CC BY
0
Обзоры
© Коллектив авторов, 2024
Пучков И.А.1, Кулинич Т.М.1, Парфенюк Е.И.1, Киселева Я.Ю.1, Каминский В.В.1, Шишкин А.М.1, Никируй Э.Я.2, Боженко В.К.1
Перспективы CAR-T-терапии солидных опухолей
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научный центр рентгенорадиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 117997, г. Москва, Российская Федерация
2 Общество с ограниченной ответственностью «Научно-производственный центр "Альфа"», 125481, г. Москва, Российская Федерация
Резюме
Злокачественные новообразования представляют собой одну из основных причин смертности во всем мире. Несмотря на достижения в области традиционных методов лечения, таких как хирургия, лучевая и химиотерапия, эффективность этих подходов значительно снижается при наличии метастатических и рецидивирующих опухолей.
В последние годы иммунотерапия, в частности терапия клетками с химерными антигенными рецепторами (CAR), предлагает новый, многообещающий и персонализированный подход к лечению рака. CAR-T-терапия основана на генетической модификации Т-лимфоцитов пациента для экспрессии CAR, направленных против специфических опухолевых антигенов.
Несмотря на впечатляющие результаты, достигнутые в лечении гематологических злокачественных новообразований с помощью CAR-T-терапии, ее применение для лечения солидных опухолей сопряжено с рядом сложностей. Ключевыми препятствиями для внедрения CAR-T-терапии солидных опухолей являются проблемы доставки CAR-T-клеток в опухолевое микроокружение, локальная иммуносупрессия, а также гетерогенность опухоли. В данном обзоре рассматриваются стратегии, направленные на повышение эффективности и безопасности CAR-T-терапии при солидных опухолях.
Ключевые слова: CAR-T; CAR-T-терапия; иммунотерапия; солидные опухоли; опухолевые антигены; опухолевая иммуносупрессия; микроокружение опухоли; комбинированная терапия; клинические исследования
Статья получена 04.10.2024. Принята в печать 22.11.2024.
Для цитирования: Пучков И.А., Кулинич Т.М., Парфенюк Е.И., Киселева Я.Ю., Каминский В.В., Шишкин А.М., Никируй Э.Я., Боженко В.К. Перспективы CAR-T-терапии солидных опухолей. Иммунология. 2024; 45 (6): 792-805. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2024-45-6-792-805
Финансирование. Исследование выполнено в рамках Государственного задания на 2023-2025 гг. по теме «Генно-терапевтический лекарственный препарат на основе модифицированных аутологичных лимфоцитов (CAR-T) для лечения СЕА-позитивных солидных опухолей». Публикация результатов исследования в открытой печати разрешена.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Подбор литературы, написание рукописи - Пучков И. А.; анализ литературы, корректировка рукописи - Кулинич Т.М.; подбор и систематизация публикаций, корректировка рукописи - Никируй Э.Я., Парфенюк Е.И.; анализ литературы, корректировка статьи - Киселева Я.Ю., Каминский В.В.; написание разделов статьи - Шишкин А.М.; разработка концепции исследования, анализ и интерпретация результатов, корректировка рукописи - Боженко В.К.
Puchkov I.A.1, Kulinich T.M.1, Parfenyuk E.I.1, Kiseleva Ya.Yu.1, Kaminskiy V.V.1, Shishkin A.M.1, Nikiruy E.Ya.2, Bozhenko V.K.1
Futures of CAR-T-therapy of solid tumors
1 Russian Scientific Center of Roentgenoradiology, Ministry of Health of the Russian Fédération, 117997, Moscow, Russian Federation
2 Scientific and Production Center «Alpha» Ltd, 125481, Moscow, Russian Federation
Abstract
Malignant neoplasms are one of the main causes of death worldwide. Despite advances in traditional treatments such as surgery, radiation and chemotherapy, the effectiveness of these
Для корреспонденции
Пучков Илья Александрович -кандидат химических наук, научный сотрудник лаборатории клеточной и генной терапии научно-исследовательского отдела молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0001-6651-8975
approaches is significantly reduced in the presence of metastatic and recurrent tumors. In recent years, immunotherapy, and in particular chimeric antigen receptor (CAR) therapy, has offered a new, promising and personalized approach to cancer treatment. CAR-T therapy is based on the genetic modification of the patient's T lymphocytes for the expression of CAR directed against specific tumor antigens. Despite the impressive results achieved in the treatment of hematological malignancies using CAR-T therapy, its use for the treatment of solid tumors is associated with a number of difficulties. The key obstacles to the introduction of CAR-T therapy for the treatment of solid tumors are the problems of delivering CAR-T cells into the tumor microenvironment, local immunosuppression, as well as tumor heterogeneity. This review examines strategies aimed at improving the effectiveness and safety of CAR-T therapy in solid tumors.
Keywords: CAR-T; CAR-T therapy; immunotherapy; solid tumors; tumor antigens; tumor immunosuppression; tumor microenvironment; combination therapy; clinical trials
Received 04.10.2024. Accepted 22.11.2024.
For citation: Puchkov I.A., Kulinich T.M., Parfenyuk E.I., Kiseleva Ya.Yu., Kaminskiy V.V., Shishkin A.M., Nikiruy E.Ya., Bozhenko V.K. Futures of CAR-T-therapy of solid tumors. Immunologiya. 2024; 45 (6): 792-805. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2024-45-6-792-805 (in Russian)
Funding. Study was performed according to the State assignment for 2023-2025 on the topic «A gene therapy drug based on modified autologous lymphocytes (CAR-T) for the treatment of CEA-positive solid tumors». Open publication of the research results is allowed.
Conflict of interests. Authors declare no conflict of interests.
Authors' contribution. Selection of literature, writing the manuscript - Puchkov I.A.; analysis of literature, proofreading the manuscript - Kulinich T.M.; selection and systematization of publications, proofreading the manuscript - Nikiruy E.Ya., Parfenyuk E.I.; analysis of literature, proofreading the article - Kiseleva Ya.Yu., Kaminsky V.V.; writing sections of the article - Shishkin A.M.; development of the research concept, analysis and interpretation of results, proofreading the article - Bozhenko V.K.
For correspondence
Ilya A. Puchkov - PhD, Research Associate at the Laboratory of cell and gene therapy of the Research department of molecular biology and experimental tumor therapy, RSCRR, MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0001-6651-8975
Введение
Онкология остается одной из важнейших проблем в здравоохранении, характеризуясь постоянным увеличением числа новых случаев и уровня смертности. Стандартные методы терапии, включающие хирургические вмешательства, лучевую и химиотерапию, не всегда эффективны при лечении распространенных, метастатических или рецидивирующих форм онкологических заболеваний [1], что подчеркивает необходимость поиска новых подходов. Последние исследования в области терапии рака демонстрируют значительный прогресс в иммунотерапии с введением в практику моноклональных антител к контрольным точкам иммунитета и адоптивной Т-клеточной терапии [2]. В этом случае моделирование ответа иммунной системы повышает ее способность распознавать и уничтожать опухолевые клетки. Также разрабатываются многочисленные стратегии иммунотерапии, такие как мРНК-вакцины с индивидуальными опухолевыми эпитопами, онколи-тические вирусы и другие подходы.
CAR-T-терапия, основанная на генетической модификации иммунных клеток для экспрессии химерных антигенных рецепторов (CAR), способных распознавать опухолевые антигены, представляет собой один из наиболее перспективных подходов к клеточной иммунотерапии рака.
Научное и клиническое сообщество в данное время высоко оценивает результаты эффективности применения CAR-T-терапии при лечении гематологических зло-
качественных новообразований [3]. Особую ценность эта терапия продемонстрировала при лечении В-кле-точных злокачественных опухолей, например рефрактерного острого лимфобластного лейкоза, где другие методы лечения оказались непродуктивными [4]. Наиболее известными мишенями для CAR-T-клеток чаще всего являются антигены В-клеток (BCMA) при множественной миеломе [5] и антиген В-клеток CD19 при различных рецидивирующих или рефрактерных В-кле-точных лимфоидных неоплазиях, включая В-клеточные лейкозы и некоторые типы лимфом [6].
Конструкция химерного антигенного рецептора (CAR) представляет собой сложную структуру, состоящую из нескольких функциональных доменов: внеклеточного антиген-связывающего домена, обеспечивающего специфическое взаимодействие с целевым антигеном на опухолевых клетках; трансмембранного домена, соединяющего вне- и внутриклеточную части; внутриклеточного сигнального домена, инициирующего активацию Т-лимфоцитов, и костимулирующего домена, усиливающего иммунный ответ.
В отличие от эндогенных Т-клеточных рецепторов, распознающих антигенные эпитопы с помощью главного комплекса гистосовместимости, конструкция CAR обеспечивает распознавание любого поверхностно экспрессируемого молекулярного эпитопа, включая неклассические мишени: углеводы, ганглио-зиды и протеогликаны. Это преимущество CAR-T-
Сравнение структур нескольких поколений CAR-T
Компонент Первое поколение Второе поколение Третье поколение Четвертое поколение Пятое поколение
Антиген-связывающий домен scFv scFv scFv scFv scFv
Сигнальный домен CD3Z CD3Z CD3Z CD3Z CD3Z
Костимулирующий домен - CD28 или 4-1BB CD28 + 4-1BB/ 0X40/ CD27/DAP10 CD28/4-1BB CD28/4-1BB
Дополнительные субъединицы Индукторы ИФН-у, ФНОа, ИЛ-2 и ИЛ-8 Домен ß-цепи рецептора ИЛ-2
терапии обусловлено независимостью действия конструкции CAR от процессинга антигена и экспрессии молекул HLA класса I [7].
Несмотря на выраженную клиническую эффективность, применение CAR-T-терапии сопровождается рядом побочных эффектов, среди которых - синдром высвобождения цитокинов, нейротоксичность и вне-опухолевая токсичность, связанная с поражением здоровых тканей, не являющихся прямыми мишенями терапии [8].
Создание и структура CAR-T
Химерные антигенные рецепторы (CAR) являются искусственными белковыми конструкциями, представленными на поверхности эффекторных Т-лимфоцитов, что позволяет им специфически распознавать и элиминировать клетки, экспрессирующие определенные целевые антигены.
В зависимости от источника получения Т-лимфоцитов различают аутологичные и аллогенные CAR-T-клетки. Аутологичные CAR-T-клетки получают путем генетической модификации Т-лимфоцитов, выделенных из периферической крови пациента посредством лейкафереза с последующей сепарацией мононуклеар-ной фракции. Выделенные Т-лимфоциты подвергаются модификации для экспрессии специфического CAR-рецептора. Последующая ex vivo экспансия генетически модифицированных Т-лимфоцитов позволяет достичь необходимого количества клеток для терапевтического применения. Аллогенные CAR-T-клетки получают на основе Т-лимфоцитов здорового донора [9].
Молекула CAR-Т состоит из трех основных компонентов: внеклеточного (антиген-связывающего), трансмембранного и внутриклеточного доменов. Эволюция структуры CAR представлена в таблице.
Внеклеточный антиген-связывающий домен обычно представлен одноцепочечным вариабельным фрагментом моноклонального антитела (scFv), однако он также может включать пептиды или другие белки, способные распознавать специфические опухоль-ассоциирован-ные антигены (ОАА) [10, 11].
Шарнирный (спейсерный) и трансмембранный домены CAR-Т обычно образованы фрагментами природных белков: CD3, CD4, CD8, CD28 или IgG4 [12]. Спей-сер, представленный коротким пептидным линкером, соединяет антиген-связывающий домен с трансмем-
бранным доменом, обеспечивая необходимую гибкость рецептора. Трансмембранный домен закрепляет CAR-Т в клеточной мембране Т-лимфоцита, стабилизирует структуру рецептора и играет ключевую роль в реализации эффекторной функции CAR-T-клеток [13]. Кости-мулирующие домены, такие как CD28 и 4-1BB (CD137), усиливают пролиферацию Т-лимфоцитов, продукцию цитокинов и противоопухолевую активность CAR-T-клеток in vivo. Активационный домен CAR-T, как правило, представлен доменом CD3Z, обеспечивает передачу сигнала внутрь клетки, запуская активацию Т-лимфоцитов. Это приводит к синтезу перфорина, высвобождению цитокинов, а в конечном итоге - к цитолизу и апоптозу опухолевых клеток.
Поколения CAR-T
CAR-T-клетки первого поколения, разработанные с 1989 по 1993 г., состояли из антиген-связывающего домена на основе scFv, конъюгированного с сигнальным доменом CD3 Т-клеточного рецептора. Эти конструкции обеспечивали направленное уничтожение опухолевых клеток in vitro, однако отсутствие костиму-лирующих сигналов ограничивало их эффективность и противоопухолевую активность in vivo, что препятствовало широкому клиническому применению [14].
CAR второго поколения были усовершенствованы за счет включения костимулирующего домена, такого как CD28 (CD4, CD8) [14]. Эта модификация привела к значительному повышению эффективности CAR-T-кле-ток, усилению продукции цитокинов и пролиферации Т-лимфоцитов [15].
Третье поколение CAR характеризуется наличием нескольких костимулирующих доменов, например OX40 (CD134), CD28, 4-1BB (CD137), CD27 или DAP10 (DNA-X-активирующий белок 10), в сочетании с сигнальным доменом CD3. Такая конструкция способствует дальнейшему улучшению экспансии и выживаемости Т-клеток, усилению секреции цитокинов и повышению противоопухолевой активности [16].
Четвертое поколение структурно схоже со вторым поколением, но дополнительно содержит гены, индуцирующие экспрессию цитокинов: ИФН-у, ФНОа, ИЛ-2 и ИЛ-8, после активации CAR-Т. Это способствует усилению пролиферации и активации Т-лимфоцитов, а также усилению противоопухолевого эффекта за счет различных синергических механизмов [17, 18].
CAR пятого поколения находятся в стадии разработки, характеризуются улучшенным профилем безопасности и высокой эффективностью благодаря включению дополнительных внутриклеточных доменов и индуцируемых систем, позволяющих контролировать активацию и деактивацию CAR-T-клеток.
Для решения проблемы гетерогенности экспрессии ОАА в данный момент разрабатываются биспецифи-ческие CAR, способные распознавать два различных антигена на поверхности опухолевых клеток за счет сочетания в своем составе двух антиген-связывающих доменов. Биспецифические CAR-T-клетки демонстрируют высокую цитотоксичность и таргетное воздействие на опухолевые клетки, снижая вероятность поражения здоровых тканей и усиливая противоопухолевую активность [19].
Опыт клинического применения препаратов на основе CAR-T
В последнее десятилетие применение CAR-T-тера-пии в клинической практике привело к значительному улучшению прогнозов у пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями, включая лимфомы и множественную миелому [20]. Однако, несмотря на успехи в лечении рецидивирующих и рефрактерных гематологических заболеваний, эффективность CAR-T-терапии в отношении солидных опухолей остается недостаточной из-за иммуносупрессивного и гипоксического микроокружения опухоли и других факторов, препятствующих инфильтрации CAR-T-кле-ток в опухолевую ткань и способствующих развитию анергии Т-лимфоцитов [21].
В отличие от гематологических злокачественных новообразований, солидные опухоли редко экспрес-сируют специфический антиген, равномерно распределенный на поверхности клеток [22]. Чаще всего в качестве мишеней рассматриваются ОAA, представляющие собой аутоантигены, аномально экспрессиру-емые или гиперэкспрессируемые в опухолевых тканях (например раково-тестикулярные или тканеспецифиче-ские антигены). ОAA служат основой для разработки CAR-T-терапии солидных опухолей. Перспективным подходом также является использование опухолевых неоантигенов, представляющих собой опухоль-специфические антигены (ОСА), возникающих в результате соматических мутаций. Неоантигены экспрессируются исключительно на опухолевых клетках, обладают высокой иммуногенностью и меньшим потенциалом для развития внеопухолевой токсичности по сравнению с ОAA [23], что делает их привлекательными мишенями для CAR-T-терапии.
Решение проблем эффективности CAR-T- терапии солидных опухолей
Основными препятствиями на пути эффективного применения CAR-T-терапии для лечения солидных опухолей являются недостаточный хоминг CAR-T-клеток
в опухолевую ткань, локальная иммуносупрессия в опухолевой микросреде, преждевременная активация CART- клеток, приводящая к развитию синдрома высвобождения цитокинов, и повреждение здоровых тканей, экс-прессирующих целевой антиген (off-target эффекты) (рис. 1).
Решение проблемы хоминга
Миграция Т-лимфоцитов в ткань опухоли, как правило, регулируется хемокинами, секретируемыми опухолевыми клетками или ее окружением, и хемокино-выми рецепторами (CCR/CXCR), экспрессируемыми эффекторными Т-лимфоцитами [24].
Для преодоления проблемы недостаточного трафика CAR-T-клеток одной из стратегий является усиление экспрессии рецепторов, специфичных к хемокинам, продуцируемым в ткани опухоли-мишени. Сигнальные пути, искусственно индуцированные опухолевыми лигандами, повышают способность иммунных клеток достигать целевых участков, что сопровождается повышенной экспрессией цитокинов, обладающих хемотак-сическими свойствами и способных модулировать миграцию и перемещение широкого спектра иммунных и соматических клеток к опухоли.
Среди препятствий для инфильтрации CAR-T-клеток в опухолевую ткань - аномальная и неструктурированная васкуляризация опухоли [25]. Для улучшения доставки CAR-T-клеток к опухолевым клеткам изучалось воздействие антиангиогенных молекул, присутствующих в сосудистой строме многих типов злокачественных новообразований и вызывающих аномальную васкуляризацию опухоли. Улучшение трафика CAR-T-клеток к опухоли достигалось путем модификации структуры шарнирного, трансмембранного и сигнального костимулирующего доменов [26].
Решение проблемы трафика может решаться с помощью введения CAR-T-клеток непосредственно в область локализации опухоли, что улучшает их биораспределение при низкой дозировке и позволяет избежать цитотоксичности, наблюдаемой при других способах введения. Было показано, что интратуморальное, интра-краниальное и интравентрикулярное введение CAR-T-клеток может быть эффективно для лечения опухолей центральной нервной системы [27].
Как подробно описано в ряде обзоров [28], стратегии по увеличению персистенции CAR-T-клеток включают: изменение условий культивирования клеток ex vivo, снижение иммуногенности конструкции CAR, модуляцию сигнальных молекул, цитокинов или их рецепторов, эктопическую экспрессию генов клеточной иммор-тализации и снижение степени окислительного стресса.
Наиболее широкоизученные подходы к модификации структуры CAR, разработанные для оптимизации персистенции, включают изменения в костимулирую-щем домене, а именно изменение размера внеклеточного спейсера и сродства scFv. В ряде исследований, опубликованных за последние несколько лет, отмечается, что расположение костимулирующего домена
796
Методы
э
Траффик и инфильтрация в опухоль
-/Опухолевая клетка
VEGF 0
V'4
Анти-VEGF
э
Внеопухолевая целевая активность
Высвобождение # * цитокинов / • • •
Иммуносупрессивное микроокружение опухоли Недостаток О2
Каталаза
•Г"
Высвобождение
CTLA4 АФК
Синдром высвобождения цитокинов
(i) костимулирующий домен CD28/41BB
(ii) вариации спейсера-шарнира
• • _ • • *
•Цитокины " о •
Пироптоз
Молекула ЛП
ФНО Этанерцепт
ИЛ-6 Тоцилизумаб
ИЛ-2 Кортикостероид
ИЛ-1 Анакинра
CD4/CD8 Дазатиниб
ИФН-Y Эмапалумаб
Рис. 1. Основные проблемы терапии с использованием САЯ-Т-клеток и стратегии их решения
А - трафик и инфильтрация в опухоль: улучшение хоминга САЯ-Т-клеток в опухолевую ткань с использованием антиангиогенных САЯ-рецепторов, а также САЯ-Т-клетки, которые экспрессируют целевые хоминг-рецепторы; Б - иммуносупрессивное микроокружение опухоли (ИМО): САЯ-Т-клетки, экспрессирующие ингибиторы контрольных точек, а также ШЕ1а-индуцируемые САЯ-Т-клетки, которые активируются в гипоксическом опухолевом микроокружении, и САЯ-Т-клетки, экспрессирующие ката-лазу, для удаления активных форм кислорода в опухолях для стимуляции роста Т-клеток; В - внеопухолевая целевая активность: схематическая диаграмма для демонстрации нацеливания САЯ-Т-клеток на нормальную клетку с экспонированным антигеном; Г - синдром высвобождения цитокинов: (1) выбор костимулирующего домена СВ28 или 41ББ, а также длина домена шарнира влияют на высвобождение цитокинов, (2) цитокины, высвобождаемые макрофагами, воспалительные цитокины и иммуностимулирующие алармины, высвобождаемые во время пироптоза, можно нейтрализовать, используя специфические препараты (этанерцепт, тоцилизумаб, кортикостероиды, дазатиниб, эмапалумаб).
в клеточной мембране имеет решающее значение и что высокая эффективность может быть достигнута только в том случае, когда этот домен экспрессируется в непосредственной близости от клеточной мембраны.
Другая стратегия заключается в использовании различных режимов многократного дозирования САЯ-Т-клеток. Поскольку введенные САЯ-Т-клетки со временем могут элиминироваться и/или терять функциональную активность, повторное дозирование функциональных САЯ-Т-клеток решает эту проблему. Учитывая их ограниченную персистенцию и быструю потерю функциональности, наблюдаемую при использовании традиционных лентивирусных САЯ-Т-клеток у пациентов с солидными опухолями, дополнительное введение потенциально может позволить большему количеству
функциональных CAR-T-клеток накапливаться в организме в течение более длительного периода времени, избегая повторной лимфодеплеции. Повторное введение решает также проблему длительной персистен-ции CAR-T-клеток, что позволяет использовать мРНК-трансдуцированные CAR-T-клетки (получаемые либо ex vivo, либо in situ) [29, 30].
Наконец, в некоторых исследованиях описывается получение функциональных CAR-T-клеток in situ после внутривенных инъекций лентивирусных векторов или липидных наночастиц, способных к целенаправленной доставке мРНК CAR [31]. Разработка этих технологий может изменить текущие подходы к лечению, поскольку она позволяет избежать необходимости в создании дорогостоящих и трудоемких производств для получе-
ния CAR-T-клеток ex vivo, не потребует повторной лим-фодеплеции и может быть легко адаптирована к многократному дозированию в различных условиях.
Стратегия поиска доступных опухолевых неоантигенов
Несмотря на то что ОСА и опухолевые неоантигены представляют собой перспективные мишени для разработки высокоэффективных CAR-T-клеток, в настоящее время идентифицировано ограниченное количество практически применимых ОСА, таких как мутации в генах TP53, HRAS/KRAS/NRAS и BRAF [32]. ОСА могут использоваться для создания терапии на основе специфических Т-клеточных рецепторов, CAR-T-кле-ток или биспецифических антител. Одним из основных препятствий использования ОСА в качестве мишеней является низкое содержание этих антигенов на поверхности клетки (обычно < 100), тогда как для CAR-T-лим-фоцита требуется несколько сотен или тысяч копий для идентификации антигена и последующей активации [32]. В связи с этим разработка методов прогнозирования и идентификации антигенов для ОСА имеет первостепенное значение при создании перспективных направлений противоопухолевой терапии.
Антигены, связанные с микроокружением опухоли, были описаны M.H. Andersen в качестве терапевтических мишеней [33]. Комбинированное нацеливание на такие антигены стимулирует иммунные клетки в опухолевой микросреде (ОМС), восстанавливая их иммунную активность, и формирует микроокружение, препятствующее неоангиогенезу и дальнейшему росту и распространению опухоли.
Решение проблемы гетерогенности антигенов в опухоли и их экранирования
Гетерогенность ОСА представляет собой фактор, влияющий на эффективность терапии, поскольку разнообразие антигенов может снижать распознаваемость опухолевых клеток CAR-T-клетками. Эта антигенная вариабельность способствует селекции клеток, нечувствительных к терапии, что, в свою очередь, может увеличить вероятность рецидива опухоли. В отличие от злокачественных лимфом или множественной мие-ломы, характеризующихся почти равномерно высокой экспрессией CD19/CD20 или BCMA, экспрессия потенциальных для иммунотерапии антигенов в солидных опухолях, как правило, ниже и отличается значительной вариабельностью.
Следует подчеркнуть, что при исследовании терапевтического воздействия CAR-T-клеток у пациентов с солидными новообразованиями уровень экспрессии целевого антигена на поверхности опухолевых клеток является одним из основных прогностических факторов противоопухолевого ответа.
Для преодоления гетерогенности распределения антигена в опухоли используются три основных подхода:
• нацеливание на множественные опухолевые антигены;
• способность CAR-T-клеток уничтожать антиген-отрицательные опухолевые клетки;
• стимуляция (модуляция) ОМС для активации эндогенных иммунных реакций [34].
К этим методам также относится трансдукция Т-лимфоцитов несколькими конструкциями CAR или проектирование CAR с двумя (или более) сайтами связывания, такими как, например, CD19/CD20 или CD19/ CD22, в случае терапии В-клеточных лимфом. Существует ряд других способов для преодоления опухолевой гетерогенности - это создание универсальных CAR, функционирующих посредством экспрессии внеклеточного адапторного домена, который действует как мост между CAR-рецептором и растворимым лигандом (антителом, ScFv), нацеленным на опухолевый антиген [35], и использование CAR-T-клеток, нацеленных на гликозилированные антигены, экспрессируемые на опухолевых клетках [36].
Способы повышения функциональной активности CAR-T-клеток для лечения пациентов с солидными опухолями
Для достижения эффекта CAR-T-терапии у пациентов с солидными опухолями выделяют две основные стратегии: увеличение доставки, персистенции CAR-T-клеток и снижение потерь ими своей функциональности. В рамках этой стратегии для улучшения эффективности используется лимфодеплеция с высокодозной химиотерапией с целью снижения числа циркулирующих лимфоцитов и улучшению эффективности терапии. Также повысить персистенцию CAR-T-клеток и сохранить их функциональность можно путем использования методов редактирования генома, обычно CRISPR/Cas9, для подавления возможных ингибирующих факторов, позволяя Т-лимфоцитам находиться в покое и, таким образом, предотвращать хроническую (конститутивную) стимуляцию [37].
Ключевой проблемой, ассоциированной с данной стратегией, является необходимость внедрения множественных генетических изменений, что часто вызывает значительные трудности при работе с первичными Т-лимфоцитами. В настоящее время, применяя ленти-вирусные векторы, можно осуществить экспрессию одного или, возможно, двух дополнительных трансгенов, интегрированных с CAR-клеткой посредством «саморасщепляющихся» пептидов, таких как Р2A, Т2А и т. п. В то же время использование ретровирусных систем, обладающих более высоким пределом нагрузки по сравнению с лентивирусами, позволяет осуществлять одновременную экспрессию до четырех отдельных трансгенов при условии адекватного поддержания титра и уровня экспрессии трансгенов.
В доклинических исследованиях, тестирующих CAR-T-клетки, многие клетки проявляют свою эффективность и функциональность на ранних этапах, но
большинство из них находится за пределами самой опухоли. По мере приближения к опухоли CAR-T-лимфоциты постепенно становятся гипофункциональными, что приводит к короткому периоду их воздействия на опухоль. Подход к решению этой проблемы заключается в разработке методов модификации Т-клеток либо ОМС [38, 39].
Наиболее перспективные доклинические подходы включают инженерию CAR-T-клеток для лечения солидных опухолей по следующим направлениям:
1) ингибирование иммунных контрольных точек посредством секреции антител против мембранных белков или рецепторов PD-1 и экспрессия доминантно-негативных или «переключающих» рецепторов, а также нокдаун PD-1 с использованием технологии CRISPR/Cas9;
2) удаление или нокдаун внутриклеточных ингиби-рующих молекул, таких как SHP1, PTEN, cbl-b, диацилглицеролкиназа DGK, фосфатаза PTNPN2, DNMT3A81, NR4A и др. [40];
3) конструирование CAR-T-клеток с повышенной устойчивостью к ингибирующим факторам, присутствующим в ОМС, таким как ТФРß (путем экспрессии доминантно-негативного аллеля TGFBR2), аденозину и ПГЕ2 (с использованием внутриклеточного цАМФ-блокирующего пептида) и активным формам кислорода (АФК) (путем экспрессии каталазы);
4) секреция различных активирующих медиаторов, таких как биспецифические антитела, активирующие молекулы РНК, а также цитокины, например ИЛ-12 и агонисты TLR5 [41];
5) экспрессия химерных активирующих рецепторов цитокинов, которые связываются с ингиби-рующими цитокинами опухолевого окружения, такими как ИЛ-12 и ИЛ-6.
Решение проблемы внеопухолевой токсичности
Один из побочных эффектов, наблюдаемых при CAR-T-терапии, - возникновение нецелевой токсичности, связанной с возможной экспрессией OAA в нормальных тканях (рис. 1В). Например, OAA, такие как HER2 и EGFR, сверхэкспрессируются в опухолевых клетках и на низком уровне - в нормальных эпителиальных тканях. Это подтверждено результатами ряда исследований, показавших токсичность анти-HER2-CAR-T-клеток по отношению к здоровым тканям. Токсический внеопухолевый эффект также наблюдался при применении других CAR-клеток, нацеленных на высокие уровни OAA, при этом особо серьезные случаи нецелевой токсичности способны приводить к смерти пациента.
Локальное введение в очаг заболевания является подходом, который может ограничить внеопухолевую токсичность. Важно отметить, что выбор в качестве мишеней оптимальных ОАА или ОСА с ограниченной экспрессией на жизненно важных здоровых тканях
(таких, например, как раково-тестикулярные антигены) является ключевым для обеспечения безопасности и эффективности CAR-T-терапии [42].
Развитие резистентности
Одной из наиболее значимых проблем, препятствующих внедрению препаратов на основе CAR-T-клеток в клиническую практику, является развитие резистентности опухолей к таким препаратам после первоначального высокого уровня иммунного ответа.
Явление переноса антигена из опухолевых клеток в CAR-T-клетки в процессе трогоцитоза наблюдалось на модельных клетках лейкемии у мышей. Обратимая потеря антигена происходит в результате его переноса в Т-клетки, что приводит к снижению плотности антигенов на поверхности опухолевых клеток и, следовательно, ставит под угрозу активность Т-клеток из-за недостатка мишеней [43].
Использование биспецифических CAR стало основным подходом для преодоления проблемы переноса или снижение уровня экспрессии антигена. В рамках этого подхода разрабатываются CAR, которые способны распознавать как CD 19 и CD20, так и CD 19 и CD22, что применимо для терапии В-клеточных лимфом (рис. 2Б) [44]. Кроме того, разрабатываются комбинации CAR, специфичных к нескольким мишеням, в случае солидных опухолей, таких как GD2 и EBV для ней-робластом и т.п. [45, 46].
Стратегии преодоления иммуносупрессивного микроокружения опухоли
В процессе опухолевого развития ее иммуносупрес-сивное микроокружение (ИМО) способствует росту опухолевых клеток, поддерживает их функции, инвазию и распространение, а также ангиогенез для преодоления гипоксической и кислой среды [47]. Наличие ИМО приводит к неэффективной инфильтрации CAR-T-клеток в солидные опухоли, деактивации и истощению Т-лимфоцитов при длительном пребывании в опухолевой ткани. Когда CAR-T-клетки достигают опухоли, они сталкиваются со сложной структурой ИМО, включающей множество факторов, препятствующих проникновению, таких как измененный внеклеточный матрикс, переменное давление интерсти-циальной жидкости, гипоксические области, а также иммуносупрессивные и регуляторные Т-клетки, мие-лоидные супрессорные клетки и макрофаги, ассоциированные с опухолью [48].
С учетом того, что опухолевые клетки потребляют значительное количество питательных веществ в ИМО, между ними и CAR-T-клетками возникает конкуренция за энергетические ресурсы, что может служить основой для создания стратегии подавления метаболизма опухоли. Одной из стратегий преодоления ИМО является создание «защищенных» CAR-T-клеток, которые индуцируют секрецию иммуностимулирующих цитокинов, таких как ИЛ-12, ИЛ-18 или ИЛ-15, что может изменить
ОМС и привести к повышению стабильности CAR-T-клеток, а также к активации эндогенных иммунных клеток, включая НК-клетки [46].
Другой подход к преодолению локальной иммуно-супрессии опухоли включает комбинацию CAR-T-кле-ток с антителами-ингибиторами контрольных точек на иммунных клетках. Данный метод продемонстрировал возможность снятия барьеров для иммунного ответа и значительного увеличения противоопухолевой эффективности CAR-T-клеток [49].
Помимо гипоксии, CAR-T-клетки также подвергаются воздействию повышенного уровня активных форм кислорода в ИМО, что негативно сказывается на их жизнеспособности. Для решения этой проблемы были разработаны CAR-T-клетки, коэкспрессирующие фермент каталазу (CAR-CAT), который ускоряет превращение перекиси водорода в воду [50]. Этот бицистрон-ный CAR продемонстрировал снижение накопления АФК в ИМО и противоопухолевую активность даже в условиях высокого содержания перекисных форм. Кроме того, CAR-CAT-клетки обеспечили значительную защиту нетрансфецированных иммунных эффекторов (рис. 1Б).
Синдром высвобождения цитокинов
Синдром высвобождения цитокинов (СВЦ) - один из наиболее распространенных токсических эффектов, возникающих после инфузии CAR-T-клеток. Считается, что СВЦ развивается в результате активации CAR-T-клеток при распознавании целевого антигена на поверхности опухолевых клеток (а также при связывании с растворимой формой антигена, в случае солидных опухолей), что приводит к высвобождению воспалительных цитокинов (рис. 1Г). Эти цитокины запускают активацию других иммунных клеток, включая моноциты и макрофаги, что сопровождается прогрессирующим увеличением выработки цитокинов, усилением воспалительного ответа и способствует проявлению симптомов СВЦ [51].
Клинические проявления СВЦ варьируют от легких (повышенная температура, гипотония) до тяжелых токсических эффектов, таких как полиорганная недостаточность, нейротоксичность, судороги и кома [52]. Токсичность, вызванная СВЦ, как правило, обратима при проведении поддерживающей терапии, однако степень выраженности синдрома индивидуальна и может зависеть от типа применяемого CAR-T-рецептора. Для смягчения симптомов СВЦ применяются различные стратегии, включая блокаду рецепторов цитокинов и кортикостероидов (рис. 1Г). Некоторые одобренные FDA препаратов моноклональных антител для лечения СВЦ после терапии CAR-T-клетками включают препараты тоцилизумаб, силтуксимаб и сарилумаб.
Заключение
В последние несколько лет в ряде стран были одобрены несколько препаратов CAR-T-клеток для практического использования в лечении острых лимфо-
бластных и хронических лимфоцитарных лейкозов, множественной миеломы и различных форм лимфом [53]. В частности, были одобрены CAR-T-клетки, нацеленные на CD19, для лечения В-клеточного острого лимфо-бластного лейкоза и В-клеточной неходжкинской лим-фомы, а также CAR-T-клетки, нацеленные на BCMA, для лечения множественной миеломы.
Согласно опубликованным клиническим исследованиям CAR-T-клеток, нацеленных на BCMA, была достигнута частота полной ремиссии от 29 до 60 % у пациентов с рецидивирующей множественной мие-ломой и до 85 и 100 % у пациентов с острым лимфо-бластным лейкозом и рефрактерным или рецидивирующим В-клеточным лейкозом при нацеливании на CD19 [54]. Однако необходимы дальнейшие разработки в усовершенствовании CAR-T-систем для распространения полученных успехов на лечение солидных опухолей [55]. Добавление костимулирующих доменов в CAR-T второго и третьего поколения улучшило устойчивость клеток in vivo, и в настоящее время разрабатываются новые поколения CAR-T-клеток, нацеленные на решение проблем, связанных с изменениями в ОМС (см. рис. 1). Также предпринимаются усилия по созданию мультиспецифичных CAR-T-клеток для преодоления проблемы экранирования и гетерогенности опухолевых антигенов. Функциональные мультиспеци-фические CAR, включающие в свою структуру нано-тела и другие новые молекулы с противоопухолевой активностью, способны эффективно устранять рецидивы после CAR-T-терапии, обеспечивая индивидуализированный терапевтический подход к фенотипически гетерогенным видам опухолей [45].
Использование технологии редактирования генов CRISPR/Cas9, позволяющей эффективно блокировать клеточные молекулы HLA и T-клеточные рецепторы, прогнозирует значительные успехи в применении CAR-T-терапии в медицинской практике. Этот подход может существенно повлиять на экономическую эффективность и методологию разработки Т-клеточной терапии в ближайшие годы (рис. 2).
Для преодоления ограничений, связанных с терапией на основе CAR-T, были разработаны новые конструкции рецепторов. Активность CAR-клеток может регулироваться индуцируемыми лекарственными средствами с помощью адаптивных механизмов типа «включение и уничтожение» или через конъюгацию с определенными пептидами и молекулами Fab [56].
Широко применяются scFv, модификация сродства которых к антигенам позволяет улучшить селективность целевых клеток, что, в свою очередь, снижает внеопухолевые эффекты токсичности [57]. Нанотела VHH и антитела, полученные из вариабельного домена тяжелой цепи, способные присоединяться к сайтам распознавания антигена благодаря своей оптимальной стабильности и высокой аффинности, улучшают специфическое связывание антител и CAR-Т-клеток.
Результаты разработки CAR-Т-клеток четвертого и пятого поколений демонстрируют обнадеживающие
800
Методы
Донор CAR-T
* Т *
CAR-T
Делеция МНС и TCR на основе CRISP/Cas9
Ii CRISP/Cas9 !■
to
Аллогенный
CAR-T
* to ^
Универсальный
i ^
CAR-T
С последовательностью дегрона
л n
CAR-T
CAR-T c iCasp9
э
¡HC CAR-T ^
С мультидоменами для разных антигенов
-Л У
V CAR-T/^
Защищенный CAR
iZ
^=CAR-T =
DARPins
CAR-T j
it
Домен распознавания антигена Fn3
Рис. 2. Создание улучшенных САЯ-Т-клеток
А - универсальные САЯ-Т-клетки, взятые у аллогенного донора, созданные с использованием технологии СЯ1БРЯ/Саз9; Б - молекулярные переключатели для контроля цитотоксичности САЯ-Т-клеток, программирование САЯ-Т-клетки с помощью последовательности деградации (дегрона) и ¡Сазр9 (индуцируемой каспазы-9); В - индивидуально разработанные САЯ-Т-клетки для различных ИМО; мультидоменные и «защищенные» САЯ-Т-клетки; Г - альтернатива БеЕу. Потенциальная альтернатива САЯ-рецепторов на основе БеЕу, такие как БАЯРт и САЯ-Т-клетки с доменом распознавания Еп3.
и устойчивые эффекты в терапии солидных опухолей и способствуют активному развитию данной области медицины в последние годы [58]. Серьезное внимание уделяется внедрению молекулярных переключающих систем, позволяющих индуцировать активность САЯ-Т-клеток и контролировать их жизнеспособность при циркуляции в организме пациента. Тем не менее сегодняшняя себестоимость СЛЯ-Т-терапии по-прежнему является серьезным препятствием на пути ее широкого применения. Однако с учетом планируемого распространения данной технологии в большинстве между-
народных клинических центров ожидается значительное снижение затрат на нее, что основывается на принципе экономии за счет масштабирования технологии СЛЯ-Т.
Кроме того, в ходе дальнейших исследований могут быть разработаны новые, более экономичные методы, такие как создание готовых (аллогенных) САЯ-Т-клеток из Т-лимфоцитов здоровых доноров для непосредственного использования у различных групп пациентов. Это значительно снизило бы производственные затраты, связанные с разработкой индивидуальной СЛЯ-Т-кле-точной терапии для каждого пациента [59].
■ Литература
1. GlobalSurg Collaborative and National Institute for Health Research Global Health Research Unit on Global Surgery. Global variation in postoperative mortality and complications after cancer surgery: a multicentre, prospective cohort study in 82 countries. Lancet. 2021; 397: 387-97. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21)00001-5
2. Sirini C., De Rossi L., Moresco M.A., Casucci M. CAR T cells in solid tumors and metastasis: paving the way forward. Cancer Metastasis Rev. 2024; 1-18. PMID: 39316265. DOI: https://doi.org/10.1007/s10555-024-10213-7
3. June C.H., O'Connor R.S., Kawalekar O.U., Ghassemi S., Milone M.C. CAR T cell immunotherapy for human cancer. Science. 2018; 359 (6382): 1361-5. DOI: https://doi.org/10.1126/science.aar6711
4. Терещенко В. П., Кузнецова М.С., Шевченко Ю.А., Фишер М.С., Курилин В.В., Алсаллум А., Акахори Я., Шику Х., Сенников С.В. Характеристика лимфоцитов с MAGE-A4-специфичным TCR-подобным CAR-рецептором in vitro. Иммунология. 2022; 43 (4): 40111. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-4-401-411
5. Wang T., He T., Ma L., Yang Y., Feng R., Ding Y., Shan Y., Bu B., Qi F., Wu F., Lu X.-A., Liu H. Clinical Outcomes of BCMA CAR-T Cells
in a Multiple Myeloma Patient with Central Nervous System Invasion. Front. Oncol. 2022; 12: 854448. DOI: https://doi.org/10.3389/fonc.2022. 854448
6. Abramson J.S., Palomba M.L., Gordon L.I., Lunning M.A., Wang M., Arnason J., Mehta A., Purev E., Maloney D.G., Andreadis C., Sehgal A., Solomon S.R., Ghosh N., Albertson T.M., Garcia J., Kostic A., Mallaney M., Ogasawara K., Newhall K., Kim Y., Li D., Siddiqi T. Lisocabtagene maraleucel for patients with relapsed or refractory large B-cell lymphomas (TRANSCEND NHL 001): a multicentre seamless design study. Lancet. 2020; 396: 839-52. DOI: https://doi.org/10.1016/ S0140-6736(20)31366-0
7. Chmielewski M., Hombach A.A., Abken H. Antigen-specific T-cell activation independently of the MHC: Chimeric antigen receptor-redirected T cells. Front. Immunol. 2013; 4 (371). DOI: https://doi. org/10.3389/fimmu.2013.00371
8. Parikh R.H., Lonial S. Chimeric antigen receptor T-cell therapy in multiple myeloma: a comprehensive review of current data and implications for clinical practice. CA: Cancer J. Clin. 2023; 73: 275-85. DOI: https://doi.org/10.3322/caac.21771
9. Heiblig M., Elhamri M., Michallet M., Thomas X. Adoptive immunotherapy for acute leukemia: new insights in chimeric antigen receptors. World J. Stem Cells. 2015; 7 (7): 1022-38. DOI: https://doi.org/10.4252/ wjsc.v7.i7.1022
10. Филиппова Ю.Г., Кузнецова М.С., Шевченко Ю.А., Терещенко В.П., Фишер М.С., Курилин В.В., Пашкина Е.А., Акахори Я., Шику Х., Сенников С.В. Фенотип и эффекторные функции GD2-специфичных CAR-T-клеток in vitro. Иммунология. 2022; 43
(5): 525-35. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-5-525-535
11. Lam N., Trinklein N.D., Buelow B., Patterson G.H., Ojha N., Kochenderfer J.N. Anti-BCMA chimeric antigen receptors with fully human heavy-chain-only antigen recognition domains. Nat. Commun. 2020; 11 (1): 283. DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-019-14119-9
12. Julamanee J., Terakura S., Umemura K., Adachi Y., Miyao K., Okuno S., Takagi E., Sakai T., Koyama D., Goto T., Hanajiri R., Hude-cek M., Steinberger P., Leitner J., Nishida T., Murata M., Kiyoi H. Composite CD79A/CD40 co-stimulatory endodomain enhances CD19CAR-T cell proliferation and survival. Mol. Ther. 2021; 29 (9): 2677-90. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.04.038
13. Sterner R.C., Sterner R.M. CAR-T cell therapy: current limitations and potential strategies. Blood Cancer J. 2021; 11 (4): 69. DOI: https://doi.org/10.1038/s41408-021-00459-7
14. Ajina A., Maher J. Strategies to address chimeric antigen receptor tonic signaling. Mol. Cancer Ther. 2018; 17 (9): 1795-815. DOI: https:// doi.org/10.1158/1535-7163.MCT-17-1097
15. Gardner R.A., Finney O., Annesley C., Brakke H., Summers C., Leger K., Bleakley M., Brown C., Mgebroff S., Kelly-Spratt K.S., Hoglund V., Lindgren C., Oron A.P., Li D., Riddell S.R., Park J.R., Jensen M.C. Intent-to-treat leukemia remission by CD19 CAR T cells of defined formulation and dose in children and young adults. Blood. 2017; 129 (25): 3322-31. DOI: https://doi.org/10.1182/blood-2017-02-769208
16. Katz S.C., Burga R.A., McCormack E., Wang L.J., Mooring W., Point G.R., Khare P.D., Thorn M., Ma Q., Stainken B.F., Assanah E.A., Davies R., Espat N.J., Junghans R.P. Phase I hepatic immunotherapy for metastases study of intra-arterial chimeric Antigen receptor-modified T-cell therapy for CEA + liver metastases. Clin. Cancer Res. 2015; 21 (14): 3149-59. DOI: https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-14-1421
17. Dejenie T.A., Medhin M.T.G., Terefe G.D., Admasu F.T., Tesega W.W., Abebe E.C. Current updates on generations, approvals, and clinical trials of CAR T-cell therapy. Hum. Vaccines Immunother. 2022; 18
(6): 2114254. DOI: https://doi.org/10.1080/21645515.2022.2114254
18. Keshavarz A., Salehi A., Khosravi S., Shariati Y., Nasrabadi N., Kahrizi M.S., Maghsoodi S., Mardi A., Azizi R., Jamali S., Fotovat F. Recent findings on chimeric antigen receptor (CAR)-engineered immune cell therapy in solid tumors and hematological malignancies. Stem. Cell Res. Ther. 2022; 13 (1): 482. DOI: https://doi.org/10.1186/s13287-022-03163-w
19. Kloss C.C., Condomines M., Cartellieri M., Bachmann M., Sadelain M. Combinatorial antigen recognition with balanced signaling promotes selective tumor eradication by engineered T cells. Nat. Biotechnol. 2013; 31 (1): 71. DOI: https://doi.org/10.1038/nbt.2459
20. Jain P., Nastoupil L., Westin J., Lee H.J., Navsaria L., Steiner R.E., Ahmed S., Moghrabi O., Oriabure O., Chen W., Badillo M., Flowers C.R., Wang M.L. Outcomes and management of patients with mantle cell lymphoma after progression on brexucabtagene autoleucel therapy. Br. J. Haematol. 2021; 192 (2): e38-42. DOI: https://doi.org/10.1111/bjh.17197
21. Simsek H., Klotzsch E. The solid tumor microenvironment -breaking the barrier for T cells. Bioessays. 2022; 44 (6): 2100285. DOI: https://doi.org/10.1002/bies.202100285
22. Martinez M., Moon E.K. CAR T cells for solid tumors: new strategies for finding, infiltrating, and surviving in the tumor microenvironment. Front. Immunol. 2019; 10: 128. DOI: https://doi.org/10.3389/ fimmu.2019.00128
23. Zhang Z., Lu M., Qin Y., Gao W., Tao L., Su W., Zhong J. Neo-antigen: a new breakthrough in tumor immunotherapy. Front. Immunol. 2021; 12: 672356. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.672356
24. Nisar S., Yousuf P., Masoodi T., Wani N.A., Hashem S., Singh M., Sageena G., Mishra D., Kumar R., Haris M., Bhat A.A., Macha M.A. Che-mokine-cytokine networks in the head and neck tumor microenvironment. Int. J. Mol. Sci. 2021; 22 (9): 1. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms22094584
25. Kozani P.S., Kozani P.S., Rahbarizadeh F. Addressing the obstacles of CAR T cell migration in solid tumors: wishing a heavy traffic. Crit. Rev. Biotechnol. 2022; 42: 1079-98. DOI: https://doi.org/10.1080/073885 51.2021.1988509
26. Stock S., Benmebarek M.R., Kluever A.K., Darowski D., Jost C., Stubenrauch K.G., Benz J., Freimoser-Grundschober A., Moessner E., Umana P., Subklewe M., Endres S., Klein C., Kobold S. Chimeric antigen receptor T cells engineered to recognize the P329G-mutated Fc part of effector silenced tumor antigen-targeting human IgG1 antibodies enable modular targeting of solid tumors. J. Immunother. Cancer. 2022; 10 (7): e005054. DOI: https://doi.org/10.1136/jitc-2022-005054
27. Brown C.E., Aguilar B., Starr R., Yang X., Chang W.C., Weng L., Chang B., Sarkissian A., Brito A., Sanchez J.F., Ostberg J.R., D'Apuzzo M., Badie B., Barish M.E., Forman S.J. Optimization of IL13Ra2-targeted chimeric antigen receptor T cells for improved anti-tumor efficacy against glioblastoma. Mol. Ther. 2018; 26 (1): 31-44. DOI: https://doi.org/10.1016/j. ymthe.2017.10.002
28. Lopez-Cantillo G., Uruena C., Camacho B.A., Ramirez-Segura C. CAR-T cell performance: how to improve their persistence? Front. Immunol. 2022; 13: 878209. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.878209
29. Moretti A., Ponzo M., Nicolette C.A., Tcherepanova I.Y., Biondi A., Magnani C.F. The past, present, and future of non-viral CAR T cells. Front. Immunol. 2022; 13: 867013. DOI: https://doi.org/10.3389/ fimmu.2022.867013
30. Foster J.B., Barrett D.M., Kariko K. The emerging role of in vitro-transcribed mRNA in adoptive T cell immunotherapy. Mol. Ther. 2019; 27
(4): 747-56. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2019.01.018
31. Rurik J.G., Tombacz I., Yadegari A., Fernandez P.O.M., Shewale S.V., Li L., Kimura T., Soliman O.Y., Papp T.E., Tam Y.K., Mui B.L., Albelda S.M., Pure E., June C.H., Aghajanian H., Weissman D., Parhiz H., Epstein J.A. CAR T cells produced in vivo to treat cardiac injury. Science. 2022; 375 (6576): 91-6. DOI: https://doi.org/10.1126/science. abm0594
32. Pearlman A.H., Hwang M.S., Konig M.F., Hsiue E.H.-C., Douglass J., DiNapoli S.R., Mog B.J., Bettegowda C., Pardoll D.M., Gabelli S.B., Papadopoulos N., Kinzler K.W., Vogelstein B., Zhou S. Targeting public neoantigens for cancer immunotherapy. Nat. Cancer. 2021; 2
(5): 487-97. DOI: https://doi.org/10.1038/s43018-021-00210-y
33. Andersen M.H. Tumor microenvironment antigens. Semin. Immu-nopathol. 2023; 45 (2): 253-64. DOI: https://doi.org/10.1007/s00281-022-00966-0
34. D'Souza R.R., Dimou P., Bughda R., Hawkins E., Babe C.L., Klampatsa A. Overcoming tumor antigen heterogeneity in CAR-T cell therapy for malignant mesothelioma (MM). J. Cancer Metastasis Treat. 2022; 8 (5): 28. DOI: https://doi.org/10.20517/2394-4722.2022.51
35. Minutolo N.G., Sharma P., Poussin M., Shaw L.C., Brown D.P., Hollander E.E., Smole A., Rodriguez-Garcia A., Hui J.Z., Zappala F., Tsourkas A., Powell Jr D.J. Quantitative control of gene-engineered T-cell activity through the covalent attachment of targeting ligands to a universal immune receptor. J. Am. Chem. Soc. 2020; 142 (14): 6554-68. DOI: https://doi.org/10.1021/jacs.9b11622
36. Meril S., Harush O., Reboh Y., Matikhina T., Barliya T., Cohen C.J. Targeting glycosylated antigens on cancer cells using siglec-7/9-based CAR T-cells. Mol. Carcinog. 2020; 59 (7): 713-23. DOI: https:// doi.org/10.1002/mc.23213
37. Gumber D., Wang L.D. Improving CAR-T immunotherapy: overcoming the challenges of T cell exhaustion. EBioMedicine. 2022; 77: 103941. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2022.103941
38. Киселевский М.В., Чикилева И.О., Ситдикова С.М., Вла-сенко Р.Я., Караулов А.В. Перспективы применения генетически модифицированных лимфоцитов с химерным Т-клеточным рецептором (CAR-T-клеток) для терапии солидных опухолей. Иммунология. 2019; 40 (4): 48-55. DOI: https://doi.org/10.24411/0206-4952-2019-14006
39. Liu Y., Peng C., Ahad F., Zaidi S.A.A., Muluh T.A., Fu Q. Advanced Strategies of CAR-T Cell Therapy in Solid Tumors and Hema-tological Malignancies. Recent Pat. Anticancer Drug Discov. 2024; 19 (5): 557-72. DOI: https://doi.org/10.2174/0115748928277331231218115402
40. Mai D., Johnson O., Reff J., Fan T.J., Scholler J., Sheppard N.C., June C.H. Combined disruption of T cell inflammatory regulators Reg-nase-1 and Roquin-1 enhances antitumor activity of engineered human T cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2023; 120 (12): e2218632120. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.2218632120
41. Smole A., Benton A., Poussin M.A., Eiva M.A., Mezzanotte C., Camisa B., Greco B., Sharma P., Minutolo N.G., Gray F., Bear A.S., Baroja M.L., Cummins C., Xu C., Sanvito F., Goldgewicht A.L., Blanchard T., Rodriguez-Garcia A., Klichinsky M., Bonini C., June C.H.,
Posey Jr A.D., Linette G.P., Carreno B.M., Casucci M., Powell Jr D.J. Expression of inducible factors reprograms CAR-T cells for enhanced function and safety. Cancer Cell. 2022; 40 (12): 1470-87. DOI: https://doi. org/10.1016/j.ccell.2022.11.006
42. Jogalekar M.P., Rajendran R.L., Khan F., Dmello C., Gangada-ran P., Ahn B.C. CAR T-Cell-Based gene therapy for cancers: new perspectives, challenges, and clinical developments. Front. Immunol. 2022; 13: 925985. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.925985
43. Hamieh M., Dobrin A., Cabriolu A., van der Stegen S.J.C., Giavri-dis T., Mansilla-Soto J., Eyquem J., Zhao Z., Whitlock B.M., Miele M.M., Li Z., Cunanan K.M., Huse M., Hendrickson R.C., Wang X., Riviere I., Sadelain M. CAR T cell trogocytosis and cooperative killing regulate tumour antigen escape. Nature. 2019; 568 (7750): 112-6. DOI: https://doi. org/10.1038/s41586-019-1054-1
44. Qin H., Ramakrishna S., Nguyen S., Fountaine T.J., Ponduri A., Stetler-Stevenson M., Yuan C.M., Haso W., Shern J.F., Shah N.N., Fry T.J. Preclinical development of bivalent chimeric antigen receptors targeting both CD19 and CD22. Mol. Ther. Oncolytics. 2018; 11: 127-37. DOI: https://doi.org/10.1016/j.omto.2018.10.006
45. Кузнецова М.С., Терещенко В.П., Шевченко Ю.А., Фишер М.С., Курилин В.В., Алсаллум А., Алрхмун С., Акахори Я., Шику Х., Сенников С.В. Фенотипические и функциональные особенности генерированных in vitro TCR-Т-клеток, специфичных к опухоль-ассоциированному антигену NY-ESO-1. Иммунология. 2022; 43 (5): 536-47. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-5-536-547
46. Zimmermann K., Kuehle J., Dragon A.C., Galla M., Kloth C., Rudek L.S., Sandalcioglu I.E., Neyazi B., Moritz T., Meyer J., Rossig C., Altvater B., Eiz-Vesper B., Morgan M.A., Abken H., Schambach A. Design and Characterization of an "All-in-One" Lentiviral Vector System Combining Constitutive Anti-GD2 CAR Expression and Inducible Cytokines. Cancers (Basel). 2020; 12 (2): 375. DOI: https://doi.org/10.3390/can-cers12020375
47. Liu G., Rui W., Zhao X., Lin X. Enhancing CAR-T cell efficacy in solid tumors by targeting the tumor microenvironment. Cell Mol. Immunol. 2021; 18 (5): 1085-95. DOI: https://doi.org/10.1038/s41423-021-00655-2
48. Guzman G., Reed M.R., Bielamowicz K., Koss B., Rodriguez A. CAR-T Therapies in Solid Tumors: Opportunities and Challenges. Curr. Oncol. Rep. 2023; 25 (5): 479-89. DOI: https://doi.org/10.1007/s11912-023-01380-x
49. Wei S.C., Duffy C.R., Allison J.P. Fundamental mechanisms of immune checkpoint blockade therapy. Cancer Discov. 2018; 8 (9): 106986. DOI: https://doi.org/10.1158/2159-8290.CD-18-0367
50. Ligtenberg M.A., Mougiakakos D., Mukhopadhyay M., Witt K., Lladser A., Chmielewski M., Riet T., Abken H., Kiessling R. Coexpressed
catalase protects chimeric antigen receptorredirected T cells as well as bystander cells from oxidative stress-induced loss of antitumor activity. J. Immunol. 2016; 196 (2): 759-66. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmu-nol.1401710
51. Santomasso B., Bachier C., Westin J., Rezvani K., Shpall E.J. The other side of CAR T-cell therapy: cytokine release syndrome, neurologic toxicity, and financial burden. Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Book. 2019; 39: 433-44. DOI: https://doi.org/10.1200/EDBK_238691
52. Rendo M.J., Joseph J.J., Phan L.M., DeStefano C.B. CAR T-cell therapy for patients with multiple myeloma: current evidence and challenges. Blood Lymphat. Cancer. 2022; 12: 119-36. DOI: https://doi. org/10.2147/BLCTT. S327016
53. Sengsayadeth S., Savani B.N., Oluwole O., Dholaria B. Overview of approved CAR-T therapies, ongoing clinical trials, and its impact on clinical practice. Eur. J. Haematol. 2021; 3 (Suppl 1): 6-10. DOI: https:// doi.org/10.1002/jha2.338
54. Martin T., Jackson C.C., Pacaud L., Madduri D., Jagannath S. Recent Advances in the Use of Chimeric Antigen Receptor-Expressing T-Cell Therapies for Treatment of Multiple Myeloma. Clin. Lymphoma Myeloma Leuk. 2023; 23 (1): 22-7. DOI: https://doi.org/10.1016/j. clml.2022.09.001
55. Shargian L., Raanani P., Yeshurun M., Gafter-Gvili A., Gurion R. Chimeric antigen receptor T-cell therapy is superior to standard of care as second-line therapy for large B-cell lymphoma: A systematic review and meta-analysis. Br. J. Haematol. 2022; 198: 838-46. DOI: https://doi. org/10.1111/bjh.18335
56. Wu C.-Y., Roybal K.T., Puchner E.M., Onuffer J., Lim W.A. Remote control of therapeutic T cells through a small molecule-gated chimeric receptor. Science. 2015; 350 (6258): aab4077. DOI: https://doi. org/10.1126/science.aab4077
57. Park S., Shevlin E., Vedvyas Y., Zaman M., Park S., Hsu Y.-M.S., Min I.M., Jin M.M. Micromolar affinity CAR T cells to ICAM-1 achieves rapid tumor elimination while avoiding systemic toxicity. Sci. Rep. 2017; 7 (1): 14366. DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-017-14749-3
58. Терещенко В.П., Сенников С.В. Опухолевые ксенотрансплан-таты как модель для доклинических испытаний генетически модифицированных клеточных препаратов. Иммунология. 2021; 42 (6): 73041. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-730-741
59. Лопатникова Ю.А., Шевченко Ю.А., Филиппова Ю.В., Фишер М.С., Облеухова И.А., Завьялов Е.Л., Соловьева О.И., Разумов И.А., Акахори Я., Шику Х., Сенников С.В. Разработка экспериментальных моделей ксенотрансплантата опухолей человека на мышах для доклинических исследований in vivo препаратов для клеточной иммунотерапии. Иммунология. 2023; 44 (6): 709-20. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2023-44-6-709-720
■ References
1. GlobalSurg Collaborative and National Institute for Health Research Global Health Research Unit on Global Surgery. Global variation in postoperative mortality and complications after cancer surgery: a multicentre, prospective cohort study in 82 countries. Lancet. 2021; 397: 387-97. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21)00001-5
2. Sirini C., De Rossi L., Moresco M.A., Casucci M. CAR T cells in solid tumors and metastasis: paving the way forward. Cancer Metastasis Rev. 2024; 1-18. PMID: 39316265. DOI: https://doi.org/10.1007/s10555-024-10213-7
3. June C.H., O'Connor R.S., Kawalekar O.U., Ghassemi S., Milone M.C. CAR T cell immunotherapy for human cancer. Science. 2018; 359 (6382): 1361-5. DOI: https://doi.org/10.1126/science.aar6711
4. Tereshchenko V.P., Kuznetsova М.S., Shevchenko J^., Fisher М.S., Kurilin V.V., Alsalloum Akahori Yu., Shiku H., Sennikov S.V. Study of MAGE-A4 specific TCR-like CAR-T lymphocytes in vitro. Immu-nologiya. 2022; 43 (4): 401-11. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-4-401-411 (in Russian)
5. Wang T., He T., Ma L., Yang Y., Feng R., Ding Y., Shan Y., Bu B., Qi F., Wu F., Lu X.-A., Liu H. Clinical Outcomes of BCMA CAR-T Cells in a Multiple Myeloma Patient with Central Nervous System Invasion. Front. Oncol. 2022; 12: 854448. DOI: https://doi.org/10.3389/fonc.2022.854448
6. Abramson J.S., Palomba M.L., Gordon L.I., Lunning M.A., Wang M., Arnason J., Mehta A., Purev E., Maloney D.G., Andreadis C., Sehgal A., Solomon S.R., Ghosh N., Albertson T.M., Garcia J., Kostic A.,
Mallaney M., Ogasawara K., Newhall K., Kim Y., Li D., Siddiqi T. Lisocabtagene maraleucel for patients with relapsed or refractory large B-cell lymphomas (TRANSCEND NHL 001): a multicentre seamless design study. Lancet. 2020; 396: 839-52. DOI: https://doi.org/10.1016/ S0140-6736(20)31366-0
7. Chmielewski M., Hombach A.A., Abken H. Antigen-specific T-cell activation independently of the MHC: Chimeric antigen receptor-redirected T cells. Front Immunol. 2013; 4 (371). DOI: https://doi.org/10.3389/ fimmu.2013.00371
8. Parikh R.H., Lonial S. Chimeric antigen receptor T-cell therapy in multiple myeloma: a comprehensive review of current data and implications for clinical practice. CA: Cancer J Clin. 2023; 73: 275-85. DOI: https://doi.org/10.3322/caac.21771
9. Heiblig M., Elhamri M., Michallet M., Thomas X. Adoptive immu-notherapy for acute leukemia: new insights in chimeric antigen receptors. World J Stem Cells. 2015; 7 (7): 1022-38. DOI: https://doi.org/10.4252/ wjsc.v7.i7.1022
10. Philippova J.G., Kuznetsova М.S., Shevchenko J^., Tereshchenko V.P., Fisher М.S., Kurilin V.V., Pashkina Е.А., Akahori Ya., Shiku H., Sennikov S.V. Phenotype and effector functions of GD2-specific CAR-T lymphocytes in vitro. Immunologiya. 2022; 43 (5): 525-35. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-5-525-535 (in Russian)
11. Lam N., Trinklein N.D., Buelow B., Patterson G.H., Ojha N., Kochenderfer J.N. Anti-BCMA chimeric antigen receptors with fully
human heavy-chain-only antigen recognition domains. Nat Commun. 2020; 11 (1): 283. DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-019-14119-9
12. Julamanee J., Terakura S., Umemura K., Adachi Y., Miyao K., Okuno S., Takagi E., Sakai T., Koyama D., Goto T., Hanajiri R., Hude-cek M., Steinberger P., Leitner J., Nishida T., Murata M., Kiyoi H. Composite CD79A/CD40 co-stimulatory endodomain enhances CD19CAR-T cell proliferation and survival. Mol Ther. 2021; 29 (9): 2677-90. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.04.038
13. Sterner R.C., Sterner R.M. CAR-T cell therapy: current limitations and potential strategies. Blood Cancer J. 2021; 11 (4): 69. DOI: https://doi.org/10.1038/s41408-021-00459-7
14. Ajina A., Maher J. Strategies to address chimeric antigen receptor tonic signaling. Mol Cancer Ther. 2018; 17 (9): 1795-815. DOI: https:// doi.org/10.1158/1535-7163.MCT-17-1097
15. Gardner R.A., Finney O., Annesley C., Brakke H., Summers C., Leger K., Bleakley M., Brown C., Mgebroff S., Kelly-Spratt K.S., Hoglund V., Lindgren C., Oron A.P., Li D., Riddell S.R., Park J.R., Jensen M.C. Intent-to-treat leukemia remission by CD19 CAR T cells of defined formulation and dose in children and young adults. Blood. 2017; 129 (25): 3322-31. DOI: https://doi.org/10.1182/blood-2017-02-769208
16. Katz S.C., Burga R.A., McCormack E., Wang L.J., Mooring W., Point G.R., Khare P.D., Thorn M., Ma Q., Stainken B.F., Assanah E.A., Davies R., Espat N.J., Junghans R.P. Phase I hepatic immunotherapy for metastases study of intra-arterial chimeric Antigen receptor-modified T-cell therapy for CEA + liver metastases. Clin Cancer Res. 2015; 21 (14): 3149-59. DOI: https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-14-1421
17. Dejenie T.A., Medhin M.T.G.., Terefe G.D., Admasu F.T., Tesega W.W., Abebe E.C. Current updates on generations, approvals, and clinical trials of CAR T-cell therapy. Hum. Vaccines Immunother. 2022; 18 (6): 2114254. DOI: https://doi.org/10.1080/21645515.2022.2114254
18. Keshavarz A., Salehi A., Khosravi S., Shariati Y., Nasrabadi N., Kahrizi M.S., Maghsoodi S., Mardi A., Azizi R., Jamali S., Fotovat F. Recent findings on chimeric antigen receptor (CAR)-engineered immune cell therapy in solid tumors and hematological malignancies. Stem Cell Res. Ther. 2022; 13 (1): 482. DOI: https://doi.org/10.1186/s13287-022-03163-w
19. Kloss C.C., Condomines M., Cartellieri M., Bachmann M., Sade-lain M. Combinatorial antigen recognition with balanced signaling promotes selective tumor eradication by engineered T cells. Nat Biotechnol. 2013; 31 (1): 71. DOI: https://doi.org/10.1038/nbt.2459
20. Jain P., Nastoupil L., Westin J., Lee H.J., Navsaria L., Steiner R.E., Ahmed S., Moghrabi O., Oriabure O., Chen W., Badillo M., Flowers C.R., Wang M.L. Outcomes and management of patients with mantle cell lymphoma after progression on brexucabtagene autoleucel therapy. Br J Haematol. 2021; 192 (2): e38-42. DOI: https://doi.org/10.1111/bjh.17197
21. Simsek H., Klotzsch E. The solid tumor microenvironment -breaking the barrier for T cells. Bioessays. 2022; 44 (6): 2100285. DOI: https://doi.org/10.1002/bies.202100285
22. Martinez M., Moon E.K. CAR T cells for solid tumors: new strategies for finding, infiltrating, and surviving in the tumor microenvironment. Front Immunol. 2019; 10: 128. DOI: https://doi.org/10.3389/ fimmu.2019.00128
23. Zhang Z., Lu M., Qin Y., Gao W., Tao L., Su W., Zhong J. Neoan-tigen: a new breakthrough in tumor immunotherapy. Front Immunol. 2021; 12: 672356. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.672356
24. Nisar S., Yousuf P., Masoodi T., Wani N.A., Hashem S., Singh M., Sageena G., Mishra D., Kumar R., Haris M., Bhat A.A., Macha M.A. Che-mokine-cytokine networks in the head and neck tumor microenvironment. Int J Mol Sci. 2021; 2 2(9): 1. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms22094584
25. Kozani P.S., Kozani P.S., Rahbarizadeh F. Addressing the obstacles of CAR T cell migration in solid tumors: wishing a heavy traffic. Crit Rev Biotechnol. 2022; 42: 1079-98. DOI: https://doi.org/10.1080/073885 51.2021.1988509
26. Stock S., Benmebarek M.R., Kluever A.K., Darowski D., Jost C., Stubenrauch K.G., Benz J., Freimoser-Grundschober A., Moessner E., Umana P., Subklewe M., Endres S., Klein C., Kobold S. Chimeric antigen receptor T cells engineered to recognize the P329G-mutated Fc part of effector silenced tumor antigen-targeting human IgG1 antibodies enable modular targeting of solid tumors. J Immunother Cancer. 2022; 10 (7): e005054. DOI: https://doi.org/10.1136/jitc-2022-005054
27. Brown C.E., Aguilar B., Starr R., Yang X., Chang W.C., Weng L., Chang B., Sarkissian A., Brito A., Sanchez J.F., Ostberg J.R., D'Apuzzo M., Badie B., Barish M.E., Forman S.J. Optimization of IL13Ra2-targeted chi-
meric antigen receptor T cells for improved anti-tumor efficacy against glioblastoma. Mol Ther. 2018; 26 (1): 31-44. DOI: https://doi.org/10.1016/j. ymthe.2017.10.002
28. Lopez-Cantillo G., Uruena C., Camacho B.A., Ramirez-Segura C. CAR-T cell performance: how to improve their persistence? Front Immunol. 2022; 13: 878209. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.878209
29. Moretti A., Ponzo M., Nicolette C.A., Tcherepanova I.Y., Biondi A., Magnani C.F. The past, present, and future of non-viral CAR T cells. Front Immunol. 2022; 13: 867013. DOI: https://doi.org/10.3389/ fimmu.2022.867013
30. Foster J.B., Barrett D.M., Kariko K. The emerging role of in vitro-transcribed mRNA in adoptive T cell immunotherapy. Mol Ther. 2019; 27
(4): 747-56. DOI: https://doi.org/10.1016Zj.ymthe.2019.01.018
31. Rurik J.G., Tombacz I., Yadegari A., Fernandez P.O.M., Shewale S.V., Li L., Kimura T., Soliman O.Y., Papp T.E., Tam Y.K., Mui B.L., Albelda S.M., Pure E., June C.H., Aghajanian H., Weissman D., Parhiz H., Epstein J.A. CAR T cells produced in vivo to treat cardiac injury. Science. 2022; 375 (6576): 91-6. DOI: https://doi.org/10.1126/science. abm0594
32. Pearlman A.H., Hwang M.S., Konig M.F., Hsiue E.H.-C., Douglass J., DiNapoli S.R., Mog B.J., Bettegowda C., Pardoll D.M., Gabelli S.B., Papadopoulos N., Kinzler K.W., Vogelstein B., Zhou S. Targeting public neoantigens for cancer immunotherapy. Nat Cancer. 2021; 2
(5): 487-97. DOI: https://doi.org/10.1038/s43018-021-00210-y
33. Andersen M.H. Tumor microenvironment antigens. Semin Immu-nopathol. 2023; 45 (2): 253-64. DOI: https://doi.org/10.1007/s00281-022-00966-0
34. D'Souza R.R., Dimou P., Bughda R., Hawkins E., Babe C.L., Klampatsa A. Overcoming tumor antigen heterogeneity in CAR-T cell therapy for malignant mesothelioma (MM). J Cancer Metastasis Treat. 2022; 8 (5): 28. DOI: https://doi.org/10.20517/2394-4722.2022.51
35. Minutolo N.G., Sharma P., Poussin M., Shaw L.C., Brown D.P., Hollander E.E., Smole A., Rodriguez-Garcia A., Hui J.Z., Zappala F., Tsourkas A., Powell Jr D.J. Quantitative control of gene-engineered T-cell activity through the covalent attachment of targeting ligands to a universal immune receptor. J Am Chem Soc. 2020; 142 (14): 6554-68. DOI: https:// doi.org/10.1021/jacs.9b11622
36. Meril S., Harush O., Reboh Y., Matikhina T., Barliya T., Cohen C.J. Targeting glycosylated antigens on cancer cells using siglec-7/9-based CAR T-cells. Mol Carcinog. 2020; 59 (7): 713-23. DOI: https:// doi.org/10.1002/mc.23213
37. Gumber D., Wang L.D. Improving CAR-T immunotherapy: overcoming the challenges of T cell exhaustion. EBioMedicine. 2022; 77: 103941. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2022.103941
38. Kiselevsky М.V., Chikileva m., Sitdikova SM., Vlasenko R.Ya., Karaulov А.V. Prospectives of application of the genetically modified lymphocytes with chimeric T-cell receptor (CAR-T-cells) for the therapy of solid tumors. Immunologiya. 2019; 40 (4): 48-55. DOI: https://doi. org/10.24411/0206-4952-2019-14006 (in Russian)
39. Liu Y., Peng C., Ahad F., Zaidi S.A.A., Muluh T.A., Fu Q. Advanced Strategies of CAR-T Cell Therapy in Solid Tumors and Hema-tological Malignancies. Recent Pat Anticancer Drug Discov. 2024; 19 (5): 557-72. DOI: https://doi.org/10.2174/0115748928277331231218115402
40. Mai D., Johnson O., Reff J., Fan T.J., Scholler J., Sheppard N.C., June C.H. Combined disruption of T cell inflammatory regulators Reg-nase-1 and Roquin-1 enhances antitumor activity of engineered human T cells. Proc Natl Acad Sci USA. 2023; 120 (12): e2218632120. DOI: https:// doi.org/10.1073/pnas.2218632120
41. Smole A., Benton A., Poussin M.A., Eiva M.A., Mezzanotte C., Camisa B., Greco B., Sharma P., Minutolo N.G., Gray F., Bear A.S., Baroja M.L., Cummins C., Xu C., Sanvito F., Goldgewicht A.L., Blanchard T., Rodriguez-Garcia A., Klichinsky M., Bonini C., June C.H., Posey Jr A.D., Linette G.P., Carreno B.M., Casucci M., Powell Jr D.J. Expression of inducible factors reprograms CAR-T cells for enhanced function and safety. Cancer Cell. 2022; 40 (12): 1470-87. DOI: https://doi. org/10.1016/j.ccell.2022.11.006
42. Jogalekar M.P., Rajendran R.L., Khan F., Dmello C., Gangada-ran P., Ahn B.C. CAR T-Cell-Based gene therapy for cancers: new perspectives, challenges, and clinical developments. Front Immunol. 2022; 13: 925985. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.925985
43. Hamieh M., Dobrin A., Cabriolu A., van der Stegen S.J.C., Giavri-dis T., Mansilla-Soto J., Eyquem J., Zhao Z., Whitlock B.M., Miele M.M., Li Z., Cunanan K.M., Huse M., Hendrickson R.C., Wang X., Riviere I.,
Sadelain M. CAR T cell trogocytosis and cooperative killing regulate tumour antigen escape. Nature. 2019; 568 (7750): 112-6. DOI: https://doi. org/10.1038/s41586-019-1054-1
44. Qin H., Ramakrishna S., Nguyen S., Fountaine T.J., Ponduri A., Stetler-Stevenson M., Yuan C.M., Haso W., Shern J.F., Shah N.N., Fry T.J. Preclinical development of bivalent chimeric antigen receptors targeting both CD19 and CD22. Mol Ther Oncolytics. 2018; 11: 127-37. DOI: https://doi.org/10.1016/j.omto.2018.10.006
45. Kuznetsova М^., Tereshchenko V.P., Shevchenko Yu^., Fisher М.S., Kurilin V.V., Alsalloum А., Alrhmoun S., Akahori Ya., Shiku H., Sennikov S.V. Phenotypic and functional features of in vitro generated TCR-T cells specific for the tumor-associated antigen NY-ESO-1. Immunologiya. 2022; 43 (5): 536-47. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-5-536-547 (in Russian)
46. Zimmermann K., Kuehle J., Dragon A.C., Galla M., Kloth C., Rudek L.S., Sandalcioglu I.E., Neyazi B., Moritz T., Meyer J., Rossig C., Altvater B., Eiz-Vesper B., Morgan M.A., Abken H., Schambach A. Design and Characterization of an "All-in-One" Lentiviral Vector System Combining Constitutive Anti-GD2 CAR Expression and Inducible Cytokines. Cancers (Basel). 2020; 12 (2): 375. DOI: https://doi.org/10.3390/cancers12020375
47. Liu G., Rui W., Zhao X., Lin X. Enhancing CAR-T cell efficacy in solid tumors by targeting the tumor microenvironment. Cell Mol Immunol. 2021; 18 (5): 1085-95. DOI: https://doi.org/10.1038/s41423-021-00655-2
48. Guzman G., Reed M.R., Bielamowicz K., Koss B., Rodriguez A. CAR-T Therapies in Solid Tumors: Opportunities and Challenges. Curr Oncol Rep. 2023; 25 (5): 479-89. DOI: https://doi.org/10.1007/s11912-023-01380-x
49. Wei S.C., Duffy C.R., Allison J.P. Fundamental mechanisms of immune checkpoint blockade therapy. Cancer Discov. 2018; 8 (9): 106986. DOI: https://doi.org/10.1158/2159-8290.CD-18-0367
50. Ligtenberg M.A., Mougiakakos D., Mukhopadhyay M., Witt K., Lladser A., Chmielewski M., Riet T., Abken H., Kiessling R. Coexpressed catalase protects chimeric antigen receptorredirected T cells as well as bystander cells from oxidative stress-induced loss of antitumor activity. J Immunol. 2016; 196 (2): 759-66. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmu-nol.1401710
51. Santomasso B., Bachier C., Westin J., Rezvani K., Shpall E.J. The other side of CAR T-cell therapy: cytokine release syndrome, neurologic
■ Сведения об авторах
Пучков Илья Александрович - канд. хим. наук, науч. сотр. лаб. клеточной и генной терапии научно-исследовательского отд. молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0001-6651-8975
Кулинич Татьяна Михайловна - канд. мед. наук, зав. лаб. иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий научно-исследовательского отд. молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0003-2331-5753
Парфенюк Елена Игоревна - мл. науч. сотр. лаб. иммунологии и онкоцитологии научно-исследовательского отдела молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0000-1284-9560
toxicity, and financial burden. Am Soc Clin Oncol Educ Book. 2019; 39: 433-44. DOI: https://doi.org/10.1200/EDBK_238691
52. Rendo M.J., Joseph J.J., Phan L.M., DeStefano C.B. CAR T-cell therapy for patients with multiple myeloma: current evidence and challenges. Blood Lymphat Cancer. 2022; 12: 119-36. DOI: https://doi. org/10.2147/BLCTT. S327016
53. Sengsayadeth S., Savani B.N., Oluwole O., Dholaria B. Overview of approved CAR-T therapies, ongoing clinical trials, and its impact on clinical practice. Eur J Haematol. 2021; 3 (Suppl 1): 6-10. DOI: https:// doi.org/10.1002/jha2.338
54. Martin T., Jackson C.C., Pacaud L., Madduri D., Jagannath S. Recent Advances in the Use of Chimeric Antigen Receptor-Expressing T-Cell Therapies for Treatment of Multiple Myeloma. Clin Lymphoma Myeloma Leuk. 2023; 23 (1): 22-7. DOI: https://doi.org/10.1016/j. clml.2022.09.001
55. Shargian L., Raanani P., Yeshurun M., Gafter-Gvili A., Gurion R. Chimeric antigen receptor T-cell therapy is superior to standard of care as second-line therapy for large B-cell lymphoma: A systematic review and meta-analysis. Br J Haematol. 2022; 198: 838-46. DOI: https://doi. org/10.1111/bjh.18335
56. Wu C.-Y., Roybal K.T., Puchner E.M., Onuffer J., Lim W.A. Remote control of therapeutic T cells through a small molecule-gated chimeric receptor. Science. 2015; 350 (6258): aab4077. DOI: https://doi. org/10.1126/science.aab4077
57. Park S., Shevlin E., Vedvyas Y., Zaman M., Park S., Hsu Y.-M.S., Min I.M., Jin M.M. Micromolar affinity CAR T cells to ICAM-1 achieves rapid tumor elimination while avoiding systemic toxicity. Sci Rep. 2017; 7 (1): 14366. DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-017-14749-3
58. Tereshchenko V.P., Sennikov S.V. Tumor xenografts as the model for a preclinical trials of genetically modified cell therapy. Immunologiya. 2021; 42 (6): 73041. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-730-741 (in Russian)
59. Lopatnikova J^., Shevchenko JA., Filippova J.G., Fisher М.S., Obleuhova I. А., Zavjalov Е.L., Solovjeva О.I., Razumov IA., Akahori Ya., Shiku H., Sennikov S.V. Development of experimental mouse xenograft models of human tumors for preclinical in vivo studies of product for cellular immunotherapy. Immunologiya. 2023; 44 (6): 709-20. DOI: https://doi. org/10.33029/0206-4952-2023-44-6-709-720 (in Russian)
■ Authors' information
Ilya A. Puchkov - PhD, Researcher of the Cell and Gene Therapy Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0001-6651-8975
Tatyana M. Kulinich - PhD, Head of the Immunology, Oncocytology and Cell Technologies Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0003-2331-5753
Elena I. Parfenyuk - Junior Researcher of the Immunology and Oncocytology Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0009-0000-1284-9560
Киселева Яна Юрьевна - канд. мед. наук, науч. сотр. лаб. иммунологии и онкоцитологии научно-исследовательского отдела молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8352-4787
Каминский Валерий Васильевич - мл. науч. сотр. лаб. клеточной и генной терапии научно-исследовательского отд. молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-5702-6090
Шишкин Александр Михайлович - канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. иммунологии и онкоцитологии научно-исследовательского отдела молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8934-2845
Никируй Эрнест Ярославович - директор ООО «НПЦ "Альфа"», Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected]
Боженко Владимир Константинович - д-р мед. наук, проф., зав. научно-исследовательским отд. молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8351-8152
Yana Yu. Kiseleva - PhD, Researcher of the Immunology and Oncocytology Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8352-4787
Valery V. Kaminsky - Junior Researcher of the Cell and Gene Therapy Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-5702-6090
Alexander M. Shishkin - PhD, Senior Researcher of the Immunology and Oncocytology Lab., Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8934-2845
Ernest Ya. Nikiruy - Director of LLC «Scientific and Production Center "Alpha"», 125481, Moscow, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Vladimir K. Bozhenko - MD, PhD, Prof., Head of the Research Dept. of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, RSCRR of the MOH of Russia, Russian Federation
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8351-8152
