CC BY
31
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
УДК:61 DOI: 10.24411/2075-4094-2018-15986
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕБНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГИНГИВИТЕ ИССЛЕДОВАНИЕМ ЦИТОКИНОВ И МОЛЕКУЛ АДГЕЗИИ
СОСУДИСТЫХ СТЕНОК
З.К. КОЗЫРЕВА*, С.Н. ГОНТАРЕВ**
Северо-Осетинская Государственная Медицинская академия, Пушкинская ул., 40, Владикавказ, Республика Северная Осетия, 362007, Россия Белгородский государственный национальный исследовательский университет, ул. Победы, 85, Белгород, Белгородская обл., 308015, Россия, e-mail: [email protected]
Аннотация. В статье определены предпосылки изучения содержания в крови молекул адгезии сосудистой стенки и провоспалительных цитокинов, как маркеров воспаления при хронических гингивитах, что предопределило цель исследования. У 49 пациентов обоего пола (по 13 человек в группе) на им-муноферментном анализаторе определяли молекулы адгезии сосудистой стенки VCAM-1 и ICAM-1, а также провоспалительных цитокинов ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а - до и после проведенного лечения (ко-ронатерой, фитовитом, как по отдельности, так и при совместном применении). В контрольной группе -53 пациента. Получены убедительные данные по возможности использования показателей эндотелиаль-ной дисфункции, провоспалительных цитокинов для оценки эффективности проводимых лечебных мероприятий при хронических гингивитах.
Ключевые слова: хронический гингивит, молекулы адгезии сосудистой стенки, провоспалитель-ные цитокины, фитотерапия.
EVALUATION OF TREATMENT EFFICIENCY OF CHRONIC GINGIVITIS BY STUDY OF CYTOKINES AND MOLECULES OF ADHESION OF VASCULAR WALLS
Z.K. KOZYREVA*, S.N. GONTAREV**
North Ossetian State Medical Academy, Pushkinskaya Str., 40, Vladikavkaz, Republic of North Ossetia, 362007, Russia Belgorod State National Research University, Pobedy Str., 85, Belgorod, Belgorod region, 308015, Russia, e-mail: [email protected]
Abstract. In the article, the prerequisites for studying the blood content of the vascular wall adhesion molecules and pro-inflammatory cytokines as markers of inflammation in chronic gingivitis have been determined, which predetermined the purpose of this study. In 49 patients of both sexes (13 in each group) VCAM-1 and ICAM-1 vascular wall adhesion molecules, as well as pro-inflammatory cytokines IL-4, IL-6, IL-8, TNF-a before and after treatment (by coronatera, fitotovit, both separately and in a joint application) were determined using an enzyme immunoassay. The control group consisted of 53 patients. Convincing data on the possible use of indices of endothelial dysfunction, pro-inflammatory cytokines for the evaluation of the effectiveness of therapeutic measures for chronic gingivitis were obtained.
Key words: chronic gingivitis, vascular wall adhesion molecules, pro-inflammatory cytokines, phytotherapy.
Введение. В последнее время возрос интерес к изучению хронических гингивитов, что связано с многообразием их клинических проявлений и значительной распространенностью, отсутствием стандартных критериев оценки эффективности лечения. Взвешенный подход к лечению хронического катарального гингивита с позиций диагностики и устранения факторов риска может способствовать увеличению диапазона эффективности их профилактики [3, 4]. Патогенетические факторы риска имеют конкретный, направленный на его устранение способ воздействия, что индивидуализирует лечебные и профилактические меры. Имеются сведения о диагностической значимости исследований молекул адгезии сосудистых стенок (VCAM-1, ICAM-1) и провоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а), в частности, при хроническом гепатите и реконвалесценции после внебольничной пневмонии, когда гематологические проявления воспаления минимизированы [1, 5, 7].
Увеличивается количество исследований, доказывающих эффективность использования фитопрепаратов, фитоэкдистероидов - при коррекции механизмов адаптации, нарушенных при различных заболеваниях, в том числе зубодесневой системы [2, 6].
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
Цель исследования - оценить значимость исследований молекул адгезии сосудистых стенок (VCAM-1, ICAM-1) и провоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а) для диагностики активности хронического гингивита.
Материалы и методы исследования. Пациенты были распределены на 3 группы, по 13 человек в каждой группе. Первая группа лечилась только коронатерой, вторая - фитовитом, третья группа - коро-натерой и фитовитом в комплексе. Все три группы больных - с диагнозом хронический катаральный гингивит. Клиническую степень тяжести изучаемой патологии устанавливали с помощью общепринятых па-родонтальных индексов. В контрольной группе из 53 пациентов лечение хронического гингивита осуществлялось общепринятыми способами терапии в соответствии с клиническими рекомендациями.
Концентрацию цитокинов и молекул адгезии в сыворотке крови определяли на иммунофермент-ном анализаторе «Alfa Prime» фирмы «Meredith Diagnostics» (Великобритания, год выпуска 2009 год). Использовались реактивы и контрольные растворы «Biolabo», «Bender Medsystems», «Dyasys». В сыворотке крови пациентов определяли уровни ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8 и ФНО-a, а также ICAM-1 и VCAM-1 методом твердофазного иммуноферментного анализа (Enzymte Linked Immunosorbent Assay), который заключался в формировании комплекса, в котором самый внешний слой составлял индикаторный фермент, а определяемое вещество - один из внутренних его слоев. Исследование осуществлялось в лунках, стенки которых изготовлены из полистирена. Алгоритм исследования: внесение первичных антител, затем исследуемой пробы, далее - вторичных антител. Четвертый слой представлен фиксированным на антителах ферментом пероксидазой. После добавления каждого реагента - оставшиеся непрореагировавшие белки удалялись отмыванием буферных растворов. Ферментативная реакция проводилась на конечном этапе, для чего добавлялся o-фенилендиамин и перекись водорода. При этом интенсивность окраски была прямо пропорциональна концентрации цитокинов.
Статистический анализ осуществлялся с помощью пакета Statistica for Windows EP, статистического пакета SPSS for Windows. Для установления взаимосвязи между параметрами, представленными в виде альтернативных переменных, использовали двухсторонний t-критерий, тест Фишера. Для определения различных показателей в группах использовали t-критерий Стьюдента. Достоверным считали уровень значимости p<0,05.
Результаты и их обсуждение. В процессе лечения больных коронатерой и фитовитом получен положительный клинический эффект. При катаральном гингивите отмечено уменьшение гиперемии, кровоточивости, отека и отторжение эпителия слизистой дёсен. Пациенты отмечали улучшение самочувствия и настроения, уменьшение или полное исчезновение болей в зубодесневой системе, были довольны проводимым лечением. Динамика функционального класса оказалась положительной (р<0,01).
Оценка полученных данных позволяет констатировать существенное значение сосудистого звена в патогенезе хронического катарального гингивита. При тяжелой форме течения процесса до лечения выявлялись гемодинамические нарушения реактивного характера, проявляющиеся в виде тромбоэндова-скулитов и продуктивных панваскулитов в сочетании со склеротическими изменениями прекапиллярно-го, капиллярного и посткапиллярного составляющих модуля системы микроциркуляции десны. На фоне гиперемии сосудов микроциркуляторного русла, отека, очагового разрыхления эпителия слизистой, лимфоидно-макрофагальной пассивности и вяло образующихся грануляций язвенных дефектов (показатели угнетения иммунитета), определялись клеточные скопления с примесью гистиоцитов, фибробластов и апоптозных телец, напоминающих увядающие гранулемы, которые местами прорастали примитивными кровеносными и лимфатическими микрососудами. В участках клеточных скоплений определялась грубая сеть дистрофически измененных ретикулярных и эластических волокон.
В большинстве случаев изучаемого материала, отмечались выраженные дистрофические изменения нервных волокон в виде штопорообразной извилистости, булавовидных утолщений, фрагментации и распада осевых цилиндров, натеков миелина и обрывов миелиновой субстанции. Эти изменения нервных проводников десны наиболее четко выявлялись при тяжелой форме течения процесс
Оценка результатов гистологических исследований биоптатов дёсен после применения фитоадап-тогенов, показал значительное уменьшение признаков циркуляторных изменений в пародонте, подчеркивающие активацию признаков неспецифической резистентности с адекватным улучшением общего состояния пациентов. Положительный клинический эффект коронатеры в комплексе с фитовитом при хроническом катаральном гингивите связан с частичным (чаще) или полным (реже) восстановлением циркуляторных нарушений в мягких тканях полости рта.
Клинический и гистологический анализ результатов исследования хронического катарального гингивита показал, что сосуды микроциркуляторного модуля десны реагируют комплексом изменений, характерных для каждой стадии заболевания и степени выраженности процесса. Поэтому полученные данные положительного влияния коронатеры и фитовита могут служить обоснованием целесообразности их применения для лечения хронического катарального гингивита.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
Таблица 1
Содержание цитокинов и молекул адгезии в сыворотке крови у пациенток, леченных коронатерой, (М±т)
Показатель Группы обследованных пациентов - I группа
Практически здоровые лица, контроль n=53 Пациенты до лечения n=13 Пациенты после лечения n=13
ФНО-а, пг/мл 51,24±4,37 80,1±1,35* 69,52±4,11#
ИЛ-4, пг/мл 224,46±9,34 260,6±14,49* 243,8±9,74 #
ИЛ-6, пг/мл 106,27±8,45 242,53±16,37* 186,51±7,86 #
ИЛ-8, пг/мл 279,2±11,46 330,46±9,35* 275,64±10,13 #
ICAM, нг/мл 5,11±0,21 12,34±0,42* 8,38±0,29 #
VCAM, нг/мл 5,35±0,18 11,87±0,23* 6,93±0,16 #
Примечание: * - показатели имеют достоверные различия со значениями в группе практически здоровых лиц (¿><0,001); # - показатели имеют достоверные различия со значениями до лечения (¿><0,001); Ф - показатели имеют достоверное значение (¿><0,05)
Таблица 2
Содержание цитокинов и молекул адгезии в сыворотке крови у пациентов, леченных фитовитом, (М±т)
Показатель Группы обследованных пациентов - II группа
Практически здоровые лица, контроль n=53 Пациенты до лечения n=13 Пациенты после лечения n=13
ФНО-а, пг/мл 51,24±4,37 79,2±1,18* 51,43±3,82#
ИЛ-4, пг/мл 224,46±9,34 258,7±16,12* 219,81±10,21#
ИЛ-6, пг/мл 106,27±8,45 238,86±17,3* 105,14±7,96 #
ИЛ-8, пг/мл 279,2±11,46 325,91±8,49* 268,47±9,43 #
ICAM, нг/мл 5,11±0,21 12,34±0,42* 8,38±0,29 #
VCAM, нг/мл 5,35±0,18 11,87±0,23* 6,93±0,16 #
Примечание: * - показатели имеют достоверные различия со значениями в группе практически здоровых лиц (¿><0,001); # - показатели имеют достоверные различия со значениями до лечения (¿><0,001)
Таблица 3
Содержание цитокинов и молекул адгезии в сыворотке крови, леченых фитовитом
и коронатерой совместно, (М±т)
Показатель Группы обследованных пациентов - III группа
Практически здоровые лица, контроль n=53 Пациенты до лечения n=13 Пациенты после лечения n=13
ФНО-а, пг/мл 50,21±4,37 76,5±1,14* 51,12±1,73#
ИЛ-4, пг/мл 224,46±9,34 256,83±14,21* 223,65±9,32#
ИЛ-6, пг/мл 106,27±8,45 241,65±18,11* 105,07±3,71#
ИЛ-8, пг/мл 279,2±11,46 341,84±7,56* 269,83±10,3#
ICAM, нг/мл 5,11±0,21 12,34±0,42* 4,12±0,22#
VCAM, нг/мл 5,35±0,18 11,87±0,23* 5,14±0,13#
Примечание: * - показатели имеют достоверные различия со значениями в группе практически здоровых лиц (¿<0,001); # - показатели имеют достоверные различия со значениями до лечения (¿<0,001)
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
При монотерапии хронического катарального гингивита коронатерой, эффективность положительного лечебного воздействия фитоадаптогенов составила 45%, при применении только фитовита - 28-30%, при сочетанном применении коронатеры и фитовита - 55%.
При хроническом гингивите установлена повышенная экспрессия молекул адгезии сосудистых стенок (VCAM-1) и межклеточных молекул адгезии (ICAM-1) на фоне повышения концентраций провос-палительных цитокинов и фактора некроза опухоли (ФНО-а), что отражено в табл. 1, 2, 3. Так, средняя концентрация ICAM-1 составила 12,34±0,42 нг/мл, VCAM-1 - 11,87±0,23 нг/мл. Эти цифры более чем в 2 раза превышают их содержание у здоровых лиц (5,35±0,18). Таким образом, показатели содержания молекул адгезии и межклеточных молекул (ICAM-1 и VCAM-1) могут служить маркером воспалительного процесса, как общего, так и местного в сочетании с повышением концентрации провоспалительных цитокинов и ФНО-а.
Отмечена значительная положительная динамика содержания цитокинов и молекул адгезии после комплексной терапии с применением фитопрепаратов, особенно при сочетанном их применении, достигающего нормальных показателей. Показано превосходство предложенной терапии над общеупотреби-мыми способами лечения хронических гингивитов.
Заключение. Показана значимость исследований молекул адгезии сосудистых стенок (VCAM-1, ICAM-1) и провоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-а) для диагностики активности хронического гингивита и оценки эффективности проводимого лечения.
Доказана выраженная клиническая результативность применения фитопрепаратов (коронатеры и фитовита, особенно при их сочетанном использовании) в терапии хронических гингивитов.
Литература
1. Антонова Т.В., Романова М.А., Лымарь Ю.В. Маркеры активации эндотелия сосудов (VCAM-1, VWF) у больных хроническим гепатитом С с инсулинорезистентностью // Журнал инфектологии. 2012. №4. С. 46.
2. Дармограй В.Н., Карасева Ю.В., Морозов В.Н., Морозова В.И., Наумова Э.М., Хадарцев А.А. Фитоэкдистероиды и фертильные факторы как активаторы синтоксических программ адаптации // Вестник новых медицинских технологий. 2005. № 2. С. 82-84.
3. Козырева З.К., Хетагурова Л.Г., Козырев К.М. Структурно- функциональное обоснование им-мунореабилитации больных хроническими гингивитами фитоадаптогенами элеутерококком и фитови-том. Влияние сульфидной минеральной воды «редант-4» // Вестник новых медицинских технологий. 2011. №3. С. 209-214.
4. Олейникова М.М., Хадарцев А.А. Теория и практика восстановительной медицины. Психосоматические соотношения при кардиоваскулярных расстройствах. Лечение коронатерой. Тула-Москва, 2005. Т. IV. С. 61-64, 208-233.
5. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Никифоров А.А., Бондарь С.С. Продукция цитокинов клетками цельной крови реконвалесцентов внебольничной пневмонии под влиянием низкоинтенсивного СВЧ-облучения // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2014. №1. Публикация 2-57. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2015-1/4815.pdf (дата обращения: 30.06.2014). DOI: 10.12737/5025
6. Хадарцев А.А., Морозов В.Н., Карасева Ю.В., Хадарцева К.А., Гордеева А.Ю. Психонейроим-мунологические программы адаптации, как модели дизадаптации у женщин с нарушенным репродуктивным циклом // Фундаментальные исследования. 2012. № 5 (часть 2). С. 359-365.
7. Хадарцев А.А., Терехов И.В., Бондарь С.С., Парфенюк В.К., Бондарь Н.В. Состояние антиок-сидантной защиты в постклиническую фазу внебольничной пневмонии под влиянием низкоинтенсивного микроволнового излучения частотой 1 ГГц // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2017. №2. Публикация 2-14. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-2/2-14.pdf (дата обращения: 19.05.2017). DOI: 10.12737/article_5922bc38b22895.03383980.
References
1. Antonova TV, Romanova MA, Lymar' YV. Markery aktivatsii endoteliya sosudov (VCAM-1, VWF) u bol'nykh khronicheskim gepatitom S s insulinorezistentnost'yu [Markers of activated endothelium (VCAM-1, VWF) in chronic hepatitis C patients with insulin resistance]. Zhurnal infektologii. 2012;4:46. Russian.
2. Darmogray VN, Karaseva YV, Morozov VN, Morozova VI, Naumova EM, Khadartsev AA. Fitoek-disteroidy i fertil'nye faktory kak aktivatory sintoksicheskikh programm adaptatsii [Phytoecdysteroids and child-bearing factors as activators syntaxchecker adaptation programs]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2005;2:82-4. Russian.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
3. Kozyreva ZK, Khetagurova LG, Kozyrev KM. Strukturno- funktsional'noe obosnovanie immunorea-bilitatsii bol'nykh khronicheskimi gingivitami fitoadaptogenami eleuterokokkom i fitovitom [Structural - functional substantiation of immunorehabilitation of patients with chronic gingivitis with phytoadaptogens the Siberian ginseng and fitoveta. Influence of sulfide mineral water "Redant-4"]. Vliyanie sul'fidnoy mineral'noy vody «redant-4». Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2011;3:209-14. Russian.
4. Oleynikova MM, Khadartsev AA. Teoriya i praktika vosstanovitel'noy meditsiny. Psikhosomati-cheskie sootnosheniya pri kardiovaskulyarnykh rasstroystvakh [Theory and practice of rehabilitation medicine. Psychosomatic ratio in cardiovascular disorders]. Lechenie koronateroy. Tula-Moscow; 2005. Russian.
5. Terekhov IV, Khadartsev AA, Nikiforov AA, Bondar' SS. Produktsiya tsitokinov kletkami tsel'noy krovi rekonvalestsentov vnebol'nichnoy pnevmonii pod vliyaniem nizkointensivnogo SVCh-oblucheniya [Production of cytokines by whole blood cells of patients with community-acquired pneumonia under the influence of low-intensity microwave irradiation]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie. 2014 [cited 2014 Jun 30];1 [about 7 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2015-1/4815.pdf. DOI: 10.12737/5025
6. Khadartsev AA, Morozov VN, Karaseva YV, Khadartseva KA, Gordeeva AYu. Psikhoneyroimmuno-logicheskie programmy adaptatsii, kak modeli dizadaptatsii u zhenshchin s narushennym reproduktivnym tsik-lom [Psychoneuroimmunological adaptation programs, as a model of disadaptation in women with impaired reproductive cycle of the]. Fundamental'nye issledovaniya. 2012;5(2):359-65. Russian.
7. Khadartsev AA, Terekhov IV, Bondar' SS, Parfenyuk VK, Bondar' NV. Sostoyanie antiok-sidantnoy zashchity v postklinicheskuyu fazu vnebol'nichnoy pnevmonii pod vliyaniem nizkointensivnogo mikrovolnovo-go izlucheniya chastotoy 1 GGts [The status of Antioch-Salantai protection in the post-clinical phase of community-acquired pneumonia under the influence of low-intensity microwave radiation with a frequency of 1 GHz]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie. 2017 [cited 2017 May 19];2 [about 6 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-2/2-14.pdf. DOI: 10.12737/article_5922bc38b22895.03383980.
Библиографическая ссылка:
Козырева З.К., Гонтарев С.Н. Оценка эффективности лечебных мероприятий при хроническом гингивите исследованием цитокинов и молекул адгезии сосудистых стенок // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2018. №1. Публикация 2-9. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2018-1/2-9.pdf (дата обращения: 21.02.2018). DOI: 10.24411/2075-4094-2018-15986.
