CC BY
65
4. Кост С.А., Стенко М.И. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов // Клиническая гематология животных. - М, 1974. - С. 99-100.
5. Гончаренко М.С Латинова А.М. Метод оценки перекисного окисления липидов//Лабораторное дело. - № 1. - 1985. -
С.60-61.
6. Гурьянова В.А., Трошин Е.И. Изучение уровня перекисного окисления липидов (ПОЛ) в тканях крыс при облучении // Актуальность проблемы ветеринарии и зоотехнии: Матер. респ. научн.-произв. конф. - Казань, 1997. - 97 с.
7. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. - Л.: Медицина, 1996. - 423 с.
8. Струков А.И., Серов В.В. Патологическая анатомия. - М.: Медицина, 1995. - С. 409-410.
THERAPEUTIC DRUGS EFFICIENCY AT ANIMAL ASSOCIATED POISONING WITH DIOXINE AND LEAD
A.V. Ivanov, K.H. Papunidi, M.Ya. Tremasov, I.R. Kadikov, M.M. Salnikova, V.R. Saitov, K.A. Osyanin, I.F. Vafin
Summary. The understanding of toxins associated affect on biological objects, as well as development and selection of specific therapy is a crucial aspect including toxicological investigations. The tasks of our work were to study dioxine and lead toxic affect at associated introduction into animal organism and to evaluate the therapeutics efficiency at poisoning with these toxicants. The aim was to identify and recommend an efficient therapeutics basing on the results of the study.
The experiments were performed on 6 groups of rabbits. The first group was a biological control and received a vegetable oil. The second group received 2,3,7,8-THDD i.e. dioxine in 1/200 LD50 dose (0,15 mkg/kg of live weight), the third group received acetic lead in 1/10 LD50 dose (65 mg/kg of live weight), the fourth group received dioxine and lead in the above mentioned dosage, the fifth group received toxicants and zeolite in 300 mg/kg live weight ratio, the sixth group received phosphonovaleric acid along with toxicants and a sorbent in 90 mg/kg live weight ratio.
The results demonstrated that the associated dioxine and lead had the most pathological influence on rabbit organism. At 18 days the animals from this group developed the clinical signs like oppression, sluggishness, disheveled skin. Some rabbits had back extremities paresis. The general protein at 40 day reduced by 20 %, albumin by 23 %, and a-globulin increased for 24 %. In the fifth and sixth groups where animals were introduced toxicants and therapeutics together the level of erythrocytes, hemoglobin and leukocytes remained within norm.
The biochemical researches data were confirmed by electron microscopy as well. So, hepatocytes had deformed kernels, chromatin marginal placement, immature mitochondrial apparatus, cytoplasm vacuolization, a large number of ultilamellar bodies. In association with dimephosphonovaleric acid, zeolite has protective effect on liver cellular ultrastructure, epithelial cells of kidney proximal channels, and cardiac hystiocyt at dioxine and lead chronic introduction.
Key words: dioxine, lead, dimephosphonovaleric acid, histostructure, ultrastructure, hepatocyte, proximal channels, zeolite.
УДК 619.615.9:546.49
ПОКАЗАТЕЛИ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА КРОЛИКОВ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ РТУТИ ДИХЛОРИДОМ И Т-2 ТОКСИНОМ И ИСПОЛЬЗОВАНИИ СОРБЕНТОВ
Д.Р. ШАРАФУТДИНОВА, кандидат биологических наук, научный сотрудник
В.А. НОВИКОВ, доктор ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник
ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
Э.К. ПАПУНИДИ, доктор биологических наук, старший преподаватель
Казанская ГАВМим. Н.Э. Баумана E-mail: [email protected]
Резюме. Исследования проводили с целью изучения естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма при интоксикации ртути дихлоридом и Т-2 токсином, а также эффективности применения сорбентов при сочетанном отравлении. Сочетанное воздействие на кроликов ртути дихлорида и Т-2 токсина снижало количество эритроцитов на 2,5...23 %, гемоглобина - на 13,2...20 %, фагоцитарную активность нейтрофилов - на 15.20 %, фагоцитарный индекс - на 15.16 %, фагоцитарное число - на 21.25 %, фагоцитарную емкость нейтрофилов - на 10.12 %, количество Т-лимфоцитов на 18.35 %, В-лимфоцитов -на 30.50 %.
В группе кроликов, получавших вместе с токсикантами бентонит, фагоцитарная активность нейтрофилов понижалась на 9.12 %, фагоцитарный индекс - на 18.20 %, фагоцитарное число - на 20.34 %, фагоцитарная емкость нейтрофилов -на 9.14 %. У животных, которым одновременно с затравкой давали цеолит величины этих показателей уменьшались соответственно на 10.13, 16.18 %, 19.34 и 8.15 %. Применение минеральных сорбентов - эффективное средство для нормализации иммунологичеких показателей при сочетанном отравлении животных ртути дихлоридом и Т-2 токсином.
Ключевые слова: тяжелые металлы, ртуть, микотоксины, Т-2 токсин, сорбенты, бентонит, цеолит.
На протяжении многих лет разработка новых эффективных мероприятий, направленных на повышение резистентности и продуктивности сельскохозяйственных животных, с использованием экологически безопасных препаратов занимает одно из ведущих мест в ветеринарии. Несбалансированность рационов по макро- и микроэлементам, витаминам и биологически активным веществам приводит к нарушению обмена веществ,
снижению продуктивности, роста и развития животных, ослаблению устойчивости к негативным факторам окружающей среды. В условиях развивающегося общества с непрерывной интенсификацией и расширением масштабов хозяйственной деятельности, сопряженной с повышенным всесторонним внимание к экологическим проблемам, эта задача особенно актуальна [1, 2].
Среди техногенных токсикантов лидирующее место занимают тяжелые металлы, из которых наиболее токсичны для животных и человека ртуть и ее соединения. Вероятность загрязнения кормов ртутью существует в зонах расположения предприятий, использующих ее соединения в технологическом процессе (производство хлора, каустика, бумаги, красок, и др.), а также в регионах разработки месторождений этого металла. Попадая в корма, ртуть ухудшает их санитарное качество, а при содержании выше максимально допустимого уровня представляет опасность для здоровья животных. В связи с высокой миграционной способностью и склонностью к биоаккумуляции, помимо прямого токсического действия, этот элемент и его соединения становятся причиной отдаленных последствий, проявляющихся в виде эмбриотоксического, тератогенного, мутагенного и канцерогенного эффектов [3, 4].
Микотоксины широко распространены в природе и наносят экономический ущерб, связанный как с общим токсическим действием, так и с отдаленными последствиями в виде эмбриотоксического, тератогенного, мутагенного действия и возникновения алиментарного бесплодия. Поэтому они считаются наиболее опасными контаминантами кормов и пищевых продуктов в естественных условиях. Т-2 относится к числу трихо-тецетовых микотоксинов и обладает сильным токсическим действием, наиболее благоприятные климатогеографические условия для его развития - средняя полоса Российской Федерации. Токсин поражает сердечно-сосудистую, нервную и пищеварительную системы организма животных, угнетает гемопоэз, вызывает иммунодефицит, быстро метаболизируется и выводится из организма, затрудняя идентификацию [5].
Цель наших исследования - изучение естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма при интоксикации ртути дихлоридом и Т-2 токсином, а также эффективности применения сорбентов при сочетанном отравлении.
Условия, материалы и методы. Опыты проводили в лабораториях отдела токсикологии ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» на 15 кроликах, разделенных на 5 групп по принципу аналогов с учетом возраста, физи-
ологического состояния и живой массы. Первая группа получала ртути дихлорид в количестве 5 ПДК, вторая
- ртути дихлорид в количестве 5 ПДК и Т-2 токсин в дозе 1/5 ЛД50. Третья и четвертая группы наряду с сочетанным отравлением получали бентонит Биклянского месторождения в количестве 2 % и цеолит Майнского месторождения - 1 % от рациона соответственно. Пятая группа служила физиологическим контролем.
В ходе затравки и лечения на 10, 20 и 30 сут. проводили общий анализ крови, включавший определение содержания эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов по общепринятым методам.
Фагоцитарную способность нейтрофилов в периферической крови определяли по методике Кост С.А. и Стенко М.И. (1974), активность лизоцима в сыворотке крови - нефелометрическим методом по Дорофейчуку В.Г. (1968), уровень Т-лимфоцитов в крови - методом спонтанного розеткообразования с гетерогенными эритроцитами (Е-РОК), В-лимфоцитов - методом ЕАС-розеток по Фримелю (1987).
Результаты и обсуждение. Длительное поступление ртутьсодержащих соединений в организм вызывает уменьшение количества эритроцитов в крови, распад лимфоидных клеток в селезенке и лимфатических узлах, что в свою очередь ведет к снижению общей резистентности и возникновению инфекционных процессов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой. Воздействие на кроликов ртути дихлорида приводило к уменьшению количества эритроцитов, по сравнению с фоновыми величинами, на 10, 20 и 30 сут. соответственно на 4, 5 и 16 %; лейкоцитов - на 13, 21 и 20 %; гемоглобина - на 11, 23 и 26 %. Одновременно фагоцитарная активность нейтрофилов на 20 и 30 сут. снизилась на 11,5 и 17,7 %, фагоцитарного индекса - на 12,4 и 15,1 %, фагоцитарного числа - на 19,8 и 24,5 %, фагоцитарной емкости нейтрофилов
- на 5,3 и 12 % соответственно (см. табл.). На 10, 20 и 30 сут. у затравленных ртути дихлоридом кроликов количество Т-лимфоцитов уменьшалось на 13, 21 и 31 %, В-лимфоцитов - 20, 41 и 54 %.
Сочетанное воздействие ксенобиотиков на организм животных приводит не только к их накоплению, но и к усилению токсического действия. У кроликов подвергнутых сочетанной затравкой ртути дихлорида и Т-2 токсина количество эритроцитов уменьшалось, по сравнению с фоновыми величинами, на 10, 20 и 30 сут. соответственно на 2,5; 15 и 23 %; гемоглобина
- на 13,2; 13,5 и 20 %, число лейкоцитов повышалось на 16,3; 24,3 и 37 %. При этом наблюдалось снижение
Таблица. Показатели естественной резистентности кроликов при сочетанном отравлении ртути дихлоридом и Т-2 токсином и применении сорбентов
Показатель Фон Группа животных
ртуть + Т-2 токсин ртуть + Т-2 токсин + бентонит ртуть + Т-2 токсин + цеолит
срок исследования, сут
10 1 20 1 30 10 1 20 1 30 10 20 1 30
Фагоцитарная актив- 66,20 56,20 53,09 52,96 60,24 60,03 58,26 59,58 58,82 57,60
ность, % ±4,20 ±3,30 ±3,50 ±3,40 ±4,10 ±4,30 ±2,20 ±2,54 ±2,80 ±3,60
Фагоцитарный ин- 8,13 6,91 6,50 6,83 6,67 6,60 6,51 6,83 6,80 6,67
декс ±0,28 ±0,48 ±0,46 ±0,52 ±0,11 ±0,12 ±0,16 ±0,20 ±0,25 ±0,24
Фагоцитарное число 5,50 4,35 4,20 4,13 4,40 4,30 3,63 4,46 3,64 4,45
±0,14 ±0,12 ±0,16 ±0,18 ±0,22 ±0,19 ±0,21 ±0,28 ±0,36 ±0,24
Фагоцитарная ем- 44,86 40,37 39,97 39,48 40,82 39,50 38,52 41,28 38,13 40,00
кость, % ±2,42 ±3,86 ±3,44 ±3,20 ±3,12 ±2,86 ±2,84 ±3,40 ±3,60 ±3,42
Т-лимфоциты, % 57,80 47,40 40,00 37,54 50,63 48,10 48,25 54,00 53,62 54,00
±3,12 ±2,46 ±2,64 ±1,24 ±2,68 ±2,80 ±2,70 ±2,54 ±2,60 ±3,10
В-лимфоциты, % 20,00 14,05 11,24 10,01 17,03 18,20 17,00 19,00 18,48 18,50
±1,40 ±0,96 ±0,96 ±0,80 ±1,12 ±1,24 ±0,98 ±1,30 ±1,22 ±1,36
фагоцитарной активности нейтрофилов на 15...20 %, фагоцитарного индекса - на 15.16 %, фагоцитарного числа - на 21.25 %, фагоцитарной емкости нейтрофилов - на 10.12 %, количества Т-лимфоцитов на 18. 35 %, В-лимфоцитов - на 30.50 %.
Один из наиболее эффективных методов детоксикации организма животных - энтеросорбция. Современные сорбенты имеют различную природу и структуру активной поверхности, что обусловливает широкий диапазон молекул, с которыми возможно взаимодействие. Однако в последние годы все большее применение находят средства естественного происхождения. Так, у кроликов, получавших на фоне сочетанной затравки бентонит, на 10, 20 и 30 сут. количество эритроцитов уменьшалось на 5,7; 10,2 и 9,6 %, гемоглобина - на 3,4; 5,2 и 5,5 %, а количество лейкоцитов увеличивалось на 12,9; 14 и 10,5 %, соответственно.
У животных, которым давали цеолит, на 10, 20 и 30 сут. количество эритроцитов и гемоглобина колеба-
лось на уровне фоновых показателей, а лейкоцитов
- увеличивалось на 10,3, 14 и 17,8 % соответственно.
У кроликов, получавших вместе с токсикантами бентонит, фагоцитарная активность нейтрофилов понижалась на 9.12 %, фагоцитарный индекс - на 18. 20 %, фагоцитарное число - на 20.34 %, фагоцитарная емкость нейтрофилов - на 9.14 %. В группе, которой одновременно с затравкой давали цеолит, величины этих показателей уменьшались соответственно на 10.13, 16.18, 19.34, 8.15 %.
Выводы. Применение минеральных сорбентов
- эффективное средство для нормализации иммуно-логичеких показателей при сочетанном отравлении животных ртути дихлоридом и Т-2 токсином. Введение в рацион сорбентов предотвращает изменения гематологических и биохимических показателей, оказывает положительное влияние на естественную резистентность и иммунобиологическую активность организма кроликов.
Литература.
1. Трахтенберг И.М., Коршун М.Н., Козлов К.П. Ртуть как глобальный химический загрязнитель // Токсикологический вестник. - 2006. - № 3. - С. 2-8.
2. Гайсин И.А. К проблеме агроэкологической безопасности в Республике Татарстан. // Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза: Сборник научных докладов международного симпозиума. - Казань: Меддок, 2007. - С. 75-77.
3. Стрельников В.В., Хмара И.В. Основные классы токсических элементов. // Ветеринария с/х животных. - 2006. - № 5. - С. 63-66.
4. Пономаренко А.М., Степанова Н.Ю., Латыпова В.З., Перевозников М.А. Особенности распределения ртути в тканях и органах рыб в модельном эксперименте. // Токсикологический вестник. - 2007. - № 1. - С. 22-25.
5. Иванов А.В., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х. и др. Микотоксикозы животных (этиология, диагностика, лечение, профилактика). - М.: Колос, 2008. - 177с.
INDICATORS OF NATURAL RESISTANCE OF THE ORGANISM OF RABBITS AT THE POISONING OF HYDRARGYRUMS DICHLORIDE AND T-2 TOXIN AND USE OF SORBENTS
D.R. Sharafutdinova, V. A. Novikov, E.K. Papunidi
Summary. The purpose of the present research was studying of natural resistance and immunobiological reactivities of an organism at an intoxication of Hydrargyrums dichloride and T-2 toxin, and also efficiency application of sorbents at combined poisoning. Combined influence on rabbits of Hydrargyrums dichloride and T-2 toxin reduced quantity of erythrocytes on 2,5-23 %; hemoglobin - on 13,220 %, phagocytic activity of neutrophils on 15-20 %, a phagocytic index - nal5-16 %, phagocytic number - on 21-25 %, phagocytic capacity of neutrophils - on 10-12 %, quantity T-lymphocyte decreased for 18-35 %, B-lymphocyte - on 30-50 %.
In group of the rabbits receiving together with Hydrargyrums dichloride and T-2 by toxin bentonite, phagocytic activity of neutrophils went down on 9-12 %, a phagocytic index - on 18-20 %, phagocytic number - on 20-34 %, phagocytic capacity of neutrophils - on 9-14 %.
In group which it is simultaneous with a priming set zeolite, phagocytic activity of neutrophils went down on 10-13 %, a phagocytic index - on 16-18 %, phagocytic number - on 19-34 %, phagocytic capacity of neutrophils - on 8-15 %.
Application of mineral sorbents is an effective remedy for normalization immune indicators at combined poisoning of Hydrargyrums dichloride and T-2 toxin.
Key word: heavy metals, mercury, mycotoxins, T-2 toxin, sorbents, bentonite, zeolite.
УДК: 619:632.95.02:574
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СОЧЕТАННОГО
ВОЗДЕЙСТВИЯ дециса и т-ЖИВОТНЫХ
В.И. ЕГОРОВ, кандидат биологических наук, зав. лабораторией
Г.Г. ГАЛЯУТДИНОВА, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник И.М. ЕРЕМЕЕВ, аспирант
А.В. ИВАНОВ, член-корреспондент РАСХН, директор ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
E-mail: [email protected]
ТОКСИНА НА ОРГАНИЗМ
Резюме. Цель наших исследований - токсикологическая оценка сочетанного воздействия дециса и Т-2 токсина на организм животных. Среднесмертельная их доза для белых крыс при раздельном воздействии составляет 45,8 и 3,0 мг/кгсоответственно, при сочетанном - 38,3 и 1,8 мг/кг; для кроликов при раздельном - 356,7и 0,54 мг/кг, при сочетанном - 290,0 и 0,46 мг/кг, что свидетельствует о взаимоуси-ливающем действии токсикантов. Коэффициент их кумуляции равен 4,8, что характерно для веществ с умеренной кумуляцией. Сочетанное воздействие дециса и Т-2 токсина на уровне
