CC BY
17
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
выявлениями двух заболеваний составила 79 месяцев (6-189 мес.). Все заболевания были верифицированы в соответствии с критериями ВОЗ. У 4 пациентов в ходе диагностики были выявлены дополнительные молекулярно-гене-тические аномалии: мутации в гене |ЛК2У617Р у 2 пациентов, в гене MPL у 1 пациента, химерный ген CBF-MYH11Л шу16 у 1 пациента. Прогрессия ХМЛ в фазу БК и смерть после выявления второго заболевания наблюдалась только у пациента с МДС. Длительность ХМЛ к моменту гибели пациента составила 17 лет, а МДС — 11 лет. Наилучшим ответом на терапию ИТК (проведено 3 линии) у данного пациента был ПГО. После выявления второго заболевания 2 пациента получали только симптоматическую
терапию, 5 пациентов получали специфическую терапию: 3 пациента — гипометилирующую терапию азацитидином (1 на фоне продолжения ИТК, 2 — без), 1 — циторедуктивную терапию гидроксимочевиной (на фоне ИТК), 1 получал пегилированный интерферон (без ИТК).
Выводы. Своевременное и полное дообследование пациентов с ХМЛ при выявлении дополнительных патологических изменений в анализах крови или клинической картине течения заболевания с использованием мо-лекулярно-генетических методик позволяет верифицировать сочетания ХМЛ с другими онкогематологическими заболеваниями и оптимизировать терапию с применением таргет-ных препаратов.
С. А. Лебедева. Е. А. Зеркаленкова, А. Н. Казакова, О. И. Солдаткина, Л. В. Земцова, Н. М. Тимофеева, Г. А. Новичкова, А. А. Масчан, М. А. Масчан, Ю. В. Ольшанская
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Министерства здравоохранения Россиийской Федерации, г. Москва
ОСТРЫЕ МИЕЛОИДНЫЕ ЛЕЙКОЗЫ С T(10;11)(P10-11; Q23.3): РЕЗУЛЬТАТЫ РЕГИСТРАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ОМЛ У ДЕТЕЙ В РОССИИ
Введение. Перестройки гена KMT2A (lysine methyltransferase 2A, ранее MLL), расположенного в регионе 11q23.3, чаще встречаются у детей и наблюдаются в 5-10 % случаев острых миелоидных (ОМЛ) и лимфобласт-ных лейкозов (ОЛЛ). KMT2A-позитивные ОЛ наиболее часто наблюдаются у детей первого года жизни и, как правило, ассоциированы с высоким инициальным бластозом и неблагоприятным прогнозом. Для гена KMT2A описано 120 различных хромосомных аберраций и более 90 различных генов-партнеров, при этом известно, что от характера гена-партнера может зависеть прогноз выживаемости. Так, транслокация t(10;11)(p12; q23.3), чаще встречающаяся при ОМЛ, является предиктором неблагоприятного прогноза. Ген MLLT10, локализованный в регионе 10p12, является одним из частых генов-партнеров, однако в этом же регионе расположены и более редкие партнеры. Близкое расположение последних, а также сложный механизм перестройки при t(10;11)(p12; q23.3)/KMT2A- MLLT10 (из-за различной ориентации генов, вовлеченных в перестройку) в ряде случаев затрудняет диагностику рутинными методами
Цель. Молекулярно-генетический анализ когорты пациентов детского возраста с ОЛ с транслокацией t(10;11)(p12; q23.3).
Материалы и методы. В рамках регистрационного исследования ОМЛ, проводимого с 2013 по 2018 год, нами были отобраны 28 пациентов (16 мальчиков и 12 девочек) в возрасте от 3 месяцев до 15 лет (медиана возраста — 19 месяцев), у которых перестройки гена KMT2A сочетались с хромосомными аберрациями в регионе 10p11-12. Информированное согласие было получено от родителей всех пациентов. Пациенты получали терапию в соответствии с протоколами AML-BFM (n=8), РОНЦ ОМЛ (n=2), ОМЛ Москва-Минск 2006 (n=15). Всем пациентам выполняли стандартное кариоти-пирование, перестройки KMT2A подтверждали флюоресцентной in situ гибридизацией (FISH). Комплексные кариотипы выявляли методом мультицветной FISH. Природу гена-партнера определяли мультиплексной ПЦР с обратной транскрипцией (RT-PCR) и длинной инвертированной ПЦР (LDI PCR) с последующим секвенированием по Сэнгеру, а также секве-нированием нового поколения на приборе Illumina MiSeq с использованием реагентов NEBNext® Ultra™ II.
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
Результаты. Сложный характер транслокации t(10;11)(p12; q23.3) (с дополнительными хромосомными перестройками либо в составе комплексного кариотипа) наблюдался в 15 случаях, еще в 2 случаях наблюдался нормальный кариотип. В проанализированной когорте пациентов частота перестроек с участием гена MLLT10 составила 89,3 % (n=25). Другими, более редкими генами-партнерами являлись NEBL (n=2), ABI1 (n=1), при этом в случае редких-генов партнеров рутинная RT-PCR показывала отрицательные результаты. Природа редких генов-партнеров была определена с помощью LDI PCR и секвенирования нового поколения. В рамках проводимого исследования, точка разрыва гена KMT2A наиболее часто локализовалась в интронах 9 (n=14) и 10 (n=7). В анализируемой когорте частота летальных исходов составила 25 % (n=7). Все пациенты
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
с редкими вариантами ^10;11)(р12; q23.3) на сегодняшний день находятся в длительной полной ремиссии. Однако из-за значительных различий в проводимой терапии оценить влияние химерных генов КМТ2А-МБВЬ и КМТ2А-АВ11 на прогноз заболевания пока не представляется возможным.
Выводы. Транслокация 1(10;11)(р12; q23.3) характеризуется сложным механизмом и выраженной гетерогенностью. Использование цитогенетических методов в сочетании с мо-лекулярно-генетическими позволяют с высокой точностью определить локализацию точки разрыва гена КМТ2А, а также природу гена-партнера в рамках 1(10;11)(р12; ц23.3), что в последствии позволяет подбирать наиболее оптимальный метод мониторинга МОБ для каждого пациента.
Н. Н. Мамаев, Я. В. Гудожникова, Т. Л. Гиндина
Научно-исследовательский институт детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачёвой, Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
ГИПЕРЭКСПРЕССИЯ ГЕНА ШТ1 — УНИВЕРСАЛЬНЫЙ МОЛЕКУЛЯРНЫЙ МАРКЕР ДЛЯ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ТЕРАПИИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗОВ
Введение. Согласно нашим представлениям, уровень экспрессии гена WT1 у больных острыми лейкозами (ОЛ) отражает массу продуцирующих WT1 мРНК бластных элементов.
Материалы и методы. Эта новаторская молекулярная технология была успешно использована нами для оценки: а) эффективности достигнутой ремиссии и раннего распознавания рецидивов у леченных аллогенной трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК) 88 больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ); а также б) результатов проведенных в условиях WT1 — молекулярного мониторинга курсов индукционной химиотерапии у 44 больных ОМЛ и 11 больных ОЛЛ, часть из которых получили новые лекарственные препараты, включая Миелотарг и Блинотумомаб.
Результаты. Исследование показало, что у 20% больных ОМЛ, расцениваемых перед аллоТГСК как в состоянии цитологической ремиссии, на самом деле таковой не имели, на что указывало наличие у них надпорогового повышения стратифицированного LeukemiaNET порогового уровня в 250 копий/104 копий гена ABL. При этом 2-летняя кумулятивная часто-
та рецидивов в этой когорте больных (50 %) оказалась ближе таковой больных, леченных трансплантацией на этапе рецидива (64,3 %, р = 0,06), нежели в ремиссии (26,4 %, р < 0,001). Отсюда, 2-летняя общая и безрецидивная выживаемости (ОВ и БРВ соответственно) у этих больных также оказались ближе к таковым, леченным в рецидиве. (52,9 % против 17,9 %, р = 0,042 и 41,2 % против 10,7 %, р = 0,059, соответственно), чем в ремиссии (81,4 % против 52,9 %, р0,015 и 71,4 % против 41,2 %, р0,013, соответственно). Из этих данных следует, что измерение уровня экспрессии гена ШТ1 у всех готовящихся к аллоТГСК больных ОМЛ должно стать обязательным. С другой стороны, использование данной молекулярной технологии для оценки эффективности проведенных курсов индукционной химиотерапии у больных с прогностически неблагоприятными цитогенетически-ми и молекулярно-биологическими вариантами ОЛ показало его несомненную практическую значимость. Несмотря на тяжёлый контингент отобранных для клинической апробации больных ОЛ, у подавляющего большинства из них на фоне индукционных курсов химиотерапии
