ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ИНТЕРЛЕЙКИНА-18 У БЕРЕМЕННЫХ С ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫМ РАЗРЫВОМ ПЛОДНЫХ ОБОЛОЧЕК: ИССЛЕДОВАНИЕ "СЛУЧАЙ - КОНТРОЛЬ"

Буштырева И.О.; Кузнецова Н.Б.; Дмитриева М.П.; Машкина Е.В.; Оксенюк О.С.; Баринова В.В.

Ийр8://с1о1.огд/10.25207/1608-6228-2021-28-2-144-156^^^^^^^^^^^^^^^^И| ф ву 40 | © Коллектив авторов, 2021

полиморфизм гена интерлейкииа-18 у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек: исследование «случай-контроль»

И. О. Буштырева1, Н. Б. Кузнецова1,2, М. П. Дмитриева2,3*, Е. В. Машкина4, О. С. Оксенюк2, В. В. Баринова1

1 Общество с ограниченной ответственностью «Клиника профессора Буштыревой» пер. Соборный, д. 58, к. 7, г. Ростов-на-Дону, 344010, Россия

2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

пер. Нахичеванский, д. 29, г. Ростов-на-Дону, 344000, Россия

3 Государственное бюджетное учреждение Ростовской области «Перинатальный центр» ул. Бодрая, д. 90, г. Ростов-на-Дону, 344068, Россия

4 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Южный федеральный университет»

ул. Большая Садовая, д. 105, к. 42, г. Ростов-на-Дону, 344006, Россия

АННОТАЦИЯ

Введение. В организме беременной женщины нарушение баланса между провоспали-тельными и противовоспалительными системами может приводить к формированию неблагоприятных для вынашивания беременности состояний и провоцировать осложнения беременности, одним из которых является преждевременный разрыв плодных оболочек.

Цель исследования — выявить влияние полиморфных вариантов -137С>0 (Г8187238), -6070Т (Г81946518), -656А>0 (Г85744228) промотора гена И-18 на развитие преждевременного разрыва плодных оболочек в сверхранние сроки беременности.

Методы. В исследование «случай-контроль» были включены 120 беременных женщин. Исследование проведено на базе государственного бюджетного учреждения Ростовской области «Перинатальный центр». Исследуемые 120 беременных были разделены на две группы: основная группа состояла из 80 беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек в сроке 22-27 недель 6 дней, которые находились на стационарном лечении в отделении патологии беременности; контрольная группа состояла из 40 женщин с физиологически протекающей беременностью в сроке 22-27 недель 6 дней, которые находились на амбулаторном наблюдении в консультативной поликлинике. Беременные исследуемых групп были сопоставимы по акушерско-гинеколо-гическому анамнезу. Критерии исключения из исследования: беременность двумя и более плодами, хромосомные аномалии плода, врожденные пороки развития у плода, беременность, наступившая вследствие вспомогательных репродуктивных технологий. Проведено генотипирование промоторного участка гена И-18 в позициях -137С>0, -6070Т, -656А>0, а также определение концентрации ИЛ-18 в периферической крови у беременных исследуемых групп.

Результаты. У беременных основной группы с преждевременным разрывом плодных оболочек в сыворотке крови концентрация интерлейкина-18 была статистически значимо выше, чем группе контроля (р = 0,001). По результатам генотипирования промотор-

ного участка гена IL-18 в основной группе беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек в 22-27 недель 6 дней статистически значимо чаще (р < 0,001) встречалась мутантная гомозигота (генотип CC) гена IL-18 в позиции -137С>С: 67% в основной группе и 27% в группе контроля соответственно.

Заключение. Среди беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек в сроке 22-27 недель 6 дней статистически значимо чаще регистрируется гомозиготное состояние полиморфного варианта гена IL-18 в позиции -1370>С, ассоциированное с повышением уровня ИЛ-18 в их крови.

Ключевые слова: преждевременный разрыв плодных оболочек, преждевременные роды, полиморфизм гена, цитокины, интерлейкин-18

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Для цитирования: Буштырева И.О., Кузнецова Н.Б., Дмитриева М.П., Машкина Е.В., Оксенюк О.С., Баринова В.В. Полиморфизм гена интерлейкина-18 у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек: исследование «случай-контроль». Кубанский научный медицинский вестник. 2021; 28(2): 144-156. https://doi.org/10.25207/1608-6228-2021-28-2-144-156

Поступила 04.12.2020

Принята после доработки 16.02.2021

Опубликована 27.04.2021

INTERLEUKIN-18 GENE POLYMORPHISM IN PREGNANCY WITH PREMATURE RUPTURE OF MEMBRANES: A CASE-CONTROL STUDY

Irina O. Bushtyreva1, Natal'ya B. Kuznetsova1,2, Mariya P. Dmitrieva2,3*, Elena V. Mashkina4, Oksana S. Oksenyuk2, Viktoriya V. Barinova1

1 "Klinika Professors Bushtyrevoy" LLC

Soborny per., 58, bld. 7, Rostov-on-Don, 344010, Russia

2 Rostov State Medical University

Nakhichevanskiy per., 29, Rostov-on-Don, 344000, Russia

3 Perinatal Centre

Bodraya str., 90, Rostov-on-Don, 344068, Russia

4 Southern Federal University

Bolshaya Sadovaya str., 105, bld. 42, Rostov-on-Don, 344006, Russia ABSTRACT

Background. Imbalanced pro- and anti-inflammatory systems can unfavourably condition carrying of pregnancy and provoke gestation complications, such as premature rupture of membranes.

Objectives. Assessing the contribution of SNP variants -137G>C (rs187238), -607G>T (rs1946518) and -656A>C (rs5744228) of the IL-18 gene promoter to the incidence of extremely preterm premature rupture of membranes.

Methods. A case-control study enrolled 120 pregnant women managed at the Perinatal Centre. The women were divided in two cohorts. The study cohort comprised 80 women with premature rupture of membranes at 22-27 weeks 6 days' gestation hospitalised in a high-risk pregnancy unit, a control cohort consisted of 40 women with physiological pregnancy at

22-27 weeks 6 days' gestation following outpatient counselling. The cohorts had comparable obstetric and gynaecological histories. The study exclusion criteria were: multiple gestation, foetal chromosomal anomalies, congenital foetal malformations, pregnancy due to assisted reproduction. Genotyping was performed at positions -137G>C, -607G>T and -656A>C of the IL-18 gene promoter with determining a peripheral blood IL-18 level in cohorts.

Results. The premature rupture of membranes cohort had a statistically higher serum interleu-kin-18 concentration compared to control (p = 0.001). Genotyping of the IL-18 gene promoter revealed a statistically higher rate of homozygous -137G>C mutation (CC genotype) in the premature rupture of membranes cohort at 22-27 weeks 6 days' term (p <0.001), 67 vs. 27% in control.

Conclusion. A homozygous IL-18 -137G>C polymorphic variant associated with elevated blood IL-18 levels is statistically more common in pregnant women having premature rupture of membranes at 22-27 weeks 6 days' gestation.

Keywords: premature rupture of membranes, preterm labour, gene polymorphism, cytokines, interleukin-18

Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest.

For citation: Bushtyreva I.O., Kuznetsova N.B., Dmitrieva M.P., Mashkina E.V., Ok-senyuk O.S., Barinova V.V. Interleukin-18 gene polymorphism in pregnancy With premature rupture of membranes: A case-control study. Kubanskii Nauchnyi Meditsinskii Vestnik. 2021; 28(2): 144-156. (In Russ., English abstract). https://doi.org/10.25207/1608-6228-2021-28-2-144-156

Submitted 04.12.2020 Revised 16.02.2021

Published 27.04.2021

ВВЕДЕНИЕ

Воспалительный фактор вносит большой вклад в осложненное течение беременности. К одному из наиболее неблагоприятных осложнений беременности, часто ассоциированному с воспалительным фактором, относится преждевременный разрыв плодных оболочек (ПРПО), особенно неблагоприятные исходы при ПРПО встречаются в сроке беременности от 22 до 27 недель 6 дней [1-7].

Система «мать—плацента—плод», иными словами, фетоплацентарная система, — регулирующее звено в управлении процессами как при физиологически протекающей беременности, так и при развитии гестационных осложнений. Полиморфизм генетических факторов, формирующих фетоплацентарную систему, в ряде случаев определяет особенности работы системы «мать—плацента—плод» [8-11]. В норме при беременности соблюдается оптимальный баланс между прово-спалительными и противовоспалительными цито-кинами в фетоплацентарном комплексе [12-18]. Нарушение баланса между провоспалительны-ми и противовоспалительными системами может приводить к формированию неблагоприятных для развития беременности состояний и провоцировать гестационные осложнения, одним из которых является ПРПО [18-25].

Изучение особенностей многогранной структуры цитокиновой системы, расшифровка путей регуляции функциональной активности клеток иммунной системы и генетического контроля иммунного ответа могут приблизить нас к решению проблемы предотвращения осложнений беременности, ассоциированных с воспалительным фактором.

Для многих генов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов известны замены одиночных нуклеотидов (Single Nucleotide Polymorphism — SNP), которые располагаются в регуляторных участках генов. Данная замена одиночных нуклеодитов в гене цитокина оказывает влияние на транскрипторную активность. При этом происходит изменение концентрации данного цитокина в плазме крови в сторону увеличения или уменьшения [1, 8, 12].

Иммунный ответ является индивидуальным в организме каждого человека, при встрече с патогенными факторами может активироваться как гуморальный, так и клеточный иммунитет. Путь, по которому идет активация защитных механизмов организма, имеет большое значение.

Цитокины — это биологически активные эндогенные медиаторы. Цитокины обеспечивают обмен информацией между различными клетками внутри одного органа и формирование связи

между органами и системами как в физиологических условиях, так и при воздействии патогенных факторов [8, 24, 26, 27]. При патологических состояниях уровень цитокинов значительно возрастает, тогда как при физиологически протекающей беременности их выработка находится на минимальном уровне. По данным литературы, различия в генах, контролирующих защитные системы организма, могут оказывать влияние на уровень продукции цитокинов и, в свою очередь, на развитие и реализацию иммунного ответа [3, 17].

Отдельные варианты генотипов цитокинов могут быть связаны с изменением биосинтеза соответствующего белкового продукта, что также оказывает влияние на характер течения болезни, возникновение определенных осложнений заболевания [8, 15, 20, 21, 24].

Состояние здоровья и благополучия в организме в целом характеризуется постоянной сбалансированной продукцией цитокинов на низком уровне, что необходимо для поддержания гоме-остаза. При повышении продукции некоторых цитокинов могут возникать различные патологические состояния и заболевания, тяжесть которых варьирует от легкой до выраженной [8, 12, 13, 15, 22].

В связи со всем вышеизложенным крайне важно определение наследственной генетической предрасположенности для понимания молекулярных механизмов развития воспалительных

реакций в организме, особенно в период беременности.

Очень важную роль среди иммунорегулирую-щих противовоспалительных цитокинов занимает интерлейкин-18 (ИЛ-18): активирует продукцию гамма интерферона (1Р^), фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а), интерлейкина-1 (ИЛ-1), интерлейкина-2 (ИЛ-2), повышает пролифера-тивную активность Т-лимфоцитов, увеличивает литическую активность НК-клеток. ИЛ-18 принимает участие в формировании клеточного и гуморального, врожденного и приобретенного иммунного ответов [13]. У человека ген И-18 расположен в хромосоме 1^22.2^22.3.

Цель исследования — выявить влияние полиморфных вариантов -1370>0 (Г8187238), -6070Т (Г81946518), -656А>0 (Г85744228) промотора гена И-18 на развитие преждевременного разрыва плодных оболочек в сверхранние сроки беременности.

МЕТОДЫ

В исследование «случай-контроль» были включены 120 беременных женщин в сроке гестации 22-27 недель 6 дней. Исследование проведено на базе государственного бюджетного учреждения Ростовской области «Перинатальный центр» (ГБУ РО «ПЦ»). Исследуемые 120 беременных были разделены на две группы: основная группа состояла из 80 беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек в сроке

Беременные в сроке от 22 до 28 недель, п = 120

1А группа 1Б группа

Первородящие Повторнородящие

N = 24 N = 56

1-я группа: беременные с ПРПО, n = 80

2-я группа: условно здоровые беременные без ПРПО, п = 40

2А группа 2Б группа

Первородящие Повторнородящие

N = 20 N = 20

Интерлейкин-18

Генотипирование промоторного участка гена ТЬ-18 в позициях -1370С, -6070Т, -656А>С

Рис. 1. Дизайн исследования. Fig. 1. Experimental design.

Концентрация интерлейкина-18 в сыворотке крови

22-27 недель 6 дней, которые находились на стационарном лечении в отделении патологии беременности; контрольная группа состояла из 40 женщин в сроке 22-27 недель 6 дней с физиологически протекающей беременностью, которые находились на амбулаторном наблюдении в консультативной поликлинике (схема дизайна исследования представлена на рисунке 1).

Средний возраст беременных основной группы составил 29,7 ± 4,3 года, группы контроля — 29,4 ± 5,4 года (^-критерий Манна — Уитни р = 0,87), группы сопоставимы. Беременные обеих клинических групп были сопоставимы по акушерско-гинекологическому анамнезу (рис. 3).

Критерии включения и исключения из исследования приведены на рисунке 2.

Акушерско-гинекологический анамнез у пациенток исследуемых групп анализировали по данным, указанным в обменной карте. Один самопроизвольный аборт (до 12 недель) в основной группе встречался у 20 пациенток (25%), в группе контроля — у 9 (24%) (р-уа!-ие > 0,05); один поздний самопроизвольный аборт (от 12 до 22 недель) в основной группе — у 24 человек (30%), в контрольной группе — у 6 (24%) (р-уа!ие > 0,05); одна неразвивающаяся беременность встречалась в основной группе у 14 женщин (17%), в группе контроля — 8 (20%) (р-уа!ие > 0,05); привычное невынашивание беременности в основной группе было у 14 беременных (17%), в контрольной группе — у 6 (15%) (р-уа!ие > 0,05); один медицинский аборт встречался у 28 женщин (35%) основной группы и у 18 пациенток (44%) контрольной группы (р-уа!ие > 0,05); два и более медицинских аборта встречалось в основной группе у 16 пациен-

ток (20%), в группе контроля — у 10 (24%) (р-уа!-ие > 0,05); кесарево сечение в основной группе было у 15 женщин (19%), в группе контроля — у 6 (15%) (р-уа!ие > 0,05); оперированная ранее шейка матки встречалась в основной группе у 18 женщин (22%), в группе контроля — у 8 (20%) (р-уа!ие > 0,05). Сравнение данных аку-шерско-гинекологического анамнеза у пациенток исследуемых групп установило отсутствие статистически значимых различий, что говорит о том, что анамнестические факторы обладают малой прогностической значимостью в прогнозировании наступления ПРПО в сверхранние сроки гестации (рис. 3).

В исследование включены беременные с консультативно-диагностического поликлинического приема и госпитализированные в отделение патологии беременности ГБУ РО «ПЦ» в период с октября 2017 по январь 2020 года.

Всем беременным было проведено генотипи-рование полиморфных локусов промоторных регионов гена И-18 в позициях -1370>С, -607С>Т, -656А>С, а также определение концентрации ИЛ18 в периферической крови.

Забор биологического материала (крови) у пациенток основной группы осуществлялся при поступлении в отделение патологии беременных до начала лечения антибактериальными препаратами в первые 12 часов после постановки диагноза ПРПО, у пациенток контрольной группы — на амбулаторном этапе в поликлиническом отделении в сопоставимые сроки беременности.

Методика исследования заявленных в исследовании позиций отображена на рисунке 4.

КРИТЕРИИ ВКЛЮЧЕНИЯ I КРИТЕРИИ ИСКЛЮЧЕНИЯ

^ срок беременности 22-28 недель;^ хромосомные аномалии; ^ однородная беременность ^ врожденные пороки плода,

установленные в течение беременности;

^ многоплодная беременность;

^ тяжелая экстрагенитальная патология;

^ ИППП (острая фаза воспаления);

^ беременность вследствие ВРТ

Рис. 2. Критерии включения и исключения беременных в группу исследования.

Примечание: ИППП — инфекции, передаваемые половым путем; ВРТ — вспомогательные

репродуктивные технологии.

Fig. 2. Study inclusion and exclusion criteria.

Note: ИППП — sexually transmitted infection, ВРТ — assisted reproductive technology.

Операции на шейке матки в анамнезе

Кесарево сечение в анамнезе 2 и более медицинских аборта в анамнезе 1 медицинский аборт в анамнезе Привычное невынашивание беременности 1 неразвивающаяся беременность в анамнезе 1 поздний самопроизвольный аборт в анамнезе

1 самопроизвольный аборт в анамнезе

(до 12 недель)

20 »22

0 10 20 30 40 50 основная группа: с ПРПО, n = 80 ■ контрольная группа: n = 40

Рис. 3. Акушерско-гинекологический анамнез у пациенток исследуемых групп (по данным обменной карты). Fig. 3. Obstetric and gynaecological histories in study cohorts

Интерлейкин-18

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

к. ш

Генотипирование промоторного участка гена IL-18 в позициях -137G>C, -607G>T, -656А>С Концентрация интерлейкина-18

в сыворотке крови

■

Выделение геномной ДНК из периферической венозной крови, стабилизированной ЭДТА, проводили с помощью комплекта реагентов «ПРОБА-ГС-ПЛЮС» («ДНК-Технология», Россия). Коммерческими наборами («ДНК-Технология», Россия) определяли

однонуклеотидные замены: -137G>C (ге187238), -607G>T (гз1946518), -656A>C (ге5744228) гена 1Ь-18 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени с помощью детектирующего амплификатора «ДТлайт» («ДНК Технология», Россия)

Образцы крови, забранные в вакуумные пробирки с активатором свертывания, центрифугировали, полученную сыворотку аликвотировали и хранили при -70 °C. После однократного размораживания методом иммуноферментного анализа определяли концентрацию ИЛ-18 в сыворотке крови коммерческими наборами (АО «Вектор Бест», Россия) с использованием анализатора Wallac 1420 Multilaber Counter (Victor-2) (PerkinElmer, Финляндия), при длине волны 450 нм в соответствии с протоколом проведения исследования

Рис. 4. Методика исследования исследуемого биологического материала. Fig. 4. Biosample processing protocols.

Статистическая обработка полученных данных проведена с помощью пакета прикладных программ IBM SPSS Statistics 23. С использованием следующих критериев: непараметрический ^-критерий Манна — Уитни, критерий х2 Пирсона, точный двусторонний критерий Фишера, логистическая регрессия с расчетом относительного риска и отношения шансов.

РЕЗУЛЬТАТЫ

В результате исследования установлено, что у беременных с ПРПО в 22-27 недель 6 дней (основная группа) уровень ИЛ-18 в сыворотке крови составил 334 [267; 384] пг/мл, в группе контроля — 209 [143; 304] пг/мл (р = 0,001, непараметрический критерий Манна — Уитни) (табл. 1).

Таблица 1. Уровень ИЛ-18 в периферической крови беременных исследуемых групп Table 1. Peripheral blood IL-18 level in study cohorts

Уровень цитокина в крови, пг/мл Основная группа, n = 80 Контрольная группа, n = 40 p-value (критерий Манна — Уитни)

ИЛ-18 334 [267; 384] 209 [143; 304] 0001

Таблица 2. Частоты генотипов по полиморфным вариантам гена IL-18 у пациенток исследуемых групп Table 2. IL-18 SNP haplotype frequencies in study groups

№ группы Вариант генотипа Полиморфизм гена IL18

-137 0>С -607 G>T -656 А>С

го с с Гомозигота по аллели дикого типа (нормальная гомозигота) 5 (6%) 59 (74%) 54 (67%)

ср Гетерозигота 22 (27%) 12 (15%) 26 (33%)

rç Гомозигота по полиморфному варианту гена (мутантная гомозигота) 53 (67%) 9 (11%) 0 (0%)

го с с Гомозигота по аллели дикого типа (нормальная гомозигота) 22 (54%) 28 (70%) 18 (46%)

^ ср Гетерозигота 8 (19%) 6 (15%) 18 (46%)

к С\1 Гомозигота по полиморфному варианту гена (мутантная гомозигота) 10 (27%) 6 (15%) 4 (8%)

Таблица 3. Ассоциация полиморфизма -137G>С гена IL-18 с преждевременным разрывом плодных оболочек Table 3. Association of IL-18 -137G>C variant with premature rupture of membranes

IL-18 -137G^ Основная группа Контрольная группа ОШ 95% доверительный интервал p-value (логистическая регрессия)

Генотип GG 6% 54% 5,6 1,9 -16,2 <0,001

Генотип GС 27% 19%

Генотип СС 67% 27%

Проведено исследование полиморфизма гена И-18 в позициях: -137С>С, -607С>Т, -656А>С. Были получены следующие результаты (табл. 2): по полиморфизму гена И-18: -137С>С было следующее распределение генотипов: в 1-й группе — гомозигота по аллели С (нормальная гомозигота, генотип СС) в 6% (п = 5), гетерозигота (генотип СС) в 27% (п = 22), мутантная гомозигота (генотип СС) в 67% (п = 53), во 2-й группе — нормальная гомозигота СС в 54% (п = 22), гетерозигота (генотип СС) в 19% (п = 8), мутантная гомозигота по аллели С (генотип СС) в 27% (п = 10); по полиморфизму гена И-18: -607С>Т было следующее распределение генотипов: в 1 группе — генотип СС в 74% (п = 59), генотип СТ в 15% (п = 12), генотип ТТ в 11% (п = 9), во 2-й — генотип СС в 70% (п = 28), генотип СТ в 15% (п = 6), генотип ТТ в 15% (п = 6); по полиморфизму гена И-18: -656А>С было следующее распределение генотипов: в 1-й группе — нормальная гомозигота (генотип АА) в 67% (п = 54), гетерозигота (генотип АС) в 33% (п = 26), мутантная гомозигота (генотип СС) в 0%, во 2-й группе — нормальная гомозигота (генотип АА) в 46% (п = 18), гетерозита (генотип АС) в 46% (п = 18), мутантная гомозигота (генотип СС) в 8% (п = 4).

По результатам исследования в группе беременных с ПРПО в 22-27 недель 6 дней стати-

стически значимо чаще встречалась (р < 0,001, точный двусторонний критерий Фишера) мутантная гомозигота (генотип СС) по полиморфному варианту /И8:-137С>С: 67% в основной группе и 27% в группе контроля (табл. 2).

Оценка значимости наследственных факторов с применением метода логистической регрессии показала, что генотип матери СС (мутантная гомозигота) гена И-18 в позиции -137 С>С повышает риск ПРПО в 22-27 недели 6 дней в 5,6 раза (табл. 3).

ОБСУЖДЕНИЕ

Резюме результатов исследования

Результаты нашего исследования показали, что в сыворотке крови беременных основной группы (с ПРПО в 22-27 недель 6 дней) концентрация интерлейкина 18 статистически значимо выше, чем у беременных группы контроля.

Изучив полиморфизм гена И-18, мы выявили значимые отличия в частотах генотипов по локу-су -137С>С гена И-18. Среди женщин основной группы (ПРПО) частота встречаемости гомозигот по полиморфному варианту гена (генотип СС) в позиции -137С>С статистически значимо выше по сравнению с группой контроля. На основании

этого нами сделан вывод, что генотип -137СС гена 18 является генотипом высокого риска развития преждевременного разрыва плодных оболочек в сроке 22-27 недель 6 дней.

Кроме того, в основной группе беременных статистически значимо большее количество женщин имели носительство гомозиготы (генотип СС) по полиморфному варианту гена ИЛ-18: -1370>С, что сочеталось со статистически значимым увеличением концентрации ИЛ-18 в сыворотке крови в данной группе исследуемых по сравнению с контрольной. На основании этого нами сделан вывод, что носительство гомозиготы ИЛ-18: -1370>С в нашем исследовании было ассоциировано с повышенной концентрацией ИЛ-18 в сыворотке крови в группе беременных с ПРПО.

Обсуждение результатов исследования

В данном исследовании нами были выявлены различия в частоте встречаемости генотипов гена интерлейкина-18 в группах беременных с ПРПО и с физиологическим течением геста-ции. Данные различия сопровождались изменениями системного цитокинового статуса. На основании этого можно высказать гипотезу о том, что первичным в нарушении гомеостаза цитоки-нов может выступать нарушение уровня экспрессии белка (а именно ИЛ-18) ввиду носительства мутантного варианта гена.

Иммунный ответ является индивидуальным в организме каждого человека, при встрече с патогенными факторами может активироваться как гуморальный, так и клеточный иммунитет. Путь, по которому идет активация защитных механизмов организма, имеет большое значение.

По данным литературы, физиологически протекающая беременность сопровождается активацией провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в фетоплацентарной области [21, 24, 25].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты нашего исследования показали, что беременные с ПРПО в сверхранние сроки (22-27 недель 6 дней) характеризуются статистически значимо частым носительством гомозиготного состояния полиморфизма -137G>C гена IL-18, что ассоциируется с повышением уровня ИЛ-18 в их крови. Выявление носительства указанного полиморфного варианта гена у беременных женщин может служить в качестве предик-тивного маркера развития преждевременного разрыва плодных оболочек в сроке 22-27 недель 6 дней.

СООТВЕТСТВИЕ ПРИНЦИПАМ ЭТИКИ

Все лица, вошедшие в исследование, подписали письменное информированное добровольное согласие. Проведенное исследование одобрено локальным независимым Этическим комитетом федерального государственного бюджетного учреждения высшего образования «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (пер. Нахичеванский, д. 29, г. Ростов-на-Дону, 344000, Россия), протокол № 18/17 от 26.10.2017 г.

COMPLIANCE WITH ETHICAL STANDARDS

All persons in the survey provided a free written informed consent. The study was approved by the Local Independent Committee for Ethics of Rostov State Medical University (Nakhichevanskiy per., 29, Rostov-on-Don, 344000, Russia), Minutes No. 18/17 of 26 October, 2017.

ИСТОЧНИК ФИНАНСИРОВАНИЯ

Авторы заявляют об отсутствии спонсорской поддержки при проведении исследования.

FINANCING SOURCE

The authors declare that no funding was received for this study.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Белоусова В.С., Свитич О.А., Тимохина Е.В., Стрижаков А.Н., Богомазова И.М. Полиморфизм генов цитокинов IL-1B, TNF, IL-1RA И IL-4 повышает риск развития преждевременных родов. Биохимия. 2019; 84(9): 1281-1288. DOI: 10.1134/ S0320972519090069

2. Дударева Ю.А., Гурьева В.А., Фильчакова О.Н. Те -чение, исход беременности и акушерская тактика при преждевременном разрыве плодных оболочек в 24-32 недели. Российский медицинский журнал. 2018; 24(5): 237-241. DOI: 10.18821/08692106-2018-24-5-237-241

3. Любомирська К.С. 1муногенетичн чинники роз-витку передчасного розриву плодових оболо-нок при недоношенш ваптност в Запорiзькiй область Патоло^я. 2018; 15(44): 309-318. DOI: 10.14739/2310-1237.2018.3.151725

4. Тошева И.И., Ихтиярова ГА. Исходы беременности при преждевременном разрыве плодных оболочек. РМЖ. Мать и дитя. 2020; 3(1): 16-19. DOI: 10.32364/2618-8430-2020-3-1-16-19

5. Lucaroni F., Morciano L., Rizzo G., D' Antonio F., Buon-uomo E., Palombi L., Arduini D. Biomarkers for predict-

ing spontaneous preterm birth: an umbrella systematic review. J. Matern. Fetal. Neonatal. Med. 2018; 31(6): 726-734. DOI: 10.1080/14767058.2017.1297404

6. Phillips C., Velji Z., Hanly C., Metcalfe A. Risk of recurrent spontaneous preterm birth: a systematic review and meta-analysis. BMJ Open. 2017; 7(6): e015402. DOI: 10.1136/bmjopen-2016-015402

7. Menon R., Richardson L.S. Preterm prelabor rupture of the membranes: A disease of the fetal membranes. Semin. Perinatol. 2017; 41(7): 409-419. DOI: 10.1053/j.semperi.2017.07.012

8. Барковський Д. G. Змши Т-хелпер асоцшованих цитоюжв при 3arpo3i невиношування BariTHOCTi. Запор'зький медичний журнал. 2019; 21(3(114)): 373-376. DOI: 10.14739/2310-1210.2019.3.169191

9. Liubomyrska K.S., Kamyshnyi O.M., Krut Yu.Ya. Association between single nucleotide polymorphis-mof immunoregulatory genes and preterm premature ruptureof membranes in preterm labour. Patholo-gia. 2018; 15(2(43)); 187-193. DOI: 10.14739/23101237.2018.2.141400

10. Панкратьева Л.Л., Мухин В.Е., Милева О.И., Володин Н.Н., Румянцев А.Г Новая концепция иммунологической регуляции системы «Мать-Плод»: плод как ключевой игрок в поддержании иммунного гомеостаза. Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. 2020; 99(1): 45-51. DOI: 10.24110/0031-403X-2020-99-1 -45-51

11. Pereyra S., Sosa C., Bertoni B., Sapiro R. Transcrip-tomic analysis of fetal membranes reveals pathways involved in preterm birth. BMC Med. Genomics. 2019; 12(1): 53. DOI: 10.1186/s12920-019-0498-3

12. Жуковец И.В., Лещенко О.Я., Андриевская И.А., Петрова К.К. Роль цитокинов в развитии ранних потерь беременности у женщин с метаболическими нарушениями в анамнезе. Acta Biomedica Scientifica (East Siberian Biomedical Journal). 2020; 5(4): 8-13. DOI: 10.29413/ABS.2020-5.4.1

13. Крукиер И.И., Авруцкая В.В., Григорьянц А.А., Лев-кович М.А., Никашина А.А., Ерджанян Л.Л. Цито-кины сыворотки крови и околоплодных вод при некоторых осложнениях беременности. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2019; 14(2): 380-382. DOI: 10.14300/mnnc.2019.14095

14. Крукиер И.И., Левкович М.А., Михельсон А.Ф., Ле-беденко Е.Ю., Ерджанян Л.Л., Михельсон А.А., Смолянинов ГВ., Попова Н.Н. Влияние дисбаланса цитокинов околоплодных вод и сыворотки крови женщины на развитие преждевременных родов. Доктор.Ру. 2019; 4(159): 19-22. DOI: 10.31550/1727-2378-2019-159-4-19-22

15. Лебедева О.П., Ивашкевич А.Н. Экспрессия мРНК IL-2, IL10, IL-12 и IL-23 в децидуальной ткани у пациенток с неразвивающейся беременностью и самопроизвольными выкидышами ранних сроков. Научные результаты биомедицинских исследований. 2019; 5(3): 71-81. DOI: 10.18413/26586533-2019-5-3-0-8

16. Малышкина А.И., Сотникова Н.Ю., Крошкина Н.В., Таланова И.Е., Куст А.В., Козелкова Е.В. Особенности содержания цитокинов периферической крови у беременных женщин с привычным невынашиванием беременности. Клиническая лабораторная диагностика. 2020; 65(5): 299-303. DOI: 10.18821/0869-2084-2020-65-5-299-303

17. Pandey M., Chauhan M., Awasthi S. Interplay of cytokines in preterm birth. Indian J. Med. Res. 2017; 146(3): 316-327. DOI: 10.4103/ijmr.IJMR_1624_14

18. Баев О.Р., Тысячный О.В., Климов В.А., Балашов И.С. Клинико-экономическая эффективность теста определения плацентарного а-ми-кроглобулина-1 и клинической диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство и гинекология. 2019; 8: 71-77. DOI: 10.18565/aig.2019.8.71-76

19. Красный А.М., Кан Н.Е., Тютюнник В.Л., Садекова А.А., Сарибекова А.Г, Кокоева Д.Н., Салпагарова З.Х., Меджидова М.К., Вторушина В.В., Кречетова Л.В. Прогнозирование преждевременных родов путем комбинированного определения цитоки-нов и внеклеточной ДНК. Акушерство и гинекология. 2019; 1: 86-91. DOI: 10.18565/aig.2019.1.86-91

20. Нариманова ГВ., Гулиев М.Р., Шахвердиева И.Д., Керимова И.А. Сравнительная оценка цитокино-вой продукции при физиологической и осложненной TORCH-инфекциями беременности. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2019; 18(5): 61-65. DOI: 10.20953/1726-1678-20195-61-65

21. Щербаков В.И., Поздняков И.М., Ширинская А.В., Волков М.В. Роль провоспалительных цитокинов в патогенезе преждевременных родов и преэклампсии. Российский вестник акушера-гинеколога. 2020; 20(2): 15-21. DOI: 10.17116/ro-sakush20202002115

22. Yockey L.J., Iwasaki A. Interferons and proinflammatory cytokines in pregnancy and fetal development. Immunity. 2018; 49(3): 397-412. DOI: 10.1016/j.immu-ni.2018.07.017

23. Huang L., Hou Q., Huang Y., Ye J., Huang S., Tian J., Tang R., Liu C., Long Y., Qin X., Weng X., Huang Y., Li M., Yang X., Mo Z. Serum multiple cytokines for the prediction of spontaneous preterm birth in asymptomatic women: A nested case-control study. Cytokine. 2019; 117: 91-97. DOI: 10.1016/j.cyto.2019.02.007

24. Новикова С.В., Дальниковская Л.А., Будыкина Т.С., Бирюкова Н.В., Климова И.В. Диагностическое и прогностическое значение исследования биохимических маркеров угрозы прерывания беременности у женщин с укороченной шейкой матки. Российский вестник акушера-гинеколога. 2020; 20(4): 18-26. DOI: 10.17116/rosakush20202004118

25. Шадеева Ю.А., Гурьева В.А., Николаева М.Г, Евтушенко Н.В. Прогнозирование риска внутриутробной инфекции плода при сверхранних и ранних преждевременных родах, индуцированных

разрывом околоплодных оболочек. Акушерство, Гинекология и Репродукция. 2020; 14(4): 490-501. DOI: 10.17749/2313-7347/ob.gyn.rep.2020.110

26. Raba G., Tabarkiewicz J. Cytokines in Preterm Delivery: Proposal of a New Diagnostic Algo-

REFERENCES____

1. Belousova V.S., Timokhina E.V., Strizhakov A.N., Bo-gomazova I.M., Svitich O.A. Polymorphism of the IL-1p, TNF, IL-1RA and IL-4 cytokine genes significantly increases the risk of preterm birth. Biochemistry (Moscow). 2019; 84(9); 1040-1046. DOI: 10.1134/ S0006297919090062

2. Dudareva Yu.A., Guryeva V.A., Filchakova O.N. Course and outcome of pregnancy, obstetric tactics by preterm rupture of membranes at the term of 2432 weeks. Medical Journal of the Russian Federation. 2018; 24(5): 237-241 (In Russ., English abstract). DOI: 10.18821/0869-2106-2018-24-5-237-241

3. Liubomyrska K.S. Immunogenetic factors for the development of premature rupture of membranes in preterm labour in Zaporizhzhia region. 2018; 15(44): 309-318 (In Ukr., English abstract). DOI: 10.14739/2310-1237.2018.3.151725

4. Tosheva I.I., Ikhtiyarova G.A. Pregnancy outcomes in preterm premature rupture of the membranes. Russian Journal of Woman and Child Health. 2020; 3(1): 1619 (In Russ., English abstract). DOI: 10.32364/26188430-2020-3-1-16-19

5. Lucaroni F., Morciano L., Rizzo G., D' Antonio F., Buon-uomo E., Palombi L., Arduini D. Biomarkers for predicting spontaneous preterm birth: an umbrella systematic review. J. Matern. Fetal. Neonatal. Med. 2018; 31(6): 726-734. DOI: 10.1080/14767058.2017.1297404

6. Phillips C., Velji Z., Hanly C., Metcalfe A. Risk of recurrent spontaneous preterm birth: a systematic review and meta-analysis. BMJ Open. 2017; 7(6): e015402. DOI: 10.1136/bmjopen-2016-015402

7. Menon R., Richardson L.S. Preterm prelabor rupture of the membranes: A disease of the fetal membranes. Semin. Perinatol. 2017; 41(7): 409-419. DOI: 10.1053/j.semperi.2017.07.012

8. Barkovskyi D.Ye. Changes in T-helper associated cytokines and the risk of miscarriage. Zaporozhye Medical Journal. 2019; 21(3(114)): 373-376 (In Ukr., English abstract). DOI: 10.14739/2310-1210.2019.3.169191

9. Liubomyrska K.S., Kamyshnyi O.M., Krut Yu.Ya. Association between single nucleotide polymorphis-mof immunoregulatory genes and preterm premature ruptureof membranes in preterm labour. Patholo-gia. 2018; 15(2(43)); 187-193. DOI: 10.14739/23101237.2018.2.141400

10. Pankratyeva L.L., Muhin V.E., Mileva O.I., Volo-din N.N., Rumyantsev A.G. A new concept of immu-nological regulation of the Mother-Fetus system: the

rithm. J. Immunol. Res. 2018; 2018: 8073476. DOI: 10.1155/2018/8073476

27. Tengvall S., Che K.F., Linden A. Interleukin-26: An Emerging Player in Host Defense and Inflammation. J. Innate. Immun. 2016; 8(1): 15-22. DOI: 10.1159/000434646

fetus as a key player in maintaining immune homeostasis. Pediatria. Journal named after G.N. Speran-sky. 2020; 99(1): 45-51 (In Russ., English abstract). DOI: 10.24110/0031-403X-2020-99-1-45-51

11. Pereyra S., Sosa C., Bertoni B., Sapiro R. Transcrip-tomic analysis of fetal membranes reveals pathways involved in preterm birth. BMC Med. Genomics. 2019; 12(1): 53. DOI: 10.1186/s12920-019-0498-3

12. Zhukovets I.V., Leshchenko O.Y., Andrievskaya I.A., Petrova K.K. The Role of Cytokines in the Development of Early Pregnancy Loss in Women with a History of Metabolic Disorders. Acta Biomedica Scientifica (East Siberian Biomedical Journal). 2020; 5(4): 8-13 (In Russ., English abstract). DOI: 10.29413/ABS.2020-5.4.1

13. Krukier I.I., Avrutskaya V.V., Grigoriants A.A., Levkov-ich M.A., Nikashina A.A., Yerdzhanyan L.L. Cytokines of blood serum and amniotic fluid in some complications of pregnancy. Medical News of North Caucasus. 2019; 14(2): 380-382 (In Russ., English abstract). DOI: 10.14300/mnnc.2019.14095

14. Krukier I.I., Levkovich M.A., Mikhelson A.F., Lebeden-ko E.Yu., Erdzhanyan L.L., Mikhelson A.A., Smoly-aninov G.V., Popova N.N. The Impact of impaired serum and amniotic fluid cytokine profiles on the risk of preterm delivery. Doctor.Ru. 2019; 4(159): 19-22 (In Russ., English abstract). DOI: 10.31550/1727-23782019-159-4-19-22

15. Lebedeva OP, Ivaschevici AN. IL-2, IL-10, IL-12 and IL-23 mRNA expression in the decidual tissue in patients with missed and spontaneous abortions in early pregnancy. Research Results in Biomedicine. 2019; 5(3): 71-81 (In Russ., English abstract). DOI: 10.18413/2658-6533-2019-5-3-0-8

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

16. Malyshkina A.I., Sotnikova N.Y., Kroshkina N.V., Ta-lanova I.E., Kust A.V., Kozelkova E.V. Peculiarities of the content of peripheral blood cytokines in pregnant women with a habitual miscarriage. Russian Clinical Laboratory Diagnostics. 2020; 65(5): 299-303 (In Russ., English abstract). DOI: 10.18821/0869-20842020-65-5-299-303

17. Pandey M., Chauhan M., Awasthi S. Interplay of cytokines in preterm birth. Indian J. Med. Res. 2017; 146(3): 316-327. DOI: 10.4103/ijmr.IJMR_1624_14

18. Baev O.R., Tysyachnyi O.V., Klimov V.A., Balash-ov I.S. Clinical and economic effectiveness of a pla-cental A-microglobulin-1 test and that of the clinical diagnosis of premature rupture of membranes. Akush-erstvo i Ginekologiia. 2019; 8: 71-77 (In Russ., English abstract). DOI: 10.18565/aig.2019.8.71-76

19. Krasnyi A.M., Kan N.E., Tyutyunnik V.L., Sadeko-va A.A., Saribekova A.G., Kokoeva D.N., Salpagaro-va Z.Kh., Medzhidova M.K., Vtorushina V.V., Krecheto-va L.V. Predicting preterm labor by combined testing of cytokines and cell-free DNA. Akusherstvo i Gine-kologiia. 2019; 1: 86-91 (In Russ., English abstract). DOI: 10.18565/aig.2019.1.86-91

20. Narimanova G.V., Guliev M.R., Shakhverdieva I.J., Kerimova I.A. A comparative assessment of cytokine production in uncomplicated pregnancy and pregnancy complicated by TORCH infections. Gynecology, Obstetrics and Perinatology. 2019; 18(5): 61-65 (In Russ., English abstract). DOI: 10.20953/1726-16782019-5-61-65

21. Shcherbakov V.I., Pozdnyakov I.M., Shirinskaya A.V., Volkov M.V. Role of pro-inflammatory cytokines in the pathogenesis of preterm birth and preeclamp-sia. Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2020; 20(2): 15-21 (In Russ., English abstract). DOI: 10.17116/rosakush20202002115

22. Yockey L.J., Iwasaki A. Interferons and proinflammatory cytokines in pregnancy and fetal development. Immunity. 2018; 49(3): 397-412. DOI: 10.1016/j.im-muni.2018.07.017

23. Huang L., Hou Q., Huang Y., Ye J., Huang S., Tian J., Tang R., Liu C., Long Y., Qin X., Weng X., Huang Y.,

Li M., Yang X., Mo Z. Serum multiple cytokines for the prediction of spontaneous preterm birth in asymptomatic women: A nested case-control study. Cytokine. 2019; 117: 91-97. DOI: 10.1016/j.cyto.2019.02.007

24. Novikova S.V., Dal'nikovskaya L.A., Budykina T.S., Biryukova N.V., Klimova I.V. Diagnostic and prognostic value of the study of biochemical markers of the threat of abortion in women with a short cervix. Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2020; 20(4): 18-26 (In Russ., English abstract). DOI: 10.17116/ro-sakush20202004118

25. Shadeeva Yu.A., Guryeva V.A., Nikolaeva M.G., Ev-tushenko N.V. Predicting intrauterine fetal infection risk in extremely preterm and early preterm births induced by rupture of the amniotic membranes. Obstetrics, Gynecology and Reproduction. 2020; 14(4): 490-501 (In Russ., English abstract). DOI: 10.17749/2313-7347/ ob.gyn.rep.2020.110

26. Raba G., Tabarkiewicz J. Cytokines in Preterm Delivery: Proposal of a New Diagnostic Algorithm. J. Immunol. Res. 2018; 2018: 8073476. DOI: 10.1155/2018/8073476

27. Tengvall S., Che K.F., Linden A. Interleukin-26: An Emerging Player in Host Defense and Inflammation. J. Innate. Immun. 2016; 8(1): 15-22. DOI: 10.1159/000434646

ВКЛАД АВТОРОВ___

Буштырева И.О.

Разработка концепции — формирование идеи; формулировка и развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — формирование исследуемых групп пациентов.

Подготовка и редактирование текста — участие в научном дизайне; подготовка работы к публикации.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант

Кузнецова Н.Б.

Разработка концепции — формирование идеи; формулировка и развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — формирование исследуемых групп пациентов, проведение исследования.

Подготовка и редактирование текста — участие в научном дизайне; подготовка работы к публикации.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант

Дмитриева М.П.

Разработка концепции — развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — проведение исследований, в частности, сбор первичной документации,

сбор биологического материала пациентов, анализ и интерпретация полученных данных.

Подготовка и редактирование текста — составление черновика рукописи; подготовка работы к публикации.

Проведение статистического анализа — применение статистических, математических, вычислительных или других формальных методов для анализа и синтеза данных исследования.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант.

Машкина Е.В.

Разработка концепции — формирование идеи; формулировка и развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — формирование исследуемых групп пациентов, проведение исследования.

Подготовка и редактирование текста — участие в научном дизайне; подготовка работы к публикации.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант.

Оксенюк О.С.

Разработка концепции — формирование идеи; формулировка и развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — формирование исследуемых групп пациентов, проведение исследования.

Подготовка и редактирование текста — участие в научном дизайне; подготовка работы к публикации.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант

Баринова В.В.

Разработка концепции — формирование идеи; формулировка и развитие ключевых целей и задач.

Проведение исследования — формирование исследуемых групп пациентов, проведение исследования.

Подготовка и редактирование текста — участие в научном дизайне; подготовка работы к публикации.

Утверждение окончательного варианта статьи — принятие ответственности за все аспекты работы, целостность всех частей статьи и ее окончательный вариант

AUTHOR CONTRIBUTIONS__

Bushtyreva I.O.

Conceptualisation — concept statement; statement and development of key goals and objectives.

Conducting research — forming of study cohorts.

Text preparation and editing — contribution to the scientific layout; preparing work for publication.