CC BY
5
УДК 619:616.995.1 -085.284
DOI 10.30914/2411 -9687-2024-10-2-150-155
Оценка эффективности средств для дезинвазии
против экзогеных форм криптоспоридий Е. С. Климова, Т. В. Бабинцева, Е. А. Фалей, Е. В. Максимова
Удмуртский государственный аграрный университет, г. Ижевск, Российская Федерация,
Аннотация. Введение. Криптоспоридиоз - это широко распространенное протозойное заболевание многих видов животных, а также человека. Перечень препаратов, используемых для уничтожения экзогенных форм ооцист Criptosporidium parvum, ограничен, так как ооцисты возбудителя сложно уничтожить во внешней среде вследствие незначительных размеров, наличия толстой оболочки, которая защищает их от неблагоприятных факторов внешней среды, что придает им высокую устойчивость к дезинфицирующим средствам. Цель: анализ эффективности препаратов «Лигроцид» и «Вироцид» для дезинвазии против ооцист Criptosporidium parvum. Материалы и методы. Была проведена сравнительная оценка эффективности препаратов для дезинвазии против ооцист Criptosporidium parvum препаратов «Лигроцид» и «Вироцид» в концентрации 0,25 % с экспозицией 1 час. Соскобы отбирали с объектов внешней среды (пол, стены, кормушки, поилки) с помощью щетки для отбора материала. Материал для изучения отбирали до обработки и через сутки после дезинвазии. Из полученных проб изготавливали нативные мазки, которые окрашивали по Цилю-Нильсену и микроскопировали при увеличении в 1000 раз. Полученные результаты исследования подверглись статистическому анализу с использованием критерия хи-квадратов МакНемара. Результаты исследования, обсуждения. При исследовании мазков, отобранных до дезинвазии, установлено, что все поверхности были контаминированы ооцистами криптоспоридий. После дезинвазии препаратом «Лигроцид» ооцисты были выявлены только в трех пробах, а при использовании препарата «Вироцид» в пяти пробах. Заключение. Таким образом, результаты исследования показали, что «Лигроцид», для дезинвазии экзогенных форм Criptosporidium parvum, оказался в 1,7 раза (р<0,001) более эффективнее относительно препарата «Вироцид». Следует отметить, что препарат «Лигроцид» почти в 10 раз дешевле, чем «Вироцид».
Ключевые слова: эндогенные формы, ооцисты, Criptosporidium parvum, дезинвазия, дезинфицирующее средство, «Лигроцид», «Вироцид»
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Для цитирования: Оценка эффективности средств для дезинвазии против экзогеных форм криптоспоридий / Е. С. Климова, Т. В. Бабинцева, Е. А. Фалей, Е. В. Максимова // Вестник Марийского государственного университета. Серия «Сельскохозяйственные науки. Экономические науки». 2024. Т. 10. № 2. С. 150-155. DOI: https://doi.org/10.30914/2411-9687-2024-10-2-150-155
Evaluation of the effectiveness of disinfectants against
exogenous forms of cryptosporidia E. S. Klimova, T. V. Babintseva, E. A. Faley, E. V. Maksimova
Udmurt State Agrarian University, Izhevsk, Russian Federation
Abstract. Introduction. Cryptosporidiosis is a widespread protozoal disease of many animal species, as well as humans. The list of drugs used to destroy exogenous forms of oocysts of Criptosporidium parvum is limited, since the oocysts of the pathogen are difficult to destroy in the external environment due to their small size, the presence of a thick shell that protects them from adverse environmental factors, which makes them highly resistant to disinfectants. The purpose of the work was to analyze the effectiveness of preparations "Ligrocid" and "Virocid" for disinfection against Criptosporidium parvum oocysts. Materials and methods. A comparative assessement of the effectiveness of "Ligrocid" and "Virocid" at a concentration of 0.25% with an exposure time of 1 hour for disinfection against Criptosporidium parvum oocysts was carried out. Scrapings were taken from environmental objects (floor, walls, feeders, drinkers) using a brush for material sampling. Material for study was taken before treatment and a day after disinvasion. Native smears were prepared from the obtained samples, stained according to Cyl-Nielsen and microscoped at a magnification of 1000 times. The obtained results were
statistically analyzed using the McNemar chi-square criterion. Research results, discussion. When examining smears taken before disinvasion, it was found that all surfaces were contaminated with Cryptosporidium oocysts. After disinvasion with "Ligrocide", oocysts were detected only in three samples, and when using"Virotide" in five samples. Conclusion. Thus, the results of the study showed that "Ligrocid" for the disinvasion of exogenous forms of Criptosporidiumparvum was 1.7 times (p<0,001) more effective than "Virocid". It should be noted that the preparation "Ligrocid" is almost 10 times cheaper than "Virocid".
Keywords: endogenous forms, oocysts, Criptosporidium parvum, disinvasion, disinfectant, "Ligrocid", "Virocid"
The authors declare no conflict of interest.
For citation: Klimova E. S., Babintseva T. V., Faley E. A., Maksimova E. V. Evaluation of the effectiveness of disinfectants against exogenous forms of cryptosporidia. Vestnik of the Mari State University. Chapter "Agriculture. Economics", 2024, vol. 10, no. 2, pp. 150-155. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.30914/2411-9687-2024-10-2-150-155
Введение
Стратегической задачей для успешного развития Российской Федерации является обеспечение населения страны качественной животноводческой продукцией собственного производства. Инвазионные болезни, в том числе кокцидиозы, значительно препятствуют реализации ФЗ «О развитии сельского хозяйства» № 264 от 29.12.2006, снижая конкурентоспособность сельскохозяйственных товаропроизводителей и ухудшая качество получаемой продукции.
Криптоспоридиоз относится к широко распространенным протозойным заболеваниям многих видов животных, в том числе и человека. Усугубление эпизоотической ситуации по возбудителю Criptosporidium parvum происходит вследствие нарушения технологии содержания, кормления животных, повышенной эксплуатации животноводческих помещений и сложности изыскания средств для борьбы с ооцистами паразита во внешней среде [1-6].
Существуют различные схемы лечебно-профилактических мероприятий при инвазионных болезнях [5]. Успех девастации зависит от комплексного подхода, который должен учитывать биологию развития паразита. Животные заражаются с кормом и водой, которые контамини-рованы ооцистами возбудителя, попадающими во внешнюю среду. Поэтому уничтожение экзогенных форм ооцист - один из основных этапов в борьбе с криптоспоридиозом. Средств, применяемых для дезинвазии против ооцист Criptosporidi-um parvum, не много, так как их сложно уничтожить во внешней среде [5; 7-10].
Цель: cравнительный анализ влияния препаратов «Лигроцид» и «Вироцид» на сохранность ооцист.
Материалы и методы
Исследование проводили на кафедре эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВО Удмуртский ГАУ. Объектом исследования служили клетки, в которых содержались беспородные белые мыши, зараженные ооциста-ми Criptosporidium parvum.
Для дезинвазии применяли препараты «Лигроцид» и «Вироцид».
«Лигроцид» - это препарат, производимый на предприятии в России, используемый для дезинфекции и содержащий в своем составе 24,8 % четвертичных аммониевых соединений (7,8 % дидецилдиметиламмоний хлорид, 17,0 % алкилдиметилбензиламмония хлорид), 10,7 % глутарового альдегида, функциональные добавки. Рабочий раствор в концентрации 0,25 % готовили согласно инструкции.
«Вироцид» производится на территории Бельгии, представляет собой универсальное дезинфицирующее средство, состав которого включает 24,86 % четвертичных аммониевых соединений (7,8 % дидецилдиметиламмоний хлорид, 17,06 % алкилдиметилбензиламмония хлорид), 10,72 % глутарового альдегида, 14,62 % изопропанола, 2 % терпентин дериват, 47,79 % буферного растворителя АД-50 ВР (включающего дистиллированную воду, оксиэтилированный спирт, этилендиаминтетрауксусной кислоты). 0,25 % раствор готовили согласно инструкции.
Клетки перед обработкой освобождали от животных, проводили механическую очистку, после дезинвазии проводили методом орошения, с экспозицией препаратов 1 час.
Для изучения контаминации объектов внешней среды пробы отбирали при помощи щетки для отбора материала с объектов внешней среды, которыми послужили поверхность пола клеток мышей, стен, кормушек, поилок (по 10 проб). Из полученного материала готовили нативные мазки, которые окрашивали по Цилю-Нильсену и в дальнейшем микроскопировали при увеличении в 1000 раз. Соскобы отбирали в 5 точках с каждой поверхности.
При оценке эффективности влияния препаратов на сохранностью ооцист криптоспоридий подсчитывали только не деформированные оои-сты. При микроскопировании обращали внимание на форму, окраску, деформацию, искривление, повреждение оболочки ооцисты.
Полученные результаты исследования подверглись статистическому анализу с использованием критерия хи-квадратов МакНемара.
Результаты исследования, обсуждения
Анализирую результаты микроскопического исследования соскобов, которые были отобраны
Изучая мазки, приготовленные из соскобов с внешней среды перед использованием препарата «Вироцид», установили, что большое количество положительных проб выявлено на поверхности полов (80 %), как и в предыдущей группе. Вторыми по степени контаминации были пробы с поверхности кормушек (70 %). В соскобах с поверхности стен и поилок обнаружено по 4 положительных пробы (40 %) (табл. 2).
до обработки, установлено, что все поверхности были контаминированы ооцистами криптоспо-ридий (табл. 1).
Экзогенные ооцисты Criptosporidium parvum выделяются во внешнюю среду с фекалиями, что приводит к контаминации поверхности пола и стен, при микроскопии соскобов с их поверхности выявлено большое количество положительных проб (80 % и 60 % соответственно) относительно других изучаемых объектов. Наши данные согласуются с результатами полученными А. С. Новиковым и А. Л. Кряжевым. Меньше всего положительных проб выявлено в со-скобах с поилок и кормушек. Таким образом, можно отметить, что контаминация объектов внешней среды играет ведущую роль в распространении криптоспоридиоза среди животных [2; 6; 7].
Результаты эффективности проведения дезин-вазии клеток лабораторных животных оценивали через сутки. После использования препарата «Лигроцид» в соскобах с ранее наиболее конта-минированных объектов были найдены ооцисты криптоспоридий в двух пробах с пола и в одной с поверхности стен. В мазках, изготовленных с поверхности поилок и кормушек, ооцисты возбудителя не были найдены.
Таблица 1 / Table 1
Положительные пробы в мазках, приготовленных из соскобов, которые отобрали после дезинвазии средством «Вироцид», были выявлены с поверхности пола (30 %), стен (10 %) и кормушек (10 %).
Анализируя полученные результаты, можно отметить, что наиболее эффективным средством для дезинвазии оказался препарат «Лигроцид», данный препарат повреждает стенки экзогенных
Контаминация клеток ооцистами Criptosporidium parvum до и после дезинвазии с использованием препарата «Лигроцид» / Contamination of cells by Criptosporidium parvum oocysts before and after disinvasion using the drug "Ligrocide"
До обработки / Before treatment После обработки / After treatment
+ пробы / + samples % + пробы / + samples %
Полы, n=10 8 80 2 20
Стены, n=10 6 60 1 10
Поилки, n=10 5 50 0 0
Кормушки, n=10 5 50 0 0
Всего, n=40 24 60 3 7,5
ооцист Criptosporidium рагуыт. Неразрушенные ооцисты были только в трех пробах (7,5 %), наблюдаемое снижение по критерию хиквадратов Мак-Немара статистически значимо (р<0,003). При использовании препарата «Вироцид» данный
показатель составил пять положительных проб (12,5 %), также статистически значим (р<0,011). «Лигроцид» в 1,7 разе эффективнее относительно средства «Вироцид», что по критерию хи-квадратов МакНемара статистически значимо (р<0,001).
Таблица 2 / Table 2
Контаминация клеток ооцистами Criptosporidium parvum до и после дезинвазии с использованием препарата «Вироцид» / Contamination of cells by Criptosporidium parvum oocysts before and after disinvasion using the drug "Virocide"
До обработки / Before treatment После обработки / After treatment
+ пробы / + samples % + пробы / + samples %
Полы, n=10 8 80 3 30
Стены, n=10 4 40 1 10
Поилки, n=10 4 40 0 0
Кормушки, n=10 7 70 1 10
Всего, n=40 23 57,5 5 12,5
Заключение
Сравнивая влияние препаратов на сохранность экзогенных форм Criptosporidium рагуит, установили, что «Лигроцид» для дезинвазии оказался в 1,7 раза (р<0,001) более эффективнее относительно препарата «Вироцид». Следует отметить, что препарат «Лигроцид» почти в 10 раз дешевле, чем «Вироцид».
Экзогенные формы ооцист Criptosporidium parvum постоянно выделяются от больных животных в окружающую среду и контаминируют различные объекты внешней среды, что становится источником заражения восприимчивых животных. Поэтому ветеринарные специалисты при составлении комплексных мероприятия против криптоспоридиоза должны учитывать данную особенность биологии развития возбудителя.
1. Бородин Ю. А., Нестерович С. Г., Сарока А. М. Криптоспоридиоз молодняка крупного рогатого скота, свиней и кур // Ученые записки учреждения образования Витебская ордена Знак почета государственная академия ветеринарной медицины. 2012. Т. 48. № 2-1. С. 4-6. URL: https://repo.vsavm.by/handle/123456789/614 (дата обращения: 19.02.2024).
2. Васильева В. А. Роль факторов внешней среды в распространении криптоспоридиоза // Материалы Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. Казань, 2001. Ч. 1. С. 12-13.
3. Климова Е. С. Инвазированность крупного рогатого скота эндопаразитозами в зависимости от категории хозяйств // Ветеринарная патология. 2022. № 2(80). С. 14-18. URL: https://cyberleninka.ru/artide/Mnvazirovannost-krapnogo-rogatogo-skota-endoparazitozami-v-zavisimosti-ot-kategorii-hozyaystv?ysclid=lxn5d3p2ya695723485 (дата обращения: 19.02.2024).
4. Cryptosporidium Infection and Associated Risk Factors among Cattle in the Central Region of Ghana / K. Dankwa, P. K. Feglo, S. V. Nuvor, M. Aggrey-Korsah, M. Mutocheluh // Journal of Parasitology Research. 2021. Vol. 2021. Pp. 1-8. DOI: https://doi.org/10.1155/2021/6625117
5. Журенко В. В., Костюк Е. Р. Меры профилактики при криптоспоридиозе крупного рогатого скота в хозяйствах // Инновации в животноводстве - сегодня и завтра: сборник научных статей по материалам Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию РУП «Научнопрактический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству», Жодино, 19-20 декабря 2019 года, 2019. С. 404-408. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=42 442615&ysclid=lxn63nlwxl830902111 (дата обращения: 19.02.2024).
6. Контаминация предметов окружающей среды ооцистами эймерий / Е. С. Климова, М. Р. Кудрин и др. // Вестник Ижевской ГСХА. 2020. № 1 (61). С. 36-40. DOI: https://doi.org/10.48012/1817-5457_2020_1_36
7. Новиков А. С., Кряжев А. Л. Контаминация объектов внешней среды ооцистами криптоспоридий на промышленном свинокомплексе и меры борьбы с ними // Российский паразитологический журнал. 2021. № 3. С. 64-70. DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2021-15-3-64-70
8. Сафиуллин Р. Т., Шибитов С. К. Дезинвазия объектов внешней среды против цист паразитических простейших (Buxtonella sulcatа) крупного рогатого скота // Российский паразитологический журнал. 2019. Т. 13. № 1. С. 64-74. DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2019-13-1-64-74
9. Campbell J., Tzipori S., Hutchison B., Angus K.W. Effect of disinfectans on survival of Cryptosporidium oocysts // Vet. Ree. 1982. Vol. 111. №18. P. 414-415. URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7147666/ (дата обращения: 19.02.2024).
10. Chalmers R. M., Smith R., Elwin K., Clifton-Hadley F. A., Giles M. Epidemiology of anthroponotic and zoonotic human cryptosporidiosis in England and Wales, 2004-2006 // Epidemiology & Infection. 2011. Т. 139. №. 5. P. 700-712. DOI: https://doi.org/10.1017/S0950268810001688
Статья поступила в редакцию 14.05.2024 г.; одобрена после рецензирования 04.06. 2024 г.; принята к публикации 18.06.2024 г. Об авторах
Климова Екатерина Сергеевна
кандидат ветеринарных наук, доцент, кафедра эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, Удмуртский государственный аграрный университет (426069, Российская Федерация, г. Ижевск, ул. Студенческая д. 11), ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5572-7149, [email protected]
Бабинцева Татьяна Викторовна
кандидат ветеринарных наук, доцент, кафедра эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, Удмуртский государственный аграрный университет (426069, Российская Федерация, г. Ижевск, ул. Студенческая д. 11), ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4169-3934, [email protected]
Фалей Екатерина Александровна
аспирант, кафедра эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, Удмуртский государственный аграрный университет (426069, Российская Федерация, г. Ижевск, ул. Студенческая д. 11),
Максимова Елена Вениаминовна
кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, Удмуртский государственный аграрный университет (426069, Российская Федерация, г. Ижевск, ул. Студенческая д. 11), ORCID: https://orcid.org/0000-0003-3689-3851, [email protected]
Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.
1. Borodin Yu. A., Nesterovich S. G., Saroka A. M. Kriptosporidioz molodnyaka krupnogo rogatogo skota, svinei i kur [Cryptosporidiosis of young cattle, pigs and chickens]. Uchenye zapiski uchrezhdeniya obrazovaniya Vitebskaya ordena Znak pocheta gosudarstvennaya akademiya veterinarnoi meditsiny = Transactions of the educational establishment "Vitebsk the Order of "the Badge of Honor" State Academy of Veterinary Medicine, 2012, vol. 48, no. 2-1, pp. 4-6. Available at: https://repo.vsavm.by/handle/123456789/614 (accessed 19.02.2024). (In Russ.).
2. Vasilyeva V. A. Rol' faktorov vneshnei sredy v rasprostranenii kriptosporidioza [The role of environmental factors in the spread of cryptosporidiosis]. Materialy Vserossiiskoi nauchno-proizvodstvennoi konferentsii po aktual'nym problemam veterinarii i zootekhnii = Materials of the All-Russian scientific and production conference on current issues of veterinary medicine and animal science, Kazan, 2001, Part 1, pp. 12-13. (In Russ.).
3. Klimova E. S. Invazirovannost' krupnogo rogatogo skota endoparazitozami v zavisimosti ot kategorii khozyaistv [Cattle endoparasitoses depending on the farms category]. Veterinarnaya patologiya = Veterinary Pathology, 2022, no. 2 (80), pp. 14-18. Available at: https://cyberleninka.ru/article/n/invazirovannost-krupnogo-rogatogo-skota-endoparazitozami-v-zavisimosti-ot-katego rii-hozyaystv?ysclid=lxn5d3p2ya695723485 (accessed 19.02.2024). (In Russ.).
4. Dankwa K., Feglo P. K., Nuvor S. V., Aggrey-Korsah M., Mutocheluh M. Cryptosporidium infection and associated risk factors among cattle in the central region of Ghana. Journal of Parasitology Research, 2021, vol. 2021, pp. 1-8. DOI: https://doi.org/10.1155/2021/6625117
5. Zhurenko V. V., Kostyuk E. R. Mery profilaktiki pri kriptosporidioze krupnogo rogatogo skota v khozyaistvakh [Preventive measures for cryptosporidiosis of cattle in farms]. Innovatsii v zhivotnovodstve - segodnya i zavtra: sborniknauchnykh stateipo ma-terialam Mezhdunarodnoi nauchno-prakticheskoi konferentsii, posvyashchennoi 70-letiyu RUP "Nauchnoprakticheskii tsentr Natsional'noi akademii nauk Belarusi po zhivotnovodstvu " = Innovations in animal husbandry - today and tomorrow: collection of scientific articles on the materials of the International scientific and practical conference dedicated to the 70th anniversary of the RUE "Scientific and Practical Center of the National Academy of Sciences of Belarus for Animal Husbandry" (Zhodino, December 19-20, 2019), 2019, pp. 404-408. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=42442615&ysclid=lxn63nlwxl830902111 (accessed 19.02.2024). (In Russ.).
6. Klimova Ye. S., Kudrin M. R., Maksimova Ye. V., Reshetnikova A. D. Kontaminatsiya predmetov okruzhayushchei sredy ootsistami eimerii [Contamination of environmental objects by Eimeria oocysts]. Vestnik Izhevskoi GSKHA = The Bulletin of Izhevsk State Agricultural Academy, 2020, no. 1 (61), pp. 36-40. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.48012/1817-5457_2020_1_36
7. Novikov A. S., Kryazhev A. L. Kontaminatsiya ob"ektov vneshnei sredy ootsistami kriptosporidii na promyshlennom svinokomplekse i mery bor'by s nimi [Contamination of environmental objects with Cryptosporidium spp. oocysts in industrial pig farm and measures to control them]. Rossiiskii parazitologicheskii zhurnal = Russian Journal of Parasitology, 2021, no. 3, pp. 64-70. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2021-15-3-64-70
8. Safiullin R. T., Shibitov S. K. Dezinvaziya ob"ektov vneshnei sredy protiv tsist paraziticheskikh prosteishikh (Buxtonella sulcata) krupnogo rogatogo skota [Disinfection of external environment objects to parasitic protozoa cysts (Buxtonella sulcatа) in cattle]. Rossiiskii parazitologicheskii zhurnal = Russian Journal of Parasitology, 2019, vol. 13, no. 1, pp. 64-74. (In Russ.). DOI: 10.31016/1998-8435-2019-13-1-64-74
9. Campbell J., Tzipori S., Hutchison B., Angus K.W. Effect of disinfectans on survival of Cryptosporidium oocysts. Vet. Ree., 1982, vol. 111, no.18, pp. 414-415. (In Eng.). DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2019-13-1-64-74
10. Chalmers R. M., Smith R., Elwin K., Clifton-Hadley F. A., Giles M. Epidemiology of anthroponotic and zoonotic human cryptosporidiosis in England and Wales, 2004-2006. Epidemiology & Infection, 2011, vol. 139, no. 5, pp. 700-712. (In Eng.). DOI: https://doi.org/10.1017/S0950268810001688
The article was submitted 14.05.2024; approved after reviewing 04.06.2024; accepted for publication 18.06.2024.
About the author Ekaterina S. Klimova
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor, Department of Epizootology and Veterinary and Sanitary Examination, Udmurt State Agricultural University (11 Student St., Izhevsk 426069, Russian Federation), ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5572-7149, [email protected]
Tatyana V. Babintseva
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor, Department of Epizootology and Veterinary and Sanitary Examination, Udmurt State Agricultural University (11 Student St., Izhevsk 426069, Russian Federation), ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4169-3 934, ariadna-35 [email protected]
Ekaterina A. Faley
Postgraduate student, Department of Epizootology and Veterinary and Sanitary Examination, Udmurt State Agricultural University (11 Student St., Izhevsk 426069, Russian Federation), [email protected]
Elena V. Maksimova
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor, Department of Epizootology and Veterinary and Sanitary Examination, Udmurt State Agricultural University (11 Student St., Izhevsk 426069, Russian Federation), ORCID: https://orcid.org/0000-0003-3689-3851, [email protected]
All authors have read and approved the final manuscript.
