CC BY
193
УДК 628.543.96
Э. Р. Бабаев, М. Э. Мовсумзаде
Преобразование нефти в процессе ее микробиологической деградации в почве
Институт химии присадок им. акад. А.М.Кулиева НАН Азербайджана, лаборатория присадок к смазочно-охлаждающим жидкостям 370000, г. Баку, Беюксорское шоссе, 24, тел. (99412)4938058, e-mail: elbeibabaev@yahoo.de,
samed@consultant.com
E. R. Babayev, M. E. Movsumzade
Transformation of oil during microbiological degradation in ground
Academican A. M. Quliyev Institute of Chemistry of Additives NASA 24, Beyuksorskoe Shosse, Baku, 370000, Russia; Ph.: (99412)4938058, e-mail: elbeibabaev@yahoo.de, samed@consultant.com
Изучены особенности изменения состава нефтепродуктов, загрязняющих почвы территории месторождения Биби-Эйбат, расположенного вблизи г.Баку после их биодеструкции в почве. Выявлены закономерности трансформации нефти под действием микроорганизмов-деструкторов. Изучена способность культур к деструкции нефтепродуктов различной степени конденсации: нефти, ее гексановых, бензольных и спир-то-бензольных фракций. В лабораторных условиях исследовано окисление нефтепродуктов биопрепаратом, содержащим углеводородокис-ляющие микроорганизмы, в сочетании с веществами, обогащающими почву питательными веществами и обеспечивающими достаточный уровень ее аэрации.
Ключевые слова: биопрепараты; биоремедиа-ция; деструкция; нефтепродукты.
Features of change of structure of the mineral oil, polluting ground of territory of Bibi-Abat deposit, located near Baku, after them biodestruction in ground are investigated. Revealing laws of transformation of oil under influence of microorganisms-destructors is carried out. Ability of cultures to destruction of mineral oil of a various degree of condensation is investigated: oil, its hexane, benzene and alcohol-benzene fractions. In laboratory conditions oxidation of mineral oil by a biological product containing hydrocarbon oxidation microorganisms, in a combination to the substances, enriching ground by nutrients and providing a sufficient level of its aeration, is researched.
Key words: biological products; destruction; mineral oil.
Процессы добычи нефти и производства нефтепродуктов, их транспорт и хранение неизбежно связаны со значительными потерями. Попадая в окружающую среду, углеводороды нефти оказывают угнетающее действие на экологические системы: губят живые организмы и существенно изменяют условии их обитания. Процессы восстановления природных систем после нефтяного загрязнения продолжительны по времени. Существующие механические, термические и физико-химические методы очистки почв от нефтяных загрязнений дороги и эффективны лишь при определенном уровне загрязнения. Среди мер, предпринимаемых с целью охраны окружающей среды от указанного типа загрязнений, наиболее перспективным и экологически безопасным является ме-
Дата поступления 05.06.09
тод биоремедиации почв и акваторий, основанный на способности некоторых микроорганизмов к деградации нефти и нефтепродуктов 1-4. Микробиологическая рекультивация загрязненных нефтью почв основывается на двух подходах: активизации аборигенной микрофлоры почвы или интродукции адаптированных к загрязнителю и условиям внешней среды штаммов нефтеокисляющих микроорганизмов.
Характерной особенностью нефти как совокупности различных углеводородов является то, что попадая в почву или водную среду, она разрушается, поскольку составляющие ее углеводороды подвержены вымыванию, выветриванию, частичному химическому окислению и микробному разрушению.
Целью данной работы являлось изучение особенностей изменения химического состава углеводородов нефти под влиянием протекаю-
щих в почве процессов химического и биологического окисления.
Материалы и методы
Почвы. В работе использовали образцы почв, отобранные из загрязненных территорий, находящихся в непосредственной близости от скважин месторождения Биби-Эйбат, а также не загрязненных почв того же месторождения (контроль). Образцы почв отбирались стерильным ножом в стерильную стеклянную посуду. Затем на очищенном спиртом стекле их тщательно перемешивали стерильным фарфоровым шпателем, распределяли тонким слоем и доводили до воздушно-сухого состояния в чистом сухом помещении, не содержащем в воздухе пыли и газов (NH3, HCl).
Величину, характеризующую содержание влаги в почве, определяли по методике 5. Содержание нефтепродуктов в почвах определяли весовым методом после экстракции углеводородов из навески почвы горячим гексаном в аппарате Сокслета 6.
Микробиологические исследования были проведены немедленно после отбора образцов почв.
Фитотоксичность почв определяли по прорастанию семян и длины проростков пшеницы.
Анализы нефтепродуктов, загрязняющих исследуемые образцы почв.
Осаждение асфальтенов из экстрактов исходной нефти проводили 40-кратным по объему количеством петролейного эфира, с температурой кипения 40—70 оС. Методом жидко-стно-адсорбционной хроматографии на колонке с двойным сорбентом (внизу окись алюминия, вверху силикагель 40/100 мкм («Chemapol» Чехия) деасфальтенизаты разделяли на фракции, элюированные гексаном, бензолом и смесью бензол-этанол (1:1).
Для исследования продуктов деградации нефти и ее некоторых фракций, полученных в процессе соответствующих экспериментов в жидкой среде и почве, использовали методы ИК- и хромато-масс-спектроскопии.
Структурно-групповой состав исследуемых фракций определен методом Фурье-спектроскопии на инфракрасном спектрометре Varian 3600 в диапазоне 4000—400 см -1.
Газохроматографические и масс-спектро-метрические анализы проводили на приборе Thermo Quest MD-800 GC 8000 Series GC/MS с помощью автосемплера (autosample Fisión
AS 800). 1 мл пробы вводили в инжектор (Splitless-mode) при 280 оС. Применялась газохроматографическая капиллярная колонка OD-BPX5 0.25) фирмы SGEB, длиной 30 м -с внутренним диаметром 0.25 мм. Газ-носитель — гелий. Температуру поднимали от 80 оС до 300 оС со скоростью 4 оС в минуту.
Численность гетеротрофных микроорганизмов в почве определяли методом 10-крат-
„ 7
ных разведений почвенной суспензии 7 с последующим высевом на поверхность агаризо-ванных сред: мясо-пептонный агар (МПА) для бактерий и сусло-агар (СА) для грибов и дрожжей, при температуре 28—32 оС.
Колонии бактерий подсчитывали через 3 дня, а грибов и дрожжевых — через 5 дней.
Для определения количества углеводоро-докисляющих бактерий была использована минеральная среда состава, (г/л): KH2PO4 — 0.5; K2HPO4 — 0.5; MgSO4 -7H2O — 0.3; FeCl3 — 0.01; NaCl — 0.01; CaCl2 — 0.1; NaNO3 —2.5; агар-агар —20, вода дистиллированная — 1 л, рН 7.
В качестве единственного источника углерода в среду вносили 1 г нефти, выделенной из загрязненных почв или ее фракции: гексано-вую (содержит парафино-нафтеновые и ароматические углеводороды); бензольную (содержит полициклические ароматические углево-дородв, бензольные смолы) и этанол-бензольную (содержит нафтеновые кислоты, этанол-бензольные смолы).
Результаты и их обсуждение
Из почв, загрязненных нефтепродуктами, было выделено 12 штаммов микроорганизмов, способных использовать выделенную из этих же почв нефть и ее некоторые компоненты (гекса-новую, бензольную и спирто-бензольную фракции). Отобранные штаммы, а также 2 тестированные культуры, ранее выделенные из почв того же месторождения (из коллекции ИХП НАНА), культивировали в жидкой минеральной питательной среде с перечисленными нефтепродуктами (1 г) на качалке (150 об/ мин) при температуре 32 оС в течение 7 сут. Степень деструкции нефтепродуктов определяли весовым методом, биомассу предварительно отмывали гексаном (табл. 1). Как видно из табл. 1, исследованные культуры микроорганизмов различаются по активности потребления компонентов нефти и нефтепродуктов. Характер потребления фракций нефти различался у разных штаммов как количественно,
Таблица 2
Изучение углеводородокисляющих способностей микробных ассоциаций в жидких средах
Таблица 1
Изучение степени деструкции нефти и нефтепродуктов микроорганизмами, выделенными из почв месторождения Биби-Эйбат
Культура Нефть (из почв) Гексановая фракция Бензольная фракция
Степень деструкции,% Вес сухой биомассы мг Степень деструкции,% Вес сухой биомассы мг Степень деструкции,% Вес сухой биомассы мг
1. Mycobacterium lacticolum 30 100 28 70 10 -
2. Pseudomonas fluorecrnses 65 210 51 170 38 170
3. М - 1 13 50 10 52 - -
4. М - 2 36 134 30 160 15 40
5. М - 3 46 190 25 135 10 -
6. М - 4 52 250 26 100 16 50
7. М - 5 60 350 56 230 6.2 40
8. М - 6 10 - - - -
9. М - 7 7 - - - -
10. М - 8 50 230 22.8 76 1.7 -
11. М - 9 11 50 - - -
12. М - 10 46.5 208 32 100 14 76
13. М - 11 30.5 160 28 60 0.5 -
14. М - 12 40 204 30 72 13.6 70
№ Ассоциации штаммов Степень деструкции нефти выделенной из почв, % Количество сухой биомассы, мг
1 М1 + М2 27 130
2 М5 + М8 33 160
3 М3 + М8 40 350
4 М8 + М10 50 400
5 М10 + М12 35 380
6 М3 + М5 55 400
7 М3 + М5 + М8 65 430
8 М5 + М8 + М10 50 400
9 М8 + М10 + М12 50 420
10 М10 + М12 + М13 48 400
11 М12 + М3 + М5 50 480
12 М3 + М5 + М8 + М10 80 510
13 М5 + М8 + М10 + М 12 45 400
14 М8 + М10 + М12 + М3 60 450
15 М10 + М12 + М3 + М5 65 400
16 М12 + М3 + М5 + М8 65 500
так и качественно. Степень деструкции выделенной из загрязненных почв нефти достигала 50—60 % у культур М8; М4 и М5; гексановой фракции 51—56 % у культур Pseudomonas fluorecenses и М5 соответственно.
Известно, что нефть и нефтепродукты являются сложными многокомпонентными загрязнителями окружающей среды, сложный химический состав нефти ставит перед необходимостью использования ассоциациий из двух и более штаммов-деструкторов, каждый из которых деградирует определенные углеводороды нефти. Создание эффективной ассоциации
предполагает не только наличие активных штаммов-деструкторов, но и изучение вопросов их совместимости в составе препарата, а также нахождения наиболее рациональной питательной среды и условий культивирования для них.
Были проверены ассоциации, состоящие из разного числа штаммов (табл. 2).
Как следует из результатов исследований из ассоциаций, состоящих из 2-х штаммов, наиболее эффективными деструкторами нефти оказались комбинации № 4 (М8 + М10) — 50% и №6 (М3 + М5) - 55%.
Добавление к парам штаммов дополнительного штамма несколько повысило деструктивную активность ассоциации, например №7 (на 10%). В 4-х компонентных ассоциациях очень эффективной оказалась смесь №12 (80%-ная деструкция).
Во всех случаях процент разложения нефти ассоциациями был выше, чем индивидуальными штаммами, входящими в ассоциации, кроме варианта №1 (М1 + М2). Понижение степени деструкции (27%) по сравнении со значением для штамма №2 (65%) свидетельствует о возможном антогонизме между этими культурами.
Полученные данные подтверждают мнение исследователей, что при создании искусственных ассоциаций нефтедеструкторов необходимо учитывать как экологические, так и трофические (пищевые) особенности каждого штамма. Как правило, в случае живых организмов свойства целого (ассоциации) не являются простым сложением отдельных единиц (каждого штамма).
Для наблюдения за процессом биодеградации в лабораторных условиях в ходе работ по созданию биологического препарата для очистки нефтезагряненных почв территории месторождения Биби-Эйбат были периодически отобраны и изучены образцы почв с различной степенью загрязненности, а также смеси активных штаммов микроорганизмов, выделенных из этих почв. Смеси активных штаммов исследованы отдельно и совместно с другими компонентами, обогащающими почву питательными веществами (навоз, минеральные соли в составе питательных сред в качестве органических и неорганических удобрений) и создающими в почве аэрацию и доступ воздуха к микроорганизмам, а также способных их адсорбировать (злаковые отруби, древесные опилки, солома).
Объектом исследований были почвы месторождения Биби-Эйбат с различным содержанием нефти (8.3% и 6.1%).
В эксперименте I сравнивали углеводоро-докислительную активность ассоциаций отобранных микроорганизмов (М3 + М5 + М12) и (М3 + М5 + М8 + М10) в почве с содержанием нефти 8.3% в присутствии некоторых поч-воулучшающих добавок при относительно низкой температуре 6—9 оС.
В эксперименте II использовали почву с загрязнением 6.1% (табл. 3).
В ходе эксперимента (60 дней) контролировали численность углеводородокисляющих микроорганизмов, фитотоксичность почв,
а также содержание и групповой состав выделенных из почв нефтепродуктов. Убыль нефтепродуктов в течение экспериментов составила для эксперимента I — 12.7%, а для эксперимента II — 23%.
Из результатов экспериментов также следует, что в первом эксперименте всхожесть семян пшеницы на исследуемых нефтезагрязнен-ных почвах недостаточно высока. Очевидно, имеет место влияние токсичности нефтепродуктов, а также относительно низкая температура окружающей среды (6—10 оС). В условиях второго эксперимента наблюдается лучшая всхожесть семян пшеницы и более высокая степень утилизации нефтепродуктов (23% в течение 60 дней). Следует отметить, что относительно хорошие результаты получены при инокулировании ассоциаций бактерий вместе с культуральной жидкостью, в которой имеются продукты их метаболизма. На всхожесть семян пшеницы положительно влияет одновременное внесение в почву навоза и злаковых отрубей. Из табл. 3. также следует, что при инокулировании ассоциаций микроорганизмов, количество углеводородокисляющих микроорганизмов через 60 суток находится почти на одном уровне (108). Из литературных источников известно, что численность вносимых микроорганизмов должна быть не ниже 3-5-106 кл/г почвы для обеспечения достаточного воспроизводства микробной популяции и сохранения естественного микроценоза, характерного для данного региона.
Следует отметить, что при деструкции нефти, выделенной из загрязненных почв происходило не просто снижение остаточного ее содержания, но и изменение ее фракционного состава. В табл. 4 представлены данные фракционного состава нефти после ее деструкции. В качестве контроля взята исходная нефть, выделенная из почв и используемая в качестве субстрата при культивировании. Также иссле дованы ее компоненты: гексановые, бензольные и спирто-бензольные фракции. Кроме того, изучен состав нефти после ее биодеградации в жидкой среде (колбе) и в почве (вегетативный опыт) табл. 4.
Методом Фурье ИК-спектроскопии изучен углеводородный состав нефтей месторождения Биби-Эйбат: нативной (1), выделенной из нефтезагрязненных почв (2), подверженной биодеградации в жидкой среде (3) и под влиянием вегетативного эксперимента (4).
Вычислены спектральные коэффициенты, характеризующие групповой состав компонентов нефти.
со
(О со
и у
о с
:: I-
о о
X
у
О *
о
I-
о
I-
>5
X
Л
и о И
Ф ^
и и
I-
я
I-
м ц
>
«
ш и
Кол-во углеводородокис-ляющих культур в 1 г почвы через: й о ш СО I д СП о Ю _ СО о со 8 Ю СО о со СО о со 0^ 8 СО о СО о ю СО о СО о ю
й о ш СО I д СО о Ю 7. СО о -.г 6. ^ Ъ СО о со СО о см 6. СО о о СО о со СО о см СО о ю СО о
й е I ч: 7 О) о см 3 СО о О) о см О) о ю СО о 6. О) о см О) о см О) о О) о оо О) о
Загрязнение - 6.1 %, Топыта - 17 оС Степень деструкции 17.7 %. 0 1 + 8 + ю + 3 о- х см рис, ■= 3 х ь о 5 сом оре о. о Г-- ю ^ О см 31 со со ^ Ю сп т- 00 со ю см оо СО СП оо оо со IV- со см оо? гч, " Ю IV- с^
х и 031 о 5 ц О 2 оре Кос р п СП ° ° СП ° ° СП СП СО СП 2 СО СП 2 оо ° ° ^ ^^ ^^ 00 ^ ^ 00 СП СП 00 ^ ^
Загрязнение - 8.3 %, Топьгта - 6-9 оС, степень деструкции 12.7 % Смесь бактерий о + 8 + ю + 3 & ^ = = ё ° 3 х ° 11 ^ 8. Г-- СО Г-- со со оо со со 3 со со см ^ ^ Ю СП СО СМ Г-- 5 со 00 ^^ »2 £ - - со юк см см см о^
х и 2 3 х в- ся С О 2 оре Кос р п СП ° ° Ю Ю СО СП ° СО Г-- оо ° <° ^^ ^^ ю оо со оо оо ^ IV- °
2 + ю + 3 2 ° 8 2 - § ° Ь Э £ ° й 2 ^ 8. СО ^ СМ - 3 - ю -е- 041 СМ Ю СМ со ^ см ^ 1- со ¡!3« Ю со СО СМ ""¡Г ■ ю со со СМ Ч- ю С^ СМ 1см
-о рх пин ° э | ? 8 ё ю оо 2 со со СО Ю СО Ю СМ Ю Г-- СО со оо Ю СП ю 2 со оо
Продолжительность опытов, сут г— О ^ 1- со Г-- Т- со г— О ^ 1- со г— О ^ 1- со г— О ^ 1- со г— О ^ 1- со г— О ^ 1- со г— О ^ 1- со О ^ 1- со О ^ 1- со
Варианты опытов -н -ен но га А к 'г раь 1_ т ^ « 7 о зор ш £ н -й- к <и и X х £ в * <2 к — ¡^ го го ™ зч ео тп -& к еа X X + ^ ау г* 8- 1 с 8 « 2 ° ■й о. О ^ ГС ъ £ £ р N ^ (В + о ш 1 ь ^ £ тот .0 ^ -0 с I ^ § ^ го + р + а ру мут О .0 лл оу о ^ о с: ш и ь лки сил ! г Зт ^^^ к и ьб су ер ? ' з ьо св еа мн " + X. с с ^ со к . ь ас у = + Зр
2 | - см со С!Э 0^ с^ о
Характеристика нефтепродуктов до и после микробного окисления
Фракции, %
Объект исследования гексановая бензольная Спирто-бензольная
1 Нефть (нативная) 32 п20о 1.4820 14 п20о 1.5080 10
2 Нефть (выделенная из почв) 26 п20о 1.4876 15,5 п20о 1.5076 10
3 Нефть (после биодеградации в колбе) 24.7 п20о 1.4887 11.4 12
4 Нефть (после биодеградации в почве) 25 п20о 1.4965 12 11.7
В таблицы 5-8 сведены данные по положению полос поглощения (и см-1) и интегральным интенсивностям (Б) ИК-спектров исследованных образцов нефти.
Спектральные коэффициенты (табл. 8), характеризующие химическую структуру соединений нефти, определяли как отношение интегральных интенсивностей соответствующих полос поглощения: алифатических (720-723, 1377-1383 и 1457-1463 см-1) и ароматических структур (1608-1618 см-1), карбонильных групп в кислотах и эфирах (1700-1710, 1730-1740 см-1), фрагментов, содержащих С = С, С = N С - N = О и ЫИ-связи (1637-1640 см-1); суль-фоксидных (1024-1038 см-1), конденсированных полиметиленовых (965-974 см-1) и метиль-ных групп в боковых цепях (743-753 см-1).
Использовали следующие коэффициенты
С1 = Б745/ §1460 ; §2 = 8973 / §1460;
С3 = Б 1030 / Б 1460 ; С4 = §1380 / §1460 (раз-ветвленности); С5 = §^00 / §720 ароматичности;
С6 = §1640/ §1460; С7 = §1710 / §1460; С8 = 81740/ §1460 окисленности; С9 = §1640/ §720;
С10 = §720 + §1386 / §1600 (алифатичности) и С 11 = §1600 / §1460 (осерненности).
Интегральное поглощение углеводородов в области =3000 см-1 позволяет судить об особенностях изменения химического состава загрязняющей почву нефти под влиянием микробиологического окисления. Увеличение поглощения в области 1650-1800 см-1 свиде-
тельствует об увеличении степени окисляемости нефтепродуктов микроорганизмами (содержание С=О структур). Поглощение в области 720, 1380 см-1 свидетельствует об изменении алифатичности (т. к. увеличение разветвленности свидетельствует о наличии процессов биодеградации, то, соответственно, уменьшается доля парафиновых структур). Информативна область 1800-1600 см-1, где определяются колебания С=С, С=О, позволяющие идентифицировать наличие непредельных и карбонилсодержа-щих соединений (альдегиды, кетоны и кислоты). Это также свидетельствует о протекающих процессах биологического окисления исследуемых нефтепродуктов.
Из приведенных спектральных данных следует, что микробиологические процессы способствуют ароматизации и депарафиниза-ции компонентов исследованной нефти, и при этом также увеличивается степень ее окислен-ности за счет увеличения содержания карбо-нилсодержащих соединений. Следует отметить, что в спектрах наблюдаются также полосы поглощения, ответственные за образование соединений с непредельной связью и азотсодержащих соединений.
Можно предположить, что исходная нефть переходит в качественно новый тип, характеризующий более глубокую стадию деградации нефти.
Результаты ИК-спектроскопического исследования образцов нефти месторождения Биби-Эйбат (гексановая фракция)
Образцы Объект Положение полос поглощения (см"1) и данные интегральной активности (Э)
400-700 700-900 900-1100 1100-1300 1300-1500 1500-1700 1700-1900 1900-2800 2800-3000 3000-3600
4 Нефть 416(0.001) 474(0.441) 620(1.514) 699(0.163) 723(0.255) 743(0.201) 763(0.043) 812(0.285) 847(0.016) 871(0.065) 891(0.004) 918(0.020) 972(0.371) 1034(0.310) 1155(0.155) 1168(0.067) 1270(0.031) 1308(0.094) 1383(5.788) 1460(10.386) 1506(0.078) 1547(0.022) 1560(0.019) 1616(2.758) 1637(10.) 1734(0.036) 1710(0.015) 2042(0.590) 2669(1.830) 2725(0.101) 2855(0.090) 2924(6.843) 3427(15.249) 3467(0.0086) 3524 (перегиб)
16 Нефть из почвы 418(0.011) 474(0.025) 616(1.115) 669(0.67) 702(0.030) 723(0.102) 744(0.095) 763(0.037) 814(0.227) 875(0.115) 890(0.012) 974(0.922) 1024(0.015) 1083(0.010) 1161 (0.003) 1243(2.388) 1305(0.013) 1377(3.471) 1463(2.680) 1540(0.028) 1558(0.015) 1618(0.052) 1636(0.085) 1701 ().026) 1739(0.182) 2041 (0.237) 2669(0.342) 2725(0.051) 2854(9.785) 2924(6.843) 3414(4.047) 3474(0.108) 3120(2.024)
25 Нефть из почвы (экс. в колбе) 428(0.030) 479(0.069) 619(1.134) 699(0.182) 722(0.725) 745(0.062) 814(0.192) 876(0.054) 973(0.338) 1034(0.139) 1075(0.094) 1122(0.081) 1155(0.045) 1207(0.008) 1272(0.386) 1304(0.058) 1377(3.471) 1461(8.266) 1547(0.033) 1616(2.031) 1637(0.508) 1707(0.001) 1734(0.033) 2035(0.305) 2668(0.056) 2724(0.003) 2854(9.785) 2924(2.027) 3427(7.151) 3466(2.240)
311 Нефть из почвы (вегет. Экспр.) 419(0.282) 474(0.012) 617(0.381) 653(0.261) 668(0.396) 721(0.725) 745(0.020) 814(0.102) 879(0.083) 973(0.451) 1033(0.228) 1125(0.321) 1208(0.005) 1270(0.386) 1304(0.240) 1317(0.147) 1383(3.833) 1457(6.739) 1419(0.109) 1506(0.218) 1521(0.148) 1540(0.319) 1558(0.344) 1616(1635,1653) 1700(0.285) 1716(0.191) 1670-1870 2668(0.038) 2723(0.020) 2853(16.308) 2924(11.437) 2952(16.158) 3455(0.004) (0.012)
Таблица 6
Результаты ИК-спектроскопического исследования образцов нефти месторождения Биби-Эйбат (бензольные)
Образцы Объект Положение полос поглощения (см"1) и данные интегральной активности (Э)
400-700 700-900 900-1100 1100-1300 1300-1500 1500-1700 1700-1900 1900-2800 2800-3000 3000-3600
4 Нефть 420(0.001) 474(0.002) 617(0.962) 698 (перегиб) 722(0.467) 745(20.226) 813(25.092) 869(22.305) 973(13.410) 1032(26.514) 1122(0.302) 1167(0.100) 1313(0.025) 1377 (97.029) 1458 (208.972) 1540(0.327) 1610 (74.682) 1637 (перегиб) 1730(1.276) - 2853 (395.462) 2923 (56.419) 3419 (109.060) 3544 (0.958)
16 Нефть из почвы 418(0.061) 477(3.709) 616(12.779) 659(0.002) 722(0.822) 746(11.104) 813(10.991) 876(11.792) 974(14.324) 1034(29.876) 1165(8.357) 1297(1.152) 1377 (81.796) 1458 (159.724) 1558(0.160) 1608(51.300) 1637 (перегиб) 1709(1.274) 2034(0.700) 2669 (77.017) 2727(9.068) 2853 (395.014) 2924 (22.164) 3412 (133.624)
25 Нефть из почвы (экс. в колбе) 419(0.018) 477(0.219) 613(1.206) 699(0.801) 722(1.064) 753(0.305) 815(0.541) 888(0.385) 974(0.932) 1033(1.026) 1169(0.601) 1302(1.900) 1377(8.030) 1462 (18.427) 1616(5.030) 1637 (перегиб) 1709(0.477) 2035(0.468) 2668(2.641) 2725(1.136) 2853 (41.157) 2923 (22.164) 3419(0.20)
311 Нефть из почвы (вегет. Экспр.) 419(0.271) 476(0.001) 613(0.001) 653(0.273) 668(0.419) 721(0.396) 745(0.120) 813(0.269) 875(0.195) 973(0.307) 1033(0.165) 1318(0.162) 1383(3.026) 1457(6.753) В области 1500-1900 наблюдается мелкая узкая полоса (слабо) 2668(0.867) 2725(0.090) 2853 (18.727) 2923 (14.329) 3446 (Данных интегриров ания нет)
Таблица 7
Результаты ИК-спектроскопического исследования образцов нефти месторождения Биби-Эйбат (спирто-бензольные фракции)
№ Объект Положение полос поглощения (см-1) и результаты интегрирования (S)
400-700 700-900 900-1200 1200-1500 1500-1700 1700-2000 2000-3000 3000-4000
12 Нефть 418(0.263) 457(0.094) 472(0.078) 617(0.518) 608(0.457) 678(0.022) 720(0.209) 749(0.001) 813(0.120) 875(0.184) 1017(4.165) 1271(4.350) 1339(0.126) 1384(0.049) 1457(1.516) 1506(0.254) 1521(0.191) 1558(0.459) 1540(0.391) 1616(1.140) 1635(0.195) 1653(0.112) 1699(0.499) 2669(10.080 ) 2728(0.210) 2853(11.824) 2923(6.629) 3419(6.682)
24 Нефть из почвы 418(0.122) 507(0.163) 618(1.558) 668(0.001) 675(0.029) 721(0.234) 755(0.018) 812(0.001) 876(0.019) 1038(0.001) 1121(0.140) 1159(0.001) 1287(0.150) 1383(1.931) 1457(2.669) 1506(0.073) 1521(0.063) 1540(0.174) 1558(0.200) 1609(0.544) 1616(0.009) 1653(0.094) 1700(11.266 ) 1771(0.044) 2852(11.266) 2923(6.682) 3419(16.60 8)
26 Нефть из почвы (эксперимент в колбе) 481(0.299) 615(1.805) 656(0.002) 723(0.699) 763(0.700) 786(0.187) 875(0.081) 1031(4.053) 1123(1.165) 1170(1.596) 1249(1.979) 1383(2.512) 1400(0.004) 1458(3.643) 1508(0.041) 1554(0.178) 1618(3.650) 1637(0,053) 1707(0.609) 1734(0.197) 2852(9.350) 2924(3.605) 3433
36 Нефть из почвы (вегетатив, эксперимент) 419(0.299) 472(0.138) 653(0.296) 668(0.463) 721(0.761) 745(1.029) 813(0.835) 875(0.795) 965(0.964) 1032(1.021) 1073(0.604) 1123(0.757) 1164(0.220) 1288(0.101) 1376(4.801) 1457(15.048) 1506(0.191) 1576(0.428) 1607(1.254) 1635(0.109) 1700(1.094) 1733(0.140) 2669(1.078) 2727(0.529) 2852(35.549) 2923(21110) 3411(0.080)
Таблица 8
Характеристика компонентов нефти месторождения Биби-Эйбат методом Фурье ИК- спектроскопии до и после проведения экспериментов по биодеградации (микробному
окислению)
№ Объект С1 С2 С3 С4 С5 Со С7 С8 С9 С10 С11
S745/ S146Q S973/ S1460 S1030/S1460 S1380/S1460 S1600/S720 S1640/S1460 S1740/S1460 S1030/S1460 S1640/S720 S720/S1380 S1600/S1460
Гексановая фракция
1. Нефть до опыты 0.08 0.013 0.006 0.56 12.00 0.5 0.0125 0.033 17.1 6.86 0.35
2. Нефть из почвы 0.14 0.018 0.060 0.46 10.57 0.74 0.06 0.15 12.40 3.27 0.17
3. Нефть из почвы (после биол. 0.12 0.040 0.024 0.48 7.79 0.52 0.08 0.08 9.93 2.10 0.41
4. эксп. в колбе) Нефть из почвы (после вегет. зксп. ) 0.099 0.62 0.007 0.58 8.00 0.33 0.63 0.65 10.60 2.72 0.25
Бензольная фракция
1. Нефть до опыты 0.057 0.048 0.08 0.39 5.0 0.16 0.07 0.08 2.40 1.05 0.33
2. Нефть из почвы 0.069 0.090 0.019 0.51 6.80 0.375 0.53 0.34 2.86 0.79 0.32
3. Нефть из почвы (после биол. 0.15 0.10 0.17 0.42 4.7 0.45 0.58 0.23 3.5 1.03 0.27
4. эксп. в колбе) Нефть из почвы (после вегет. эсп. ) 0.11 0.028 0.11 0.35 7.2 0.68 0.75 0.1 12.8 1.06 0.38
Спиртобензольная фракция
1. Нефть до опыты 0.078 0.87 0.46 42.17 0.88 1.35 0.22 28.0 0.37 1.32
2. Нефть из почвы 0.12 0.64 0.40 30.0 0.48 1.3 0.24 16.0 0.89 0.90
3. Нефть из почвы (после биол. 0.14 0.075 0.50 27.2 0.27 1.3 0.13 14.70 0.65 0.625
4. эксп. в колбе) Нефть из почвы (псспе вегет. эксп. ) 0.17 0.03 0.05 0.33 12.86 0.28 0.80 0.32 4.86 0.52 0.75
Литература
1. Вельков В. В. // Биотехнология.— 2001.— № 2.- С. 70.
2. Panicker G., Aislabie J., Saul D., Dei A. K // Polar Biology.- 2002.- V. 25, №1.- P. 5.
3. Звягинцева И. С., Суровцева И. Г., Поглазова М. Н., Ивойлов В. С., Белов С. С.// Прикладная биохимия и микробиология.- 2001.- Т. 70, № 3.- С. 321.
4. Белоусова Н. И., Барышникова А. М., Илкид-ченко А. Н. // Прикладная биохимия и микробиология.- 2002.- Т. 38, № 5.- С. 513.
5. Практикум по почвоведению. / Под ред. И. С. Кауричева.- М., 1980.- 272 с.
6. Современные методы исследования нефтей / Отв. ред. А. И. Богомолов.- М.: Недра, 1984.431 с.
7. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под ред. Д. Г. Звягинцева.- М.: Изд-во МГУ, 1991.- 231 с.
