CC BY
43
ПРЕНАТАЛЬНАЯ КОРРЕКЦИЯ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА ТЕЛЯТ
Н.В. Самбуров
Аннотация. Изучена возможность проведения коррекции иммунного статуса коров в последний период стельности иммуномодулятором тимогеном с целью получения более резистентного приплода. Установлены возрастные изменения показателей гуморального и клеточного иммунитета у подопытных телят.
Ключевые слова: коррекция, резистентность, приплод, иммуномодулятор, тимоген, иммуноглобулины, Т-и В-лимфоциты, гуморальный и клеточный иммунитет.
В период новорожденности организм телят имеет физиологически незрелую иммунную систему, вследствие отсутствия антигенной стимуляции, обусловленной особенностями строения плаценты матерей [1.-С. 51; 2-С. 36]. Однако, некоторые механизмы естественной резистентности такие, как системы комплимента и пропердина, фагоцитоз, бактерицидная (БАСК) и лизоцимная (ЛАСК) активность сыворотки крови формируются в процессе внутриутробного развития [З.-С. 40]. Формирование колострального иммунитета полностью зависит от поступления в кровеносную систему новорожденных иммуноглобулинов с материнским молозивом [4.-С. 3; 5.-С. 404].
Состояние незащищенности организма телят в первые дни после рождения против различных патогенов требует разработки методов иммунокоррекции, способствующих эффективному функционированию комплекса «мать -плод - новорожденный». Ветеринарная фармакология располагает значительным арсеналом средств, обладающих иммунотропным действием. Препараты этого ряда активируют клеточный и гуморальный иммунитет, ослабляют действие стресс-факторов, усиливают обмен веществ. Одним из таких препаратов является тимоген синтетический пептид тимуса глюта-милтриптофан (С1бН20^О5), положительными свойствами которого кроме выше названных, являются ускорение процесса дифференциров-ки лимфоидных клеток, индукция экспрессии антигенов на лимфоцитах, нормализация количества и соотношения Т-хелперов/Т-супрес-соров. Эффективно применение иммуномодуляторов стельным коровам, для которых харак-
терно иммунодефицитное состояние в связи с супрессивным влиянием беременности на иммунный статус организма [6.-С. 100; 7.-С. 50].
Цель работы - изучение влияния иммуномодулятора тимогена на иммунологические показатели организма у стельных коров и получаемого от них приплода.
Исследования проводили на 20 стельных черно-пестрых голштинских коровах класса элита-рекор д/элита со средней продуктивностью по последней законченной лактации 5554 кг молока и содержанием жира 3,69%, разделенных по принципу аналогов на опытную и контрольную группы по 10 голов в каждой. Животным опытной группы иммуномодулятор вводили за 60...45 суток до отела внутримышечно три дня подряд с интервалом в 24 часа в дозе 500 мкг на животное, а коровам контрольной группы инъецировали равное количество изотонического раствора хлорида натрия. Кровь у коров отбирали до введения препаратов и за 5-3 суток до отела, у телят - в возрасте 1, 3, 15 и 25 суток. Оценивали морфологию крови, показатели гуморального и клеточного иммунитета общепринятыми в клинической практике методами, а также профилактическую эффективность тимогена в отношении заболеваемости новорожденных телят.
Результаты гематологических исследований показали, что фоновое количество эритроцитов в крови коров опытной группы составляло 5,11±0,19*1012/л, содержание в них гемоглобина - 105,93±2,45 г/л, лейкоцитов - 5,60± 0,22 * 109/л. У контрольных животных соответственно 5,06±0,15*1012/л, 105,76±2,41г/л и 5,58±0,28* *109/л. В течение опыта (за 5-7 суток
Информация об авторе
Самбуров Николай Васильевич, доктор биологических наук, профессор кафедры кормопроизводства и зоогигиены Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И. И. Иванова, E-mail: samburov [email protected], тел. (4712) 53-06-03.
до отела) число эритроцитов в крови опытных животных повысилось до 5,14±0,18*1012/л, содержание в них гемоглобина до 106,11±2,29 г/л, тогда как в контроле эти показатели оставались на том же уровне. Что касается лейкоцитов, то количество этих клеток в крови у коров опытной группы по сравнению с контролем было выше на 1,44% (5,64±0,20*109/л против 5,56±0,25*109/л).
У подопытных коров по сравнению с контрольными перед отелом наблюдали увеличение БАСК на 32,5%, ЛАСК - на 4,43% (Р0,05). Количественное содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов О- и М-изотипов с приближением отела у всех животных понижалось, что обусловлено селективным переходом В ОСНОВНОМ 1§£т1 из сыворотки крови в образующееся молозиво. Уровень 1^ у обработанных животных в этот период составлял 26,56±0,21 г/л, контрольной-25,60±0,5 5 г/л, что ниже фоновых значений соответственно на 2,26 г/л и 3,06 г/л (табица 1).
Клеточные факторы защиты организма коров до начала опыта отличались незначительно. В течение опыта абсолютное число лимфоцитов у животных опытной группы повысилось с 3,4±0,28 до 3,57±0,18*109/л, в контроле - с 3,30±0,81 до 3,43±0,19*109/л. Количество Т-лимфоцитов у коров, получавших тимоген, по сравнению с контрольной группой было выше на 9,5%. Функциональная активность В-лимфоцитов за 3-5 суток до отела более значительно возрастала у животных опытной группы. Так, абсолютное число В-клеток повысилось с 0,55±0,04*109/л до 0,66±0,03*109/л, что в 1,7 раза выше чем у контрольных животных
(Р<0,001). Индекс Т/В у коров опытной группы после введения тимогена уменьшался с 3,04 до 2,80, а в контроле он увеличился до 4,45.
В течение опыта наблюдали снижение и лейко-Т-клеточного индекса (ЛТИ): на 0,30 у опытных животных и на 0,25 контрольной группы (рисунок 1).
Под влиянием иммуномодулягора более заметно изменялся лейко-В-клеточный индекс (ЛВИ). Если его фоновые значения были в пределах 10,38 (опытная группа) и 16,66 (контроль), то перед отелом у опытных коров ЛВИ понизился на 1,77 (с 10,38 до 8,11), а в контрольной группе - на 1,62 (с 16,66 до 15,04) (рисунок 2).
Период сразу после рождения телят, как указывалось выше, является наиболее критическим, так как до приема молозива в их крови нет иммунологически активных белков. Введение коровам в последний период стельности тимогена оказало положительное влияние на иммунологические показатели приплода в течение всего периода наблюдений. Анализ результатов исследований показал, что БАСК была выше с рождения до 25-суточного возраста и достоверно превышала показатели контрольной группы (таблица 1). Аналогичную картину имела и ЛАСК, хотя разница между показателями опытных и контрольных животных не всегда была достоверной. Уровень в сыворотке крови у телят опытной группы в возрасте
1, 3, 15, 25 суток превышал показатели контроля соответственно на 1,7; 5,7; 3,91 и 2,22 г/л (Р<0,01).
Таблица 1 - Оценка иммунологического статуса коров и полученного от них приплода
Показатели Коровы за 60...45 суток до отела Коровы за 5...3 суток до отела Телята в возрасте 1 суток Телята в возрасте 3 суток Телята в возрасте 15 суток Телята в возрасте 25 суток
БАСК, % 40.98±0.54 54.46±0.25* 34.08±0.51** 39.39±0.02** 46.84±1.11** 52.41±0.48**
40,94±0,51 41,07±0,42 28,950,49 31,01±0,48 39,21±0,86 46,19±0,88
ЛАСК, % 29.30±0.66 40.72±0.92* 0.75±0.01 1.24±0.02 2.55±0.02 2.96±0.03*
29,39±0,70 36,29±0,94 0,71±0,02 1,01±0,06 2,06±0,02 2,26±0,02
Иммуноглобулины, г/л:
1§С 28.82±0.27 26.56±0.21 24.93±0.42* 24.65±0.42** 22.67±0.39** 19.75±0.39**
28,66±0,19 25,60±0,55 23,23±0,38 18,95±0,36 18,76±0,35 17,53±0,41
1§М 3.17±0.14 3.01±0.27 3.84±0.11** 3.38±0.07^^ з.21±олз** 3.00±0.06**
2,82±0,48 2,69±0,31 2,82±0,18 2,59±0,20 2,29±0,13 2,07±0,12
Лимфоциты, 109/л 3.40±0.28 3.57±0.18 4.66±0.15* 4.10±0.14** 4.52±0.14^^ 5.23±0.16**
3,30±0,81 3,43±0,19 4,38±0,08 3,54±0,04 3,89±0,06 4,01±0,06
Т-лимфоциты, 109/л 1.67±0.08 1.85±0.10 2.58±0.07** 2.28±0.08** 2.48±0.09** 2.84±0.09**
0,59±0,11 1,69±0,08 1,94±0,04 1,73±0,04 1,87±0,04 2,04±0,05
В-лимфоциты, 109/л 0.55±0.04 0.66±0.03 0.73±0.02** 0.35±0.03** 0.66±0.03** 0.83±0.04г+гг+г
0,36±0,05 0,38±0,04 0,34±0,01 0,25±0,01 0,29±0,02 0,31±0,03
Индекс Т/В 3.04 1,64 2.80 4,45 3.53 5,71 6.51 6,92 3.76 6,45 3.42 6,58
Примечание. В числителе приведены показатели опытных животных, в знаменателе - контрольных. *Р<0,05; **Р<0,01.
□ опытная группа Пконтрольная группа
Рисунок 1 - Изменение ЛТИ у коров в течение опыта
опытная группа Пконтрольная группа
Рисунок 2 - Показатели ЛВИ у подопытных коров
Абсолютное количество лимфоцитов, Т-клеток у телят опытной группы по сравнению с контролем в суточном возрасте было выше соответственно на 6,4% и 32,09%, 3-суточном - 15,8% и 31,8%, 15-суточном - 16,2% и 32,6%, 25-суточном - 30,4% и 39,2% Причем следует отметить, что эти различия были статистически достоверны.
При подсчете абсолютного количества В-лимфоцитов в крови опытных и контрольных телят выявлена следующая динамика: в возрасте 1 суток разница в показателях составила 0,39*109/л, 3 суток - 0,10*109/л, 15 суток -0,37*109/л, 25 суток - 0,52*109/л.
Расчет лейко-Т-клеточного индекса показал, что у телят суточного возраста он был равен 3,37 (опыт) и 3,55 (контроль). Через 25 суток ЛТИ у животных опытной группы снизился до значения в 3,07, контрольной - до 3,3 (рис. 3).
Изменение ЛВИ в течение опытного периода представлено на рисунке 4. Фоновые его значения колебались в пределах от 10,38 до 16,66 соответственно у телят опытной и контрольной групп. К концу периода наблюдений отмечали снижение этого показателя у животных опытной группы на 1,77 в контроле на 1,62.
Повышение неспецифической резистентности организма телят опытной группы позволило им легче преодолеть первичный возрастной иммунодефицит, что сказалось на проявлении желудочно-кишечных болезней, сопровождающихся диарей-ным синдромом. Анализ заболеваемости (%), сохранности (%), начало болезни (сут), ее продолжительность (сут) показал, что у телят, полученных от коров, которым вводили иммуномодулятор, эти показатели соответствовали следующим значениям: 65,5%, 100%, 3 сутки, 2,5 суток, в контроле -80% 90%, 1,3 суток, 4,1 суток
Рисунок 4 - Показатели ЛВИ у подопытных телят
Выявление критических периодов в жизни новорожденных телят с высоким генетическим потенциалом продуктивности имеет большое практическое значение. Снижение концентрации иммуноглобулинов в крови телят обусловлено их катаболизмом. Известно, что период полураспада иммуноглобулинов, пассивно приобретенных с материнским молозивом, составляет для от 16 до 32 суток, для - 4 суток [8.-С. 492]. При снижении в крови уровня материнских иммуноглобулинов до минимальных значений наступает второй критический период. В наших исследованиях его регистрировали на 25 сутки жизни телят. Аналогичные данные приводят в своей работе и Ю.Н. Федо-
ров с соавт. (2007 г.), которые указывают на наличие иммунодефицита в 20-40-суточном возрасте. Активный же синтез собственных иммуноглобулинов в организме телят стабилизируется лишь к 2-месячному возрасту [9.-С. 110].
Полученные нами данные подтверждают сведения о том, что телята рождаются с достаточно зрелой в количественном отношении системой Т-клеток, которые, как известно, выполняют функцию надзора и регуляции иммунологического гомеостаза организма. Для Т-лимфоцитов после рождения характерна более высокая функциональная активность, возможно, за счет Т-супрессоров в связи с тем, что количество и активность В-клеток понижены, а
это свидетельство несовершенства кооперативных, регуляторных взаимоотношений между иммунокомпетентными клетками.
Таким образом, применение тимогена с целью фармакоррекции иммунного статуса коров в последний период стельности позволило получить приплод с более высокими показателями резистентности организма.
Список использованных источников
1 Кенигсберг, Я.Э. Влияние дибазола и ме-тилурацила на иммунитет / Я.Э. Кенигсберг // Научные труды ВАСХНИЛ.-М.: Агропромиз-дат, 1985.-С. 50-52.
2 Жучаев, К.В. Генетическая характеристика иммунореактивности и естественной резистентности сельскохозяйственных животных / К.В. Жучаев // С-х. биология,-1992,- №6.-С. 36-46.
3 Емельяненко, П. А. Иммунная система жвачных / П. А. Емельяненко // Проблема ветеринарной иммунологии.-М., 1985.-С. 40-46.
4 Федоров, Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят / Ю. Н. Федоров //Ветеринария.- 1996.-№11.-С. 3-6.
5 Watson, D.L. Immunological functions of the mammary gland and its secretion. Comparative review / D.L. Watson // Aust. J. Biol. Sci.- 1980.-V. 33,-P. 403-422.
6 Андреева, 11.Л. Общность действия иммуностимуляторов, адаптогенов, антистрессовых средств / Н. Л. Андреева // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Мат-лы 9-й межгос. межвуз. научи.-иракт. конф,-СПб., 1997.-С. 100-101.
7 Соколов, В.Д Иммуностимуляторы в ветеринарии / В.Д Соколов, НЛ Андреева, АВ. Соколов // Ветеринария-1992,- №7-8.- С. 49-50.
8 Husband, A.J. Absorption and endogenous production of immunoglobulins in calves / A.J. Husband, M.R. Brandon, A.K. Lascelles // Austr. J. Biol. Med. Sci.-1972.-V. 50.-P. 491-498.
9 Федоров, Ю.Н. Иммуноглобулиновые профили биологических жидкостей у коров-матерей и полученных от них телят / Ю.Н Федоров, Е.В. Борзенко, Т. А Чеботарева, О. А Верховский // С-х биология-2007.-№6.-С. 108-112.
