mechanism of serotonin regulation of their state occurs and is completed in the postnatal period, to 6 years of age, and is expressed in increasing the functionality of these systems.
УДК 632.082.12
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ПРОЛАКТИНА У КОРОВ
ТАТАРСТАНСКОГО ТИПА ХОЛМОГОРСКОГО СКОТА
Закирова Г.М., Султанов Р.Р.*, Зиннатова Ф.Ф.*
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана»
ГНУ «Татарский научно-исследовательский институт сельского
хозяйства»*, г.Казань
Ключевые слова: ПЦР, ДНК, полиморфизм, аллели, генотип пролактина, молочная продуктивность.
Key words: PCR, DNA, genotype, allele, prolactin genotype, milk production.
Пролактин относится к семейству белковых гормонов, участвующих в инициации и поддержании лактации у млекопитающих. Многие данные указывают на большое значение пролактина в регуляции синтеза и секреции разнообразных компонентов молока.
В настоящее время известно 2 аллеля пролактина (PRL). У большинства пород скота частота аллеля А превосходит над В. Такая картина характерна для голштинского скота, широко используемого для совершенствования отечественных пород и выведения новых типов. Присутствие В-варианта пролактина в молоке коров (генотипы АВ и ВВ) оказывает существенное влияние на молочную продуктивность. Целью данной работы было изучение полиморфизма гормона пролактина у коров татарстанского типа холмогорской породы и выявление взаимосвязи с молочной продуктивностью [1,2,3].
Материал и методика. Исследование проводили в течение 2010 г. на базе племрепродуктора имени Вахитова Кукморского района Республики Татарстан у коров-первотелок (n=161) татарстанского типа холмогорской породы. ДНК-диагностика проведена в ГНУ "Тат НИИСХ". По полученным данным у них выявлены аллели А и В пролактина и три генотипа - АА, ВВ и АВ.
Для проведения ДНК-диагностики и оценки по гену пролактина у животных были отобраны пробы крови.
Кровь, полученную из яремной вены животных, вносили в пробирки с 100 мМ ЭДТА до конечной концентрации 10 мМ.
Фрагменты ДНК амплифицировали на программируемом термоциклере MyCycler (Bio-Rad, США). Для ПЦР использовали Taq полимеразу (Fermentas, Латвия) с поставляемым буфером. Все четыре нуклеотида (Fermentas) были добавлены в реакционную смесь в конечной концентрации 0,2 мМ. Для амплификации фрагмента гена пролактина использовали следующие праймеры PRL1: 5'-CGAGTCCTTATGAGCTTG ATTCTT-3', PRL2: 5'-GCCTTCCAGAAGTCGTTTGTTTTC-3', (Mtra et al, 1995).
Для определения полиморфизма гена пролактина по вариантам А и В 20 мкл ПЦР пробы обрабатывали 5 ед. эндонуклеазы рестрикции Rsa I (СибЭнзим, Россия) согласно рекомендациям производителя.
Молочную продуктивность определяли ежемесячно путём проведения контрольных доек (3 раза в месяц). На основании контрольных доек рассчитывали общую молочную продуктивность за 305 дней лактации. Анализ качества молока производили на приборе «Лактан 1-4» в соответствии с инструкциями производителя. Для измерения использовали свежее молоко.
В работе наряду с экспериментальными материалами использовались данные зоотехнического и племенного учета хозяйств, то есть племенные карточки (2-МОЛ).
Полученные результаты в ходе научных исследований обработаны биометрическим методом с использованием ЭВМ и программного приложения Microsoft Excel.
Результаты исследований. Анализ результатов ДНК-тестирования выявил следующее распределение животных по генотипам локуса пролактина: АА - 119 голов, АВ - 22 головы и ВВ - 7 голов (табл. 1). Частота встречаемости аллеля А составила 0,88, аллеля В - 0,12. В данном хозяйстве преобладают животные с генотипом АА, которые составляют 80,4%, а желательный генотип ВВ имеют лишь 4,7% животных. Следовательно в хозяйстве были использованы быки-производители в геноме которых отсутствовал аллель В.
1. Полиморфизм животных по гену пролактина
Г енотип Число животных Частота генотипа, %
АА 119 80,4
АВ 22 14,9
ВВ 7 4,7
В группах коров с генотипами по гену пролактина АА, АВ и ВВ выявлены отличия по молочной продуктивности (табл. 2). Наивысший удой (6168 кг молока) за 305 дней лактации имели животные с генотипом
АА, достоверно превосходили группу животных с генотипом ВВ (на 437,2 кг, Р<0,05). Коровы-первотелки с генотипом АВ имели удой за 305 дней на 64 кг ниже группы с генотипом АА.
Изучение динамики содержания жира в молоке коров за 305 дней лактации показало, что в молоке коров с генотипом пролактина ВВ данный показатель имел наивысшее значение (4,25%). У коров с генотипом пролактина АА содержание жира оказалось наименьшим - 3,87%, промежуточное положение занимали коровы с генотипом пролактина АВ -3,93%.
2. Молочная продуктивность коров-первотелок с различными генотипами
по гену пролактина
Показатели Г енотипы
АА АВ ВВ
Удой за 305 дней лактации, кг 6168,0±70,7* 6104,8±173,3 5730,8±160,4
Содержание жира, % 3,87±0,07 3,93±0,16 4,25±0,31
Количество молочного жира, кг 238,6±4,8 239,5±10,9 243,7±18,9
Содержание белка, % 3,10±0,02 3,11±0,03 3,13±0,02
Количество молочного белка, кг 191,2±2,9 190,9±5,9 179,4±4,8
Выход молочного жира у коров, имеющих в геноме аллель А пролактина в составе гомозиготного генотипа, был выше по сравнению с группой животных с генотипом ВВ на 4,2 и 5,1 кг соответственно.
Содержание белка в молоке животных с генотипом пролактина ВВ за 305 дней лактации было выше по сравнению с животными, имеющими АА аллельный вариант в своем геноме на 0,03% и 5,1 кг.
Заключение. В результате исследований коров-первотелок татарстанского типа холмогорской породы, методом ДНК-диагностики, выявлены три генотипа по локусу РЯЬ (АА, АВ, ВВ). При этом частота встречаемости генотипа АА составила 80,4 %. Частота аллеля "А" пролактина составило 0,88, аллеля "В" - 0,12. Животные, гомозиготные по локусу РЯЬ (ВВ), имели преимущество по сравнению с генотипами АА и АВ по содержанию и выходу жира, белка в молоке. По удою за 305 дней лактации животные, имеющие в геноме аллель А пролактина в составе гомо- и гетерозиготного генотипа, превосходили коров с генотипом ВВ.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Алипанах М. Хозяйственно-полезные признаки коров с различными генотипами каппа-казеина и пролактина : дисс.канд.с.-х.наук : 06.02.01, 06.02.04 / Алипанах Массуд. - Москва. - 2006. - 125 с. 2. Калашникова, Л.А. ДНК-технологии оценки сельскохозяйственных
животных/ Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко [и др]. - М.: ВНИИплем, Лесные поляны.-1999.- 148 с. 3. Хабибрахманова, Я. М. Полиморфизм молочных белков и гормонов крупного рогатого скота : автореф. дисс. канд. биол. наук : 06.02.01 / Хабибрахманова Язиля
Аминовна. - Лесные Поляны. - 2009. - 23 с.
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ПРОЛАКТИНА У КОРОВ ТАТАРСТАНСКОГО ТИПА
ХОЛМОГОРСКОГО СКОТА
Закирова Г.М., Султанов Р.Р., Зиннатова Ф.Ф.
Резюме
Определены генотипы у коров татарстанского типа холмогорской породы по локусу гена пролактина в племрепродукторе имени Вахитова Кукморского района Республики Татарстан. При анализе образцов крови, методом ПЦР-ПДРФ, установлено три генотипа АА, АВ, ВВ с процентным соотношением 80,4 : 14,9: 4,7 соответственно. Распределение частот аллелей было следующим: А аллель составил 0,88, В аллель - 0,12. Установлено влияние генотипа пролактина на молочную продуктивность коров.
POLYMORPHISM OF PROLACTIN IN TATARSTAN TYPE KHOLMOGOR
BREED COWS
Zakirova G.M., Sultanov R.R., Zinnatova F.F.
Summary
Tatarstan type genotypes of Kholmogor breed cows on prolactin gene locus at pedigree farm named by Vahitov were defined. PCR methods of cow blood analysis showed 3 genotypes such as AA, AB, BB with the following percentage 80,4 : 14,9: 4,7 accordingly. The distribution of allele frequency was the following : A allele - 0,88, B allele - 0,12.
УДК 619:612.1+612.015.3:636.7
НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ГЕМОПОЭЗА И ОБМЕННЫХ ПРОЦЕССОВ В ОРГАНИЗМЕ БЕРЕМЕННЫХ СУК
Зухрабов М.Г. Кононова Н.Ю.
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: эритроциты, гемоглобин, анемия, альбумин, общий белок, щелочная фосфатаза.