CC BY
37
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. 2017; 62(11) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-769-772
БИОХИМИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 616.379-008.64-092:612.014.49
Дерюгина А.В.1, Малышева Е.С.2, Иващенко М.Н.3, Самоделкин А.Г.3
ОЦЕНКА АДАПТАЦИОННЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ОРГАНИЗМА ПРИ ТЕРАПИИ САХАРНОГО ДИАБЕТА 1-го И 2-го ТИПА
1ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», кафедра биохимии и физиологии, 603950, Нижний Новгород, Россия;
2ГБУЗ Нижегородской области «Городская клиническая больница №5», 603005, Нижний Новгород, Россия;
3ФГБОУ ВО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» Минсельхоза РФ, кафедра физиологии
и биохимии животных, 603107, Нижний Новгород, Россия
В работе изучены электрофоретическая подвижность эритроцитов (ЭФПЭ), их прооксидантные свойства и внутриклеточная концентрация аденозинтрифосфата (АТФ) и 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ) у больных сахарным диабетом (СД) 1-го и 2-го типа при проведении терапии. В исследование включены 46 больных СД 1-го и 2-го типа. 22 здоровых добровольца составили группу контроля. 20 пациентов с СД 1-го типа получали инсулин протафан и инсулин актрапид, 26 больных СД 2-го типа получали препараты сульфонилмочевины, бигуаниды, инкретины. Анализ крови проводили до и после курса лечения, исследовали ЭФПЭ, концентрацию в них малонового диальдегида (МДА), содержание 2,3-ДФГ и АТФ. При СД 1-го и 2-го типов установлено повышение содержания МДА, снижение ЭФПЭ, концентрации АТФ и 2,3-ДФГ в эритроцитах относительно физиологической нормы, наиболее выраженное у больных СД 1-го типа. Терапия снижала концентрацию МДА и увеличивала ЭФПЭ, содержание АТФ и 2,3-ДФГ по сравнению с показателями до лечения. У больных СД 2-го типа в ходе лечения наблюдалось восстановление ЭФПЭ и 2,3-ДФГ до физиологической нормы. Позитивное действие данных клинических стратегий при лечении СД 1-го и 2-го типа обусловлено снижением стрессовой реакции и активацией адаптационных процессов, что проявляется на уровне микроциркуляции улучшением кислородтранспортной функции крови за счёт повышения ЭФПЭ, уровня 2,3-ДФГ и снижения деструктивных процессов мембран эритроцитов.
Ключевые слова: эритроциты; сахарный диабет; адаптация.
Для цитирования: Дерюгина А.В., Малышева Е.С., ИващенкоМ.Н., Самоделкин А.Г. Оценка адаптационных возможностей организма при терапии сахарного диабета 1-го и 2-го типа. Клиническая лабораторная диагностика. 2017;62(11): 678-681DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-678-681 DeryuginaA.V.1, MalyshevaE.S.2, IvashchenkoM.N.3, SamodelkinA.G.3
the evaluation of adaptive possibilities of organism under therapy of diabetes
MELLITus Type I AND II
1The Federal state autonomous educational institution of higher education "The N.I. Lobachevsky Nizhny Novgorod state university" 603950 Nizhny Novgorod, Russia
2The state budget institution of health care "The municipal clinical hospital №5" 603005 Nizhny Novgorod, Russia
3The Federal state budget educational institution of higher education "The Nizhny Novgorod state agricultural academy" of
the Minselkhoz of Russia, 603107 Nizhny Novgorod, Russia
The article presents results of the study of electrophoretic agility of erythrocytes, their pro-oxidant characteristics and intra-cellular concentration of adenosine triphosphate (ATP) and 2,3-diphosphoglycerate (2,3-DPG) in patients with diabetes mellitus type I and II under implementation of therapy. The .sampling included 46 patients with diabetes mellitus type I and II. The control group consisted of 22 healthy volunteers. 20 patients with diabetes mellitus type i received insulin protaphan and insulin actrapid, 26 patients with diabetes mellitus type II received preparations of sulfanylurea, biguanides, incretins. The analysis of blood was applied before and after course of treatment. The electrophoretic agility of erythrocytes was analyzed, including concentration of malonic dialdehyde in them, content of 2,3-DPG and ATP. In case of diabetes mellitus type I and II, the study established increasing of content of malonic dialdehyde, decreasing of electrophoretic agility of erythrocytes, concentration of ATP and 2,3-DPG in erythrocytes concerning physiological standard, mostly expressed in patients with diabetes mellitus type I. The therapy decreased concentration of malonic dialdehyde and increased electrophoretic agility of erythrocytes, content of ATP and 2,3-DPG as compared with indices before treatment. In patients with diabetes mellitus type II during treatment reduction of electrophoretic agility of erythrocytes and 2,3-DPG up to physiological standard was observed. The positive effect of the given clinical strategies during treatment of diabetes mellitus type I and II is conditioned by decreasing of stress reaction and activation of adaptation processes that is manifested at the level of micro-circulation by amelioration of oxygen-transport function of blood at the expense of increasing of electrophoretic agility of erythrocytes, level of 2,3-DPG and decreasing of destructive processes of membranes of erythrocytes.
Keywords: erythrocytes; diabetes mellitus; adaptation.
For citation: Deryugina A.V, Malysheva E.S., Ivashchenko M.N., Samodelkin A.G. The evaluation of adaptive possibilities of organism under therapy of diabetes mellitus type I and II. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2017; 62 (11): 678-681. (in Russ.). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-678-681 For correspondence: Ivashchenko M.N., associate professor of the chair of physiology and biochemistry of animals of the Federal state budget educational institution of higher education "The Nizhny Novgorod state agricultural academy". e-mail: [email protected]
Conflict of interests. The authors declare absence of conflict of interests. Acknowledgment. The study had no sponsor support.
Received 20.07.2017 Accepted 01.08.2017
Для корреспонденции: Иващенко Марина Николаевна, доц. каф. физиологии и биохимии животных; e-mail: [email protected]
Russian clinical laboratory diagnostics. 2017; 62(11)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-678-681
Введение. Сахарный диабет (СД), получающий всё большее распространение, включает в себя комплекс патофизиологических нарушений, прогрессирование которых приводит к тяжёлым медико-социальным исходам [1]. При этом у большинства больных заболевание длительно протекает скрыто, приводя к развитию поздних осложнений [2]. Такие осложнения, как ишеми-ческая болезнь сердца, кардиоваскулярная автономная нейропатия, синдром диабетической стопы, являющиеся главной причиной инвалидизации и смертности больных диабетом, связаны с развитием микро- и макроан-гиопатий [3, 4].
Гипергликемия при СД обусловливает развитие микро- и макроангиопатий, определяемых эндотелиальной дисфункцией, оксидативным стрессом и нарушением реологических свойств крови. Существенное влияние на реологические свойства крови оказывают эритроциты, снижение поверхностного заряда которых приводит к повышению их агрегации [5]. Выполняя кислород-транспортную функцию, эритроциты играют ключевую роль в энергетическом и метаболическом обеспечении гомеостатических механизмов. Кроме того, ранее нами было показано, что изменение поверхностного заряда эритроцитов, отражаемое в их электрофоретической подвижности, является стереотипной реакцией на активацию стресс-реализующих систем организма при развитии патологии и значимым маркёром в диагностике адаптационных процессов [6, 7].
Сложная природа СД предполагает дальнейшее изучение механизмов действия препаратов, используемых в клинической практике. Одно из ведущих мест в лечении больных СД в зависимости от стадии заболевания занимают инсулинотерапия у пациентов с СД 1-го типа и комбинированная пероральная терапия сахароснижаю-щими препаратами при СД 2-го типа. Однако исследований, которые изучали бы электрофоретическую подвижность эритроцитов (ЭФПЭ) вкупе с адаптационными реакциями организма и метаболическими процессами в эритроцитах у пациентов с СД, не проводилось. Цель данной работы — изучение ЭФПЭ, их прооксидантных свойств и внутриклеточной концентрации аденозинтри-фосфата (АТФ) и 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ) у больных СД 1-го и 2-го типа при проведении терапевтических мероприятий.
Материал и методы. Под наблюдением находилось 46 пациентов с СД I и II стадии. Все пациенты получали базовую терапию. Первую группу составили 20 пациентов с СД 1-го типа, средний возраст составил 43,3 (37,0—49,0) лет. Во вторую группу вошли 26 пациентов с СД 2-го типа, средний возраст составил 74,6 (67,0— 81,0) лет. 22 здоровых добровольца в возрасте от 35 до 55 лет составили группу контроля.
Базовая терапия больных СД 1-го типа включала применение протафана — человеческого инсулина средней продолжительности действия и актрапида — человеческого инсулина короткого действия. Протафан использовался 2 раза в сутки, актрапид назначался 3 раза в день за 30 минут до приёма пищи. Контроль гликемии осуществлялся 4 раза в день.
Базовая терапия больных СД 2-го типа включала препараты сульфонилмочевины (диабетон, манинил), бигу-аниды (метформин), инкретины (галвус, янувия).
Препараты сульфонилмочевины применялись до приёма основной пищи 1—2 раза в день, препараты группы бигуанидов — после еды и на ночь, инкреатины
biochemistry
применялись 1 или 2 раза в сутки во время или после приёма пищи.
Все пациенты подписывали информированное согласие на проведение диагностических и лечебных мероприятий.
Кровь забирали из локтевой вены натощак, до и после курса лечения.
В работе проводили исследование отмытых эритроцитов крови. Отмытые эритроциты получали троекратным центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 мин с 0,85% раствором хлористого натрия. Анализ ЭФПЭ производили методом микроэлектрофореза [8]. При измерении ЭФПЭ регистрировали время прохождения эритроцитами расстояния 10 мкм в буфере трис-HQ с pH 7,4 при силе тока 10 мА. Концентрацию МДА оценивали спектрофотометрически по реакции с тиобар-битуровой кислотой [9]. Содержание 2,3-ДФГ и АТФ в суспензии отмытых эритроцитов исследовали неэнзима-тическим методом, определяя неорганический фосфор в гидролизатах эритроцитов [10]. Определение неорганического фосфора проводили фотоэлектроколориметри-чески [11].
У всех пациентов проводился контроль гликемии 1 раз в 2 дня путём исследования капиллярной крови с помощью глюкометра Accu-cHEK pERFoRMA с использованием тест-полосок.
Полученные данные были обработаны с помощью пакетов прикладных программ statistica 6.0 и Microsoft Excel с использованием методов одномерной статистики. Достоверность различий средних определяли по /-критерию Стьюдента. Различия считали статистически значимыми при уровне значимости p < 0,05.
Результаты. Проведённые исследования показали, что у больных СД 1-го и 2-го типа зафиксировано существенное снижение ЭФПЭ и повышение концентрации МДА относительно значений физиологической нормы, более выраженное у пациентов с СД 1-го типа (табл. 1). Терапия вызывала увеличение ЭФПЭ и снижение концентрации МДА. Так, инсулинотерапия больных СД 1-го типа вызывала рост ЭФПЭ на 12% и снижение концентрации МДА на 19% по сравнению с показателями до лечения; при комбинированной пероральной терапии сахароснижающими средствами у больных СД 2-го типа содержание МДА в эритроцитах снижалось на 25%, а ЭФПЭ увеличивалась на 15%. Следует отметить, что при СД 2-го типа в ходе лечения достигалось восстановление ЭФПЭ до физиологической нормы.
Ранее при изучении реакции организма на альтерацию нами была выявлена закономерная динамика ЭФ-ПЭ, стереотипно изменяющейся в ответ на активацию симпатоадреналовой и гипофизарно-надпочечниковой систем [12]. При этом механизм снижения ЭФПЭ (1-я фаза) связан с модификацией мембраны эритроцита эндогенными катехоламинами, тогда как экскреция корти-костероидов, направленная на лимитирование 1-й фазы стресс-реакции, определяет повышение ЭФПЭ (2-я фаза) и ограничивает стрессовую реакцию [6].
Обсуждение. Анализируя результаты исследования, можно полагать, что развитие СД сопряжено со снижением резистентности организма и нарастанием напряжения адаптационных механизмов. Использование сахароснижающих препаратов у больных вызывало повышение ЭФПЭ, что свидетельствует о снижении стрессового статуса организма. При этом рост ЭФПЭ и уменьшение концентрации МДА в ходе терапевтиче-
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. 2017; 62(11) СЮ!: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-769-772
БИОХИМИЯ
Таблица 1
Динамика концентрации МДА и ЭФПЭ больных СД 1-го и 2-го типа в ходе терапии
Группа пациентов Этапы исследования Концентрация МДА, нмоль/мл ЭФПЭ, мкм • см
М ± т Р Р1 М ± т Р Р1
СД 1-го типа До лечения 2,26 ± 0,20 0,03 0,98 ± 0,05 0,03
После лечения 1,84 ± 0,19 0,04 0,04 1,10 ± 0,02 0,02 0,03
СД 2-го типа До лечения 1,93 ± 0,09 0,04 1,07 ± 0,07 0,02
После лечения 1,45 ± 0,11 0,04 0,02 1,23 ± 0,06 0,1 0,02
Примечание. Здесь и в табл. 2: р — отличие от физиологической нормы, р1 — различие показателей до и после лечения. Физиологическая норма концентрации МДА — 1,09 ± 0,08 нмоль/мл, ЭФПЭ — 1,28 ± 0,04 мкм • см.
Таблица 2
Динамика концентрации АТФ и 2,3-ДФГ в эритроцитах больных СД 1-го и 2-го типа в ходе терапии
Группа пациентов Этапы исследования Концентрация АТФ, мкмоль Рн/мл клеток Концентрация 2,3-ДФГ, мкмоль Рн/мл клеток
М ± т Р Р1 М ± т Р Р1
СД 1-го типа До лечения 0,87 ± 0,11 0,03 1,50 ± 0,10 0,03
После лечения 1,10 ± 0,12 0,04 0,05 2,01 ± 0,19 0,02 0,04
СД 2-го типа До лечения 1,01 ± 0,13 0,03 1,72 ± 0,12 0,02
После лечения 1,43 ± 0,19 0,03 0,04 2,28 ± 0,16 0,5 0,03
Примечание. Физиологическая норма концентрации АТФ — 1,74 ± 0,11 мкмоль Рн/мл клеток, 2,3-ДФГ — 2,66 ± 0,16 мкмоль Рн/мл клеток.
ских мероприятий связаны с ограничением процессов перекисного окисления липидов и деструкции мембран, приводящих к восстановлению отрицательного заряда эритроцитов, что, соответственно, вызывает улучшение реологических, кислородтранспортных показателей крови и развитие адаптационных процессов в организме.
Следует отметить, что адаптационные возможности организма в значительной мере определяются его способностью обеспечивать адекватное снабжение тканей кислородом. Существенную роль в этом процессе играют органические фосфаты в эритроцитах, такие как 2,3-ДФГ и АТФ. 2,3-ДФГ служит важным аллостерическим регулятором связывания кислорода с гемоглобином, а АТФ влияет на деформацию клеток, что обеспечивает оптимальный перенос кислорода тканям [10]. Как видно из табл. 2, терапия больных СД 1-го и 2-го типа привела к эффективному увеличению в эритроцитах концентрации как АТФ, так и 2,3-ДФГ. У больных СД 1-го типа отмечалось повышение АТФ и 2,3-ДФГ на 26 и 34% соответственно, а у больных СД 2-го типа — на 41 и 32% относительно значений до лечения.
По всей видимости, увеличение эритроцитарного содержания органических фосфатов обусловлено нормализацией метаболических процессов в эритроцитах. В частности, у больных СД выявлено интенсивное накопление лактата, что способствует развитию гипоксиче-ских явлений и как следствие ухудшает течение и прогноз заболевания [13]. Инсулин активирует поглощение миоцитами, кардиомиоцитами глюкозы [14]. По всей видимости, в эритроцитах также наблюдается активация поглощения глюкозы, что вызывает рост концентрации АТФ и 2,3-ДФГ, повышение деформации эритроцитов, облегчение отдачи кислорода тканям организма и, таким образом, улучшение его кислородного обеспечения.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение базовой терапии у больных СД вызывало активацию адаптационных процессов, опосредованных восстановлением микроциркуляции и кислородтран-
спортной функции крови. Этому сопутствовало улучшение состояния пациентов: уменьшение слабости, сухости во рту, жажды, снижение количества мочеиспусканий, уменьшение онемения, покалывания в нижних конечностях. У пациентов наблюдалось значительное улучшение гликемического профиля. У пациентов с СД 1-го типа гликемия при поступлении составляла в среднем 21,5 (18,7—23,4) ммоль/л, после проведённого лечения — 7,9 (5,8—9,7) ммоль/л. У пациентов с СД 2-го типа средний показатель гликемии при поступлении — 17,2 (15,7—20,4) ммоль/л, после проведённого лечения — 7,2 (6,4—8,9) ммоль/л.
Заключение. Таким образом, существенное терапевтическое влияние инсулинотерапии у больных СД 1-го типа и комбинированной пероральной терапии саха-роснижающими средствами у больных СД 2-го типа достигается за счёт позитивного действия данных клинических стратегий на процессы микроциркуляции и кислородтранспортную функцию крови и обусловлено снижением стрессовой реакции и активацией адаптационных процессов. Весьма вероятно, что анализ стресс-реакции и адаптационных процессов по функционально-биохимическим показателям эритроцитов может быть дополнительным критерием эффективности проводимой терапии, а также позволяет расширить возможности для раннего выявления предрасположенности к данному заболеванию с учётом общего адаптационного резерва организма.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дедов И.И. Инновационные технологии в лечении и профилактике сахарного диабета и его осложнений. Сахарный диабет. 2013; 3: 4—10.
2. Мисникова И.В., Древаль А.В., Ковалева Ю.А. Оптимизация скрининга для раннего выявления нарушений углеводного обмена. Сахарный диабет. 2014; 1: 8—14.
3. Стронгин Л.Г., Ботова С.Н., Починка И.Г. Прогностическое значение кардиоваскулярной автономной нейропатии у больных со-
RUSSIAN CLINICAL LABORATORY DIAGNOSTICS. 2017; 62(11) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-11-678-681
четанием сахарного диабета 2-го типа и хронической сердечной недостаточности. Кардиология. 2010; 2: 26—9.
4. Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет: диагностика, лечение, профилактика. М.: Медицинское информационное агентство; 2011.
5. Кравец Е.Б., Рязанцева Н.В., Яковлева Н.М. Молекулярные нарушения мембраны эритроцитов при сосудистых осложнениях сахарного диабета 1-го типа. Сахарный диабет. 2006; 1: 10—4.
6. Крылов В.Н., Дерюгина А.В. Изменение электрофоретической подвижности изолированных эритроцитов при действии стресс-факторов. Гематология и трансфузиология. 2011; 5: 18—21.
7. Антипенко Е.А, Трошин В.В., Густов А.В., Дерюгина А.В. Неспецифическая резистентность организма при хронической ишемии головного мозга. Медицинский альманах. 2011; 1: 60—2.
8. Крылов В.Н., Дерюгина А.В., Константинова А.И. Электрофоретическая подвижность и активность Na, К-АТФазы эритроцитов у крыс при стрессе. Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2014; 100(11): 1297—1302.
9. Лившиц В.М., Седельникова В.И. Медицинский лабораторно-аналитический справочник. М.: Триада Х; 2007.
10. Крылов В.Н., Дерюгина А.В., Симутис И.С. и др. Содержание АТФ и 2,3-ДФГ в эритроцитах при консервации и воздействии озона. Биомедицина. 2014; 2: 37—43.
11. Виноградова И.Л., Багрянцева С.Ю., Дервиз Г.В. Метод одновременного определения 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах. Лабораторное дело. 1980; 7: 424—6.
12. Крылов В.Н., Дерюгина А.В., Захарова О.А., Антипенко Е.А. Неспецифические адаптационные реакции крови при хронической ишемии головного мозга. Клиническая лабораторная диагностика. 2010; 12: 28—30.
13. Колесникова Л.И., Власов Б.Я., Колесников С.И., Даренская М.А., Гребенкина Л.А., Натяганова Л.В., Семенова Н.В., Гнуси-на С.В. Значения лактата, пирувата и их соотношений у пациентов с сахарным диабетом 1-го типа. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61(7): 405—7.
14. Титов В.Н., Сажина Н.Н., Ариповская А.В., Евтеева Н.М. Инсулин инициирует «кинетическое совершенство». Биологические функции локомоции. Глюкоза — субстрат синтеза поперечнополосатыми миоцитами ф-9олеиновой жирной кислоты. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61(5): 260—70.
REFERENCES
1. Dedov I.I. Innovative technologies in the treatment and prevention of diabetes and its complications. Sakharnyj diabet. 2013; 3: 4—10. (in Russian)
2. Misnikova I.V., Dreval' A.V., Kovaleva Yu.A. Optimization of
BIOCHEMISTRY
screening for early detection of disorders of carbohydrate metabolism. Sakharnyj diabet. 2014; 1: 8—14. (in Russian)
3. strongin L.G., Botova s.N., pochinka I.G. prognostic value of cardiovascular autonomic neuropathy in patients with combination of diabetes mellitus of the 2nd type, and congestive heart failure. Kardiologiya. 2010; 2: 26—9. (in Russian)
4. Dedov I.I., sHestakova M.V. Diabetes mellitus: diagnosis, treatment, prevention [Sakharnyi diabet; diagnostika, lechenie, profilaktika]. M.: Meditsinskoe informatsionnoe agentstvo; 2011. (in Russian)
5. Kravec E.B., Ryazanceva N.V., Yakovleva N.M. Saharnyj diabet. 2006; 1: 10—4. (in Russian)
6. Krylov V.N., Deryugina A.V. Molecular disturbances of erythrocyte membranes in vascular complications of diabetes mellitus type 1. Diabetes. Gematologiya i transfuziologiya. 2011; 5: 18—21. (in Russian)
7. Antipenko E.A, Troshin V.V., Gustov A.V., Deryugina A.V. Nonspecific resistance of the organism in chronic cerebral ischemia. Meditsinskiy al'manakh. 2011; 1. 60—2. (in Russian)
8. Krylov V.N., Deryugina A.V., Konstantinova A.I. Electrophoretic mobility and activity of Na,K-ATpase of red blood cells in rats under stress. Rossiyskiy fiziologicheskiy zhurnal im. I.M. Sechenova. 2014; 100(11): 1297—1302. (in Russian)
9. Livshic V.M., sedel'nikova V.I. Medical laboratory reference [Meditsinskiy laboratorno-analiticheskiy spravochnik]. M.: Triada H; 2007. (in Russian)
10. Krylov V.N., Deryugina A.V., simutis I.s. The ATF and 2,3 DFG in erythrocytes in preservation and ozone. Biomeditsina. 2014; 2: 37—43. (in Russian)
11. Vinogradova I.L., Bagryanceva s.Yu., Derviz G.V. Method of simultaneous determination of 2,3 DpG and ATp in erythrocytes. Laboratornoe delo. 1980; 7: 424—6. (in Russian)
12. Krylov V.N., Deryugina A.V., Zaharova o.A., Antipenko E.A. Nonspecific adaptive reactions of the blood in chronic cerebral ischemia. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2010; 12: 28— 30. (in Russian)
13. Kolesnikova L.I., Vlasov B.Ya., Kolesnikov s.I., Darenskaya M.A., Grebenkina L.A., Natyaganova L.V., semenova N.V., Gnusina s.V. The values of lactate, pyruvate and their ratio in patients with diabetes mellitus 1st type. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2016; 61(7): 405—7. (in Russian)
14. Titov V.N., sazhina N.N., Aripovskaya A.V., Evteeva N.M. Insulin initiates a «kinetic perfection». The biological function of locomotion. Glucose — substrate for the synthesis of the striated myocytes ф-9олеиновой fatty acids. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2016; 61(5): 260—70. (in Russian)
Поступила 20.07.17 Принята к печати 01.08.17
