2014, Т. 4, № 1
Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»
отличающиеся невысоким содержанием специфических иммуноглобулинов и наличием перекрестной активности.
В настоящее время в лаборатории гибридом института сконструированы и широко апробированы диагностические препараты на основе видоспеци-фических моноклональных антител (МКА), которые позволяют выявлять холерные вибрионы О1 и О139 серогрупп в реакциях слайд-агглютинации и прямой иммунофлуоресценции. Сравнительные исследования с аналогичными поликлональными препаратами показали, что моноклональные диа-гностикумы не уступают им по чувствительности, но превосходят по специфичности, и подтверждение тому — отсутствие перекрестных реакций с близкородственными и гетерологичными микробами.
В настоящее время в России не существует коммерчески доступных иммуноферментных микропланшетных наборов для выявления холерного вибриона. Нами проведены работы по конструированию моноклональных пероксидазных конъюга-тов для детекции V. ско1егае О1 и О139 (при наличии в пробе 105—106 м.к.) в прямом варианте планшетного ИФА и ДИА (дот-иммуноанализе), постановка которых занимает 1,5—2 ч. Высокая специфичность конъюгатов подтверждена при испытании их на наборе штаммов холерных вибрионов О1, О139 серо-групп и представителях близкородственных и гете-рологичных микроорганизмов. Совместно с ГНЦ ПМБ (г. Оболенск) разработана моноклональная иммунохроматографическая тест-система (чувствительность — 108 м.к.) для выявления в течение 15 мин V. ско1егае О1, при лабораторных испытаниях которой установлена строгая специфичность в отношении вибрионов О1 серогруппы. Набор высокоспецифичных препаратов будет расширен за счет Инаба- и Огава-специфических МКА, получение которых осуществляется в настоящее время для конструирования се-ровароспецифических диагностикумов.
Таким образом, на сегодняшний день Ростовский противочумный институт подготовил набор высокоспецифичных препаратов, которые проходят государственную регистрацию для последующего внедрения их в практику здравоохранения с целью совершенствования лабораторной диагностики холеры и повышения достоверности серологического анализа.
ПОПУЛЯЦИИ В-КЛЕТОК ПАМЯТИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С
Д.С. Елезов1, Н.А. Арсентьева1, И.В. Кудрявцев2, А.В. Семенов1, Арег А. Тотолян1
1ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
2ФГУННИИээкспериментальной медицины, Санкт-Петербург
В-клетки могут быть разделены на 5 субпопуляций на основании экспрессии молекул СВ38 и СВ27: транзиторные клетки (СВ38ЬпёИСВ27-), наивные зрелые клетки (СВ38+СВ27-), покоящиеся клетки памяти (С038-С027+), активированные зрелые клетки (С027+С038+) и дубль-негативные клетки (СВ38-СВ27-). Исследование данных субпопуляций может помочь в понимании иммунопатогенеза и формирования иммунологической памяти при хроническом вирусном гепатите С.
Цель работы. Оценка количественного изменения субпопуляций В-клеток периферической крови больных хроническим вирусным гепатитом С.
Материалы и методы. Объектом исследования служила венозная кровь 29 больных хроническим вирусным гепатитом С, ранее не проходивших лечение, и 27 практически здоровых лиц. Измерение количества клеток в популяциях проводили методом проточной цитофлюориметрии с использованием прибора Navios (Beckman Coulter, США). Для окрашивания лимфоцитов использовали следующие меченные флюорохромами моноклональные антитела: CD38-PE, CD27-PC7, CXCR3-APC, CD19-AF700, CD45-AF750. Переменные сравнивали, используя непараметрический тест Манна—Уитни.
Результаты. Относительное количество транзи-торных В-клеток было снижено в 2 раза по медиане (p < 0,001) в сравнении с группой контроля и составило 2,7% от CD19+ клеток, а относительное количество наивных зрелых клеток — в 1,1 раза (p = 0,025) и составило 54,8%. Относительное количество дубль-негативных клеток было повышено в 1,3 раза (p = 0,034), медиана равнялась 10,4% от CD19+ клеток. Не было выявлено достоверных различий в количестве покоящихся В-клеток памяти и активированных зрелых В-клеток, медианы составили 13,2% и 14,1% соответственно.
Выводы. Выявлено относительное уменьшение менее дифференцированных субпопуляций В-кле-ток — транзиторных и наивных зрелых клеток с достоверным увеличением только дубль-негативной субпопуляции. Таким образом, полученные данные подтверждают, что при хроническом вирусном гепатите С не происходит значительной активации и дифференцировки В-клеток.
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСАМ СЕМЕЙСТВА HERPESVIRIDAE, ХЛАМИДИЯМ И ТОКСОПЛАЗМАМ У ДЕТЕЙ В САНКТ-ПЕТЕРБУРГЕ В 2013 г.
К.Д. Ермоленко, Л.Б. Куляшова, А.В. Закревская
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
На сегодняшний день отмечается повсеместная значительная распространенность вирусов семейства Herpesviridae во всех возрастных группах населения. На стабильно высоком уровне находится инфицированность хламидиями и токсоплазмами. Отсутствие точной информации о серопозитивно-сти к данным возбудителям среди детей затрудняет точное прогнозирование развития эпидемического процесса, а также возможное установление наиболее актуальных путей передачи этих заболеваний.
Целью работы явилось изучение частоты выявления антител ко всем вирусам семейства Herpesviridae кроме вируса герпеса 7 типа, а также хламидиям и токсоплазмам среди детей в Санкт-Петербурге.
В период с марта по сентябрь 2013 г. было проведено исследование крови 102 детей. Всего было обследовано 63 ребенка мужского и 49 детей женского пола. В исследование включались дети в возрасте от 2 месяцев до 17 лет, не имевшие клинических проявлений герпетических инфекций.
Методом иммуноферментного анализа у всех детей определялись противовирусные IgG к ВПГ 1/2 типа, а также типоспецифические IgG к ВПГ 1 и ВПГ 2 от-