Получение и использование липосомальных антибиотиков для лечения экспериментального сифилиса Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ЛИТЕРАТУРА

1. Васильев В.Н. с соавт. Заболеваемость сифилисом у несовершеннолетних в Кемеровской области в период 1995-2004 гг: Терапия социально значимых заболеваний в дерматовенерологии / Сб. тез. - М., 2005. - С. 210.

2. Вислобоков А.В., Ломоносов К.М., Музалевская М.В. Сезонные колебания заболеваемости сифилисом среди сельского населения Центрального федерального Округа: Терапия социально значимых заболеваний в дермато венерологии / Сб. тез. - М., 2005. - С. 211.

3. Здоровье населения и среда обитания. Информационный бюллетень / Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. - М., 1993 - 2007.

ПОЛУЧЕНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛИПОСОМАЛЬНЫХ АНТИБИОТИКОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО СИФИЛИСА

А.В. Одинец

Ставропольская государственная медицинская академия, г. Ставрополь

С момента возникновения эпидемии сифилиса и до настоящего времени идёт поиск лекарственных препаратов и методик эффективного его лечения. Значительно расширили наши представление о течении сифилитической инфекции электронно-микроскопические исследования, которыми может гордиться отечественная сифилидология [2]. Именно с их помощью установлены неизвестные ранее звенья патогенеза заболевания, доказана возможность существования и сохранения бледной трепонемы в организме больного в форме цист. Определена роль цист в обеспечении персистенции трепонем в период латентности. Установлено, что количество цист-форм, а также Л-форм, спиралевидных форм в полимембранных фагосомах нарастает при вторичном рецидивном и более поздних стадиях сифилиса. Участились случаи развития нейросифилиса, клинической и серологической резистентности, изменилось соотношение вторичного рецидивного сифилиса и свежих форм; происходит рост числа детей с врожденным и приобретенным бытовым сифилисом [3].

Эти исследования побуждают к разработке новых биотехнологий, направленных на создание адекватных методов лечения с внутриклеточной доставкой антибиотиков в различные органы и ткани организма. С этой задачей могут справиться липосомальные формы лекарственных веществ.

Известно, что компоненты бислойной мембраны липосом активно включаются в метаболические процессы, взаимодействуя с клетками макроорганизма, и вызывают изменения функционального состояния отдельных органов и систем организма [1].

Первоначально была отработана биотехнология получения липо-сомальных везикул из фосфолипидов головного мозга свиньи. Тех-

I. СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ХЛАМИДИОЗА И ДРУГИХ ИНФЕКЦИЙ, ПЕРЕДАЮЩИХСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ

нология получения комплекса фосфолипидов из головного мозга свиньи включает гомогенизацию, обезвоживание и экстракцию исходного сырья ацетоном, экстракцию осадка смесью хлороформа с этанолом, отделение липидной фазы и выделение из нее фосфолипидов добавлением ацетона в соотношении с экстрактом 1,5 - 2,0:1. Фосфолипиды и холестерин оказались пригодны при конструировании различными способами липосом, содержащих антибиотики, используемые для лечения сифилиса.

Установлена коррелятивная связь между методом иммобилизации антибиотиков в липосомы и уровнем его включения в них. Из фосфолипидов и холестерина головного мозга свиньи, куда для стабилизации мембран липидных везикул добавляли -токоферол методом «обращения фаз», получены липосомы размером 100-850 нм и внутренним объёмом 9 л/моль липида. Последующую иммобилизацию натриевой соли бензилпенициллина и экстенциллина во внутренний объём липосом осуществляли методом «замораживания-оттаивания». В процессе многократно повторяющихся циклов замораживания фос-фолипидных дисперсий с последующим оттаиванием происходит формирование липосом с высоким процентом включения инкапсулируемых антибиотиков (72-86%).

При лечении экспериментального первичного сифилиса клинические проявления заболевания начинали нивелироваться с рубцеванием шанкров, на месте которых через 30 дней оставалась лишь пигментация. Введение по тем же схемам липосомальных антибиотиков в половинных дозах через 15 дней приводило к полной ликвидации всех клинических проявлений экспериментального первичного сифилиса.

Лечение антибиотиками экспериментального вторичного сифилиса, начатое спустя 3 месяца от момента заражения кроликов на фоне выраженных клинических проявлений, обеспечивало к 30-м суткам негативацию клинических проявлений, сопровождающихся регрессом папулёзных высыпаний на половых органах, корнях ушей и лапах, паренхиматозным кератитом, полиаденитом, которые полностью исчезали через 60 дней после начала лечения. Липосомальные антибиотики, вводимые экспериментальным животным по тем же схемам, но в половинных дозах, обеспечивали полное исчезновение клинических проявлений к 30-м суткам.

Таким образом, при лечении экспериментальной сифилитической инфекции показана высокая эффективность липосомальных форм экстенциллина и натриевой соли бензилпенициллина. Причём, применение второго препарата позволило добиться регресса клинических проявлений при первичном сифилисе через 15 дней после начала лечения и при вторичном сифилисе через 30 дней после начала лечения.

Получены результаты наблюдения за серологическими показателями течения сифилитической инфекции у кроликов. При введении

липосомальных форм антибиотиков негативация МР и РПГА проходила в два раза быстрее, чем при использовании свободной формы антибиотиков, а количество животных с полной негативацией серологических реакций достигало 100% при применении липосомальной формы натриевой соли бензилпенициллина через 60 дней после начала лечения. Интактные антибиотики и липосомальный экстенцил-лин достигали такого эффекта лишь в 60-70 и 90% случаев соответственно. Даже удвоенная курсовая доза свободных антибиотиков не обеспечивала аналогичных результатов лечения.

Введение терапевтической дозы свободных форм антибиотиков подопытным животным сопровождалось резким венозным полнокровием сосудов и альтерацией, преимущественно в печени, наблюдавшиеся в других исследуемых органах реактивные процессы можно расценивать как признаки адаптационно-приспособительных механизмов, граничащих с декомпенсацией. Изучение патоморфологических изменений при сочетанном введении животным свободных антибиотиков с интактными липосомами свидетельствовало о существенном повышении терапевтического эффекта. Вероятно, это связано с тем, что интактные липосомальные везикулы действуют как неспецифические иммуномодуляторы в макроорганизме.

При использовании липосомального пенициллина патоморфологические изменения носили менее выраженный характер. Причём у животных, получавших лечение бензатин-бензилпенициллином, изменения были более деструктивные, чем у животных, получавших бензилпенициллина натриевую соль.

Разработанные схемы оптимального лечения сифилитической инфекции, заключающиеся в снижении курсовой дозы разработанных препаратов в два раза по сравнению с традиционной, позволят получить экономический эффект в государственном масштабе.

В целом, полученные результаты открывают широкие возможности для последующих клинических исследований. Липосомальные лекарственные формы, проникая внутриклеточно, где остаются персистирую-щие атипичные формы бледных трепонем, будут способствовать санации макроорганизма, снижая уровень заболеваемости сифилисом.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ефременко В.И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и медицине). - Ставрополь,1999. - 236 с.

2. Овчинников Н.М., Делекторский В.В. Ультраструктура возбудителей венерических заболеваний и её клиническое значение. - М., 1986. - 224 с.

3. Онищенко ГГ, Монисов А.А., Гульченко Л.П. // Журн. микробиол. - 1999. - №4. - С. 14-17.