через 7 сут. лечения. У 27 (84,4%) из 32 животных этой группы выделяли микроорганизмы (из них: у 15 животных — S. aureus в монокультуре, у 12 — ассоциации S. аureus с другими микроорганизмами: 4 с S. еpidermidis, 3 с E. rnli, 2 с P. аlcaligenes, 3 с S. cohnii ssp. urealyticum. У 6 (75 %) из 8 крыс III гр. микрофлора в посевах из ран не была высеяна по окончании лечения. У 2 (25%) из 8 животных микрофлора определялась, у 1 крысы выделили S. aureus в монокультуре, у 1 — ассоциация S. аureus с S. еpidermidis.
На основании проведённого микробиологического исследования выявлено, что наиболее выраженный антимикробный эффект отмечен в основной (опытной) группе животных, в лечении ран которых использовали совместно милиацил и КВЧ-терапию.
В меньшей степени антимикробной активностью характеризовался милиацил, который использовали во II контрольной гр., в значительно меньшей степени — КВЧ-терапия, используемая в III контрольной гр.
Вывод. Полученные в данном исследовании результаты о выраженной антимикробной активности при сочетанном применении милиацила и КВЧ-терапии позволили разработать новый метод лечения гнойных ран.
Литература
1. Бахарева Л.И. Диагностика и лечение инфекционных осложнений в хирургии / В.Н. Бордуновский, В.А. Бычковских, Г.Р. Зарипова [и др.]. Челябинск: Издательство ООО «Фирма «ПИРС», 2015. 148 с.
2. Нелаева А.А., Хасанова Ю.В., Хоботова Е.С. Роль провос-палительных цитокинов в развитии и прогрессировании микро- и макроангиопатий у пациентов с сахарным диабетом 2-го типа // Ангиология и сосудистая хирургия. 201 З.Том 19. № 3. С. 9-13.
3. Федоров В.Д., Светухин А.М. Избранный курс лекций по гнойной хирургии. М.: Издательство «Миклош», 2007. 364 с.
4. Блатун Л.А. Местное медикаментозное лечение ран // Хирургия. Журнал Н.И. Пирогова. 2011. № 4. С. 51-9.
5. Нузов Б.Г., Стадников А.А., Нузова О.Б. Оптимизация репаративной регенерации тканей М.: Медицина, 2012. 199 с.
6. Blueman D., Bousfield C. The use of larval therapy to reduce the bacterial load in chronic wounds // J Wound Care. 2012. № 5. Р. 244-53.
7. Frank D.N., Wysocki A., Specht - Glick D.D. et al. Microbial diversity in chronic open wounds // Wound Repair Regen. 2009. № 2. Р. 163-172.
Показатели аутоиммунных реакций на фоне применения Эраконда
В.Ю. Сафонова, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВО Оренбургский ГПУ
Ядерная катастрофа на Чернобыльской атомной электростанции в 1986 г. и авария на Фукусиме (2011 г.) послужили тому, что исследования в области радиационной биологии и экологии были направлены на изучение воздействия внешней радиации в небольших дозах на жизненно важные системы живого организма [1—3]. Среди таковых иммунной системе отводится первостепенная роль.
В основе развития иммунодефицита лежит аутосенсибилизация организма. Последняя влечёт за собой появление как оппортунистических инфекций, так и онкологической патологии, включая всевозможные осложнения [3—5]. Большое значение в этом процессе имеет уровень концентрации циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК).
Цель исследования — изучить влияние облучения и природного препарата Эраконд на концентрацию ЦИК в сыворотке крови животных. Повышенное содержание ЦИК отражает развитие аутоиммунных реакций в облучённом организме. Образование ЦИК обязано взаимодействию аутоантигенов и аутоантител при патологических процессах, обусловленных воздействием радиации. Что касается здорового организма, то в нём концентрация ЦИК незначительна.
Материал и методы исследования. В качестве подопытных животных нами были выбраны белые
нелинейные крысы-самцы с массой тела 179—190 г. Данный вид млекопитающих считается весьма удобной моделью для проведения экспериментальных исследований. Крысы, будучи признанными лабораторными животными, практически лишены сезонных изменений в процессе своей жизни.
Однократное внешнее облучение животных проводили на гамма-установке с источником излучения 137Cs в дозах от 2,0 до 4,0 Гр. Биологическим контролем являлись интактные крысы. Для установления эффективности препарата Эраконд контролем являлись облучённые крысы в дозе 4,0 Гр.
Подопытные группы формировали с учётом массы тела животных. Все животные содержались в одинаковых условиях вивария, с однотипным кормлением и поением.
Для коррекции содержания циркулирующих иммунных комплексов в крови подопытных животных использовали препарат Эраконд — экстракт люцерны посевной (Medicago sativa). Его получают путём гидробарометрической обработки наземной части люцерны. В полученный экстракт добавляют определённые микроэлементы. Препарат разработан в ТОО НВП «АПТ-Экология» (Екатеринбург). Эраконд имеет густую, стерильную консистенцию тёмно-коричневого цвета, приготовлен по ТУ 9337-004-12334249-97. В случае высушивания твердеет. Вкус горьковатый, хорошо растворяется в воде (допускается незначительный осадок). Подо-
пытным крысам вводили 10-процентный раствор Эраконда перорально с кормом, включая поение, в дозе 5,5—7,5 мл/кг.
Кровь для исследования у подопытных животных брали из яремной вены путём декапитации. Исследование вели в течение месяца на 3-и, 5-е, 7-е, 14-е, 21-е и 30-е сут. после воздействия. Для определения ЦИК в сыворотке крови использовали метод М. Digeon и др. (1987). В основе этого метода лежит различная растворимость мономеров иммуноглобулинов в составе иммунных комплексов при наличии в среде полиэтиленгликоля (ПЭГ) 6000.
Величину и состав иммунных комплексов определяет как антиген, так и свойства антител, включая их относительную и абсолютную концентрацию. Олиговалентные антигены и М-антитела принимают участие в образовании высокомолекулярных растворимых иммунных комплексов.
Состав иммунных комплексов зависит от относительной концентрации антиген/антител (АГ/АТ). Иммунные комплексы, образующиеся при избытке антигена, меньше по размеру, чем те, которые формируются в зоне равновесия АГ/АТ. Поливалентные антигены сравнительно легко преципитируются избытком антител, чем олиговалентные антигены.
Результаты исследования. Исследование показало, что диапазон указанных доз ионизирующего излучения не влиял на клиническое состояние подопытных животных. Они сохраняли аппетит, у них отмечалась адекватная реакция на внешние раздражители, масса тела оставалась в пределах нормы. Крысы всех подопытных групп выглядели опрятно. Что касается изменений в картине крови, то они были заметными и зависели от величины дозы ионизирующего излучения. Отмечалось достоверное снижение общего количества лейкоцитов с последующим постепенным их восстановлением по истечении 14 сут. Установленное снижение общего числа лейкоцитов происходило за счёт снижения лимфоцитов.
Концентрация ЦИК в сыворотке крови не облучённых крыс (биологический контроль) во все сроки исследования находилась в пределах 1,41+0,06; 1,42+0,04; 1,48+0,08; 1,47+0,07; 1,21+0,10; 1,59+0,08 г/л.
При воздействии ионизирующей радиации в дозе 2,0 Гр в сыворотке крови облучённых аналогов содержание ЦИК составило по периодам исследования соответственно 1,62+0,08; 1,72+0,09; 1,82+0,05; 2,04+0,06*; 1,82+0,09; 1,72+0,12 г/л, с достоверной разницей на 14-е сут. после облучения.
При облучении в дозе 3,0 Гр отмечалось достоверное увеличение концентрации ЦИК на 5-е, 7-е и 14-е сут. после облучения — 1,82+0,06; 2,24+0,11*; 2,42+0,18*; 2,34+0,17*; 1,98+0,09; 1,96+0,06 г/л соответственно.
Облучение в дозе 4,0 Гр вызвало достоверную разницу исследуемого показателя с таковым в группе биологического контроля на 5-е, 7-е,
14-е, 21-е и 30-е сут. после облучения и составило 1,82+0,06(3); 2,21+0,09*; 2,62+0,09* (7); 2,54+0,10*(14); 2,26+0,09*; 2,10+0,06* г/л соответственно. Более высокая концентрация ЦИК определялась на 7-е и 14-е сут. после облучения.
Введение Эраконда крысам в составе корма и воды за три дня до облучения в дозе 4,0 Гр способствовало коррекции концентрации циркулирующих иммунных комплексов в сторону их понижения на 5-е, 7-е, 14-е, 21-е и 30-е сут. после воздействия. Их содержание составило 1,80+0,06; 1,90 +0,09; 2,0 4+0,09; 1,94+0,10*; 1,86+0,09*; 1,76+0,06* г/л соответственно.
Содержание ЦИК в сыворотке крови животных в более высоких концентрациях по отношению к норме может использоваться как прогностический тест с целью предупреждения аутоиммунных процессов, влекущих за собой в последующем аутоиммунные заболевания после воздействия радиации в дозах, не вызывающих проявлений острой лучевой болезни.
Вывод. Внешнее однократное облучение в дозах 2,0; 3,0 и 4,0 Гр не вызывало заметных клинических проявлений у подопытных животных со стороны общего состояния организма во все сроки исследования. Но при этом в картине крови прослеживалась кратковременная лейкопения, глубина которой была обусловлена дозой облучения. Концентрация циркулирующих иммунных комплексов носила дозовую и временную зависимость. Достоверное повышение концентрации ЦИК отмечалось при дозе 2 Гр на 14-е сут. после облучения, при дозе 3,0 Гр — на 5-е, 7-е и 14-е сут., а при дозе 4,0 Гр — на 5-е, 7-е, 14-е, 21-е и 30-е сут. Предварительное, за три дня до облучения в дозе 4,0 Гр, введение Эраконда в составе корма и воды способствовало коррекции образования циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови подопытных крыс. При этом концентрация ЦИК была достоверно ниже таковой в контрольной гр. на 14-е, 21-е и 30-е сут. после облучения в указанной дозе.
Литература
1. Сафонова В.Ю., Сафонова В.А. Влияние предварительного облучения животных малой дозой радиации в сочетании с фитопрепаратами на содержание клеток костного мозга и периферической крови при последующем летальном радиационном воздействии // Вестник КрасГАУ. 2008. Вып. 2. С. 190-195.
2. Сафонова В.Ю. Влияние эраконда, флоренты и тимогена на содержание клеток костного мозга облучённых крыс // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2009. № 1 (Ч. 1). С. 237-239.
3. Сафонова В.Ю., Сафонова В.А. Влияние предварительного воздействия ионизирующего излучения в низкой дозе и эраконда на выживаемость, клиническое состояние и ге-мопоэз повторно облучённых летальной дозой животных // Вестник КрасГАУ. 2008. № 4. С. 196-201.
4. Сафонова В.А. Влияние препаратов природного происхождения на компенсаторные возможности клеток костного мозга // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2014. № 1 (45). С. 161-163.
5. Сафонова В.Ю., Агишева О.Н. Влияние факторов физической природы на некоторые показатели иммунитета у животных на фоне применения эраконда и диметилсульфок-сида // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2015. № 6 (56). С. 250-251.