CC BY
214
УДК 615.07:615.453.6 Вестник СПбГУ. Сер. 11. 2012. Вып. 3
И. Е. Смехова, Ю. М. Перова, Н. Н. Турецкова
ОЦЕНКА МЕТОДОМ IN VITRO ЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ТАБЛЕТОК, СОДЕРЖАЩИХ МАГНИЙ И ПИРИДОКСИН
ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия»
Нормальный уровень магния в организме является основополагающей константой, контролирующей здоровье человека. Нарушение гомеостаза магния играет существенную роль в развитии заболеваний практически всех систем организма, в первую очередь нервной, костной, сердечно-сосудистой, мочевыделительной, пищеварительной и репродуктивной [1]. Недостаточность магния — одно из наиболее распространенных дефицитных состояний человека [2]. Дефицит магния часто сочетается с дефицитом пиридоксина, симптомы их проявления схожи. Магний образует комплексы с витамином В6, которые улучшают всасываемость и биодоступность обоих нутриен-тов [1, 3, 4]. Препаратами выбора для долговременной профилактики и лечения дефицита магния являются лекарственные формы (ЛФ) для приема внутрь [3].
Для обеспечения взаимозаменяемости при фармакотерапии лекарственные препараты (ЛП) в одной и той же ЛФ, содержащие одинаковые лекарственные вещества (ЛВ), должны отвечать сопоставимым стандартам качества, а также быть биологически и терапевтически эквивалентными. Биоэквивалентность определяют методом in vivo, а в некоторых случаях — in vitro [5, 6].
Цель исследования — методом in vitro оценить эквивалентность и взаимозаменяемость таблеток, содержащих соли магния и пиридоксина гидрохлорид.
Материалы и методы. В качестве объектов исследования были выбраны препараты производства Санофи Винтроп Индустрия, Франция: таблетки МагнеВ6@ (препарат сравнения) и МагнеВ6@-форте, а также таблетки Магнелис@В6, производства ОАО Фармстандарт-УфаВИТА, Россия. Препараты соответствовали требованиям нормативных документов.
Исследование проводили на приборе «Erweka» DT6 (Германия), аппарат «лопастная мешалка» (ЛМ) при скорости вращения мешалки 50 и 75 об/мин. Эквивалентность определяли методом in vitro в различных средах: фармацевтическую — в воде и 0,1 М растворе кислоты хлористо-водородной (НС1), биологическую — в растворе НС1 с рН 1,2, ацетатном буферном растворе (АБ) с рН 4,5 и фосфатном буферном растворе (ФБ) с рН 6,8. Объем среды — 900 мл.
Испытание проводили на 6-ти (для фармацевтической) или 12-ти (для биоэквивалентности) таблетках каждого объекта исследования. Для построения профилей растворения пробы объемом 50 мл отбирали через 15, 30, 45 и 60 мин после начала испытания. Отобранный объем восполняли соответствующей средой растворения.
Количество соли магния, перешедшей в среду растворения, определяли трилономе-трически, количество пиридоксина гидрохлорида — методом УФ-спектрофотометрии. Оптическую плотность измеряли в максимумах поглощения при длине волны 292 нм (в НС1 и АБ) или при 327 нм (в ФБ). В качестве раствора сравнения использовали
© И. Е. Смехова, Ю. М. Перова, Н. Н. Турецкова, 2012
соответствующую среду растворения. Для каждого исследования готовили раствор стандартного образца пиридоксина гидрохлорида.
На рисунках 1-5 представлены профили растворения солей магния и пиридоксина гидрохлорида из таблеток в разных средах, построенные по средним значениям, полученным для каждой точки времени отбора проб. Для сравнения профилей растворения рассчитывали коэффициент подобия f2, значение которого должно быть в пределах 50-100 [5, 6].
Результаты и обсуждение. МагнеВ6@ и Магнелис@В6 — таблетки, покрытые оболочкой, содержащие магний в виде дегидратированного лактата и пиридоксина гидрохлорид (витамин В6). Санофи помимо МагнеВ6@ выпустил на рынок препарат, содержащий магний и пиридоксин, но в форме таблеток-форте. Практический интерес представляло исследование и этих таблеток. 1 таблетка МагнеВ6@-форте содержит другую соль магния (магния цитрат) и двойное количество, по сравнению с обычными таблетками, пиридоксина гидрохлорида.
Для твердых пероральных ЛФ (таблетки, капсулы, драже) одним из важнейших критериев качества, который позволяет подтвердить не только постоянство их свойств и надлежащие условия производственного процесса, но также предсказать биоэквивалентность, является тест «растворение» [7].
При исследовании многокомпонентного ЛП международные документы рекомендуют определять растворение всех входящих в него ЛВ. В американской фармакопее (USP 30) имеются отдельные статьи на таблетки магния глюконата и таблетки пиридоксина. Испытание «растворение» и таблеток магния, и таблеток пиридоксина проводится в одинаковых условиях на аппарате ЛМ при скорости вращения 50 об/мин в воде объемом 900 мл.
Фармацевтическую эквивалентность таблеток МагнеВ6@ и Магнелис@В6 определяли по тесту «растворение» по методике USP (в воде), а также в 0,1 М HCl при различной скорости вращения мешалки. Установлено, что в воде магния лактат высвобождался из исследуемых таблеток примерно с одинаковой скоростью (рис. 1,я). Подобие профилей растворения подтверждено значением коэффициента подобия: /2 = 55.
а б
20 30 40 Время, мин - Маше В6 —■— Магаелис В6
20 30
Время, мин Магае В6 —■— Магаелис В6
Рис. 1. Профили растворения магния лактата и пиридоксина в воде: а — магния лактат; б — пиридоксина гидрохлорид.
В то же время пиридоксина гидрохлорид из таблеток МагнеВ6@ высвобождался со значительно большей скоростью и к 60 мин его количество составляло более 40%,
тогда как за это же время из таблеток Магнелис@В6 в среду растворения перешло лишь около 10% вещества. Различие профилей растворения подтверждено значением коэффициента подобия: /2 = 29.
В связи с тем, что при пероральном приеме таблетки попадают в кислую среду желудка, нами были проведены испытания и в такой среде (0,1 М раствор HCl) при рекомендуемой фармакопеями скорости вращения мешалки 50 об/мин. Было установлено, что различие в скорости растворения пиридоксина из таблеток наблюдалось и при замене среды растворения (воды на 0,1 М HCl) (рис. 2,6). Пиридоксин из таблеток Маг-неВ6@ растворялся примерно в 2 раза быстрее, чем из таблеток Магнелис@В6, различие профилей растворения сохранялось на протяжении всего эксперимента (/2 = 26).
В этих же условиях магния лактат из таблеток Магнелис@В6 высвобождался с большей скоростью, чем из таблеток МагнеВ6@, различие наблюдалось после 30-й мин эксперимента (рис. 2,я). Однако быстрое высвобождение магния лактата в желудке может привести к росту риска возникновения побочных эффектов (раздражение, боль, тошнота и др.).
я
100
£ 80
(О
| 60
"8 40
6
20 30 40 Время, мин - Маше В6 —■— Машелис В6
20 30 40
Время, мин Маше В6 —■— Машелис В6
Рис. 2. Профили растворения магния лактата и пиридоксина в 0,1М НС1 (ЛМ 50 об/мин): I — магния лактат; б — пиридоксина гидрохлорид.
Увеличение скорости вращения мешалки с 50 до 150 об/мин приводило к увеличению скорости растворения пиридоксина из таблеток Магнелис@В6, что согласуется с данными литературы о влиянии скорости вращения на высвобождение ЛВ. Однако такие условия не адекватны условиям в организме и не рекомендуются фармакопеями.
Так как витамин В6 усиливает эффекты магния [1, 4], его плохое высвобождение может привести к недостаточному усвоению магния в организме.
Таким образом, в связи с отсутствием подобия профилей растворения пиридокси-на гидрохлорида как в воде, так и в растворе HCl можно сделать вывод о фармацевтической неэквивалентности исследуемых таблеток МагнеВ6@ и Магнелис@В6.
В рекомендациях ВОЗ указывается, что в некоторых случаях сравнение полученных в средах, имитирующих условия ЖКТ, профилей растворения испытуемых препаратов может служить основанием для заключения об их биоэквивалентности [5, 6].
Помимо МагнеВ6@ и Магнелис@В6 исследовали растворение в трех средах также таблеток МагнеВ6@-форте.
Установлено, что в среде HCl (рис. 3,я) и ФБ (рис. 3,6) из таблеток МагнеВ6@ и Магнелис@В6 пиридоксина гидрохлорид высвобождался с одинаковой скоростью (f = 50 и f = 57 соответственно). В то же время в АБ высвобождение пиридоксина
из МагнеВ6@ превосходило таковое из таблеток Магнелис@В6 (рис. 4) (разница статистически достоверна, /2 = 33).
МагаеВб, —■■ - Магаелис Вб —МагаеВб-форте —,— ManreВ6 —» -МагаелисВб — МагаеВб-форте
Рис. 3. Профили растворения пиридоксина гидрохлорида из таблеток: а — среда 0,1 М HCL; б — среда ФБ, pH 6,8.
Время, мин
МагаеВб —» -МагаелисВ6 МагаеВб-форте
Рис. 4. Профили растворения пиридоксина гидрохлорида из таблеток. Среда: АБ, рН 4,5
Следует отметить, что с наибольшей скоростью во всех трех средах пиридоксин высвобождался из таблеток МагнеВ6@-форте (рис. 3 и 4).
При исследовании растворения соли магния установлено, что в среде HCl из таблеток МагнеВ6@ магния лактат переходил в среду растворения более равномерно и к 45 мин высвобождался практически полностью (рис. 5,я). Отличие в растворении от других таблеток наблюдалось в первые 15 мин.
В среде ФБ высвобождение солей магния из таблеток проходило медленно, количество высвободившегося вещества не превышало 40% и к концу эксперимента (рис. 5,6). Результаты можно, по-видимому, объяснить тем, что в ФБ соли магния переходили в малорастворимые фосфаты, что и приводило к замедлению высвобождения.
Профили растворения магния лактата из МагнеВ6@ и Магнелиса@В6 как в ФБ, так и АБ подобны (рис. 5) (/2 = 66 и 56 соответственно). Полученные результаты не позволяют однозначно говорить и о биоэквивалентности исследованных таблеток. Авторам, проводившим исследования in vivo, также не удалось достоверно определить биодоступность таблеток МагнеВ6@ и Магнелиса@В6 [8].
я
6
20 30 40 50 Время, мин
- Maine В6 —ш- -МагаелисВб —Маше Вб~4юрге
/X
Время, мин
-МагнеВб —»■ -МагаелисВб —МагаеВб-форте
Рис. 5. Профили растворения магния лактата из таблеток:
а — среда 0,1 М Н^; б — среда ФБ, рН 6,8; в — среда АБ, рН 4,5.
20 30 40
Время, мин
-МагаеВб —» -МагаелисВбМаше Вб-форге
в
Следует отметить, что максимальное высвобождение соли магния во всех средах наблюдалось из таблеток форте, что можно, по-видимому, объяснить в том числе и лучшей растворимостью магния цитрата. Применение таблеток МагнеВ6@-форте позволяет уменьшить ежедневное количество принимаемых таблеток и тем самым улучшить качество жизни пациентов.
В связи с отсутствием подобия профилей растворения пиридоксина гидрохлорида как в воде, так и в растворе HCl сделан вывод о фармацевтической неэквивалентности исследуемых таблеток МагнеВ6@ и Магнелис@В6. ^достаточное высвобождение пи-ридоксина гидрохлорида может способствовать меньшей усвояемости магния лактата в организме.
Отсутствие подобия профилей растворения как магния лактата в одной из трех сред, так и пиридоксина гидрохлорида не позволило с уверенностью показать биологическую эквивалентность и взаимозаменяемость таблеток МагнеВ6@ и Магнелис@В6.
Показано преимущество таблеток МагнеВ6@-форте.
Литература
1. Воробьева О. В., Акарачкова Е. С. Магне В6: опыт 5-летнего клинического применения в неврологической и терапевтической практике // Фарматека. 2008. № 20. C. 1-8.
2. Громова О. А., Гоголева И. В. Применение магния в зеркале доказательной медицины и фундаментальных исследований в терапии. Дефицит магния и концепция стресса Трудный пациент. 2007. Т. 5, № 11. C. 3-11.
3. Громова О. А. Магнезиальная терапия в поликлинической практике // ^равочник поликлинического врача. 2006. № 1. C. 2-7.
4. Межеветинова Е. А., Акопян А. Н. Магнийдефицитные состояния в гинекологической практике: клиническая оценка и методы коррекции // Вопросы гинекологии, акушерства и пе-ринатологии. 2007. Т. 6, № 4. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://gynecology.phdynasty.
5. Guidelines on the investigation of bioequivalence. CPMP/EWP/QWP/1401/98 Rev. 1/ Corr*. — EMEA, 27 p. (2010).
6. WHO. 2006. Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability // WHO Technical Report Series. 2006. № 937. Annex 7.
7. Арзамасцев А. П., Дорофеев В.Л. Эквивалентность воспроизведенных лекарственных средств: фармацевтические аспекты // Ведомости НЦ ЭСМП. 2007. № 2. С. 6-11.
8. Жердев В. П., Колыванов Г. Б. Сравнительная фармакокинетика и относительная биодоступность препаратов, содержащих магний // Эксперим. и клинич. фармакол. 2010. Т. 73, № 12. С. 28-30.
Статья поступила в редакцию 7 июня 2012 г.
