотя некоторые аспекты их репродукции изучены [2, 4, 5].
В частности установлено, что размер желтых тел в яичниках самок в конце беременности составляет 1,5...2,0 мм и они хорошо видны невооруженным глазом. После родов желтые тела медленно уменьшаются и к концу активного периода жизни зверей имеют вид черных точек размером 0,1.. .0,2 мм2.
В условиях клеточного содержания появилась возможность управлять сроками размножения сурков, открывая лазы домиков и начиная кормить и поить зверей по мере выхода их из спячки. Хотя нередко наблюдаются случаи, когда самки практически не выходят из домика, не едят и не пьют, но несмотря на это щенятся и благополучно выращивают щенков [4].
У половозрелых самок перед залеганием в спячку в яичниках отмечаются процессы активизации роста фолликулов и усиление пролиферативной активности
фолликулярного эпителия. Такие факты указывают на то, что в период подготовки к началу гибернации у животных отмечается активизация герминативной функции яичников. Вероятно, эти процессы направлены на подготовку половых желез самок к размножению в следующем сезоне, что может быть связано со сжатым по времени периодом, в течение которого происходит овуляция и спаривание [5].
Некоторые исследователи считают, что у самок сурков овуляция индуцируется спариванием. В подтверждение этой гипотезы они приводят данные, свидетельствующие о том, что у самок альпийских сурков гормональный фон (концентрация эстрогенов и прогестерона) перед овуляцией не изменяется [6].
В комплексе возможных методов стимуляции репродуктивной функции животных особое место отводится гормональному воздействию. Значительное количество работ проведено по экспериментальному выявлению влияния тех или иных препаратов на процесс овуляции. Сегодня для этого широко применяют такие высокоочи-щенные гипофизарные и плацентарные препараты, как «ФСГ-СУПЕР», который содержит фолликулостимулирующий гормон, полученный из передней части гипофиза свиней, «Хорулон», обладающий активностью лютеини-зирующего гормона (ЛГ), «Фоллимаг», содержащий гонадотропин сыворотки жеребых кобыл и вспомогательные веществ (глицин, калий, натрий). Они стимулируют рост и созревание фолликулов в яичниках, а в последующем овуляцию и развитие желтых тел.
В результате более ранних исследований доказана возможность стимуляции овуляции у соболя путем введения однолетним самкам 50 ед. хорионического гонадотропина (ХГ) через несколько часов после покрытия [1]. Введение фолликулостимулирующего гормона и хорионического гонадотропина самкам соболей вызвало значительные изменения в яичниках и крови подопытных животных. Проведенные гистологические исследования указывают на стимулирующее действие указанных препаратов на половой аппарат животных. В результате исследования крови и мочи выявлена повышенная экскреция гонадотропных гормонов у опытных зверей, по сравнению с контрольными.
Для сурков клеточного разведения характерна низкая воспроизводительная способность. Более 70 % зверей начинает размножаться в 3-летнем возрасте, часть самок через год или в течение 5.6 лет остается без приплода.
Цель наших исследований - установить влияние хорионического гонадотропина на репродуктивную способность самок сурков.
Условия, материалы и методы. Работу проводили на сурковой ферме ОАО «Племзавод «Пушкинский» Московской области в 2011 г. Лазы домиков сурков открывали с 1 февраля последовательно по мере выхода животных из спячки. Кормление и поение зверей осуществляли с момента открытия домиков.
Таблица 1. Возраст первого щенения у самок сурков
Показатель Всего Возраст, лет
1 1 2 3 1 4 1 5 1 6 7 з
Число, гол. Доля, % 147 100,0 — 15 10,2 52 35,3 39 25 26,5 17.1 7 4,8 7 4,8 2 1,3
В это же время проводили проверку петель у самок и семенников у самцов. При необходимости меняли зверей в парах.
У самцов размер и упругость семенников определяли путем пальпации и каждый признак оценивали по трехбалльной шкале от 1 до 3 баллов.
Первые признаки подготовки к размножению у половозрелых животных начинают проявляться в конце января или начале февраля. Петли у самок развиваются в течение недели и после спада повторного развития не наблюдается. Перед инъекцией оценивали состояние петли по разработанной нами пятибалльной шкале (1 балл - первые признаки очищения петли; 2 - небольшое увеличение, набухание; 3 - покраснение, увеличение петли; 4 - максимальное увеличение, полное набухание и покраснение; 5 - спад напряжения половых губ, незначительное появление бледности).
Для наблюдения за развитием эстрального цикла (стадиями охоты и овуляции) после выхода самок из спячки, наряду с оценкой внешнего изменения петли и поведения зверей, использовали метод влагалищных мазков [3]. Мазок брали из бокового свода верхней трети влагалища с помощью ватного тампона. После фиксации метиловым спиртом его окрашивали синькой Лефлера и краской Романовского-Гимза, что улучшало видимость под микроскопом. Микроскопию проводили с помощью бинокулярной лупы МБС-1 и микроскопа АУ-12 под увеличением окуляра - 7, объективов - 10 и 40.
Хорионическим гонадотропином (ХГ) обработали 20 самок сурков разного возраста. Группы животных были уравнены по возрасту. Препарат вводили однократно при оценке петли в 5 баллов и по мазку в стадии эструса. Животным I группы препарат применяли в дозе 100 МЕ, II - 200 МЕ.
Для определения оптимальных сроков введения препарата и возраста гормональной стимуляции были проанализированы сведения о периоде щенения сурков (по данным за 1995-2011 гг.), возрасте первого вступления в воспроизводство, а также продолжительности их половой активности.
Результаты и обсуждение. За годы наблюдений получено 248 пометов. Период щенения у сурков очень растянут во времени (около 2 мес.). Первый приплод регистрировали 13 марта, последний - 2 мая. Пик размножения
Таблица 2. Воспроизводительная способность самок сурков, М ± m
Доза n Плодови- тость Зарегистрировано в возрасте 45 дней
100 МЕ 4 4,75 І 0,85 4,75 І 0,85
200 МЕ 5 4,8 І 1,15 3,8 І 1,46
Всего обра-
ботанные ХГ 9 4,77 І0,70 4,22 І0,86
Не обрабо-
танные ХГ 9 3,00 І 0,78 2,44 І0,84
приходился на 31 марта - 7 апреля. За эти 8 дней щенки родились у 71,7 % самок. Период гона у сурков начинается 7 февраля и заканчивается 29 марта. Продолжительность беременности составляет 35 дней, следовательно, пик гона приходится на 25 февраля - 4 марта.
Чаще всего самки начинают размножаться в 3-летнем возрасте (35,3 % ) и только 10,2 % щенится в возрасте 2 лет (табл. 1). После 5-летнего возраста первый раз щенится небольшое число животных (10,9 %). Репродуктивный период продолжается от 2 до 8 лет.
Плодовитость самок, обработанных хорионическим гонадотропином, в среднем по 2 группам составила 4,77 щенка, у не обработанных - 3,0. Зарегистрировано на благополучно ощенившуюся самку соответственно 4,22 и 2,44 щенка. Отсутствие достоверных различий, на наш взгляд, связано с малым количеством животных в опыте, поэтому исследования будут продолжены.
У двух самок, которым вводили ХГ, отмечено рождение девяти щенков в помете, что для сурков довольно редко. Важно, что они сами выкормили молодняк до отсадки. Кроме того, три самки ощенились первый раз в возрасте 5, 6 и 7 лет, что, на наш взгляд, также косвенно свидетельствует о положительном влиянии препарата. По сохранности молодняка различий не установлено. Как в опыте, так и в контроле до регистрации пало по 5 щенков.
Выводы. При использовании хорионического гонадотропина отмечена положительная тенденция к улучшению воспроизводительной способности сурков (плодовитость в среднем увеличивается на 1,77 щенка, число зарегистрированных щенков на благополучно ощенившуюся самку - на 1,78 щенка). Применение препарата в период гона способствует получению приплода от ранее не щенившихся самок.
Литература.
1. Бернацкий В.Г., Куличков А.Б. Наставление по гормональной стимуляции овуляции у покрытых молодых соболей. Утверждено Зверопромом РСФСР, 1984.
2. Машкин В.И. Продуктивность разных видов сурков//Сурки Северной Евразии: сохранение биологического разнообразия: Тез. докл. II междунар. (VI) совещ. по суркам стран СНГ. - М.: ABF, 1996. - С.5Т-58.
3. Плотников И.А., Заболотских Ю.С., Газизов В.З. Методические рекомендации по содержанию и разведению различных видов сурков. - М., 1998. - Т9 с.
4. Рымалов И.В. Возможность полиандрического типа реализации репродуктивного потенциала особей в семейных группировках степных сурков // Сурки Голарктики как фактор биоразнообразия: Тез. докл. III междунар. конф. по суркам. -М.:ABF, 199Т. -С.86.
5. Шевлюк Н.Н., Руди В.Н., Стадников А.А. Биология размножения наземных грызунов из семейства беличьих. - Екатеринбург, 1999. - 146 с.
Le Berre M. Results and trends in the french research programme on marmots//Actual problems of marmots investigation (Collection of scientific articles). - М.,1994. - Р. Т1-85.
USING OF CHORIONIC GONADOTROPIN FOR STIMULATION OF REPRODUCTIVE FUNCTION OF
MARMOT FEMALES K.B. Kharlamov, G.A. Fedoseeva, I.E. Chernova
Summary. A development of marmot breeding in captivity is complicated by late puberty of animals (more than 70% of animals begin to breed in З-years old). Most of the females breed ones in two years or for 5-б years stays free of offspring.
The aim of our work is to establish the effect of CG on the reproductive capacity of marmot females to investigate the possibility of increasing the reproductive capacity. Before we had some objectives: to study the effect of CG on the reproductive ability of marmot females of different ages; to determine the effect of different doses of CG on the reproductive ability of marmot females.
The work was carried out on the marmot farm of OAO «Plemzavod «Pushkinskiy», Moscow region.
Opening of the cages were made February 1. At this time the test of loops in females and testes in males was conducted. The method of vaginal smears was used for monitoring of the development of the estrous cycle (stage of wish and ovulation) after the end of hibernation from along with an estimate of the outer loop changes and behavior of females. It was formed two groups of animals with different doses
of the drug CG: Group 1 - 100 IU: Group 2 - 200 IU. The drug was injected once in the assessment of loop in 5 points and under smear in the stage of estrus. Experimental data on the reproductive capacity of marmot females with using CG were obtained.
As a result of researches it is establiched that application of CG makes positive impact on reproductive ability of groundhogs. Fertility at the females processed by CG made 4,77, at not processed - 3,0 puppies. 4,22 and 2,44 puppies are registered on safely both breeding a female respectively. CG application during the period estrus promotes receiving an issue from earlier not both breeding females. Key words: marmot, reproductive ability, hormonal stimulation, estrus, breeding, fertility.
УДК 636.934.57:(619:616.9)
ПАТОЛОГОМОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ И ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ХЕЛИКОБАКТЕРИОЗА НОРОК
И.В. ВАСИНА, научный сотрудник
A.Н. СЕМИКРАСОВА, кандидат биологических наук, зав. отделом
B.И. ГЕЛЛЕР, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник
НИИ пушного звероводства и кролиководства имени В.А. Афанасьева Россельхозакадемии
E-mail: [email protected]
Резюме. Исследования проводили с целью разработки патоморфологического способа диагностики хеликобактериоза и его дифференциальной диагностики от основных заболеваний норок.
При проведении гистологического исследования установили атрофические изменения в слизистой оболочке желудка в сочетании с лимфолликулярной гиперплазией и метаплазией эпителия. Гистологические изменения при хеликобактериозе у норок, в основном, характеризовались как хронический хели-кобактерный активный гастрит, проявляющийся метаплазией эпителия, инфильтрацией собственной пластинки и эпителия слизистой оболочки желудка плазматическими клетками, Т- и В-лимфоцитами, инфильтрацией межуточной соединительной ткани большим количеством нейтрофильных элементов, застойной гиперемией и отеком подслизистой пластинки. При наличии эрозий в антральном отделе желудка норок наблюдали дефекты эпителиального пласта с некробиотическими изменениями эпителия преимущественно на вершине валиков. По краям эрозии однослойный цилиндрический эпителий и собственная оболочка слизистой полностью лизированы (глыбки хроматина, белковый детрит). В ряде случаев имел место периваскулярный отек и стазы эритроцитов. При выраженном активном хеликобактер-ассоциированном гастрите установлена обсемененность слизистой оболочки хеликобактериями. На гистологических срезах, окрашенных метиленовым синим по Лефлеру, хеликобактерии выявляются в виде изогнутых палочек. Для них характерно расположение в слизи, на эпителии и в просветах ямок вблизи эпителия. В ряде случаев в антральном отделе желудка норок выявлены язвы. В подслизистом слое, рыхлой соединительной ткани подслизистой оболочки присутствуют обширные воспалительные инфильтраты. В печени отмечали признаки хронического портального, перипортального и паренхиматозного гепатита: вокруг триад лимфоидно-плазмоклеточная инфильтрация и отек, поддольковые и центральные вены расширены, вокруготек и лимфоидная инфильтрация, вакуольная и жировая дистрофия гепатоцитов, иногда балочное строение гепатоцитов нарушено, в дольках небольшие лимфоидные инфильтраты. В поджелудочной железе также имели место дискомплексация конечных отделов ацинусов, вакуолизация цитоплазмы, разрастание соединительной ткани между ацинусами. По ходу выводных протоков лимфоидная инфильтрация и вакуолизация цитоплазмы эпителия протоков.
Ключевые слова: хеликобактериоз, норка, гистология, патоморфология, гастрит, желудок.
Хеликобактериоз (Helicobacteriosis) - широко распространенное инфекционное заболевание, которое проявляется симптомами острого и хронического гастрита, гастродуоденита, а также язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Его вызывают бактерии тропные к эпителию желудочного типа. Хеликобактериоз относят к антропозоонозам. Эпидемиологическими и серологическими исследованиями показано, что Helicobacter pylori -самая частая хроническая инфекция, носителем которой может быть каждый второй человек [1, 2]. На сегодняшний день заболевание зарегистрировано у человека, мышей, собак, хомяков, обезьян, свиней, диких и домашних птиц, крыс, кошек, гепардов, хорьков, норок и овец [3].
В зверохозяйствах различных регионов РФ зарегистрировано заболевание норок с предварительным диагнозом хеликобактериоз [4]. У таких зверей наблюдали отказ от корма и рвоту. Болели как взрослые животные, так и молодняк, причем у щенков смертность с клиническими и патоморфологическими признаками хеликобактериоза достигала 60 % от общего падежа. У павших норок обнаруживали перитонит, язвенное прободение желудка, дегтеобразную массу в брюшной полости, иногда ткань желудка была лизирована. При отсутствии перитонита отмечали гастрит и язвы диаметром 2.15 мм в антральной части желудка. Поверхность слизистой оболочки желудка была покрыта характерными извилинами. Внутренние органы анемичны, печень увеличена, дряблая, желто-коричневая, поджелудочная железа значительно увеличена, иногда уменьшена в размере.
При постановке диагноза на хеликобактериоз необходимо исключить другие инфекционные заболевания норок, которые протекают с признаками поражения желудочно-кишечного тракта (вирусный энтерит норок, кишечная форма чумы плотоядных, пастереллез, сальмонеллез). Кроме того, поражение желудочнокишечного тракта и печени отмечают при алеутской болезни норок и токсикозах [5].
В связи с изложенным целью наших исследований была разработка патоморфологического способа диагностики хеликобактериоза у норок и дифференциальная диагностика его от основных заболеваний этих зверей.
Условия, материалы и методы. В 2010-2011 гг. для исследования были отобраны 150 трупов норок, у которых в анамнезе отмечали рвоту, отказ от корма, понос. Патологический материал фиксировали в 10 %-ном нейтральном формалине, гистосрезы готовили
