CC BY
64
УДК 616.248-056:575.174.015.3 ББК 54.124,2 П 20
Руденко Ксения Андреевна
Кандидат биологических наук, иммуногенетическая лаборатория НИИ Комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, e-mail: [email protected]
Тугуз Аминат Рамазановна
Доктор биологических наук, профессор кафедры ботаники факультета естествознания, зав. иммуноге-нетической лабораторией НИИ комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, тел. (8772) 593941, e-mail: [email protected] Муженя Дмитрий Витальевич
Кандидат биологических наук, иммуногенетическая лаборатория НИИ Комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, e-mail: [email protected]
Нихай Мира Мосовна
Терапевт-пульмонолог, зав. пульмонологическим отделением Адыгейской республиканской клинической больницы, Майкоп, e-mail: [email protected]
Татаркова Елена Анатольевна
Аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, Майкоп, тел. (8772) 593941, Майкоп, e-mail: [email protected] Шумилов Дмитрий Сергеевич
Кандидат биологических наук, иммуногенетическая лаборатория НИИ Комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, e-mail: [email protected] Смольков Иван Владимирович
Кандидат биологических наук, иммуногенетическая лаборатория НИИ Комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, e-mail: [email protected]
Патофизиологические механизмы развития бронхиальной астмы с участием полиморфных вариантов C-786T гена NOS3
(Рецензирована)
Аннотация. Ассоциация C-786T (rs2070744) полиморфизма гена синтазы оксида азота NOS3, контролирующего продукцию внутриклеточного мессенджера NO, проанализирована в пилотном исследовании с информированного согласия больных пульмонологического отделения Адыгейской республиканской клинической больницы с тяжелыми формами бронхиальной астмы, диагностированными в соответствии с критериями GINA (2011). Несмотря на участие NOS3 в патофизиологических процессах и достоверную ассоциацию C-786T гена NOS3, с такими клиническими проявлениями бронхиальной астмы, как отек и бронхоспазм во многих регионах мира, у жителей Республики Адыгея не подтверждена статистически значимая связь C-786T гена NOS3 со смешанными формами заболевания.
Ключевые слова: бронхиальная астма, смешанная SNP, NOS1, NOS2, NOS3, NO, C-786T (rs2070744) NOS3, отек легких, гипперреактивность бронхов, бронхоспазм.
Rudenko Kseniya Andreevna
Candidate of Biology, Immunogenetic Laboratory of Research Institute of Complex Problems, Adyghe State University, Maikop, e-mail: [email protected]
Tuguz Aminat Ramazanovna
Doctor of Biology, Professor of Botany Department of Natural Science Faculty, Head of Immunogenetic Laboratory of Research Institute of Complex Problems, Adyghe State University, Maikop, ph. (8772) 593941, e-mail: [email protected] Muzhenya Dmitriy Vitalyevich
Candidate of Biology, Immunogenetic Laboratory of Research Institute of Complex Problems, Adyghe State University, Maikop, e-mail: [email protected]
Nikhay Mira Mossovna
Therapeutist-Pulmonologist, Head of Pulmonic Department of the Adyghe Republican Clinical Hospital, Maikop, e-mail e-mail: [email protected]
Tatarkova Elena Anatolyevna
Post-graduate student of Botany Department of Natural Science Faculty, Adyghe State University, Maikop, ph. (8772) 593941, e-mail: [email protected] Shumilov Dmitriy Sergeevich
Candidate of Biology, Immunogenetic Laboratory of Research Institute of Complex Problems, Adyghe State University, Maikop, e-mail: [email protected]
Smolkov Ivan Vladimirovich
Candidate of Biology, Immunogenetic Laboratory of Research Institute of Complex Problems, Adyghe State
University, Maikop, e-mail: [email protected]
Pathophysiological mechanisms of development of bronchial asthma with participation of C-786T polymorphic variants of NOS3 gene
Abstract. The C-786T association (rs2070744) of gene polymorphism of nitric oxide synthase NOS3 controlling products of the NO intracellular messenger is analyzed in a pilot research according to the informed consent ofpatients of pulmonary department of the Adyghe Republican Clinical Hospital with the severe forms of bronchial asthma diagnosed according to GINA criteria (2011). Despite participation of NOS3 in pathophysiological processes and reliable association C-786T of NOS3 gene, with such clinical manifestations of bronchial asthma as hypostasis and a broncho-spasm in many regions of the world, statistically significant relationship of C-786T of NOS3 gene with the mixed disease forms is not confirmed at inhabitants of the Republic of Adyghea.
Keywords: the bronchial asthma, mixed SNP, NOS1, NOS2, NOS3, NO, C-786T (rs2070744) of NOS3, a pulmonary edema, hyperreactivity of bronchial tubes, a bronchospasm.
Введение. Бронхиальная астма (БА) относится к одним из самых распространенных (около 300 млн. больных) в мире хронических воспалительных заболеваний легких (ХВЗЛ), к 2025 году, по данным экспертов ВОЗ, возможен рост до 400 млн. человек. В России, при самой низкой заболеваемости, смертность от БА превышает мировые показатели и составляет 28,6 случаев на 100 тыс. населения [1]. В Республике Адыгея (РА), по данным медицинского информационно-аналитического центра (МИАЦ, 2017), с 2011 по 2017 гг. наблюдается тенденция роста случаев БА среди детей и подростков в возрасте 1-14 лет (соответственно 53% и 49% от всех болезней органов дыхания).
Патогенетические механизмы развития бронхиальной астмы связаны со стойкой бронхиальной гиперреактивностью, повторяющимися эпизодами свистящих хрипов, снижающими качество жизни, одышкой и сопряжены с высоким риском неблагоприятного исхода. Гене -тический компонент при БА составляет 50-70%, при этом условно выделяют группы протек-тивных и ассоциированных с БА генов [1]. Однако некоторые гены, в частности, синтазы оксида азота (NOS) - внутриклеточного мессенджера NO, могут проявлять двойственный эффект, что в свою очередь зависит от их полиморфных вариантов и клеточных линий, продуцирующих маркер атопического воспаления при БА - оксид азота (NO) [2, 3].
NO регулирует сосудистое сопротивление, запускает воспалительные процессы, оказывает бронхорасширяющее действие и дилятацию артерий, блокируя высвобождение ацетил-холина, усиливает активность реснитчатого эпителия бронхов и повышает мукоцилиарный транспорт, запуская патофизиологические механизмы и усиливая такие клинические проявления бронхиальной астмы, как отек и бронхоспазм [4].
Высокая концентрация оксида азота в очаге воспаления влияет на альвеолярные макрофаги со снижением активности 5-липоксигеназ и НАДФН-оксидаз, что приводит к повышению синтеза медиаторов воспаления, активности циклооксигеназ и оверэкспрессии лекот-риенов - метаболитов арахидоновой кислоты. Оксид азота также влияет на баланс Th1/Th2, смещая в сторону Th2, способствуя тем самым эозинофильной и нейтрофильной инфильтрации дыхательных путей - одного из ключевых звеньев патогенеза БА [4, 5].
Уровни NO регулируются синтазами оксида азота, которые у человека представлены тремя изоформами: нейронной (nNOS или NOS-1), индуцибельной (iNOS или NOS-2) и сосудистой эндотелиальной (eNOS или NOS - 3). Все три изоформы NOS (NOS1, NOS2, NOS3) продуцируются клетками дыхательных путей и синтезируют оксид азота из L-аргинина. NOS1, NOS3 относят к кальций- и кальмодулин зависимым синтазам, NOS2 активируется провоспалительными цитокинами (TNF-a, IL-1, INF-y). Каждая из трех синтаз (NOS1, NOS2, NOS3) кодируется разными генами, расположенными соответственно на 12, 17 и 7 хромосомах. Полиморфные варианты в промоторных регионах генов NOS1,2,3 могут индуцировать снижение или, наоборот, гиперпродукцию оксида азота, что в конечном итоге приводит к разнонаправленным эффектам с выраженным цитотоксическим, антибактериальным, противогрибковым действием, способствуя развитию воспалительного процесса и иммунной за-
щите, а также к повреждению ДНК, ингибированию митохондриального дыхания и усилению апоптоза клеток [4, 5].
Полиморфизмы генов NOS1,2,3 оказывают влияние на развитие патофизиологической стадии и тяжести последующих клинических проявлений у детей и взрослых, что подтверждено крупномасштабными исследованиями (табл. 1) по анализу роли SNP генов NOS1,2,3 в развитии БА (HuGE Navigator, PubMed, NCBI, дата обращения 09.2018) [3].
Таблица 1
SNP генов NOS1,2,3 при БА (HuGEN, PubMed, NCBI, дата обращения 09.2018)
№ Год иссл. Авторы Страна Выборка Ассоциированные, протектив-ные аллели, генотипы
эксперим. группа контр. группа
1. 2017 Iordanidou M. [et al.] [61 Греция 193 (дети) 96 NOS3-894GG N083-78611 - ассоциированы
2. 2012 Bouzigon E. [et al.] [7] Франция 388 415 N083 ге743507 ассоциированы
3. 2012 Dahgam S. [et al.] [8] Швеция 1737 (эпидемиологическое исследование) N082 ге9901734 G аллель ^3729508 СС или СТ N083 8№ге7830 GT или ТТ ассоциированы
4. 2010 Salam M.T. [et al.] [9] США 207 (дети) 2091 (дети) Ш82А ^3742879 ассоциированы
5. 2009 Spanier A.J. [et al.] [10] США 225 (дети) - N081 N083 (нет ассоциации)
6. 2008 Djidjik R. [et al.] [11] Алжир 125 111 N081 -84 G->A N083 -786 Т-, 894 G->T (нет ассоциации) N083 -786С ассоциированы
7. 2008 Holla L.I. [et al.] [12] Чехия 294 316 Гаплотип N083 -786Т / -691С / 27-Ьр 5 / 774С / 894G / 11Т про-тективный
8. 2007 Duckworth L. [et al.] [13] США 86 48 N083 Т -786С (нет ассоциации)
9. 2006 Holla L.I. [et al.] [14] Чехия 305 334 N083 -786С / Т и -691С / Т (нет ассоциации)
10. 2005 Leung T.F. [et al.] [15] Китай 295 (дети) 174 (дети) N081 С5266Т и N083 G894T (нет ассоциации)
11. 2004 Yildiz P. [et al.] [16] Турция 49 49 N083 (нет ассоциации)
12. 2003 Storm van's Gravesande K. [et al.] [17] США N0S3G894T GT и GG ассоциированы
13. 2002 Holla L.I. [et al.] [18] Чехия 163 209 N083 G894T (нет ассоциации)
14. 2000 Lee Y.C. [et al.] [19] Южная Корея 310 121 N083 ассоциирована
Исследование полиморфизмов NOS в России
15. 2014 Ахминеева А.Х. [и др.] [20] Россия, Астрахань 115 27 NOS3 4аМЬ ассоциирован
16. 2013 Батожаргалова Б.Ц. [и др] [21] Россия, Бурятский округ 68 (дети) 100 (дети) 4I4 и 4I5 гена NOS3 ассоциирован VNTRINOS2 11 протективный
17. 2011 ОгородоваЛ.М. [и др.] [22] Россия, Томск 929 720 NOS2 - 0 954G I C GC и СС С-ассоциированы
18. 2010 Воронина Л. П. [23] Россия, Астрахань 276 54 NOS3 4аМЬ ассоциирован
Мировые исследования по SNP генов изоформ NOS, влияющих на патофизиологические проявления БА, противоречивы. Статистически значимых ассоциаций полиморфных вариантов гена NOS1,3 (rs1799983, rs2070744) с БА в обследованных популяциях Китая, Турции не установлено (табл. 1). У жителей Греции, Франции, Швеции, Южной Кореи типи-рованы аллели и генотипы NOS2,3 (rs743507, rs9901734, rs3729508, rs7830), ассоциированные с повышенным риском развития БА (табл. 1) [6-8, 19]. При исследовании 4 полимор-физмовгенов NOS в популяциях Алжира выявлены нормальные или «дикие» аллели (-786C;
NOS3 (rs2070744)), ассоциированные с высоким риском развития заболевания и не вовлеченные в патогенез БА (NOS1 -84 G->A, NOS3 -786 T-, 894 G->T) [11].
Наиболее противоречивые данные отмечены для жителей США: в двух из четырех работ, представленных в HuGE Navigator, отсутствуют достоверные ассоциации полиморфизма T-786C гена NOS3 с БА. По данным Stormvan's Gravesande K. [et al., 2003], для G894T ал-лельных вариантов гена NOS3 установлено, что GT и GG генотипы ассоциированы с повышенным риском развития астмы. Salam M.T. [et al., 2010] выявил у детей связь БА с полиморфным вариантом rs3742879 гена NOS2A [9, 10, 13, 17]. По 786C/T, -691C/T, - 894T/GSNP гена NOS3 у жителей Чехии (2002-2008 гг.) не выявлено ассоциированных с БА генотипов или гаплотипов, однако показано протективное действие -786T / -691C / 27-bp 5 / 774C / 894G / 11T гаплотипов NOS3 [12, 14, 18].
Связь полиморфных вариантов генов двух изоформ NOS2 и NOS3 с риском развития БА в РФ исследована для жителей только трех регионов: Астрахани, Томска и Бурятского округа. В географически удаленных регионах России в независимых исследованиях был установлен один и тот же генотип NOS3 4а/4^ ассоциированный с БА (табл. 1). Но по данным Огородовой Л.М. [и др., 2011], с повышенным риском развития заболевания у жителей Томска также ассоциированы гетерозиготный (GC) и патологический гомозиготный (CC) генотипы NOS2 -954G/C. Протективный генотип VNTR (variable number of tandem repeats) / NOS2 11 выявлен у детей Бурятского округа [20-23].
C-786T полиморфизмы промоторного региона гена NOS3 оказывают влияние на синтез соответствующей мРНК и белка, обуславливая избыточную продукцию оксида азота, что нехарактерно для эндотелиальной синтазы азота (NOS3), обладающей цитопротективным действием при низких концентрациях NO [2]. Несмотря на то, что оксид азота в норме вызывает бронходилатацию, повышение уровня оксида азота может быть связано с атопическим (аллергическим) воспалением и патофизиологическими проявлениями БА, в частности, с брон-хоспазмом, что возникает в результате окислительно-нитратного стресса. Гиперпродукция оксида азота индуцирует синтез такого побочного продукта, как пероксинитрит, который подавляет бронхолитический эффект и может вступать во взаимодействие со многими биоактивными молекулами, опосредуя токсические эффекты NO [4, 5].
Идентифицированные в мировых популяциях протективные и ассоциированные с риском развития БА полиморфные варианты генов NOS зависят от этнических, половозрастных и других факторов. В РА исследования по выявлению ассоциации полиморфных вариантов NOS с БА ранее не проводились.
Материалы и методы. В пилотное исследование включено 20 неродственных жителей РА: доноры (n=8) в возрасте 21-32 лет (средний возраст 25) без клинических проявлений, наследственной отягощенности БА и больные пульмонологического отделения Адыгейской республиканской клинической больницы (n=12) 24-56 лет (средний возраст 45) с тяжелыми формами бронхиальной астмы, диагностированными в соответствии с критериями GINA (2011). Полиморфизмы генов NOS 3 (C-786T, rs2070744) исследованы SNP-методом на тест-системах НПФ «Литех» (Москва) с электрофоретической детекцией результатов. Геномная ДНК выделена из периферической крови доноров и больных «ДНК-экспресс кровь» НПФ «Литех» (Москва). Концентрации и качество образцов ДНК тестированы на спектрофотометре NanoDrop 2000c "Thermo Scientific" (USA). Статистически значимые различия (Р<0,05) частот полиморфизмов генов NOS 3 (C-786T, rs2070744) и их ассоциации с бронхиальной астмой вычислены с использованием X (кси квадрата), OR (odds-ration - отношения шансов), 95% доверительного интервала (95% С1).
Результаты исследований и обсуждение полученных данных
Несмотря на участие NOS3 в патофизиологических процессах и достоверную ассоциацию C-786T гена NOS3 с клиническими проявлениями БА, по данным информационных баз [2, 3], у жителей РА в пилотном исследовании не подтверждена статистически значимая связь C-786T гена NOS3 со смешанными формами заболевания. Распределение частот аллельных
вариантов и генотипов N083 (С-786Т) в группе обследованных больных и доноров подчиняется закону Харди-Вайнберга, но достоверно не различаются у больных и доноров (табл. 2).
Таблица 2
Частоты гена N083 (С-786Т) в обследованных группах доноров и больных с БА
Ген / n Аллели / генотипы Частоты аллелей и генотипов 2 X OR (95% CI)
больные БА (n=12) доноры (n=8)
NOS3 (C-786T) C 0,292 0,500 1,78 0,41 (0,11 - 1,54)
T 0,708 0,500 2,43 (0,65 - 9,07)
CC 0,083 0,375 2,59 0,15 (0,01 - 1,84)
CT 0,417 0,250 2,14 (0,30 - 15,36)
TT 0,500 0,375 1,67 (0,27 - 10,33)
Примечание: n - количество обследованных больных / доноров
Незначительное повышение частот патологической 786T аллели NOS3, гетерозиготного (C786T) и патологического гомозиготного (Т786Т) генотипов у больных с верифицированной БА по сравнению с донорами сопоставимо с результатами аналогичных исследований в Греции [6]. У жителей Алжира риск развития БА ассоциирован с «нормальной» или дикой 786C аллелью гена NOS3 [11].
Повышение частоты патологической 786Т аллели в группе больных в 1,4 раза по сравнению с донорами исключает возможность ее использования в качестве протективного полиморфизма для жителей РА и противоречит выводам Holla L.I. [et al.] [12, 14, 18]. Полученные для жителей РА и сопредельных территорий Краснодарского края данные по распределению частот аллельных вариантов и генотипов C-786T гена NOS3, отличающихся от результатов, представленных для географически удаленных регионов, могут быть обусловлены этническими различиями.
Одной из возможных причин противоречивых данных по ассоциированности / протек-тивности C-786T полиморфизмов промоторного региона гена NOS3 в условиях оверэкспрес-сии NO может быть гиперпродукция побочного продукта пероксинитрита, подавляющего бронхолитический эффект и вступающего во взаимодействие с биоактивными молекулами, опосредуя токсические эффекты NO [4, 5].
Выводы
1. В пилотном исследовании у жителей Республики Адыгея с бронхиальной астмой отмечено повышение частоты патологической аллели 786T гена NOS3.
2. Носительство мутантной аллели в гетеро- и гомозиготном состоянии является фактором повышенного риска развития бронхиальной астмы.
Примечания:
1. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни легких: пер. с англ. / под ред. А.Г. Чучалина. М.: Атмосфера, 2016. 201 с.
2. [Электронный ресурс]. URL: https://www.snpedia.com
3. [Электронный ресурс]. URL: http://www.hugenavigator.net/HuGENavigator
4. Никитин А.В., Золотарева М.А. Роль ферментативной активности в формировании окислительного стресса у больных бронхиальной астмой (обзор литературы // Вестник новых медицинских технологий. 2013. Т. ХХ, № 2. С. 165-169.
5. Урясьев О.М., Рогачиков А.И. Роль оксида азота в регуляции дыхательной системы // Наука молодых (Eruditio Juvenium). 2014. № 1. С. 133-140.
6. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms are associated with sensitization to seasonal aeroallergens in asthmatic children / M. Iordanidou [et al.] // World J. Pe-diatr. 2017. No. 13 (1). Р. 34-40.
References:
1. Global strategy for the diagnosis, treatment and prevention of chronic obstructive pulmonary disease: transl. from English / ed. by A.G. Chuchalin. M.: Atmosphere, 2016. 201 pp.
2. [Electronic resource]. URL: https://www.snpedia.com
3. [Electronic resource]. URL: http://www.hugenavigator.net/HuGENavigator
4. Nikitin A.V., Zolotareva M.A. The role of enzyme activity in the formation of oxidative stress in patients with bronchial asthma (review of the literature // Bulletin of New Medical Technologies. 2013. Vol. 20, No. 2. P. 165-169.
5. Uryasyev O.M., Rogachikov A.I. The role of nitric oxide in the regulation of the respiratory system // Science of the Young People (Eruditio Juvenium). 2014. No. 1. P. 133-140.
6. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms are associated with sensitization to seasonal aeroallergens in asthmatic children / M. Iordanidou [et al.] // World J. Pe-diatr. 2017. No. 13 (1). P. 34-40.
7. Associations between nitric oxide synthase genes and exhaled NO-related phenotypes according to asthma status / E. Bouzigon [et al.] // PLoS One. 2012. No. 7 (5). Р. 1-8.
8. Single nucleotide polymorphisms in the NOS2 and NOS3 genes are associated with exhaled nitric oxide / S. Dahgam [et al.] // J. Med. Genet. 2012. No. 49 (3). Р. 200-205.
9. Genetic variations in nitric oxide synthase and arginase influence exhaled nitric oxide levels in children / M.T. Salam [et al.] // Allergy. 2011. No. 66 (3). Р. 412-419.
10. Environmental exposures, nitric oxide synthase genes, and exhaled nitric oxide in asthmatic children / A.J. Spanier [et al.] // Pediatr. Pulmonol. 2009. No. 44 (8). Р. 812-819.
11. Constitutive nitric oxide synthase gene polymorphisms and house dust mite respiratory allergy in an Algerian patient group / R. Djidjik [et al.] // Tissue Antigens. 2008. No. 71 (2). Р. 160-164.
12. Haplotype analysis of the endothelial nitric oxide synthase gene in asthma / L.I. Holla [et al.] // Hum. Immunol. 2008. No. 69 (4-5). Р. 306-313.
13. Physician-diagnosed asthma and acute chest syndrome: associations with NOS polymorphisms / L. Duckworth [et al.] // Pediatr. Pulmonol. 2007. No. 42 (4). Р. 332-338.
14. Association study of promoter polymorphisms within the NOS3 gene and allergic diseases / L.I. Holla [et al.] // Int. Arch. Allergy Immunol. 2006. No. 141 (2). Р. 103-109.
15. Nitric oxide synthase polymorphisms and asthma phenotypes in Chinese children / T.F. Leung [et al.] // Clin. Exp. Allergy. 2005. No. 35 (10). Р. 1288-1294.
16. Endothelial dysfunction in patients with asthma: the role of polymorphisms of ACE and endothelial NOS genes / P. Yildiz [et al.] // J. Asthma. 2004. No. 41 (2). Р. 159-166.
17. Association of a missense mutation in the NOS3 gene with exhaled nitric oxide levels / K. Stormvan's Gravesande [et al.] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. No. 168 (2). Р. 228-231.
18. Prevalence of endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in patients with atopic asthma / L.I. Holla [et al.] // Clin. Exp. Allergy. 2002. No. 32 (8). Р. 1193-1198.
19. Gene polymorphisms of endothelial nitric oxide syn-thase and angiotensin-converting enzyme in patients with asthma / Y.C. Lee [et al.] // Allergy. 2000. No. 55 (10). Р. 959-963.
20. Роль VNTR полиморфизма гена эндотелиальной синтазы оксида азота в развитии респираторно-кардиальной коморбидности / А.Х. Ахминеева [и др.] // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2014. № 3. С. 10-14.
21. Генетические особенности у больных с бронхиальной астмой и у здоровых подростков бурятской популяции. I. Анализ полиморфных вариантов генов FCER2, ADRB2, NOS2, NOS3, GSTM1, TNFA / Б. Батожарга-лова [и др.] // Вестник НГУ. Сер. Биология. Клиническая медицина. 2013. Т. 11, вып. 2. С. 80-90.
22. Роль полиморфизма гена индуцибельной NO-синтазы в формировании бронхиальной астмы / Л.М. Огородова [и др.] // Бюллетень СО РАМН. 2011. Т. 31, № 4. С. 60-63.
23. Влияние полиморфизма генов эндотелиальной синта-зы оксида азота на функциональное состояние микрососудистого эндотелия при бронхиальной астме / Л.П. Воронина, В.Г. Ушакова, И.В. Нуржанова, Е.А. Полунина // Материалы XX Национального конгресса по болезням органов дыхания. М., 2010. С. 68.
7. Associations between nitric oxide synthase genes and exhaled NO-related phenotypes according to asthma status / E. Bouzigon [et al.] // PLoS One. 2012. No. 7 (5). P. 1-8.
8. Single nucleotide polymorphisms in the NOS2 and NOS3 genes are associated with exhaled nitric oxide / S. Dahgam [et al.] // J. Med. Genet. 2012. No. 49 (3). P. 200-205.
9. Genetic variations in nitric oxide synthase and arginase influence exhaled nitric oxide levels in children / M.T. Salam [et al.] // Allergy. 2011. No. 66 (3). P. 412-419.
10. Environmental exposures, nitric oxide synthase genes, and exhaled nitric oxide in asthmatic children / A.J. Spanier [et al.] // Pediatr. Pulmonol. 2009. No. 44 (8). P. 812-819.
11. Constitutive nitric oxide synthase gene polymorphisms and house dust mite respiratory allergy in an Algerian patient group / R. Djidjik [et al.] // Tissue Antigens. 2008. No. 71 (2). P. 160-164.
12. Haplotype analysis of the endothelial nitric oxide synthase gene in asthma / L.I. Holla [et al.] // Hum. Immunol. 2008. No. 69 (4-5). P. 306-313.
13. Physician-diagnosed asthma and acute chest syndrome: associations with NOS polymorphisms / L. Duckworth [et al.] // Pediatr. Pulmonol. 2007. No. 42 (4). P. 332-338.
14. Association study of promoter polymorphisms within the NOS3 gene and allergic diseases / L.I. Holla [et al.] // Int. Arch. Allergy Immunol. 2006. No. 141 (2). P. 103-109.
15. Nitric oxide synthase polymorphisms and asthma phenotypes in Chinese children / T.F. Leung [et al.] // Clin. Exp. Allergy. 2005. No. 35 (10). P. 1288-1294.
16. Endothelial dysfunction in patients with asthma: the role of polymorphisms of ACE and endothelial NOS genes / P. Yildiz [et al.] // J. Asthma. 2004. No. 41 (2). P. 159-166.
17. Association of a missense mutation in the NOS3 gene with exhaled nitric oxide levels / K. Stormvan's Gravesande [et al.] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. No. 168 (2). P. 228-231.
18. Prevalence of endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in patients with atopic asthma / L.I. Holla [et al.] // Clin. Exp. Allergy. 2002. No. 32 (8). P. 1193-1198.
19. Gene polymorphisms of endothelial nitric oxide syn-thase and angiotensin-converting enzyme in patients with asthma / Y.C. Lee [et al.] // Allergy. 2000. No. 55 (10). P. 959-963.
20. The role of VNTR polymorphism of the gene of endo-thelial nitric oxide synthase in the development of respiratory cardiac comorbidity / A.Kh. Akhmineeva [et al.] // Kursk Scientific and Practical Journal of Man and His Health. 2014. No. 3. P. 10-14.
21. Genetic features in patients with bronchial asthma and in healthy adolescents of the Buryat population. I. Analysis of polymorphic variants of the genes FCER2, ADRB2, NOS2, NOS3, GSTM1, TNFA / B. Batozhargalova [at al.] // Bulletin of Novosibirsk State University. Ser. Biology. Clinical Medicine. 2013. Vol. 11, Iss. 2. P. 80-90.
22. The role of the polymorphism of the gene of inducible NO synthase in the formation of bronchial asthma / L.M. Ogorodova [et al.] // Bulletin of the SO RAMN. 2011. Vol. 31, No. 4. P. 60-63.
23. Influence of the polymorphism of genes of endothelial synthase of nitric oxide on the functional state of microvascular endothelium in bronchial asthma / L.P. Vo-ronina, V.G. Ushakova, I.V. Nurzhanova, E.A. Polun-ina // Proceedings of the 20th National Congress on respiratory diseases. M., 2010. P. 68.
