CC BY
17Ветеринарный врач. 2023. № 4. С. 38 - 43 The Veterinarian. 2023; (4): 38 - 43
Научная статья
УДК 619:616-001.28/29+579
DOI: 10.33632/1998-698Х_2023_4_38
Получение и оценка безвредности препарата на основе Escherichia coli
Тимур Рафкатович Гайнутдинов, Дина Талгатовна Шарифуллина, Рамзи Низамович Низамов, Айрат Минсагитович Идрисов, Эдие Миначетдиновна Плотникова, Ленар Ильгизарович Зайнуллин
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», Казань, Россия Автор, ответственный за переписку: Тимур Рафкатович Гайнутдинов, [email protected]
Аннотация. Получен препарат микробного происхождения на основе производственного штамма Escherichia coli «ПЛ-6» путем выращивания тест-штамма на твердой питательной среде -мясопептонном агаре при температуре плюс 37 оС в условиях термостата в течение 48 часов. Посев указанной культуры делали по 0,1 см3 1 млрд суспензии по стандарту мутности Л. А. Тарасевича. По истечении данного промежутка времени выросшую культуру E. coli смывали физиологическим раствором, облучали в дозе 155 Гр на гамма-установке «Исследователь», источник 60Co с мощностью экспозиционной дозы 3,7 кГр/час, затем инактивировали 0,5 %-ным раствором формалина, доводили до концентрации 10 млрд микробных клеток и закупоривали в стерильные стеклянные флаконы по 100 см3. Определение стерильности полученного средство показало, что роста бактерий, грибов и микоплазм в инкубированных жидких и твердых питательных средах (Китта-Тароцци, Сабуро, Хейфлика, МПБ и МПА) не наблюдалась, следовательно, изучаемый препарат стерильный. Результаты проведенных опытов на лабораторных животных показали, что испытуемое средство оказалось нереактогенным, не токсичным и безвредным. В следующих опытах проверяли противорадиационную активность препарата на 24 белых мышах, облученных в летальной дозе (8,0 Гр) на гамма-установке «Пума» с источником облучения 137Cs и мощностью экспозиционной дозы 295,42 Р/час. Результаты испытаний показали, что полученное средство обладает противорадиационной активностью и обеспечивает 83,3 %-ную выживаемость летально облученных животных при ЛД83,3-100/30. Полученные данные дают основание для его дальнейшего использования как профилактического средства при острой лучевой болезни животных.
Ключевые слова: тест-штамм, Escherichia coli, питательная среда, микробный метаболизм, белые мыши, острая лучевая болезнь, радиопротектор
Obtaining and evaluation of the harmlessness of the drug based on Escherichia coli
Timur R. Gaynutdinov, Dina T. Sharifullina, Ramzi N. Nizamov, Ayrat M. Idrissov, Edie M. Plotnikova, Lenar I. Zaynullin
Federal State Budgetary Scientific Institution «Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological safety», Kazan, Russia
Author responsible for correspondence: Timur R. Gaynutdinov, [email protected]
Abstract. A preparation of microbial origin based on the production strain of Escherichia coli «PL-6» was obtained by growing the test strain on a solid nutrient medium - meat-peptone agar at a temperature of plus 37 ° C under thermostat conditions for 48 hours. Sowing of this crop was done by 0.1 cm3 of 1 billion suspension according to the turbidity standard of L. A. Tarasevich. After this period of time, the grown E. coli culture was washed off with a saline solution, irradiated at a dose of 155 Gy at the gamma installation «Researcher», a 60Co source with an exposure dose capacity of 3.7 kGy/hour, then inactivated with a 0.5 % formalin solution, brought to a concentration of 10 billion microbial cells and sealed in sterile glass vials according to 100 cm3. Determination of the sterility of the obtained agent showed that the growth of bacteria, fungi and mycoplasmas in incubated liquid and solid nutrient media (Kitta-Tarozzi, Saburo, Hayflick, MPB and MPA) was not observed, therefore, the studied drug is sterile. The results of the experiments conducted
on laboratory animals showed that the test agent turned out to be non-lactogenic, non-toxic and harmless. In the following experiments, the anti-radiation activity of the drug was tested on 24 white mice irradiated at a lethal dose (8.0 Gy) at the Puma gamma installation with a 137Cs irradiation source and an exposure dose rate of 295.42 R/hour. The test results showed that the resulting agent has anti-radiation activity and provides 83.3 % survival of lethally irradiated animals at LD83.3-100/30. The obtained data provide the basis for its further use as a preventive agent in acute radiation sickness of animals.
Keywords: test strain, Escherichia coli, nutrient medium, microbial metabolism, white mice, acute radiation sickness, radioprotector
Введение. Для получения радиовакцин и препаратов, защищающих млекопитающих от гамма-излучения и его последствий на живой организм, российскими и зарубежными учеными, при исследованиях аспектов механизма противорадиационного воздействия, получен огромный экспериментальный материал, доказывающий, что вещества микробного происхождения (ВМП) повышают радиорезистентность живого организма к воздействию ионизирующей радиации и понижают смертность облученных животных [1, 14, 10].
Облучение живого организма в сравнительно небольших дозах уже вызывает нарушение метаболизма, влияет на иммунную реактивность и синтез ДНК [5, 4, 16]. Поэтому учеными не прекращаются изыскания препаратов микробного происхождения.
При этом наблюдается интересный иммунологический феномен, который заключается во взаимодействии вводимых вакцинных препаратов на иммунитет, просматривается ярко выраженная конкурирующая связь между реакцией макроорганизма на инъекцию антигенов и аутоаллергии, которая возникает при лучевой болезни. Живой организм, вовлеченный в фазу ответа на чужеродный антиген, не проявляет сильной аутоиммунной реакции на образование аутоантигенов [6].
Препараты микробного происхождения в облученном макроорганизме вызывают активизацию мононуклеарных фагоцитов в крови и тканях. Следовательно, усиливается устойчивость к экзо- и эндоинфекциям и, соответственно, происходит нарастание стимулирующей функции к образованию антител за счет повышения антителообразующих клеток, активизируются процессы кроветворения в облученном макроорганизме, панцитопения идет на спад в разгар лучевой болезни, ускоряется нарастание гранулоцитов и тромбоцитов.
В восстановительном периоде просматривается увеличение общего гемоглобина, усиливаются пролиферация и миграция стволовых клеток костного мозга, ускоряется дифференцировка клеточных элементов и появляется большее количество очагов кроветворения в селезенке и костном мозге иммунизированных животных, а также происходит реакция антител с продуктами клеточного распада, возникающего при облучении и отсутствие токсического действия на макроорганизм [7].
Одним из основных механизмов противолучевого действия препаратов микробной природы считается усиление эндогенной продукции интерлейкинов (ИЛ-ф, ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-6), колониестимулирующего фактора (КСФ), туморнекротического фактора (ТНФ-а) [15, 13], которые регулируют гомопоэз, преодолевают миелосупрессии, повышают выживаемость животных [9, 18, 17].
В последнее время для раннего терапевтического эффекта наблюдается смещение акцента в сторону привлечения биологических факторов противолучевой защиты, а именно - использование микроорганизмов кишечно-тифозной группы (E. coli и другие) [11, 12], обладающих длительным защитным свойством и без проявления побочных эффектов.
Метаболиты кишечной палочки обеспечивают пролонгированную радиорезистентность у летально облученных животных.
Микроорганизмы-продуценты при выращивании их на жидкой питательной среде -мясопептонный бульон (МПБ), выделяют уникальный набор продуктов метаболизма (бактериоцины, аминокислоты, пробиотические компоненты, лизоцим, ферменты, гормоны, полипептиды), которые обладают антитоксическим, антибактериальным, метаболизмкорригирующим и иммуномодулирующим эффектами, обеспечивая устойчивость макроорганизма к стресс-факторам [8]. Эшерихии в процессе своей жизнедеятельности выделяют антибактериальные вещества (колицины), фермент каталазу и аминокислоты.
В соответствии с приведенными литературными данными можно сказать, что применение продуктов микробного метаболизма из группы кишечных бактерий в качестве радиопротекторов является достаточно актуальным, интересным направлением для дальнейшего изучения и изготовления препаратов с противолучевыми свойствами.
Вышесказанное явилось основанием для разработки средства на основе эшерихий для профилактики острой лучевой болезни (ОЛБ), соответственно, целью наших исследований стало конструирование и оценка безвредности препарата на основе E. coli.
Материалы и методы. С учетом того, что колициногенные бактерии обладают длительным лечебным эффектом без проявления побочных реакций макроорганизма нами было разработано и испытано средство, полученное из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», синтезирующий адгезивный антиген К 88.
Работу выполнили в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Биомассу, состоящую из соматических клеток и продуктов метаболизма E. coli, получали путем выращивания тест-штамма на твердой питательной среде - мясопептонном агаре (МПА) при температуре плюс 37 оС в течение 48 часов в термостате. Посев указанной культуры делали по 0,1 см3 1 млрд суспензии по стандарту мутности Л. А. Тарасевича. По истечению данного промежутка времени выросшую культуру E. coli смывали 0,85 %-ным физиологическим раствором, облучали в дозе 155 Гр на гамма-установке «Исследователь», источник 60Co с мощностью экспозиционной дозы 3,7 кГр/час, затем инактивировали 0,5 %-ным раствором формалина, доводили до концентрации 10 млрд микробных клеток и закупоривали в стерильные стеклянные флаконы по 100 см3.
На следующем этапе работы проводили опыты по изучению стерильности (отсутствие роста микоплазм, бактерий и грибов) согласно ГОСТ 28085 [2]; реактогенности, безвредности и токсичности полученного средства из производственного штамма E. coli «ПЛ-6» по ГОСТ 31926 [3].
Реактогенность полученного препарата определяли на 20 необлученных, здоровых белых мышах обоего пола, живой массой 18-20 г, разделенных на 2 группы по 10 животных в каждой. Мышам 1 группы однократно подкожно в область спины после предварительной дезинфекции спиртовым тампоном вводили предлагаемый препарат в объеме 0,2 см3; животным 2 группы препарат не вводили - они служили биологическим контролем. За мышами опытной и контрольной групп вели клиническое наблюдение в течение 7 суток.
Далее проводили испытания препарата, полученного из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», на токсичность и безвредность на 70 лабораторных животных (белые мыши) живой массой 19-22 г обоего пола, которых по принципу аналогов разделили на 7 групп по 10 голов в каждой.
Животным 1 опытной группы вводили испытуемый препарат, полученный из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», однократно подкожно, обработав место введения спиртовой салфеткой, в объеме 0,1 см3 в область поверхности спины; животным 2 группы - 0,3 см3; 3 группы - 0,5 см3; 4 группы - 0,7 см3, 5 группы - 0,9 см3 и 6 группы - 1,0 см3. Мышам 7 группы препарат не вводили, они служили биологическим контролем. За всеми животными вели клиническое наблюдение в течение 14 суток.
В следующих опытах проверяли противорадиационную активность препарата на 24 белых мышах, облученных в летальной дозе (8,0 Гр) на гамма-установке «Пума» с источником облучения 137Cs и мощностью экспозиционной дозы 295,42 Р/час.
Методом аналогов животных разделили на 4 группы по 6 мышей в каждой. Животным 1 группы за 72 часа до облучения в дозе 8,0 Гр вводили испытуемый препарат, полученный из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», однократно подкожно в дозе 1*1010 м.к./кг (0,2 см3), предварительно обработав спиртом поверхность спины; 2 группы за 72 часа до облучения в дозе 8,0 Гр вводили регламентированный препарат - противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин (ПЛПИ) в дозе 5,0 миллиграмм на голову (0,1 см3); мышам 3 и 4 групп препараты не вводили, они служили контролем облучения (3 группа) и биологическим контролем (4 группа).
Клиническое наблюдение за опытными и контрольными животными вели в течение 30 суток, ведя учет выживших и павших.
Результаты исследований. В результате было получено средство, определение стерильности которого показали, что рост бактерий, грибов и микоплазм в инкубированных жидких и твердых питательных средах (Китта-Тароцци, Сабуро, Хейфлика, МПБ и МПА) не наблюдался, следовательно, изучаемый препарат стерильный.
Проведенными клиническими испытаниями доказано, что препарат, полученный из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», не обладает реактогенной активностью. При ежедневном визуальном наблюдении каких-либо изменений в поведении, приеме корма и воды, внешнего вида зафиксировано не было. Все мыши выжили, внешне выглядели здоровыми: шерсть была чистой, не испачканная экскрементами, они охотно принимали корм и воду, активно двигались и адекватно реагировали на внешние раздражители.
Результаты проведенных опытов по определению токсичности показали, что по истечению срока клинических наблюдений в течение 14 суток изменений не наблюдалось, следовательно, предлагаемый препарат не токсичный, а также в ходе исследований доказано, что данный препарат безвредный, т.к. введение его опытным животным в двух-четырехкратной дозе не вызывало никаких изменений клинических признаков и гибели животных в течение периода наблюдения (14 суток).
Данные сравнительного испытания радиационной активности препарата, полученного из производственного штамма E. coli «ПЛ-6» и регламентированного препарата - противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин (ПЛПИ) приведены в таблице 1.
Таблица 1 - Терапевтическая эффективность испытуемого средства в опытах на белых мышах
Группа 1олученное средство Количест во (голов) Объем препарата (см3/голо ву) Способ введения Форма проявления болезни СПЖ (сутки) Выживаемость (%)
1 (опытная) ПС на основе E. coli «ПЛ-6» 5 0,2 однократн о, п/к легкая 14 83,3
2 (опытная) ПЛПИ 5 0,1 однократн о, п/к легкая 15,5 66,7
3(контроль облучения) - 5 - - острая 10,6 16,7
4(биоконтроль) - 5 - - - - 100
Примечания 1 ПС - предполагаемое средство. 2 ПЛПИ - противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин. 3 СПЖ - средняя продолжительность жизни. 4 п/к - подкожное введение.
Из таблицы 1 видно, что наиболее высокой противорадиационной активностью обладает препарат, полученный из производственного штамма E. coli «ПЛ-6», который при однократном подкожном введении облученным в дозе 8,0 Гр белым мышам показал 83,3 %-ную выживаемость против 66,6 % регламентированного препарата (ПЛПИ) и контроля облучения - 16,7 %. При этом СПЖ опытных животных увеличивалась до 14 суток (препарат на основе E. coli «ПЛ-6») против 10,6 - у контроля облучения.
Заключение. В результате проведенных исследований установлено, что полученный препарат на основе E. coli штамма «ПЛ-6» является нереактогенным, не обладает токсичностью и абсолютно безвреден, вызывая 83,3 %-ную выживаемость летально облученных животных в ЛД8з,з-1оо/зо, что дает основание для его дальнейшего использования как средство при профилактике острой лучевой болезни животных.
Литература
1. Агиров, А. Х. Экологические проблемы современности / А. Х. Агиров, Н. С. Хиштова. -Майкоп, 2008. - С. 10-12.
2. ГОСТ 28085-2013. Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы бактериологического контроля стерильности : межгосударственный стандарт Российской Федерации : издание официальное : принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 марта 2013 г. № 55-П) : введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. № 319-ст : введен взамен ГОСТ 28085-89 : дата введения 2014-07-01 / разработан Федеральным государственным бюджетным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ») // Техэксперт : офиц. сайт. - URL: http: //docs.cntd.ru/document/1200104835 (дата обращения: 30.09.2022).
3. ГОСТ 31926-2013. Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности: межгосударственный стандарт Российской Федерации: издание официальное: принят Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол 07 мая 2013 г. № 43) : введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 27 июня 2013 г. № 243-ст : введен впервые : дата введения 2014-07-01 / подготовлен Федеральным государственным бюджетным учреждением «Всероссийский
государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ») // Техэксперт : офиц. сайт. - URL: http: https://docs.cntd.ru/document/1200103451 (дата обращения: 30.09.2022).
4. Использование радиоинактивированных штаммов микроорганизмов в качестве современного технологического сырья для конструирования на их основе биологических радиопротекторов / К. Н. Вагин, Т. Р. Гайнутдинов, Р. Н. Низамов, Г. И. Рахматуллина // Исследования вопросов радиационной, химической и биологической защиты в мирное и военное время. Часть II : сборник статей II Всероссийской научно-практической конференции, 14-15 сентября 2021. - Кострома: Военная академия радиационной, химической и биологической защиты им. Маршала Советского Союза С. К. Тимошенко, 2021. - С. 76-81.
5. Киршин, В. А. Действие ионизирующих излучений на с.-х. животных. Противорадиационная защита с.-х. животных / В. А. Киршин // Ветеринарная патология. - 2002. - № 3. - С. 58-60.
6. Клемпарская, Н. Н. Антибактериальный иммунитет и радиорезистентность / Н. Н. Клемпарская, Н. В. Раева, В. Ф. Сосоева. - М. : Медгиз, 1963. - 120 с.
7. Клемпарская, Н. Н. Иммунотерапия экспериментальной острой лучевой болезни / Н. Н. Клемпарская. - М. : Энергоиздат, 1981. - 102 с.
8. Концептуальные основы конструирования иммунотерапевтических средств при многофакторной экопатологии : монография / Р. Н. Низамов, Ж. Р. Насыбуллина, К. Н. Вагин [и др.].
- Казань, 2021. - 359 с.
9. Михайленко, Е. В. Специфические и неспецифические иммуномодуляторы в повышении эмбриональной выживаемости крупного рогатого скота : специальность 03.00.13 «Физиология»: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Михайленко Ева Викторовна ; Всесоюзный научно-исследовательский институт живот. - Дубровицы, 2000. - 28 с.
10. Определение радиозащитной эффективности инактивированных гамма-облучением штаммов микроорганизмов / Т. Р. Гайнутдинов, А. М. Идрисов, А. В. Фролов [и др.] // Ветеринарный врач. - 2022. - № 2. - С. 13-20.
11. Радиозащитная активность композиций на основе метаболитов E. coli, B. bifidum и иммуномодуляторов нового поколения / Г. В. Конюхов, Р. Н. Низамов, Д. Т. Шарифуллина [и др.] // Ветеринарный врач. - 2016. - № 6. - С. 36-39.
12. Усовершенствование технологии получения радиозащитных препаратов на основе B. bifidum, E. coli в сочетании с биополимером и оценка их эффективности на с.-х. животных / Г. В. Конюхов, Р. Н. Низамов, Т. Р. Гайнутдинов [и др.] // Ветеринарный врач. - 2017. - № 6. - С. 31-35.
13. Advances in Radiobiology of Stereotactic Ablative Radiotherapy / Qiu Bin; Aili Abudureyimujiang; Xue Lixiang, Ping Jiang // Frontiers in oncology. - 2020. - Ко 10. - 1165 p.
14. Bleddyn, J. Clonical Radiobiology of Fast neutron Therapy: What Was Learnt? / Jones Bleddyn // Frontiers in oncology. - 2020. - Ко 10. - 1537 p.
15. Leblanc, Julie Radiation Biolody and lts Role in the Canadian Radiation Protection Framework / Julie Leblanc, Julie Burtt // Health physics. - 2019. - Vol. 3. - Ко 117. - P. 319-329.
16. Obtaining radioactivated strains of microorganisms and studying their antiradiation efficiency / T. R. Gaynutdinov, R. N. Nizamov, A. M. Idrisov [et al.] // IOP Conf. Series: Earth and Environmental Science.
- 2021. - Vol. 723. - Р. 042008. - Doi: org/10.1088/1755-1315/723/4/042008.
17. Smolen, J. S. The pathogenesis of rheumatoid arthritis: new insights from old clinical data? / J. S. Smolen, D. Aletaha, K. Redlich // Nature Rev. Rheumatol. - 2012. - Ко 8. - P. 235-243.
18. Yarilina, A. Regulation of inflammatory responses in tumor necrosis factor-activated and rheumatoid arthritis synovial macrophages by JAk inhibitors / A. Yarilina // Arthr. and Rheumatol. - 2012. -Ко 64. - P. 3856-3866.
References
1. Agirov, A. H. Ecological problems of modernity / A. H. Agirov, N. S. Khishtova. - Maykop, 2008.
- pp.10-12.
2. GOST 28085-2013. Biological medicinal products for veterinary use. Methods of bacteriological sterility control : Interstate Standard of the Russian Federation : official publication : adopted by the Interstate Council for Standardization, Metrology and Certification (Protocol 55-P of March 25, 2013) : put into effect by order of the Federal Agency for Technical Regulation and Metrology of June 28, 2013. К 319-st : introduced instead of GOST 28085-89 : date of introduction 2014-07-01 / developed by the Federal State Budgetary Institution «All-Russian State Center for Quality and Standardization of Medicines and Feed» (FGBI // Techexpert : ofic. website. - URL: http: //docs.cntd.ru/document/1200104835 (accessed: 30.09.2022).
3. GOST 31926-2013. Medicinal products for veterinary use. Methods for determining harmlessness: Interstate Standard of the Russian Federation: official publication: adopted by the Interstate Council for
Standardization, Metrology and Certification (Protocol No 43 of May 07, 2013) : put into effect by order of the Federal Agency for Technical Regulation and Metrology of June 27, 2013. No. 243-st : introduced for the first time : date of introduction 2014-07-01 / prepared by the Federal State Budgetary Institution «All-Russian State Center for Quality and Standardization of Medicines and Feed» (FGBI «VGNKI») // Techexpert : ofic. website. - URL: http: https://docs.cntd.ru/document/1200103451 (accessed: 30.09.2022).
4. The use of radioinactivated strains of microorganisms as modern technological raw materials for the construction of biological radioprotectors based on them / K. N. Vagin, T. R. Gaynutdinov, R. N. Nizamov, G. I. Rakhmatullina // Research on radiation, chemical and biological protection in peacetime and wartime. Part II : Collection of articles of the II All-Russian Scientific and Practical Conference, September 14-15, 2021. - Kostroma: Military Academy of Radiation, Chemical and Biological Protection named after Marshal of the Soviet Union S. K. Timoshenko, 2021. - P. 76-81.
5. Kirshin, V. A. The effect of ionizing radiation on agricultural animals. Anti-radiation protection of agricultural animals / V. A. Kirshin // Veterinary pathology. - 2002. - No 3. - P. 58-60.
6. Klemparskaya, N. N. Antibacterial immunity and radioresistance / N. N. Klemparskaya, N. V. Raeva, V. F. Sosoeva. - M. : Medgiz, 1963. - 120 p.
7. Klemparskaya, N. N. Immunotherapy of experimental acute radiation sickness / N. N. Klemparskaya. - M. : Energoizdat, 1981. - 102 p.
8. Conceptual foundations of the design of immunotherapeutic agents in multifactorial ecopathology : monograph / R. N. Nizamov, J. R. Nasybullina, K. N. Vagin [et al.]. - Kazan, 2021. - 359 p.
9. Mikhailenko, E. V. Specific and nonspecific immunomodulators in increasing the embryonic survival of cattle : specialty 03.00.13 «Physiology» : autoref. dis. ... cand. Biol. nauk / Mikhaylenko Eva Viktorovna ; All-Union Scientific Research Institute belly. - Dubrovitsy, 2000. - 28 p.
10. Determination of the radioprotective effectiveness of strains of microorganisms inactivated by gamma irradiation / T. R. Gaynutdinov, A.M. Idrisov, A.V. Frolov [et al.] // The Veterinarian. - 2022. - No 2.
- P. 13-20.
11. Radioprotective activity of compositions based on E. coli, B. bifidum metabolites and new generation immunomodulators / G. V. Konyukhov, R. N. Nizamov, D. T. Sharifullina [et al.] // The Veterinarian. - 2016. - No 6. - P. 36-39.
12. Improvement of technology for obtaining radioprotective drugs based on B. bifidum, E. coli in combination with a biopolymer and evaluation of their effectiveness on farm animals / G. V. Konyukhov, R. N. Nizamov, T. R. Gaynutdinov [et al.] // The Veterinarian. - 2017. - No 6. - P. 31-35.
13. Advances in Radiobiology of Stereotactic Ablative Radiotherapy / Qiu Bin; Aili Abudureyimujiang; Xue Lixiang, Ping Jiang // Frontiers in oncology. - 2020. - No 10. - 1165 p.
14. Bleddyn, J. Clonical Radiobiology of Fast neutron Therapy: What Was Learnt? / Jones Bleddyn // Frontiers in oncology. - 2020. - No 10. - 1537 p.
15. Leblanc, Julie Radiation Biolody and lts Role in the Canadian Radiation Protection Framework / Julie Leblanc, Julie Burtt // Health physics. - 2019. - Vol. 3, No 117. - P. 319-329.
16. Obtaining radioactivated strains of microorganisms and studying their antiradiation efficiency / T. R. Gaynutdinov, R. N. Nizamov, A. M. Idrisov [et al.] // IOP Conf. Series: Earth and Environmental Science.
- 2021. - Vol. 723. - P. 042008. - Doi: org/10.1088/1755-1315/723/4/042008.
17. Smolen, J. S. The pathogenesis of rheumatoid arthritis: new insights from old clinical data? / J. S. Smolen, D. Aletaha, K. Redlich // Nature Rev. Rheumatol. - 2012. - No 8. - P. 235-243.
18. Yarilina, A. Regulation of inflammatory responses in tumor necrosis factor-activated and rheumatoid arthritis synovial macrophages by JAk inhibitors / A. Yarilina // Arthr. and Rheumatol. - 2012. -No 64. - P. 3856-3866.
© TaHHyTgHHoB T. P., fflapu^y^HHa ft T., HroaMoB P. H., HgpucoB A. M., n^oraHKoBa Э. M., 3anHy^HH .H.H. 2023
