CC BY
0
УДК 577.215.3
А. А. ГИЗАТУЛЛИНА, Я. В. ВАЛОВА, Н. Ю. ХУСНУТДИНОВА, Д. А. СМОЛЯНКИН, Д. О. КАРИМОВ, Д. Д. КАРИМОВ
ОЦЕНКА ЭКСПРЕССИИ ГЕНА MT1А В ПОЧКАХ КРЫС В ПОДОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ С ПЕРИОДОМ РЕМИССИИ
Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека, Уфа, Российская Федерация
_ АННОТАЦИЯ_
Введение. Кадмий представляет тяжелый металл, широко распространённый в окружающей среде, особенно близ крупных городов и промышленных производств. Это в том числе характерно и для многих территорий Российской Федерации. Кадмий является токсичным металлом, который может вызывать различные заболевания, включая болезни почек, печени, сердца и легких. Он также может влиять на нервную систему, провоцируя возникновение судорог, паралича и других неврологических проблем, кроме того, он может снижать мужскую фертильность, ухудшает репродуктивную способность и играет активную роль в патогенезе бесплодия.
Цель. Целью исследования стала оценка влияния хлорида кадмия в течение трёх месяцев и одного месяца ремиссии на уровень экспрессии гена МТ1а в почках крыс.
Материалы и методы. В эксперименте были использованы белые аутбредные крысы средней массой тела 200г в количестве 40 особей. Животные были рандомно распределены в четыре
группы. Крысам из трех экспериментальных групп ежедневно в течение трех месяцев перорально вводили водный раствор хлорида кадмия в различных дозах, тогда как животные контрольной группы получали чистую воду в таком же объеме.
Результаты. Анализ кратности экспрессии гена МТ1а в тканях почек выявил статистически значимые различия между исследуемыми группами (Н = 19,02; р = 0,001), кроме того, обнаружено дозозависимоеувеличение кратности экспрессии гена с увеличением дозы токсиканта.
Заключение. Таким образом, экспрессия гена МТ1а в почечной ткани крыс увеличилась в экспериментальных группах по сравнению с группой контроля, что согласуется с уже имеющимися литературными данными и дополняет цикл проведенных нами исследований по изучению влияния тяжелых металлов на организм.
Ключевые слова: тяжелые металлы, хлорид кадмия, экспрессия генов, металлотионеины, ген МТ1а.
Для цитирования Гизатуллина А. А., Валова Я. В., Хуснутдинова Н. Ю., Смолянкин Д. А., Каримов Д. О., Каримов Д. Д. Оценка экспрессии гена МТ1а в почках крыс в подостром эксперименте с периодом ремиссии // Оренбургский медицинский вестник. 2023. Т. XI, № 4 (44). С. 37-42.
Рукопись получена: 15.09.2023 Рукопись одобрена: 15.11.2023 Опубликована: 15.12.2023
ALINA A. GIZATULLINA, YANA V. VALOVA, NADEZHDA YU. KHUSNUTDINOVA, DENIS A. SMOLYANKIN, DENIS O. KARIMOV, DENIS D. KARIMOV
EVALUATION OF MT1A GENE EXPRESSION IN RAT KIDNEYS IN A SUBACUTE EXPERIMENT WITH A PERIOD OF REMISSION
Ufa Research Institute of Occupational Medicine and Human Ecology, Ufa, Russian Federation
_ ABSTRACT_
Introduction. Cadmium is a heavy metal widely distributed in the environment, especially near large cities and industrial production. This, among other things, is typical for many territories of the Russian Federation. Cadmium is a toxic metal that can cause a variety of diseases, including kidney, liver, heart and lung disease. It can also affect the nervous system, causing seizures, paralysis and other neurological problems, in addition, it can reduce male fertility, impair reproductive ability and play an active role in the pathogenesis of infertility.
Aim. The purpose of the study was to evaluate the effect of cadmium chloride for three months and one month of remission on the level of expression of the MT1a gene in the kidneys of rats.
Materials and methods. The experiment used 40 white out-bred rats with an average body weight of200 g. The animals were randomly assigned to four groups. Rats from three experimental
groups were orally administered an aqueous solution of cadmium chloride in various doses every day for three months, while animals in the control group received clean water in the same volume.
Results. Analysis of the fold expression of the MT1a gene in kidney tissue revealed statistically significant differences between the study groups (H = 19.02; p = 0.001), in addition, a dose-dependent increase in the fold of gene expression was found with increasing dose of the toxicant.
Conclusions. Thus, the expression of the MT1a gene in the kidney tissue of rats increased in the experimental groups compared to the control group, which is consistent with existing literature data and complements the series of studies we conducted to study the effect of heavy metals on the body.
Keywords: heavy metals, cadmium chloride, gene expression, metallothioneins, MT1a gene.
For citation: Gizatullina A. A., Valova Y. V., Khusnutdinova N. Yu., Smolyankin D. A., Karimov D. O., Karimov D. D. Evaluation of MT1A gene expression in rat kidneys in a subacute experiment with a period of remission. Orenburg Medical Bulletin. 2023;XI;4 (44):37-42. (In Russia). Received: 15.09.2023 Accepted: 15.11.2023 Published: 15.12.2023
ВВЕДЕНИЕ
Ионы тяжелых металлов уже на протяжении долгого времени являются одними из наиболее активных загрязнителей окружающей среды. Их высокое биологическое сродство к аминокислотам, а именно к карбоксильным, тиоловым, а также сульфгидрильным группам, может являться причиной развития предпатологических и патологических состояний. Это может проявляться в виде нарушений метаболизма, возникновения болевых ощущений, тошноты, повреждений сердечно-сосудистой, нервной и других систем организма. Более того, тяжелые металлы показывают способность к трансплацентарной миграции, что делает их опасными на всех этапах онтогенеза.
Кадмий (Сф - один из тяжелых металлов, который широко распространен в окружающей среде, особенно близ крупных городов и промышленных производств. Это в том числе характерно и для многих территорий Российской Федерации. С каждым годом концентрация данного элемента в атмосфере увеличивается. По предварительным оценкам, за 2021 год по всему миру выделилось более 7 тонн выбросов кадмия. Всемирная организация здравоохранения определила кадмий на пятое место среди самых опасных химических веществ, которые могут негативно воздействовать на состояние организма живых существ [1]. А в 2022 году кадмий занял седьмое место в приоритетном списке опасных веществ, который был опубликован Агентством по регистрации токсичных веществ и болезней [2]. Частицы кадмия способны к адсорбции на твердых веществах, что позволяет ему с большой скоростью переноситься на значительные расстояния, накапливаться в биологических системах и даже при незначительных концентрациях оказывать отравляющее действие.
Основным источником попадания кадмия в организм являются принимаемые пища и вода, которые, в свою очередь, могут быть уже насыщены ионами тяжелых металлов. Наиболее активно токсические агенты накапливаются растениями, а именно теми их органами, в которых активно транспортируются вещества из окружающей среды, - корнями, плодами, семенами и листьями. Поэтому в зону риска попадают большая часть фруктов и овощей, зернобобовые культуры и корнепло -ды. Кроме того, избыток кадмия может быть обнаружен в морепродуктах, получаемых из морских животных, питающихся планктоном [3].
Ионы кадмия также присутствуют в листьях табачных растений, входят в состав автомобильных шин и тормоз -ных колодок. Поэтому другим источником попадания данного тяжелого металла является вдыхаемый воздух, включающий в себя дорожную пыль, промышленные и выхлопные выбросы, а также сигаретный дым [4].
Кадмий является токсичным металлом, который может вызывать различные заболевания, включая болезни почек, печени, сердца и легких. Он также может влиять на нервную систему, провоцируя возникновение судорог, паралича и других неврологических проблем [5, 6]. Кроме того, кадмий снижает мужскую фертильность, ухудшает репродуктивную способность и играет активную роль в патогенезе бесплодия [7].
Преобладающая часть кадмия все же выводится из организма благодаря органам пищеварения и выделения. Накопление кадмия в почках является в некоторой степени частью процесса детоксикации организма, поскольку вещества, накапливающиеся в этом органе, выводятся таким образом из системного кровообращения [8]. Однако тесное и длительное взаимодействие нефронов с ионами тяжелого металла имеет негативные последствия для почек и выделительной системы, что в дальнейшем может сказаться на других системах и тканях организма.
Процесс так называемого накопления ионов кадмия в почках происходит за счет связывания первых с белками - металлотионеинами. Белки играют важную роль в снижении токсичности тяжелых металлов, и кадмия в частности. Это подтверждается рядом исследований. Так, например, в одном из них было обнаружено, что введение раствора кадмия, связанного с данным белком, внутривенно может предотвращать развитие некроза в почечной ткани у мышей, тогда как аналогичные дозы раствора данного тяжелого металла без металлотио -неинов оказывали на почки необратимое разрушающее воздействие [9].
Таким образом, предполагается, что уровень экспрессии одного из генов, кодирующих белки - металлотио-неины, может повышаться при длительном поступлении кадмия в организм. В то же время научно-практический интерес вызывает способность организма к восстановлению в период ремиссии после отравления.
ЦЕЛЬ исследования - оценка влияния хлорида кадмия в течение трех месяцев и одного месяца ремиссии на уровень экспрессии гена MT1a в почках крыс. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Модельными животными для эксперимента были выбраны белые беспородные крысы средней массой те -ла 200 г (N = 40). Было сформировано четыре группы, в каждую из которых случайным образом отбирались в равном количестве самцы и самки (N = 10). Раствор хлорида кадмия в трех дозах (1 мкг/кг, 10 мкг/кг и 100 мкг/кг) вводили перорально особям трех групп соответственно, тогда как животные контрольной группы получали чистую воду в таком же объеме. По окончании введения токсиканта животные всех групп проходили стадию ремиссии в течение одного месяца, после чего были эвтаназированы путем декапитации.
Фрагменты почек крыс, изъятые при вскрытии и помещенные в пробирку с тризолом (Extract RNA, Россия), были заморожены с помощью жидкого азота. Суммарную РНК из почек выделяли согласно протоколу производителя с использованием коммерческого набора ExtractRNA (Evrogen, Россия). Анализ кратности проводили методом ПЦР в реальном времени (краситель SYBR Green) и специально подобранными для гена MT1A олигонуклеотидными праймерами. Для стандартизации полученных результатов в каждом образце также оценивали уровень активности гена Gapdh, который кодирует конститутивный белок и имеет относительно стабильный уровень экспрессии в исследуемом типе тканей.
Для статистической оценки полученных данных использовали программу IBM SPSS Statistics 21 (IBM, США). Выборки были проверены на нормальность рас -пределения признака, для чего был использован критерий Колмогорова - Смирнова. Данные представлены в виде среднего арифметического и стандартным отклонением, а порогом уровня значимости принято значение p = 0,05. Числовые значения получены с применением однофак-торного дисперсионного анализа и использованием апо -стериорных критериев Таймхена и Тьюки. РЕЗУЛЬТАТЫ
В результате введения животным в течение трех месяцев водного раствора хлорида кадмия в трех различных дозировках - 1 мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг -и дальнейшей ремиссии, длительностью 1 месяц, была получена следующая картина распределения кратности экспрессии (рис. 1).
Рисунок 1 - Экспрессия гена MT1a в почках крыс через 3 месяца интоксикации раствором хлорида кадмия и 1 месяца ремиссии при разных дозах затравки
Figure 1 - Expression of the MT1a gene in the kidneys of rats after 3 months of intoxication with a solution of cadmium chloride and 1 month of remission at different doses of the primer
По результатам статистического анализа данных кратности экспрессии гена МТ1а в тканях почек были обнаружены значимые различия между группами (Н = 19,02; p = 0,001). Следы воздействия раствора кадмия в течение трех месяцев на уровень активности исследуемого гена обнаружены даже в группе с минимальной дозой токсиканта - 1,37 [0,47; 2,29], что значимо выше, чем в группе контроля (p = 0,012). В группе экспериментальных животных, получавших раствор хлорида кадмия в концентрации 10 мкг/кг, кратность экспрессии гена МТ1а повысилась по сравнению с контрольными значениями до 1,69 [0,68; 2,9], (p = 0,020). Введение раствора кадмия в максимальной дозе 100 мкг/кг показало наибольшее значение исследуемого показателя - 1,79 [1,26; 2,17], (p = 0,010). Таким образом, в рамках проведенного нами эксперимента наблюдается дозозависимый эффект раствора кадмия на экспрессию гена металлотионеина 1 от минимальной к максимальной дозе.
Полученные нами результаты дополняют литературные данные.
Белки металлотионеинов могут связывать различные металлы, причем известен относительный порядок сродства к ним данных транспортных белков: Cd > Pb > Cu > Hg > Zn > Ag > Ni > Co [10]. В норме в здоровом организме металлотионеины обнаружены чаще всего в связи с ионами цинка и меди, в то время как связывание с кадмием зависит от накопления иона этого металла в почках, которое меняется с возрастом [11].
В исследовании Kavita Rana с соавторами оценивалась почечная токсичность наночастиц сульфида кадмия в расчете 10 мкг/кг в течение полутора месяцев. Авторы показали, что обработка экспериментальных животных через день значительно увеличивала количество кадмий-металлотионеиновых комплексов, а также приводила к активации перекисного окисления липидов, увеличению концентрации креатинина в моче крыс и снижению уровня щелочной фосфата-зы из щеточной каймы проксимальных извитых канальцев [12].
L. Lei обнаружил, что один из полиморфных вариантов гена металлотионеина МТ1а связан с высокой концентрацией кадмия в крови у жителей загрязненных районов, а также с повышенным токсическим воздействием на их почки [13]. В другом эксперименте также было подтверждено, что повышенный профиль экспрессии именно гена МТ1а демонстрируют клетки уротелия человека, причем существуют изоформы, имеющие высокую специфичность к ионам кадмия и являющиеся долгоживущими белковыми биомаркерами воздействия этого тяжелого металла [14].
Уровень экспрессии гена МТ1а в клетках перифериче -ской крови работников, подвергающихся профессиональному воздействию кадмия, коррелирует с повышенным уровнем данного металла в моче [15]. Исследование, проведенное на клеточной линии, полученной из эмбриональных почек человека, HEK293, показало, что сверхэкспрессия гена МТ1а наиболее эффективно защищает клетки от низких концентраций ионов кадмия, по сравнению с МТ2а и МТ3а [16].
В работе Е. Г. Пыхтеевой проведен масштабный анализ влияния некоторых тяжелых металлов на внутренние органы. В числе прочих металлов исследовался и кадмий. Уже после четырех недель воздействия в почечной ткани заметны морфологические изменения. Кроме того, отмечено, что индуцированная кадмием клеточная токсичность в основном определяется фракцией кадмия в почках, еще не связанного с металлотионеинами [17]. То есть для грамотной оценки и прогнозирования пагубных воздействий токсиканта важно понимать, какая доля ионов тяжелого металла связывается металло-тионеинами и насколько активна экспрессия каждого из генов данных белков, что, в свою очередь, позволит вычислить долю несвязанных ионов кадмия. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, экспрессия гена МТ1а в почечной ткани крыс увеличилась в экспериментальных группах по сравнению с группой контроля, что согласуется с уже
имеющимися литературными данными и дополняет цикл проведенных нами исследований по изучению влияния тяжелых металлов на организм. Полученные результаты показывают взаимосвязь активности иссле -дуемого гена с интоксикацией организма кадмием, что может использоваться в качестве индикатора кадми-_ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ_
1. Ивуть А. И. Загрязнение окружающей среды кадмием как экологический риск здоровью // Международный студенческий научный вестн ник. - 2021. - № 2. URL: https://eduherald.ru/ru/article/view7id = 20447.
2. Agency for Toxic SubSances and Disease RegiSry SubSance Priority LiS/ 2022. Available online. URL: https://www.atsdr.cdc.gov/spl/index.html
3. Andjelkovic M., Buha Djordjevic A., Antonijevic E. et al. Toxic Effect of Acute Cadmium and Lead Exposure in Rat Blood, Liver, and Kidney // Int J Environ Res Public Health. - 2019. - № 16 (2). - P. 274.
4. Фазлыева А. С. Даукаев Р. А., Каримов Д. О. Влияние кадмия на здол ровье населения и способы профилактики его токсических эффектов // Медицина труда и экология человека. - 2022. - № 1. URL: https://cy-berleninka.ru/article/n/vliyanie-kadmiya-na-zdorovie-naseleniya-i-sposo-by-profilaktiki-ego-toksicheskih-effektov.
5. Hwang I. C., Ahn H. Y. High Cadmium Levels in Individuals with Depressive Mood: Results from the 2008-2013 Korean National Health and Nutrition Survey // Iran J Public Health. - 2021. - № 50 (8). - P. 1595-1602. DOI 10.18502/ijph.v50i8.6805.
6. Koszewicz M., Markowska K., Waliszewska-Prosol M. et al. The impact of chronic co-exposure to different heavy metals on small fibers of peripho eral nerves // A Sudy of metal induSry workers. J Occup Med Toxicol. -2021. - № 16 (1). - Р. 12. DOI 10.1186/s12995-021-00302-6.
7. Alharthi W., Hamza R., Elmahdi M. et al. Selenium and L-Carnitine Ameliorate Reproductive Toxicity Induced by Cadmium in Male Mice // Biol Trace Elem Res. - 2019. - № 197 (2). - Р. 619-27.
8. Satarug S. Dietary cadmium intake and its effects on kidneys. Toxics. -2018. - № 6. - P. 15. DOI 10.3390/toxics6010015.
9. Smereczanski N. M., Brzoska M. M. Current Levels of Environmental Exposure to Cadmium in InduSrialized Countries as a Risk Factor for Kidney Damage in the General Population: A Comprehensive Review
_REFERENCES_
1. Ivut A. I. Environmental pollution with cadmium as an environmental health risk. International Student Scientific Bulletin. 2021;2. URL: https://eduher-ald.ru/ru/article/view?id = 20447. (In Russian)
1. Agency for Toxic SubMances and Disease Registry SubMance Priority Li&/ 2022 Available online. URL: https://www.atsdr.cdc.gov/spl/index.html
2. Andjelkovic M., Buha Djordjevic A., Antonijevic E. et al. Toxic Effect of Acute Cadmium and Lead Exposure in Rat Blood, Liver, and Kidney. Int J Environ Res Public Health. 2019;6(2):274.
1. Fazlyeva A. S., Daukaev R. A., Karimov D. O. The influence of cadmium on public health and ways to prevent its toxic effects. Labor medicine and human ecology. 2022;1. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/vliyanie-kadmiya-na-zdorovie-naseleniya-i-sposoby-profilaktiki-ego-toksicheskih-effektov. (In Russian)
2. Hwang I. C., Ahn H. Y. High Cadmium Levels in Individuals with Depressive Mood: Results from the 2008-2013 Korean National Health and Nutrition Survey. Iran J Public Health. 2021;50(8):1595-1602. DOI 10.18502/ijph. v50i8.6805.
3. Koszewicz M., Markowska K., Waliszewska-Prosol M. et al. The impact of chronic co-exposure to different heavy metals on small fibers of peripheral nerves. A tfudy of metal indu&ry workers. J Occup Med Toxicol. 2021;16(1):12. DOI 10.1186/s12995-021-00302-6.
4. Alharthi W., Hamza R., Elmahdi M. et al. Selenium and L-Carnitine Ameliorate Reproductive Toxicity Induced by Cadmium in Male Mice. Biol Trace Elem Res. 2019;197(2):619-27.
5. Satarug S. Dietary cadmium intake and its effects on kidneys. Toxics. 2018;6:15. DOI 10.3390/toxics6010015.
6. Smereczanski N. M., Brzoska M. M. Current Levels of Environmental Exposure to Cadmium in InduSrialized Countries as a Risk Factor for Kidney
евого отравления даже после одномесячного периода ремиссии. Кроме того, выявленная индукция металло-тионеинов токсикантом, в частности хлоридом кадмия, может применяться для коррекции терапевтического лечения, а также с целью профилактики токсического отравления ксенобиотиками.
of Available Data // Int J Mol Sci. - 2023. - № 24 (9). - Р. 8413. DOI 10.3390/ijms24098413.
10. Genchi G. et al. The effects of cadmium toxicity // International journal of enn vironmental research and public health. - 2020. - Т. 17. - № 11. - P. 3782.
11. Himeno S., Sumi D., Fujishiro H. Toxicometallomics of cadmium, mangao nese and arsenic with special reference to the roles of metal transporters // Toxicological Research. - 2019. - Т. 35. - P. 311-316.
12. Rana K., Verma Y., Rani V., Rana S. V. S. Renal toxicity of nanoparticles of cadmium sulphide in rat // Chemosphere. 2018. - № 193. - P. 142-150. DOI 10.1016/j .chemosphere. 2017.11.011.
13. Lei L., Chang X., Rentschler G., Tian L., Zhu G., Chen X., Jin T., Broberg K. A polymorphism in metallothionein 1A (MT1A) is associated with cadmium-related excretion of urinary beta 2-microglobulin // Toxicol Appl Pharmacol. - 2012. - 15. - № 265 (3). - P. 373-381. DOI 10.1016/j. taap.2012.09.006.
14. McNeill R. V., Mason A. S., Hodson M. E., Catto J. W. F., Southgate J. Specificity of the Metallothionein-1 Response by Cadmium-Exposed Normal Human Urothelial Cells // Int J Mol Sci. - 2019. - 17. - № 20 (6). -Р. 1344. DOI 10.3390/ijms20061344.
15. Chang X., Jin T., Chen L., Nordberg M., Lei L. Metallothionein I isoform mRNA expression in peripheral lymphocytes as a biomarker for occupax tional cadmium exposure // Exp Biol Med (Maywood). - 2009. - № 234 (6). - Р. 666-72. DOI 10.3181/0811-RM-336.
16. Li J., Liu Y., Ru B. Effect of metallothionein on cell viability and its inter;-actions with cadmium and zinc in HEK293 cells // Cell Biol Int. - 2005. -№ 29 (10). - P. 843-850. DOI 10.1016/j.cellbi.2005.05.008.
17. Пыхтеева Е. Г. Металлотионеин: биологические функции. Роль металн лотионеина в транспорте металлов в организме // Актуальные проблео мы транспортной медицины. - 2009. - № 4 (18). - С. 44-58.
Damage in the General Population: A Comprehensive Review of Available Data. Int J Mol Sci. 2023;24(9):8413. DOI 10.3390/ijms24098413.
7. Genchi G. et al. The effects of cadmium toxicity. Internationaljournal of environmental research and public health. 2020;17;11:3782.
8. Himeno S., Sumi D., Fujishiro H. Toxicometallomics of cadmium, mangao nese and arsenic with special reference to the roles of metal transporters.
Toxicological Research. 2019;35:311-316.
9. Rana K., Verma Y., Rani V., Rana S. V. S. Renal toxicity of nanoparticles of cadmium sulphide in rat. Chemosphere. 2018;193:142-150. DOI 10.1016/j. chemosphere.2017.11.011.
10. Lei L., Chang X., Rentschler G., Tian L., Zhu G., Chen X., Jin T., Broberg K. A polymorphism in metallothionein 1A (MT1A) is associated with cadmium-related excretion of urinary beta 2-microglobulin. Toxicol Appl Pharmacol. 2012;15;265(3):373-381. DOI 10.1016/j.taap.2012.09.006.
11. McNeill R. V., Mason A. S., Hodson M. E., Catto J. W. F., Southgate J. Specificity of the Metallothionein-1 Response by Cadmium-Exposed Normal Human Urothelial Cells. Int J Mol Sci. 2019;17;20(6):1344. DOI 10.3390/ijms20061344.
12. Chang X., Jin T., Chen L., Nordberg M., Lei L. Metallothionein I isoform mRNA expression in peripheral lymphocytes as a biomarker for occupax tional cadmium exposure. Exp Biol Med (Maywood). 2009;234(6):666-72. DOI 10.3181/0811-RM-336.
13. Li J., Liu Y., Ru B. Effect of metallothionein on cell viability and its interacL tions with cadmium and zinc in HEK293 cells. Cell Biol Int. 2005;29(10):843-850. DOI 10.1016/j.cellbi.2005.05.008.
14. Pykhteeva E. G. Metallothionein: biological functions. The role ofmetallov thionein in the transport of metals in the body. Actual problems oftransport medicine. 2009;4(18):44-58. (In Russian).
_ ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ / ADDITIONAL INFORMATION_
Вклад авторов. А. А. Гизатуллина - концепция и дизайн исследования, сбор и обработка материала, статистическая обработка, написание текста; Я. В. Валова - сбор и обработка материала, статистическая оработка; Н. Ю. Хуснутдинова - сбор и обработка материала; Д. О. Смолянкин - сбор и обработка материала; Д. О. Каримов - концепция и дизайн исследования; Д. Д. Каримов - сбор и обработка материала; все соавторы - утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи. Author contribution. A. A. Gizatullina - concept and design of the study, collection and processing of material, statistical processing, text writing; Y. V. Valova - collection and processing of material, statistical processing; N. Yu. Khusnutdinova - collection and processing of material; D. O. Smolyankin - collection and processing of material; D. O. Karimov - concept and design of the study; D. D. Karimov - collection and processing of material; all co-authors - approval of the final version of the article, responsibility for the integrity of all parts of the article. Соблюдение этических стандартов. Дата заседания биоэтической комиссии ФБУН «Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека» 03.04.2023 г. № 01-04. Животные содержались в стандартных условиях вивария с постоянной комнатной температурой, уровнем влажности и двенадцатичасовым искусственным освещением (с 08:00 до 20:00). Условия содержания и кормления были одинаковы для всех групп животных. По окончании введения токсиканта животные всех групп проходили стадию ремиссии в течение одного месяца, после чего были эвтаназированы путем декапитации.
Нормативные документы, которые были использованы при уходе за животными, питании и проведении экспериментов: ГОСТ 332152014 «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила оборудования помещений и организации процедур»; рекомендации комитета по экспериментальной работе с использованием животных при Минздраве России; рекомендациями ВОЗ; рекомендации Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемые для экспериментальных и других целей. Вывод животных из эксперимента проводили с соблюдением международных принципов Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным и требованиями «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Минздрава СССР от 12.08.1977 № 755).
Compliance with ethical standards. Date of the meeting of the bioethical commission of the Federal Budgetary Institution «Ufa Research Institute of Occupational Medicine and Human Ecology» 04/03/2023 No. 01-04. The animals were kept in standard vivarium conditions with constant room temperature, humidity level and twelve-hour artificial lighting (from 08:00 to 20:00). Housing and feeding conditions were the same for all groups of animals. At the end of the administration of the toxicant, animals of all groups went through a stage of remission for one month, after which they were euthanized by decapitation.
Regulatory documents that were used in animal care, nutrition and experiments: GOST 33215-2014 «Guide to the care and maintenance of laboratory animals. Rules for equipment of premises and organization of procedures»; recommendations of the Committee on Experimental Work Using Animals under the Russian Ministry of Health; WHO recommendations; recommendations of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Purposes. The removal of animals from the experiment was carried out in compliance with the international principles of the Declaration of Helsinki on the humane treatment of animals and the requirements of the «Rules for carrying out work using experimental animals» (Appendix to the order of the USSR Ministry of Health dated August 12, 1977 No. 755).
Финансирование. Отраслевая научно-исследовательская программа Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека на 2021-2025 гг. п. 6.1.9. «Экспериментальное обоснование высокочувствительных маркеров воздействия токсичных металлов на организм и разработка мер профилактики».
Funding source. Industry research program of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare for 2021-2025. clause 6.1.9. «Experimental substantiation of highly sensitive markers of the effects of toxic metals on the body and development of preventive measures».
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Competing interests. The authors declares that there are no obvious and potential conflicts of interest associated with the publication of this article.
. ОБ АВТОРАХ._
* Алина Анваровна Гизатуллина,
мл. н. с. отдела токсикологии и генетики с экспериментальной клиникой лабораторных животных;
ORCID: 0000-0002-7321-0864;
e-mail: [email protected]
Яна Валерьевна Валова,
мл. н. с. отдела токсикологии и генетики
с экспериментальной клиникой лабораторных
животных;
ORCID: 0000-0001-6605-9994;
e-mail: [email protected]
Надежда Юрьевна Хуснутдинова,
н. с. отдела токсикологии и генетики
с экспериментальной клиникой лабораторных
животных;
ORCID: 0000-0001-5596-8180; е-mail: [email protected]
Денис Анатольевич Смолянкин,
мл. н. с. отдела токсикологии и генетики с экспериментальной клиникой лабораторных животных;
ORCID: 0000-0002-7957-2399;
e-mail: [email protected]
Денис Олегович Каримов,
к. м. н., заведующий отделом токсикологии
и генетики с экспериментальной клиникой
лабораторных животных;
ORCID: 0000-0003-0039-6757;
e-mail: [email protected]
Денис Дмитриевич Каримов,
к. б. н., ст. н. с. отдела токсикологии и генетики
с экспериментальной клиникой лабораторных
животных;
ORCID: 0000-0002-1962-2323; e-mail: [email protected]
_ AUTHORS INFO_
* Alina A. Gizatullina,
junior researcher at the Department of Toxicology and Genetics with the experimental laboratory animal clinic;
ORCID: 0000-0002-7321-0864; e-mail: [email protected] Yana V. Valova,
junior researcher at the Department of Toxicology and Genetics with the experimental laboratory animal clinic;
ORCID: 0000-0001-6605-9994;
e-mail: [email protected]
Nadezhda Yu. Khusnutdinova,
researcher at the Department of Toxicology and
Genetics with the experimental laboratory animal
clinic;
ORCID: 0000-0001-5596-8180; e-mail: [email protected]
* Автор, ответственный за переписку / Corresponding author
Denis A. Smolyankin,
junior researcher at the Department of Toxicology and Genetics with the experimental laboratory animal clinic;
ORCID: 0000-0002-7957-2399; e-mail: [email protected] Denis O. Karimov,
Candidate of Medical Sciences, Head of the Department of Toxicology and Genetics with the Experimental Laboratory Animal Clinic; ORCID: 0000-0003-0039-6757; e-mail: [email protected] Denis D. Karimov,
Candidate of Biological Sciences, senior researcher at the Department of Toxicology and Genetics with the experimental laboratory animal clinic; ORCID: 0000-0002-1962-2323; e-mail: [email protected]
