CC BY
55
I Преаналитический этап производства судебно-химической экспертизы (исследования) объектов биологического происхождения в судебно-медицинской практике
• Р. Р. Краснова, Н. А. Крупина, д.м.н., проф. В. А. Клевно
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: В 2014 году под редакцией профессора В. А. Клевно изданы правила изъятия объектов биологического происхождения для лабораторных исследований в бюро судебно-медицинской экспертизы: локальные нормативные правовые акты ГБУЗ МО Бюро СМЭ, где был подробно изложен порядок забора и направления биологических объектов для проведения судебно-химической экспертизы (исследования).
Ключевые слова: преаналитический этап, судебно-химическая экспертиза, объекты биологического происхождения
Preanalytical stage of forensic-chemistry examination (research) of biological objects in forensic practice
• R. R. Krasnova, N. A. Krupina, V. A. Klevno Abstract: Guidelines on specimen collection of postmortem samples for the forensic laboratory investigations: the local legal acts Bureau of forensic medicine of Moscow region were published under the editorship of Professor V. A. Klevno in 2014. The recommendation for specimen selection, sampling, storage of postmortem samples for forensic toxicology laboratories has been described in detail. Keywords: preanalytical stage, forensic laboratories, biological objects
ВВЕДЕНИЕ
В судебно-химическом отделе Бюро СМЭ Московской области разработана тара - картонная упаковка с гнёздами для шести пластиковых баночек с завинчивающимися крышками вместимостью 100 мл и четырёх стеклянных флаконов вместимостью 13 мл. При конструировании были учтены размерности проб для исследования с учётом применяемой схемы анализа и оснащённости современным оборудованием. Такие коробки удобны для упорядочения упаковки и транспортировки биологических объектов и сопроводительных документов к ним, упрощения и стандартизации описания объектов, направленных на судебно-химическое исследование, последующего хранения в архиве отдела и уничтожения бумажной и пластиковой тары кремацией по истечении срока хранения. Разработаны также самоклеющиеся этикетки и сти-кер с очевидностью вскрытия для опечатывания коробки.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучена литература и разработан изложенный в правилах порядок забора и направления биологических объектов для проведения судебно-химической экспертизы (исследования) в СХО ГБУЗ МО «Бюро СМЭ». При подозрении на отравление:
• этанолом направляют следующие объекты: кровь, мочу во флаконах, которые заполняют под пробку, при недостаточном объёме - направлять весь имеющийся объём; кровь берут шприцем из крупных вен конечностей или синусов твердой мозговой оболочки; при невозмож-
ности направить кровь и мочу берут мышечную ткань и внутриглазную жидкость;
• наркотическими средствами, психотропными и лекарственными веществами - направляют кровь, мочу, внутриглазную жидкость, желчь, печень, почку;
• кислотами и едкими щелочами - желудок с содержимым, стенки пищевода и участки кожи со следами действия яда; в направлении указывают вес всего содержимого желудка (без стенок желудка);
• летучими веществами, в т.ч. хлорорганическими веществами и техническими жидкостями - кровь, мочу, часть сальника, головного мозга, печени, почки;
• метиловым спиртом - кровь, мочу, часть печени, почки, головного мозга;
• фосфорорганическими соединениями - обязательно кровь для определения активности холинэстеразы;
• солями ртути - кровь, мочу, часть печени, почки, волосы, ногти;
• соединениями свинца, таллия, мышьяка (хроническое) - кровь, мочу, часть печени, почки, волосы, ногти;
• окисью углерода (смерть при пожарах, в гараже, в плохо вентилируемых закрытых помещениях с печным отоплением или газовой колонкой) - кровь из полостей сердца или крупных артерий; при отсутствии крови -часть сердца, селезёнки:
• метгемоглобинобразующими ядами - кровь;
• грибами и ядовитыми растениями - непереваренные кусочки грибов и растений из содержимого желудка и кишечника, рвотные массы и промывные воды.
Существуют некоторые особенности, на которые необходимо обратить внимание.
Моча. При аутопсиях, по возможности, должно быть собрано 50 мл мочи в пластиковые контейнеры или пластиковые пробирки, один с консервантом (2% фторида натрия). Моча представляет собой ценный материал для скрининга лекарств или ядов, особенно наркотиков и их метаболитов и часто используются для количественного определения этанола одновременно с кровью.
Кровь для количественного анализа. Для повышения надежности результатов количественного определения в трупной крови рекомендуется:
• минимизировать интервал между смертью и временем судебно-медицинского исследования трупа;
• труп и биообъекты хранить при 4°С до вскрытия и после взятия биоматериала;
• добавлять консервант (около 2% вес/объем фторида натрия) к каждой порции крови);
• кровь брать из бедренных вен после перевязывания их вблизи места взятия;
• указывать точное место взятия крови, время взятия;
• если получено достаточное количество крови, ее можно разделить на 2 части, одну с добавлением консерванта (фторида), другую - без консерванта; если пробы недостаточно, ее следует консервировать, за исключением случаев, когда предполагается отравление фторидом или веществами с возможным образованием фторида in vivo;
• если кровь взята только из сердца или синуса твердой мозговой оболочки, то это следует отразить в документе.
Содержимое желудка. В содержимом желудка может присутствовать большое количество яда и метаболитов. Ценным объектом могут быть промывные воды, особенно первые порции. Для анализа следует брать около 50 мл содержимого желудка или промывных вод, взятых при жизни, без консерванта. При этом обязательно замерить общее количество содержимого для последующего расчета количества оставшегося в желудке яда, что особенно ценно в случае, когда трудно интерпретировать концентрацию яда в крови. В содержимом желудка могут ока-
заться остатки непереваренных частей растений, грибов, фармацевтических препаратов (таблеток или капсул). Их следует поместить в отдельные контейнеры и направить на исследование.
Спинномозговая жидкость. Получают её шприцем с толстой иглой. Внутриглазная, внутрисуставная и спинномозговая жидкости в норме довольно хорошо защищены от воздействия факторов окружающей среды и поэтому могут быть ценным объектом для обнаружения, например, этанола, особенно, когда другие объекты отсутствуют или гнилостно изменены.
Внутриглазная жидкость. Внутриглазная жидкость может быть иногда взята, когда труп обгорел или поврежден, когда начались процессы гниения, когда отсутствует моча. Внутриглазная жидкость представляет собой солевой раствор с очень маленьким содержанием белка и поэтому яд и метаболиты можно экстрагировать как из их раствора в буфере. Чрезмерное отсасывание может привести к изменению концентрации аналита. Существует возможность постмортальных изменений, как и в других биообъектах.
Внутрисуставная жидкость. Синовиальную жидкость набирают шприцем. Вместе со спинномозговой жидкостью и внутриглазной жидкостью она может быть полезна при исследовании случаев смерти от травмы или в загнившем трупном материале, как относительно защищенный от окружающей среды объект.
Печень. Печень легко изымать и легко гомогенизировать. Она может содержать большое количество лекарственных веществ и их метаболитов и может быть основным объектом исследования в случае отсутствия крови. Пробу следует брать из глубоких отделов правой доли для снижения риска загрязнения желчью и возможной диффузии яда из желудка, которая больше в левой доле. Пробу печени не консервируют.
Другие ткани. Другие ткани могут изыматься при подозрении на отравление летучими веществами (растворители, газы при курении и вдыхании наркотических средств). Части мозга, легкого (верхушка), селезенки и почки помещают в неконсервированном виде в отдельные контейнеры и глубоко замораживают до транспортировки в лабораторию. Обратить внимание, чтобы не переполнить контейнеры во избежание трещин контейнера при заморозке. Определение концентрации в мозге представляет интерес в отдельных случаях. Как, например, в случаях смерти, вызванной передозировкой кокаина. Селезенка богата эритроцитами и поэтому может представлять ценность как альтернативный орган для определения карбок-сигемоглобина, когда отсутствует кровь.
Кератоидные ткани (волосы и ногти). Волосы с головы (пучок волос толщиной с карандаш, приблизительно 100-200 волос) должны быть связаны у корней хлопковой ниткой и срезаны или сострижены на расстоянии около 2 мм от кожи с теменной области. Ножницы надо держать параллельно поверхности головы. Связывание ниткой помогает выравнивать сегменты волос при разрезании их при сегментарном анализе. Пробы следует ровно поместить в алюминиевую фольгу (для исследования на наркотические средства), четко указав концы волос. Лобковые и подмышечные волосы можно брать при отсутствии волос на голове и в случаях, когда волосы чрезмерно обесцвечены или подвергнуты перманентной завивке. Волосы сохраняются дольше, чем другие ткани при захоронении. Многие ионы металлов, лекарственные вещества и их метаболиты проникают в волосы и ногти по мере их формирования и не подвергаются метаболизму в дальнейшем. Эти пробы могут быть полезны при подозрении на хроническую интоксикацию. Волосы также
являются возможным объектом исследования при подозрении на совершение преступление в отношении живых лиц, введённых в беспомощное состояние с использованием психотропных препаратов, наркотических средств. Если кровь и моча от потерпевших не была отобрана своевременно, и предполагаемый аналит не был обнаружен в крови, моче, промывных водах, в этих случаях волосы исследуют спустя 1-2 месяца, чтобы волосы выросли, тогда анализ сегментов волос может указать на наличие аналита. Ногтевые пластины отделяют целиком от пальцев, однако, относительно мало известно о механизме попадания и удерживания лекарственных веществ и их метаболитов в ногтях. Кроме того, более медленный рост ногтей, особенно ногтей на ногах, по сравнению с волосами, делает сегментарный анализ и интерпретацию более трудными.
Кости и костный мозг. Кости и костный мозг изымаются при эксгумации трупа, когда мягкие ткани полностью утрачены. Могут быть объектом исследования при подозрении на отравление мышьяком и свинцом.
Вещественные доказательства с места происшествия. Блистеры с таблетками, порошки, жидкости упаковываются в отдельные ёмкости. Все вещественные доказательства с места происшествия, особенно, ёмкости с летучими веществами упаковывать отдельно от биологических объектов и не хранить в одном холодильнике с биологическими объектами.
Биологические пробы рекомендуется хранить при 4 С° в холодильнике до транспортировки в лабораторию. Исключение составляют волосы и ногти, которые можно хранить при комнатной температуре и пробы, цель исследования которых - газы (метан, пропан, бутан,...), и прочие легко летучие вещества. Эти пробы рекомендуется замораживать. При хранении в морозильнике герметично закрывать тару для проб, заполняя в достаточном объеме, но, не переполняя, особенно, стеклянную посуду во избежание трещин при замораживании вследствие увеличения объема.
ВЫВОДЫ
Выполнение всех требований по изъятию объектов биологического происхождения является основой успешного решения поставленных задач при производстве су-дебно-химической экспертизы.
Если изъятие объектов на судебно-химическое исследование, транспортировка и хранение осуществляется ненадлежащим образом, все дальнейшие усилия по их исследованию теряют значение. Какими бы надежными ни были методы для обнаружения токсических веществ в биологических объектах, результаты экспертиз не будут значимыми, если отбор, транспортировка и хранение проб произведены без учёта природы предполагаемого яда и путей введения его в организм, распределения, путей и скорости выведения, длительности течения интоксикации и лечебных мероприятий, соблюдения техники правильного изъятия. Прогресс, который постоянно происходит в связи с внедрением новых инструментальных методов анализа, позволяет уменьшать размерность проб и исследовать новые объекты, которые ранее из-за недостаточной чувствительности методов не могли быть использованы.
