CC BY
114
УДК 612.028.64
Е.А. Ботоева, И.П. Убеева
оценка фармакологических свойств сухого экстракта ортилии однобокой
ГОУ ВПО «Бурятский государственный университет» (Улан-Удэ) ГОУ ДПО Иркутский государственный институт усовершенствования врачей (Иркутск)
Курсовое введение сухого экстракта ортилии однобокой оказывает выраженное противовоспалительное,
антибактериальное и спазмолитическое действие.
ключевые слова: ортилия однобокая, фармакологические свойства
EvALuATioN of pHARMAcoLoGicAL characteristics of dry extract of ORTHILIA SEcUNDA (L.) house
E.A. Botoeva, I.P. Ubeeva
Buryat state university, Ulan-Ude Irkutsk state institute of physicians advanced training, Irkutsk
Course аdministration of dry extract of Orthilia secunda has expressed, anti-inflammatory, antibacterial and antispasmodic effects.
Key words: Orthilia secunda, pharmacological properties
Актуальность проблемы воспалительных заболеваний половых органов определяется их высокой частотой и склонностью к длительному течению. Развитие выраженных изменений не только в половой, но и в других системах организма, при хронических заболеваниях ведет к нарушению специфических функций женского организма и при определении тактики лечения дает основания для более широкого использования немедикаментозных методов [5, 9]. Многогранность действия лекарственных растительных средств превращает фитотерапию в незаменимый компонент комплексного лечения воспалительных заболеваний матки и ее придатков. Практически все используемые в настоящее время при лечении фармпрепараты оказывают побочное действие и, следовательно, имеют противопоказания к применению. Медикаментозные методы терапии не всегда позволяют добиться полной реабилитации больных и предотвратить рецидивы воспалительного процесса [10, 18]. Поэтому несмотря на то, что современный арсенал противовоспалительных препаратов достаточно обширен, проблема изыскания новых высокоэффективных, безвредных, дешевых и удобных в применении средств природного происхождения остается весьма актуальной.
Средства растительного происхождения — это химически сложившиеся комплексы, которые родственны организму человека, так как они вместе и во взаимодействии совершали и совершают эволюцию основных процессов жизнеобеспечения клеток. ВОЗ рекомендует расширить поиск и внедрение местных лекарственных растений, так как они малотоксичны, обладают высокой биологической активностью, оказывают тонизирующий, укрепляющий эффект, регулируют обмен веществ и функцию пищеварительных органов [5, 14]. Они
оказывают многостороннее действие благодаря наличию в них различных групп биологически активных веществ: органических кислот, аминокислот, гликозидов, эфирных масел, сапонинов, жиров, иридоидов, макро- и микроэлементов и других природных соединений [2, 16].
Сведения об использовании растений в народной и традиционной медицине являются ориентиром для выбора направления поиска новых видов лекарственного сырья. В качестве объекта исследования нами была выбрана ортилия однобокая — Orthilia secunda (L.) House, семейства Pyrolaceae, которая издавна известна в Сибири как лекарственное растение, применяемое при лечении гинекологических заболеваний [16]. Это растение произрастает на территории Бурятии и является доступным для промышленных заготовок лекарственным сырьем. Показано, что сухой экстракт ортилии однобокой содержит комплекс биологически активных веществ, представленный флавоноидами, иридоидами, производными кумарина, фенологликозидами, тритерпеновыми сапонинами, аминокислотами, дубильными веществами [4, 7]. Кроме того, установлено, что антиокислитель-ная активность СЭОО равна 47,6 г/л-1 [1].
Целью данной работы явилось определение противовоспалительной, антибактериальной и спазмолитической активности сухого экстракта ортилии однобокой (СЭОО).
материалы и методы
Эксперименты выполнены на белых крысах линии Wistar с исходной массой 170-180 г. Животные находились в стандартных условиях вивария на обычном рационе (Приказ МЗ СССР № 1179 от 10.10.83 г.). Эксперименты осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использо-
ванием экспериментальных животных» (Приложение к Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.77 г.).
Сухой экстракт ортилии однобокой вводили лабораторным животным per os в дозах 50 — 200 мг/кг массы, а препарат сравнения в изоэффективных дозах — согласно показаниям к их применению [14]. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду в эквиобъемном количестве по аналогичной схеме в каждой серии экспериментов. Кроме того, для более детального изучения механизмов действия испытуемого фитоэкстракта в отдельных сериях опытов этилацетатную, хлороформную, бутанольную и водную фракции, извлеченные из ортилии однобокой, вводили экспериментальным животным per os в дозах 10 — 30 мг/кг массы.
Влияние сухого экстракта ортилии однобокой на течение основных фаз воспалительной реакции изучали в соответствии с методическими рекомендациями МЗ РФ по исследованию противовоспалительных препаратов [11]. На основании полученных данных оценивали степень угнетения экссудации, процент стимуляции образования фииброзно-грануляционной ткани, выраженность торможения альтеративных процессов [12]. В качестве препарата сравнения использовали спиртовый экстракт календулы после деалколизации в дозе 100 мг/кг массы животных (в пересчете на сухой остаток) [10].
Оценку влияния экстракта на течение экссудативной фазы воспалительной реакции проводили при острых асептических воспалениях, вызываемых флогогенными агентами по Ю.Е. Стрельникову [15]. Оценку влияния СЭОО на альтерацию тканей проводили на фоне острого воспаления, индуцированного введением уксусной кислоты по И.А. Ойвину и С.Л. Шетель [13]. Для оценки влияния на процессы пролиферации клеток использовали метод Ф.П. Тринуса с соавт. (1975) [17].
Изучение спазмолитической активности полученного сухого экстракта ортилии однобокой проводили по методу Furchgott [19]. Изолированный отрезок тонкого кишечника крысы помещали в инкубационную камеру с аэрируемым раствором Тироде при температуре +36,6 °С. Сокращение мускулатуры отрезка кишки регистрировали в изотоническом режиме на кимографе. Сократительную реакцию вызывали введением в инкубационную среду холиномиметика — карбохолина гидрохлорида (1 х 10-6 М) или адреномиметика — адреналина гидротартрата (1 х 10-5 М) [10].
Оценку антибактериальной активности испытуемого средства осуществляли методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде [7]. Готовили серийные разведения фитоэкстракта с концентрациями от 17,0 до 0,11 мг/мл. В качестве тест-объектов использовали музейные культуры условно-патогенных бактерий: Escherihia coli — 408 Новгородская, Sraphylococcus aureus — 209P, Proteus vulgaris — H50, Streptococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa ATCC-10145, полученные из ГИСК им. Л.А. Тарасевича (Москва). Бактерицидную активность учитывали через 18 — 24
часа по отсутствию роста бактерий в пробирках и чашках.
Полученные экспериментальные данные обработаны методами вариационной статистики с использованием параметрического ^критерия Стьюдента и непараметрического и-критерия Вилкоксона — Манна — Уитни [3].
результаты и обсуждение
На модели острого асептического воспаления установлена эффективная доза, снижающая экссудацию. Выраженное антиэкссудативное действие СЭОО проявляет в дозе 100 мг/кг массы животных, уменьшая отек лапки у крыс на 33,6 %.
В другой серии опытов выявлено, что хлороформная, этилацетатная, бутанольная и водная фракции ортилии однобокой в дозе 30 мг/кг массы животных обладают наиболее выраженной антиэк-ссудативной активностью. При этом максимальный эффект определяется у хлороформной фракции, которая уменьшает отек лапки у крыс на 55,2 % по сравнению с контролем. Исследуемая активность всех фракций также нарастает с увеличением дозы. Следует отметить, что в дозе 10 мг/кг массы животных антиэкссудативного действия у исследуемых веществ не наблюдалось.
По антиэкссудативной активности изученные вещества можно расположить в следующей последовательности: хлороформная фракция (55,2 %), этилацетатная фракция (40,3 %), бутанольная фракция (40,3 %), водная фракция (37,3 %).
Разная степень выраженности противовоспалительной активности фракций, извлеченных из ортилии, связана с их химическим составом. Можно полагать, что наиболее выраженное влияние хлороформной и этилацетатной фракций обусловлено присутствием более широкого спектра биологически активных веществ (флавоноиды в виде гликозидов и флавоноловых агликонов, ку-марины, тритерпеновые сапонины).
Следует отметить, что по выраженности анти-экссудативного действия сухой экстракт ортилии превосходит препарат сравнения — спиртовый экстракт календулы.
В результате проведенных исследований установлено, что испытуемый экстракт ортилии снижает степень деструкции ткани на 33, 37 и 32 % через 7-е, 14-е и 21-е сутки соответственно. При этом по выраженности антиальтеративного действия сухой экстракт ортилии однобокой превосходит активность препарата сравнения — спиртового экстракта календулы.
Установлено, что сухой экстракт ортилии однобокой в дозе 100 мг/кг массы животных не оказывает существенного влияния на образование фиброзно-грануляционной ткани при воспалительной реакции.
Для оценки спазмолитического действия испытуемого средства исследовали его влияние на холи-но- и адренергические медиаторные системы.
Из данных, представленных в таблице 1, видно, что изучаемый фитоэкстракт в дозе 100 мг/кг мас-
сы животных снижает величину адренергической и холинергической реакций на 80 — 86%. Сухой экстракт ортилии однобокой в указанной дозе оказывает ингибирующее влияние на реактивность гладкой мускулатуры, что свидетельствует о наличии у испытуемого средства выраженной спазмолитической активности.
В результате проведенных исследований также установлено, что сухой экстракт ортилии однобокой обладает антимикробной активностью по отношению к изученным тест-бактериям. При этом наиболее выраженное бактерицидное действие проявлялось по отношению к Escherihia coli, Streptococcus faecalis и Pseudomonas aeruginosa (в концентрации фитоэкстракта 2,13 мг/мл). Умеренное бактерицидное действие проявлялось по отношению к Proteus vulgaris и Staphylococcus aureus (в концентрации фитоэкстракта 4,25 мг/мл). В то же время наиболее выраженное бактериостатиче-ское действие проявилось по отношению к Streptococcus faecalis (в концентрации фитоэкстракта 0,11 мг/мл). Умеренное бактериостатическое действие наблюдалось по отношению к Escherihia coli и Pseudomonas aeruginosa (в концентрации 0,21 мг/мл). Менее выраженное бактериостатическое действие проявлялось по отношению к Streptococcus faecalis и Proteus vulgaris (в концентрации
0,83 мг/мл). Результаты проведенных исследований представлены в таблице 2.
Таким образом, сухой экстракт ортилии однобокой оказывает выраженное противомикробное действие по отношению к условно-патогенным бактериям Staphylococcus aureus, Escherihia coli, Proteus vulgaris, Streptococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa.
заключение
Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что испытуемое новое
лекарственное средство — сухой экстракт ортилии однобокой — обладает противовоспалительной, спазмолитической и антибактериальной активностью.
Известно, что пусковым механизмом в развитии ВЗПО является воздействие микробного фактора, которое определяет формирование очага воспаления и возникновение начальных проявлений заболевания. Escherihia coli, Streptococcus faecalis и Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris и Staphylococcus aureus, как известно, являются наиболее частыми возбудителями эндометритов и сальпингитов [6]. Установлено, что СЭОО оказывает выраженное противомикробное действие по отношению к условно-патогенным бактериям Staphylococcus aureus, Escherihia coli, Proteus vulgaris, Streptococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa.
Кроме того, известно, что тритерпеновые сапонины, флавоноиды, иридоиды, кумарины обуславливают спазмолитическую активность испытуемых лекарственных средств [2]. Сухой экстракт ортилии однобокой в указанной дозе оказывает ингибирующее влияние на реактивность гладкой мускулатуры, что свидетельствует о наличии у испытуемого средства выраженной спазмолитической активности.
Антибактериальная, спазмолитическая и противовоспалительная активности изучаемого фитоэкстракта делают возможным его применение для лечения и профилактики воспалительных заболеваний женской половой сферы, так как наличие болевого синдрома, ганглионевритов, изменений в центральной и перифирической нервной системе, нарушений микроциркуляции с дефицитом кровоснабжения органов малого таза является одним из ведущих патогенетических механизмов эндометритов и сальпингитов.
Можно полагать, что молекулярно-клеточным механизмом, определяющим эффективность
Таблица 1
Влияние сухого экстракта ортилии однобокой на адренергическую и холинергическую реакции изолированного
отрезка тонкой кишки крысы (M ± m)
Название препарата Наименование медиаторов Величина реакции мускулатуры отрезка тонкой кишки (мм)
Контроль Кі Опыт (на фоне экстракта) Контроль К2 (после отмывки экстракта)
СЭОО (100 мг/кг) адреналина гидротартрат 25,5 ± 5,6 3,5 ± 0,1* 0
карбохолина гидрохлорид 61,5 ± 4,4 12,0 ± 5,0* 35,0 ± 8,5
Таблица 2
Антимикробная активность сухого экстракта ортилии однобокой (минимальная подавляющая концентрация,
мг/мл) (M ± m)
Культура бактерий Бактерицидное действие Бактериостатическое действие
Staphylococcus aureus 4,25 0,42
Proteus vulgaris 4,25 0,83
Escherihia coli 2,13 0,21
Streptococcus faecalis 2,13 0,11
Pseudomonas aeruginosa 2,13 0,21
сухого экстракта ортилии однобокой в качестве средства для лечения воспалительных заболеваний, является его способность ингибировать процессы перекисного окисления липидов, обусловленная воздействием комплекса биологически активных веществ, содержащимся в испытуемом фитоэкстракте [1, 4]. Эти вещества оказывают опосредованное антиоксидантное действие, выражающееся в способности защищать от окислительной деструкции важнейшие эндогенные антиоксиданты: аскорбиновую кислоту, адреналин, тиоловые соединения, способствуя усилению и пролонгированию их эффекта [1, 2].
Полученные данные аргументируют целесообразность применения сухого экстракта ортилии однобокой в гинекологической практике в качестве противовоспалительного средства в комплексе с другими лечебно-профилактическими мероприятиями.
литература
1. Антиоксидантные и мембраностабилизирующие свойства сухого экстракта ортилии однобокой / С.А. Чукаев [и др.] // Человек и лекарство : мат. VIII Рос. нац. конгр. — М., 2001. — С. 636.
2. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека / В.А. Барабой. — М., 1984. — 160 с.
3. Беленький М.А. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.А. Беленький. — Л. : Медицина, 1963. — 162 с.
4. Бураева Л.Б. Противовоспалительное действие сухого экстракта ортилии однобокой / Л.Б. Бураева, С.С. Ломбоева // Разработка и внедрение новых методов и средств традиционной медицины. — М., 2001. — Т. 2. — С. 182—183.
5. Гинекология: национальное руководство / под ред. В.И. Кулакова. — М. : ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 1200 с.
6. Краснопольский В.Н. Гнойная гинекология / В.Н. Краснопольский, С.Н. Буяпова, Н.А. Щукина. — М. : МЕДпресс, 2006. — 304 с.
7. Лабораторные методы исследования в клинике / В.В. Меньшиков [и др.]. — М. : Медицина, 1987. — 320 с.
8. Ломбоева С.С. Количественное определение суммы флавоноидов в надземной части Orthilia
сведения об авторах
secunda (L.) House / С.С. Ломбоева, Л.М. Танхаева, Т.А. Асеева // Биологически активные добавки и здоровое питание : мат. Всерос. науч. конф. — Улан-Удэ, 2001. - С. 27-28.
9. Макаров О.В. Инфекции в акушерстве и гинекологии / О.В. Макаров, В.А. Алешкин, Т.Н. Савченко. — М. : МЕДпресс, 2007. — 464 с.
10. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. — М. : Медицина, 1988. — Т. 1. — С. 203.
11. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. — М., 1983. — 15 с.
12. Мечников И.И. Лекции о сравнительной патологии воспаления / И.И. Мечников. — М. : Медгиз. — 1947. — 189 с.
13. Ойвин И.А. Методика изучения местных нарушений каппилярной проницаемости / И.А. Ойвин, С.Л. Шетель // Материалы по патогенезу воспаления и патологии белков крови. — Душанбе, 1961. — № 5. — С. 167 — 173.
14. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeniacea — Thymelaeceae. — СПб. : Наука, 1991. — 336 с.
15. Стрельников Ю.С. Сравнительная характеристика противовоспалительного действия некоторых пиримидиновых производных / Ю.С. Стрельников // Фармакология и токсикология. — 1969. — № 6. — С. 526 — 531.
16. Телятьев В.В. Полезные растения Центральной Сибири. — Иркутск : Вост.-Сиб. кн. изд-во, 1985. — 417 с.
17. Тринус Ф.П. Нестероидные противовоспалительные средства / Ф.П. Тринус, Н.А. Мохор, Б.М. Клебанов. — Киев, 1975. — 240 с.
18. Хашукоева А.З. Современные подходы к лечению хронических воспалительных заболеваний внутренних половых органов / А.З. Хашукоева, А.М. Торчинов, Л.Е. Смирнова // Иммунология. — 2004. — № 3. — С. 78 — 90.
19. Furchgott R.F. The pharmacological differentiation of adrenergic receptors / R.F. Furchgott // Ann. N.-Y. Acad. Sci. — 1967. — Vol. 139. — P. 553 — 570.
Ботоева Елена Аполлоновна - доцент кафедры АГП, к.м.н. (670000, г. Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36а, деканат мед. факультета БГУ; тел.: 8 (3012) 44-82-55; e-mail [email protected])
Убеева Ираида Поликарповна - профессор, д.м.н., заведующий кафедрой инфекционных болезней Бурятского государственного университета
