CC BY
46
1 B/T В/A -à-А/І
Динамика показателей ритмической активности при стимуляции стальной иглой
с последующей электростимуляцией
Примечание: Достоверность различий между оцениваемым режимом и предшествующим (парное сравнение)
* - р<0,05,
# - р<0,01.
проявившего в данном исследовании наибольшую информативность, предлагается для количественной оценки специфической реакции ЦНС на стимуляцию БАТ. Кэффекта = (BT2) / (BT1),
Кпоследействия = (BT3) / (BT1), где
BT1 - показатель B/T до воздействия,
BT2 - показатель B/T во время воздействия,
BT3 - показатель B/T после прекращения воздействия,
Все показатели представляют собой значение спектральных показателей магнитуды, усредненное за интервал 5 мин.
Выявленный отчетливый период повышения показателя B/T после прекращения стимуляции БАТ обеспечивает значительную продолжительность терапевтического влияния процедуры.
Количественная оценка исследованных реакций может быть полезна при прогнозировании предполагаемого терапевтического эффекта стимуляции и послужить одним из элементов нейрофизиологических исследований в этой области.
ЛИТЕРАТУРА
1. Смоляков Ю. Н. Оценка информативности нормированных показателей ритмической активности нейронов коры головного мозга // Материалы XXI Всероссийской научно-технической конференции «Биомедсистемы 2008». - Рязань: РГРУ, 2008. - С.158-160.
2. Caplan J. B. Human theta oscillations related to sensorimotor integration and spatial learning // J Neurosci 23: 4726-4736, 2003.
3. Cho Z. H. fMRI Neurophysiological evidence of acupuncture Mechanisms // Medical Acupuncture, 2003. - Vol.14, № 1. - P. 134-138.
4. Glantz S. A. Primer of Biostatistics. - 6th ed. McGraw-Hill Medical Publishing, 2005. - 500 p.
5. Guidelines for clinical research on acupuncture - World health organization. Regional Office for the Western Pacific, 1995. - 68 p.
6. Nunez P. L. Electric Fields of the Brain - The Neurophysics of EEG // Oxford University Press, Inc., 2006. - 611 p.
7. Scott S. A. Biochemical Hypothesis for the Effectiveness of Acupuncture in the Treatment of Substance Abuse: Acupuncture and the Reward Cascade // Amer J Acupun, 1997. - Vol. 25, № 1. - P. 33-40.
8. Standard Acupuncture Nomenclature - 2nd ed., World health organization. Regional Office for the Western Pacific, 1993. - 266 p.
Поступила 09.09.2009
В. В. СОРОКИНА
ПРИЧИНЫ СМЕРТИ ПРИ ОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ НАРКОТИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
*+ _
И ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ЦИТОКИНОВ
Кафедра патологической анатомии с курсом клинической патологии,
ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия»,
Россия, 644043, г. Омск, ул. Партизанская, 20. E-mail: [email protected]
Проведено типирование генов цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-Жа у лиц, погибших в результате острой и хронической наркотической интоксикации. Получены статистически значимые различия частот встречаемости аллеля Т полиморфного локуса С+3953Т в экзоне 5 гена ИЛ-1р. По аллелям 2К и 4К VNTR полиморфизма в интроне 2 гена ИЛ-Жа между вышеозначенными
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009 УДК 616-099-036.88:615.212.7+577.112:575.174.015.3
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
группами не выявлено статистически значимых различий. Лица, погибшие в результате хронической наркотической интоксикации, носители генотипов Т/Т ИЛ-1Р, 2/2 ИЛ-Жа, имели быстрый темп развития осложнений и выраженную тенденцию к хронизации и торпидному течению. В качестве основных причин смерти преобладали инфекции с выраженным воспалительным профилем с тенденцией к генерализации: туберкулез, сепсис, гепатиты с быстрым прогрессированием и пневмонии различной этиологии. Делается вывод о важности исследования ИЛ-1Р в аспекте клинических подходов, определения тактики лечения и прогнозов заболевания.
Ключевые слова: генетический полиморфизм, ИЛ-1Р, ИЛ-Жа, наркотическая интоксикация.
V. V. SOROKINA
THE REASONS TO DEATHS UNDER SHARP AND CHRONIC NARCOTIC INTOKSIKACII AND GENETIC POLIMORFIZM CITOKINOV
Pulpit to pathological anatomy with course of clinical pathology,
GOU VPO Omskaya state medical academy,
Russia, 644043, Omsk, st. Partizanskay, 20. Е-mail: [email protected]
It Is Organized tipireted gene cytokines IL-ip, IL-1Ra beside persons perished as a result sharp and chronic narcotic intoxicated. Statistical significant differences of the frequencies counter alleles T polymorphic locus S+3953T are received in exoni 5 genes IL-ip. On alleles 2R and 4R VNTR polymorphic in introni 2 genes IL-1RA between abovementioned group is not revealled statistical significant difference. The Persons, perished as a result chronic narcotic intoxicated - a carriers genotypes T/T IL-ip, 2/2 IL-1RA had a quick pace of development of the complications and expressed trend to chronic’s and torpid’s to current. As main reasons to deaths dominated the infections with expressed by inflammatory profile with trend to generalisation: tuberculosis, sepsis, hepetitises with quick progress and pneumonia different etiologies. The conclusion is done about importance of the study IL-ip, in aspect clinical approach, determinations tacticians treatments and forecast of the disease.
Key words: genetic polimorfizm, IL-1 p, IL-iRa, narcotic intoxicated.
Введение
Постоянное или эпизодическое употребление опиатов с морфинным циклом ведет к целому спектру изменений, определяющих характер проявлений и осложнений наркотической болезни. По данным зарубежных и отечественных литературных источников [3], существуют три пика смертности лиц употребляющих наркотические вещества внутривенно, а именно:
1. Первые месяцы от начала потребления наркотических веществ, основная причина смерти передозировка наркотических веществ;
2. Начиная со второго года систематического употребления наркотических веществ происходит постепенный рост смертности от тяжелого течения висцеральной патологии с пиком на пятом году.
3. После 5 лет.
Помимо токсического действия наркотика у лиц, употребляющих наркотические вещества внутривенно, часто отмечаются признаки хронических воспалительных и инфекционных заболеваний, что связано не только с выраженной иммуносупрессией, вызванной непосредственным действием наркотика, но, возможно, и с генетически детерминированным характером воспалительного ответа. Согласно данным последних лет полиморфизм генов цитокинов, включая семейство ИЛ-1Р, оказывает существенное влияние на общие особенности протекания воспалительного ответа - остроту, хронизацию, уровень лихорадки и др. По всей видимости, в зависимости от индивидуального ансамбля высоко- и низкопродуци-рующих вариантов генов про- и противовоспалительных цитокинов характер воспалительного ответа может значительно различаться между индивидуумами с полярными («провоспалительным» и «противовоспалительным») генотипами. Такая поляризация мо-
жет быть ответственна за выраженную дисрегуляцию воспалительного ответа.[1]
Целью настоящей работы явилось изучение ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов ИЛ-1в (С+3953Т) и ИЛ-Жа ^МТ^тй2) с причинами смерти лиц, погибших в результате острой и хронической наркотической интоксикации
Материал и методы исследования
Работа основана на результатах анализа наблюдений случаев смерти лиц, погибших с установленными данными употребления наркотических веществ. Проведено аутопсийное исследование 189 трупов лиц, страдавших опийной наркоманией за период 2005-2007 гг. Исследование трупов проводилось на базе ГУЗООБСМЭ.
Сведения об имевшейся наркотической зависимости в 35 наблюдениях были получены из амбулаторных карт, в 48 случаях в беседе с родственниками и близкими товарищами умерших, а также из материалов уголовных дел и протоколов осмотра трупа на месте происшествия.
В преобладающем большинстве случаев аутопсию проводили в сроки до 24 часов после наступления смерти. Макроскопическое исследование проводили с применением традиционных секционных методик. Полученные на вскрытии образцы органов и тканей 30-40 для каждого наблюдения заливали в парафин, парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, выборочно проводили ШИК-реакцию.
Молекулярно-генетический метод:
Из всего массива случаев нами была выделена группа лиц количеством 130 человек, давность наступления смерти которых на момент осмотра трупа в морге не превышала 12 часов. Также была сформирована
группа контроля - субъекты до 35 лет, погибшие в результате насильственной смерти, без признаков употребления наркотических веществ внутривенно - 100 человек, давность наступления смерти которых на момент осмотра трупа в морге также не превышала 12 часов. В обеих группах проводился забор крови (10 мл) с антикоагулянтом и последующим получением взвеси лейкоцитов, из которых выделяли ДНК методом перхлоратной экстракции с этанольным содержанием. Исследование полиморфизма генов ИЛ-Iß проводили и с помощью полимеразной цепной реакции (аллель специфичная ПЦР и ПДРФ анализ). Использованы олигонуклеатидные праймеры, синтезированные в Институте химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (г. Новосибирск).
Амплификацию проводили в буфере, содержащем 10 мМ Трис-HCl (pH 8,9), 50 мМ KCl, 1,7 мМ MgCl, 0,05% Tween 20, с добавлением 0,2 мМ-ого раствора dNTP, 0,5 мкМ-ого раствора праймеров, 20 нг ДНК и 1,0 ед. акт. Taq-ДНК-полимеразы. Реакционную смесь в объеме 20 мкл покрывали 40 мкл минерального масла. ПЦР проводили на амплификаторе «Терцик» («ДНК-Технология», Москва).
Анализ рестрикционных смесей проводили с помощью электрофореза в 3%-м агарозном геле с бромистым этидием. Результаты исследований были статистически обработаны при помощи углового преобразования Фишера и х2. Статистически достоверными считали различия при р<0,05.
Частоты встречаемости аллелей генов ИЛ-^ в исследуемой и контрольной группах соответствовали закону распределения Харди-Вайнберга.
Результаты исследования и их обсуждение
Гены, кодирующие ИЛ-^ и ИЛ-Жа, кластеризуются на длинном плече хромосомы 2 [1]. Генетический полиморфизм найден в обоих генах. Для нуклеотидной замены С+3953Т в 5 экзоне ИЛ-^ и VNTR повтора во втором интроне ИЛ-Жа гена (VNTR-intr2) доказана связь различных аллелей с продукцией соответствующих цитокинов.
Аллель Т полиморфного локуса С+3953Т большинство исследователей связывают с повышенной продукцией ИЛ-^ [1] и, соответственно, с предрасположенностью к развитию воспалительных заболеваний. Полученные нами данные по генотипированию точечной нуклеотидной замены С+3953Т ИЛ-^ представлены в таблице 1. Статистически значимые различия наблюдаются для гомозигот по аллелю Т, которые встречаются чаще в исследуемой группе (х2, р=0.025).
В гене ИЛ-1 Ка существует полиморфизм в интроне 2 в результате присутствия различного количества тандемных повторов с длиной 86 п.н. В настоящий момент описано 5 аллелей, которые обозначаются как 2К, 3К, 4К, 5К и 6К в соответствии с числом тандемных повторов. Наиболее часто в человеческой популяции встречаются аллели 2К и 4К. Остальные аллели встречаются с частотой не более 2%. С аллелем 2К связано повышение базального уровня ИЛ-Жа, а также увеличение продукции ИЛ-1Р стимулированными моноцитами [1,6]. Данный аллель ассоциирован с различными воспалительными и иммунозависимыми заболеваниями. [1, 5] и т. д.
При изучении полиморфного локуса VNTR-intr2 гена ИЛ-Жа нами было выявлено два аллеля с 2, 4 тандемными повторами. Наиболее высокая частота встречаемости в обеих группах была у аллеля 4К, что соответствует общепопуляционной закономерности. Аллель 2К, который зарекомендовал себя как маркер воспалительных заболеваний, встречался более часто в исследуемой нами группе, чем в группе контроля. Статистически значимое различие в частотах встречаемости аллелей и генотипов между группой лиц, погибших в результате хронической наркотической интоксикации, и группой контроля нами выявлено не было. Однако в группе лиц, погибших в результате хронической наркотической интоксикации, доля субъектов с генотипом 2К/2К и аллелем 2К возрастала. Такое увеличение носителей аллеля 2К, обусловливающее большую продукцию ИЛ1- Ка на фоне увеличения продукции самого ИЛ-1Р, вполне закономерно. Полагают, что при реализации воспалительного ответа у носителей генетически обусловленного перевеса в сторону выработки ИЛ-Жа количество этого белка больше, чем необходимо для адекватной реализации воспаления, что вызывает компенсаторное образование еще большего количества ИЛ-1р. При этом продукция ИЛ-Жа тоже увеличивается. Таким образом, носительство сочетаний генов ИЛ-1Р и ИЛ-Жа, определяющих перевес в сторону выработки ИЛ-Жа, приводит к более продолжительному воспалительному ответу с выраженной тенденцией к хронизации.
При рассмотрении гаплотипов обращала на себя внимание комбинация аллелей ИЛ-Жа 2К/2К+/ИЛ-1Р Т/Т+. В нашей выборке из 10 человек с генотипом ИЛ-1Р Т/Т ни один не имел генотип ИЛ-1 Ка-2К/2К, и из 7 человек с генотипом ИЛ-1Ка-2К/2К не встретилось ни одного с генотипом ИЛ-1Р Т/Т. Логично было бы предположить, что при наличии этих двух провоспали-тельных генотипов увеличится вероятность крайне тяжелого течения воспалительных процессов. Возможно,
Таблица 1
Частота встречаемости генотипов полиморфного локуса С+3953Т ИЛ-1Р в группах лиц, употреблявших наркотики, и контроле
Генотип Лица, погибшие при употреблении наркотиков £ 93 Контроль £100 Уровень статистической значимости различия
Количество (шт.) Частота встречаемости Количество (шт.) Частота встречаемости
С/С 46 0,49 61 0,60 Р>0,05
С/Т 37 0,40 39 0,37 Р>0,05
Т/Т 10 0,11 2 0,03 Р<0,05
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
Таблица 2
Соотношение основных причин смерти и воспалительных и невоспалительных генотипов
Причина смерти Г Е Н О Т И П
С/С, N=46 С/Т, N=37 Т/Т, N=10
Острое отравление наркотиками 20 0,43 5 0,13 1 0,1
Диллатационная кардиомиопатия 24 10 0
и острая коронарная недостаточность 0,53 0,27
Гепатит и цирроз 1 0,2 11 0,3 2 0,2
Пневмония 1 0,2 11 0,3 3 0,3
Сепсис 0 0 4 0,4
Таблица 3
Соотношение основных причин смерти и воспалительных и невоспалительных генотипов
Период употребления наркотиков, Г Е Н О Т И П
завершающийся смертью С/С, N=46 С/Т, N=37 Т/Т, N=10
До 1 года 23 3 1
0,5 0,8 0,1
От 1 года до 5 лет 5 30 9
0,11 0,81 0,9
Более 5 лет 18 0,39 4 0,11 -
носители данных сочетании, в связи с редкой частотой их встречаемости, не попали в число лиц, прошедших генотипирование. Данные о носительстве двух одинаковых гаплотипов, в литературе отсутствуют. Можно предположить, что совместное носительство высокоп-родуцирующих аллелей элиминируется из популяции, поэтому функциональная мутация в одном из этих генов чаще встречается в сочетании с немутантным аллелем другого из них.
Возможно, здесь имеет значение именно определенное соотношение продукции данных цитокинов. Так, при небольшом увеличении соотношения в сторону провос-палительного ИЛ-1Р (гаплотипы ИЛ-Жа 2К/2К—/ИЛ-1Р Т/ Т+ и ИЛ-Жа 2Р/2К+/ИЛ-1Р Т/Т—) наблюдается предрасположенность к воспалительным заболеваниям, а сильный перевес в сторону ИЛ-1Р (гаплотип ИЛ-Жа 2К/2К+/ ИЛ-1Р Т/Т+) элиминируется из популяции или проявляется в более тяжелых формах заболеваний. В связи с этим логично сделать вывод о благоприятном прогнозе для носителей гаплотипа ИЛ-Жа 4К+/ ИЛ-1Р С+, однако данная гипотеза требует дальнейшего рассмотрения на большей выборке образцов для возможности более точного статистического анализа.
Возможно, дальнейшее увеличение выборки и группы контроля приведет к увеличению статистической значимости полученных и выявления новых ассоциаций. Особый интерес в этом плане представ-
ляет изучение именно гаплотипов генов цитокинов и их рецепторов, так как индивидуальные ассоциации с заболеваниями могут быть неинформативны, в то время как комбинации генотипов цитокинов часто служат предрасполагающими факторами восприимчивости к заболеванию или формированию особенностей его пато- и морфогенеза.
В нашем массиве случаев был выявлен ряд часто встречающихся основных причин смерти лиц, употреблявших наркотические вещества опийной природы внутривенно. Их можно разделить на три основные группы. Первая группа - это причины смерти, связанные непосредственно с действием наркотика на организм: острые отравления опиатами. Вторая группа -причины смерти, связанные с использованием нестерильного инструмента для инъекций, а также связанные с иммуносупрессивным действием наркотика на организм: сепсис, гепатит, пневмонии различной этиологии. Третья группа - это причины смерти, патогенетически связанные с развитием хронической гипоксии органов и тканей, обусловленной действием наркотических веществ на центральную нервную систему, реализующееся через эпизодическое угнетение деятельности дыхательного центра - кардиомиопатии, диффузный кардиосклероз.
В нашей работе мы проанализировали взаимосвязь ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов
ИЛ-1Р (С+3953Т) с причинами смерти лиц погибших в результате острой и хронической наркотической интоксикации. Результаты представлены в таблице 2.
По нашим данным, в группе лиц носителей «невоспалительного» генотипа С/С среди причин смерти преобладали острые отравления наркотиками и патология системы кровообращения - кардиомиопатия. В группе лиц носителей «воспалительного» аллеля Т в генотипе чаще присутствовали причины смерти, связанные с развитием острого, хронического и ациклического воспаления в органах и тканях: гепатит, пневмонии различной этиологии, сепсис, пневмонии, туберкулез.
В этих группах нами была проанализирована длительность наркотического стажа.
В первой группе с генотипом С/С преобладали лица со стажем употребления наркотиков до 1 года, а также более 5 лет. Во второй группе с генотипом с/т преобладали лица с длительностью стажа употребления наркотиков 1-5 лет. В третьей группе с генотипом Т/Т также преобладали лица с длительностью стажа употребления наркотиков 1-5 лет. Результаты представлены в таблице 3.
Наркоманы - носители высокопродуцирующего аллеля Т 11_-1р - имеют измененный иммунологический профиль. У этой категории лиц наблюдается быстрое прогрессирующее течение бронхитов, пневмоний, а также туберкулеза, сепсиса, хронического гепатита с исходом в цирроз. Эти заболевания, в патогенезе которых лежит воспалительный процесс, определяют спектр причин смерти и выживаемости в периоде от 1 года до 5 лет употребления алкалоидов опия. В ходе лечения лиц, злоупотребляющих наркотическими веществами либо употребляющих таковые с медицинскими целями, необходимо иссле-
дование полиморфизма гена ИЛ-1р. Наличие провос-палительного генотипа представляет собой потенциальный риск развития воспалительных осложнений наркомании и, возможно, крайне тяжелого течения гепатита, сепсиса, туберкулеза. Это требует специальной коррекции. В противном случае наличие вышеуказанного генотипа определяет крайне тяжелый прогноз хронической наркотической интоксикации.
ЛИТЕРАТУРА
1. Громова А. Ю., Симбирцев А. С. Полиморфизм генов семейства IL-1 человека // Цитокины и воспаление. - 2005. -Т. 4, № 2. - С. 3-12.
2. Смольникова М. В., Коненков В. И. Клиническая иммуногенетика заболеваний человека // Медицинская иммунология. - 2001. -Т. 3. - С. 379-389.
3. Шабанов П. Д. Наркология: Практическое руководство для
врачей. - М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. - С. 320-325.
4. Nicklin M. J., Weith A., Duff G. W. A physical map of the region
encompassing the human interleukin-1 alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-1 receptor antagonist genes // Genomics. 1994. - № 19. -С. 382-384.
5. Pociot F., Molvig J., Wogensen L. A TaqI polymorphism in the human interleukin-1 p(IL-1p) gene correlates with IL-1 в secretion in vitro // Eur. J. Clin. Invest. - 1992. - № 22. - С. 396-402.
6. Hacker U. T., Erhardt S., Tschop K., et al. Influence of the IL-
1Ra gene polymorphism on in vivo synthesis of IL-1Ra and IL-1beta after live yellow fever vaccination // Clin. Exp. Immunol. - 2001. -№ 125. - С. 465-469.
7. Santtila S., Savinainen K., Hurme M. Presence of the IL-1RA allele 2 (IL1RN*2) is associated with enhanced IL-1beta production in vitro // Scand. J. Immunol. - 1998. - № 47. - С. 195-198.
Поступила 26.06.2009
Г. И. ТАРУАШВИЛИ, В. А. АВАКИМЯН, В. Н. КОЧОВ, С. А. ЧИЛОВ, А. Г. ГИШЕВ, А. А. ТХАГАПСО, М. Г. АВРАМИДИ
ИНТРАОПЕРАЦИОННЫЕ И ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫЕ ОСЛОЖНЕНИЯ ДВУХ СПОСОБОВ ОДНОСТОРОННЕГО НЕПОЛНОГО ИНТРАКАВЕРНОЗНОГО ПРОТЕЗИРОВАНИЯ У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ПЕЙРОНИ
кафедра госпитальной хирургии с курсом урологии Кубанского государственного медицинского университета,
Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. Тел. 8 (861) 261-52-03
Одностороннее неполное проксимальное интракавернозное протезирование при болезни Пейрони сводит к минимуму опасность развития интраоперационных и послеоперационных осложнений. Наиболее опасные осложнения (травма уретры и протезная инфекция) при этом методе интракавернозного протезирования не наблюдались.
Ключевые слова: болезнь Пейрони, осложнения, интракавернозное протезирование.
G. I. TARUASHVILI, W. A. AWAKIMJAN, V. N. KOCHOV, S. A. CHILOV,
A. G. GISHEV, A. A. THAGAPSO, M. G. AVRAMIDI
INTRAOPERATIVE AND POSTOPERATIVE COMPLICATIONS TWO METHODS UNILATERAL INCOMPLETE INTRACAVERNOSAL PROSTHESIS BY PATIENTS WITH PEYRONI'S DISEASE
1Chair of hospital surgery with urology course of Kuban State Medical University,
Russia, 350063, Krasnodar, Sedin Str., 4. Tel. 8 (861) 261-52-03
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009 УДК 616.66-77-089.168.1-06
