Показатели гемопоэза у облучённых крыс с применением эраконда
В.А. Сафонова, д.б.н., профессор, Оренбургский ГАУ
Коррекция гемопоэза у облучённых животных является одной из основополагающих задач современной радиобиологии. Работы в этом направлении проводятся постоянно. Известны
разные фармакохимические и биологические средства, обладающие радиозащитным эффектом при костномозговой форме острой лучевой болезни у лабораторных животных [1—5].
Основным источником регенерации клеток периферической крови является костный мозг,
который относится к первой группе критических органов у облучённых ионизирующим излучением животных. Поскольку биологическая сущность острого лучевого повреждения заключается в угнетении процессов клеточного обновления, то степень радиационного поражения и темпы восстановления кроветворной ткани обусловливают шансы на выживание организма [1, 2, 6, 7].
Цель работы — изучить влияние эраконда на некоторые показатели гемопоэза у крыс, подвергнутых воздействию гамма-излучения.
Материал и методика. Опыты проведены на белых беспородных крысах-самцах с массой тела 180—210 г. Из животных сформировали четыре группы: интактные (1-я); облучённый контроль (2-я); эраконд + облучение (3-я); облучение + эраконд (4-я). Крыс подвергали однократному воздействию гамма-излучения в дозе 5,0 Грей (Гр) на гамма-установке «Агат-С» при мощности дозы 6,0 Гр/мин. с источником излучения 60Со. В течение 5—10 дней до облучения крысам 3-й группы и после облучения в течение этого же периода времени крысам 4-й группы вводили 10%-процентный раствор фитопрепарата эраконд с водой или кормом в дозе 5,5—7,5 мл/кг.
Эраконд представляет собой экстракт люцерны посевной (Medicago зМыа), полученный при гидробарометрической обработке наземной части растения с добавлением определённого набора микроэлементов. Препарат разработан в НВП «АПТ-Экология» (Екатеринбург).
Этот препарат нашёл широкое применение в животноводческой и ветеринарной практике. Установлено, что применение эраконда регулирует гемопоэз, соотношение иммунокомпетент-ных клеток и биохимические показатели крови животных, обладает положительным влиянием на функциональное состояние печени. Эраконд применяется для лимфотерапии и коррекции иммунопатологических состояний при различных заболеваниях скота, оказывает выраженное стимулирующее действие на иммунитет цыплят-бройлеров. В условиях химического загрязнения внешней среды препарат снижает содержание тяжёлых металлов в организме животных [8, 9].
У подопытных животных исследовали общее количество клеток в костном мозге бедренной кости. На мазках-отпечатках костного мозга подсчитывали процентное содержание отдельных миелокариоцитов и затем рассчитывали абсолютное число клеток различных генераций [10]. Морфологические исследования периферической крови проводили общепринятыми методами. Полученный цифровой материал обрабатывали методом вариационной статистики. Достоверность различий оценивали по 1-критерию Стьюдента.
Результаты и обсуждение. Установлено, что облучение в дозе 5,0 Гр вызывает клеточное опусто-
шение костного мозга крыс. Эффект наблюдается сразу после облучения, достигая максимума ко вторым суткам. Так, общее количество клеток в костном мозге через 48 часов после воздействия радиации уменьшалось на 83% и составляло лишь 17% от исходного уровня. Начиная с третьих суток происходило постепенное восстановление гемопоэза. На восьмой день общее количество клеток в костном мозге достигало уже 58—82% по отношению к биологическому контролю.
Резкое уменьшение клеток костного мозга в период первичной реакции на облучение, как и любой активно пролиферирующей системы клеточного обновления, укладывается в известную схему митотической гибели клеток: задержка вступления в митоз; образование нежизнеспособных гигантских клеток; гибель после первого деления; гибель в последующих делениях. Причины задержки клеточного деления обусловлены разрушением веществ, стимулирующих митоз, нарушением проницаемости клеточных мембран, нарушением синтеза нуклеиновых кислот, структурными повреждениями хромосом. Многие авторы считают, что массовая гибель клеток костного мозга в ранние сроки (10—12 ч после облучения) является интерфазной, т.е. наступающей до следующего деления [1, 2, 8]. В патоморфологическом плане интерфазная гибель миелокариоцитов проявляется как общий «некроз» костного мозга. Признаки интерфазной гибели наиболее отчётливо прослеживаются в патологии ядерных структур клеток: пикнозе (гомогенизации) ядерного материала, распаде хроматина, фрагментации клеток. Частота клеток костного мозга с пикнотическими ядрами в раннем постлучевом периоде зависит от дозы облучения.
Наши исследования показали, что картина периферической крови крыс в период первичной реакции на облучение характеризовалась глубокой лейкопенией (количество лейкоцитов составляло 1,8 • 109/л). Существенное снижение общего числа лейкоцитов было обусловлено выраженной лимфопенией. Количество эритроцитов на этот период снижалось до 3,4 ± 0,05 • 109/л, а тромбоцитов — до 426 ± 9 • 109/л. На восьмые сутки после облучения у животных данной группы наблюдалась более выраженная лим-фопения, эритропения, тромбоцитопения. Показатели, полученные в наших исследованиях при воздействии внешнего облучения в дозе 5,0 Гр, являлись контролем для 3-й и 4-й групп опытных животных, которые получали эраконд соответственно до и после облучения.
Влияние эраконда на состояние гемопоэза у облучённых животных было очевидным. Так, в группе животных, которым до воздействия гамма-излучения вводили эраконд, общее число клеток костного мозга в период первичной реакции на облучение превосходило этот показатель
группы облучённого контроля на 32—42%. Эта закономерность была характерна и для показателей периферической крови — лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов, в аналогичных процентных соотношениях. Эраконд купирует накопление радиотоксинов, вызывающих митотическую и интерфазную гибель клеток в костном мозге облучённых животных, обладает способностью защищать вещества, стимулирующие митоз, предотвращать нарушение проницаемости клеточных мембран и нарушение синтеза нуклеиновых кислот. Применение эраконда после облучения не было столь успешным, как до воздействия гамма-излучения. Вероятно, это связано с необратимыми процессами прямого и косвенного действия радиации, которые произошли уже в момент облучения и в первые часы после него.
Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют о радиозащитных свойствах эраконда, которые проявляются в коррекции гемопоэза у крыс, подвергнутых воздействию гамма-излучения в дозе 5,0 Гр.
Литература
1. Груздев Г.П. Проблема поражения кроветворной ткани при острой лучевой патологии. М.: Медицина, 1968. 212 с.
2. Бутомо Н.В., Джаракьян Т.К. Геморрагический синдром острой лучевой болезни. Л.: Медицина, 1976. 168 с.
3. Андрушенко В.Н., Иванов А.А., Мальцев В.Н. Противолучевое действие веществ микробного происхождения // Радиационная биология. Радиоэкология. Т. 37. 1997. В. 1.
4. Владимиров В.Г., Красильников И.И., Арапов О.В. Радиопротекторы — структура и функции. Киев: Наук, думка, 1989. 259 с.
5. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. М.: Изд-во МГУ, 1985. 248 с.
6. Зяблицкий В.М., Семина О.В. Иммуномодулятор неоген стимулирует пострадиационное восстановление тромбо-цитопоэза // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. Т. 43. № 1. С. 49-50.
7. Иванов А.А., Кузнецов В.П. Противолучевая эффективность лейкинферона у собак и морских свинок // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. Т. 44. № 4. С. 403.
8. Сунагатуллин Ф.А., Овчинникова А.А. Влияние эраконда на биохимические показатели крови бычков // Загрязнённость экологических систем токсикантами и актуальные вопросы современной фармакологии и токсикологии. Подготовка кадров: матер, междунар. конф. Троицк, 1996. С, 105-106.
9. Таирова А.Р. Элиминационные свойства фитопрепарата эраконд // Ветеринарный врач. 2001. № 2 (6). С. 50—52.
10. Жербин Е.А., Чухловин А.Б. Радиационная гематология. М.: Медицина, 1989. 176 с.