CC BY
84
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ОБЗОРЫ
Острое повреждение почек у новорожденных. От эксперимента к клинической практике
Плотников Е.Ю.1, 2, Силачев Д.НЛ 2, Павленко Т.А.2, Павлова В.С.1, Крючко Д.С.1, Зубков В.В.1, Зоров Д.Б.1' 2, Сухих Г.Т.1
1 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва
2 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»
Проблема острой почечной недостаточности у новорожденных остается актуальной, несмотря на появление новых методов диагностики и выявление предикторов, свидетельствующих о поражении почек. Вопрос тактики лечения также остается нерешенным. По данным литературы, для недоношенных детей современная тактика диагностики и лечения требует поиска новых лекарственных препаратов, способных влиять на нефрогенез. Это, в свою очередь, требует развития подходов экспериментального моделирования неонатальных патологий у животных. В данном обзоре рассмотрена возможность использования новорожденных крысят в модели неонатального острого повреждения почек (ОПП), представлено сравнение нефрогенеза и физиологии почки новорожденного и крысы, описаны различные механизмы повреждения почки с их моделированием в лабораторных условиях, приведены возможности диагностики ОПП посредством новых маркером (NGAL, ^-1) и перспективы клеточной терапии с апробацией на животной модели.
Ключевые слова:
почка, нефропатия, почечное повреждение, кардиоренальный синдром, экспериментальное моделирование, диагностика
Неонатология: новости, мнения, обучение. 2017. № 4. С. 58-63.
Статья поступила в редакцию: 11.09.2017. Принята в печать: 13.10.2017.
Acute kidney injury in neonates. From bench to bed side
Plotnikov E.Yu.1,2, Silachev D.N.12, 1 V.I. Kulakov Obstetrics, Gynecology and Perinatology National Pavlenko T.A.2, Pavlova V.S.1, Medical Research Center of Ministry of Healthсаre of the Russian
Kryuchko D.S.1, Zubkov V. V.1, Federation, Moscow
Zorov D.B.1,2, Sukhikh G.T.1 2 A.N. Belozersky Research Institute of Physicochemical Biology,
M.V. Lomonosov Moscow State University, Moscow
The problem of acute renal failure in newborns remains relevant, despite the emergence of new diagnostic methods and the identification of predictors, indicating kidneys failure. The question of treatment tactics remains unresolved as well. According to clinical data, in preterm infants this tactic is not able to provide full recovering of the kidneys, so further drugs development is needed to affect nephrogenesis. This in turn requires to employ approaches for experimental modeling of neonatal pathologies in animals. In this review, we consider
the possibility of using neonatal rats as neonatal AKI model and compare nephrogenesis and physiology of the kidney of the newborn rat and human. Different mechanisms of kidney damage and developing of its laboratory models are discussed , as well as the possibility of the diagnosis of AKI by using new biomarkers (NGAL, Kim-1) and prospects of cell therapy after testing in animal models are suggested.
Keywords:
kidney, nephropathy, kidney injury,cardiorenal syndrome, experimental modeling, diagnostics
Neonatology: News, Opinions, Training. 2017; (4): 58-63.
Received: 11.09.2017. Accepted: 13.10.2017.
Термин «острое повреждение почек» (ОПП) у новорожденных уже давно стал привычным в неонатологии, однако эта проблема остается одной из сложнейших в связи с трудностями диагностики и ограниченными возможностями лечения. Одна из многих причин неадекватной диагностики и лечения - отсутствие отработанной животной модели неонатального повреждения почек, что связано с особенностями как нефрогенеза, так и анатомо-физио-логических особенностей новорожденного. Прояснить ситуацию и продвинуться в решении этого вопроса помогут экспериментальная медицина и биология. Одной из самых популярных моделей ишемии/повреждения почек у взрослых служат лабораторные крысы, и количество публикаций на данную тему исчисляется сотнями. Но попытки повторить те же эксперименты на новорожденных крысятах либо приводят к неожиданным результатам, либо заканчиваются безрезультатно. В данном обзоре рассмотрена возможность использования новорожденных крысят как модели неонатального ОПП, представлено сравнение нефрогенеза и физиологии почки человека и крысы, описаны различные механизмы повреждения почки и их моделирование в лабораторных условиях, даны возможности диагностики ОПП посредством новых маркеров (NGAL, К1М-1) и перспективы клеточной терапии с апробацией на животной модели.
Различия нефрогенеза человека и экспериментальных животных
Количество нормально сформировавшихся и функционирующих нефронов определяет почечную функцию и возможности ее сохранения при воздействии патогенных факторов. Механические, токсические, ишемические и воспалительные повреждения могут вызывать повреждения и необратимую потерю нефронов, сопровождающуюся гиперфильтрацией и усугублением состояния почки. Недостаток закладки нефронов также приводит к повышенной нагрузке на орган и потому является краеугольным камнем в перинатальном поражении почек.
Развитие почки у млекопитающих различных видов и семейств в целом происходит по общему механизму, проходя стадии пронефроса, мезонефроса и метанефроса. Непосредственно метанефрос формируется в результате взаимодействия двух мезодермальных структур: метанеф-рогенной ткани (мезенхимы) и мочеточникового выроста (эпителиальной ткани). В результате реципрокных взаимо-
действий метанефрогенная ткань индуцирует развитие мочеточникового выроста, тогда как мочеточниковый вырост вызывает формирование в метанефрогенной ткани претубу-лярных агрегатов и впоследствии стимулирует начальные стадии организации нефронов. Эти нефроны в конечном счете васкуляризуются за счет инвазии ангиобластов, которые формируют клубочковые и окружающие канальцы -капилляры. Мочеточниковый вырост дает начало собирательным трубочкам, чашечно-лоханочной системе и мочеточнику, а метанефрогенная ткань формирует нефрон. Процесс закладки нефронов у грызунов, в частности у крыс, происходит вплоть до 10-го дня после рождения [1, 2], а у человека до 32-34-й (по разным данным) недели беременности [3], что на первый взгляд делает неприменимой крысиную модель для перинатального почечного повреждения, однако не для недоношенных новорожденных. У недоношенных детей почка сохраняет возможность к нефро-генезу на протяжении нескольких недель после рождения [3, 4], но этот период не бесконечен и ограничен 40 днями для новорожденных с экстремально низкой массой тела (<1000 г) [3]. Функциональные возможности этих нефронов ограничены: эксперименты на приматах продемонстрировали высокий процент повреждений среди клубочков, сформированных в постнатальный период [5].
Одной из теорий переключения пролиферации на диф-ференцировку в почке млекопитающих является повышение парциального давления кислорода (р02) в артериальной крови после рождения: фетальное кровообращение с газообменом через плаценту, при котором почка получает смешанную кровь, сменяется газообменом через легкие и артериальным кровоснабжением почек. Доказательством этой теории может служить наличие фактора транскрипции HIF (hypoxia-inducible factor), поддерживающего механизмы пролиферации в развивающейся почке при низком р02 [6]. HIF представляет собой гетеродимер из двух субъединиц: одна из них является кислород-зависимой (HIF-1a), а другая конститутивна (HIF-2P). В эксперименте со системной гипоксией у новорожденных крысят экспрессия HIF и ряда других белков коррелировала с аналогичными данными у плода.
Очевидно, что изменение р02 является не единственным регулятором нефрогенеза, существуют другие факторы, лимитирующие пролиферацию клубочков у недоношенных новорожденных. Их изучение возможно в том числе на крысиной модели при учете описанных выше особенностей постнатального развития почки у грызунов.
Патогенез острого повреждения почки у новорожденных
Помимо физиологического изменения парциального давления кислорода в крови, в перинатальном периоде недоношенные новорожденные часто испытывают на себе патологические колебания уровня кислорода как гипо-, так и гипероксического характера. Отслойка плаценты, интрана-тальная гипоксия, длительные реанимационные мероприятия, неадекватный режим искусственной вентиляции легких (ИВЛ) и многие другие факторы могут приводить к окислительному стрессу в организме новорожденного, что сопровождается перекисным окислением липидов и окислительным повреждением ДНК и белков, в конечном итоге приводящим к апоптозу. Данный патологический механизм является универсальным и активно участвует в повреждении почки: у крысят описаны гипероксическое повреждение почек, приводящее к фиброзу [7], и внутриматочная асфиксия, индуцирующая ОПП [8]. Однако при сравнении влияния гипоксии на почки взрослых и новорожденных крыс у последних было отмечено обратимое повреждение почечных клеток, тогда как у взрослых крыс эпителий почечных канальцев стойко утрачивал функцию реабсорбции [9].
Популярная модель цитотоксического повреждения почек также опробована на крысятах, однако полученные результаты были достаточно неожиданными: у неонатальных животных почка практически не реагировала на введенный цисплатин первые 6 сут, тогда как у взрослых крыс он вызывал набухание цитоплазмы и десквамацию эпителия уже через 24 ч после инъекции [10].
Такие различия в ответе на повреждение могут объясняться, например, особенностями иммунного ответа новорожденных. Известно, что в человеческой популяции у новорожденных нейтрофилы характеризуются количественной и качественной недостаточностью фагоцитоза и низкой пероксидазной активностью, а моноциты, в свою очередь, не способны продуцировать достаточное количество провоспа-лительных цитокинов(К-1, К-12 и TNF-a). У новорожденных крысят также отмечены низкие уровни как базовой [11], так и индуцированной [11, 12] продукции цитокинов, что дает возможность сопоставлять полученные в экспериментах данные с уже известными фактами.
Помимо различия в функциональной характеристике макрофагов, появляются данные о существовании их различных субпопуляций в постнатальном и взрослом периодах жизни млекопитающих. У новорожденных мышей в миокарде были обнаружены резидентные макрофаги эмбрионального происхождения, которые определяют минимальное воспаление и индуцируют восстановление поврежденного миокарда через пролиферацию кардиоми-оцитов и ангиогенез [13]. В сердце взрослых мышей также содержатся данные макрофаги, но после повреждения они замещаются провоспалительными моноцитарными макрофагами с меньшей репаративной активностью. Однако аналогично почкам, у миокарда мышей есть терапевтическое «окно» - 7 сут [14], по истечении которого кардио-миоциты начинают терять потенциал пролиферации. Эти данные дают основание полагать, что существуют единые
для организма млекопитающих регуляторы, изменяющие тип универсального ответа на повреждение с фетального на «взрослый», изучение которых имеет большие перспективы в лечении и профилактике дизэмбриогенетических патологий.
Еще одной распространенной причиной ишемического повреждения почки является острая кровопотеря. Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой и симпатоадре-наловых систем вкупе с централизацией кровообращения не может компенсировать снижение скорости кровотока в почечной артерии, что приводит к падению фильтрационного давления и ОПП. Стабильность и воспроизводимость результатов, получаемых на модели геморрагического ОПП у взрослых крыс [5, 15], к сожалению, не гарантирует аналогичных эффектов на неонатальных моделях вследствие физиологических особенностей сердечно-сосудистой системы новорожденных. В случае человеческих новорожденных к этим особенностям можно отнести низкое абсолютное значение объема циркулирующей крови, высокую базовую частоту сердечных сокращений порядка 140 уд/мин и практически неизменный ударный объем вследствие низкой растяжимости левого желудочка. Незрелость барореф-лексов в постнатальном периоде не обеспечивает достаточной периферической вазоконстрикции, и потеря 10-15% объема циркулирующей крови может вызвать геморрагический шок без достаточной централизации кровотока. Поскольку у новорожденных крысят гемодинамика имеет сходные с человеком характеристики, очевидно, острая кровопотеря скорее приведет к смерти животного от циркуля-торной гипоксии и ишемического повреждения головного мозга, чем к ОПП из-за централизации кровотока. Вероятно, именно этими фактами и объясняется отсутствие публикаций по геморрагическому поражению почки у новорожденных животных.
Кардиоренальный синдром
Взаимосвязь кардиальной и почечной патологии уже давно привлекает внимание ученых из различных областей биомедицинской науки. Накопленные данные по физиологии и патофизиологии позволили объединить сочетанное поражение этих органов понятием «кардиоренальный синдром», классификация которого была представлена C. Ronco и соавт. в 2008 г. на согласительной конференции ADQI в Венеции. Выделяют 5 типов кардиоренального синдрома [15]. Острый кардиоренальный синдром представляет собой кардиогенный шок или декомпенсацию хронической сердечной недостаточности, которая ведет к острому почечному повреждению. Хронический кардиоренальный синдром возникает, когда хроническая сердечная недостаточность приводит к хронической болезни почек, острый ренокар-диальный синдром - когда быстрое ухудшение функции почек (ишемия почек, гломерулонефрит) ведет к острой дисфункции сердца (аритмия, острая сердечная недостаточность). Хронический ренокардиальный синдром, наоборот, связан с хронической болезнью почек, которая приводит к гипертрофии миокарда, снижению функции сердца и увеличению риска сердечно-сосудистых осложнений. Наконец
5-й тип кардиоренального синдрома представляет собой системную патологию (например, сепсис), приводящую к сочетанной сердечной и почечной дисфункциям.
Патогенез различных типов кардиоренального синдрома описан достаточно полно, разработаны стратегии по ведению пациентов с сочетанной патологией, а вот по лечению и профилактике его острых форм остается много нерешенных вопросов. Одной из таких проблем является кардиоре-нальный синдром в перинатальный и ранний постнатальный период. Насколько ОПП в перинатальном периоде повлияет на состояние миокарда, его сократительную функцию, а главное, повысит ли риски сердечно-сосудистых патологий в будущем - на эти вопросы клиническая медицина пока не может дать однозначного ответа и здесь большие надежды возлагаются на лабораторное моделирование. Опубликованные данные о взаимосвязи ОПП и острого повреждения миокарда у взрослых грызунов [16, 17] указывают на клеточное (апоптоз сердечных клеток) и субклеточное (фрагментация митохондрий клеток сердца) поражение сердца при ишемии почки, а также на значительное увеличение провос-палительных цитокинов в миокарде. Ранее описанные особенности воспалительного ответа у новорожденных крысят дают возможность смоделировать на них острый кардиоре-нальный синдром и сделать предположения о его течении у недоношенных детей.
Разработка новых маркеров
для диагностики острого повреждения
почек у новорожденных
Традиционно в клинической практике оценка функции почек осуществляется по сывороточному содержанию кре-атинина и остаточного азота, однако с введением термина ОПП стало очевидно, что чувствительность традиционных маркеров и темпы их изменения не отвечают современным требованиям диагностики. У новорожденных требования к маркерам повреждения становятся более конкретными, так как в первые дни жизни происходит становление почечной функции, и физиологическая олигурия может маскировать ОПП. Креатинин является неидеальным маркером, так как зависит от диеты и функции скелетных мышц, а также требует стабильной функции почки [18]. Увеличение сывороточного креатинина происходит через 48-72 ч после почечного повреждения, для значительного увеличения его концентрации необходима потеря более 50% функционирующих нефронов, а у новорожденных - до 75%. Уровень остаточного азота в плазме также является поздним маркером и зависит от многих факторов, включая гиповолемию. Созданные педиатрические шкалы оценки почечной функциир RIFLE и nRIFLE также базируются на определении креатинина в плазме и олигурии, поэтому ограничены при оценке повреждения почек в первые дни жизни.
В связи с этим в последнее время широкое внедрение в клиническую практику получили новые маркеры ОПП, такие как NGAL и KIM-1, определяемые в моче и сыворотке крови. Белок KIM-1 является фосфатидилсериновым рецептором клеток проксимальных почечных канальцев [19] - scavenger-рецептором, превращающим эпителиальную клетку почеч-
ного канальца в клетку фагоцитарного типа, которая распознает и фагоцитирует поврежденные клетки канальцев. Также К1М-1 вовлечен в удаление клеточного детрита из просвета канальцев и может отвечать за ограничение аутоиммунного ответа на повреждение. Экспрессия К1М-1 не детектируется в нормальных клетках проксимальных канальцев почки и значительно повышается в поврежденных, сосредотачиваясь в апикальной части клетки. В дальнейшем его большой эктодомен отщепляется и остается стабильным при выведении с мочой. Повышение К1М-1 в моче наблюдается через 24 ч после повреждения, уровень маркера остается высоким до 14-го дня наблюдения [8].
NGAL (нейтрофильный желатиназный липокалин) -белок с молекулярной массой 25 кДа, принадлежит к суперсемейству липокалинов и входит в состав вторичных гранул нейтрофилов [20]. Впервые был обнаружен в культуре пролиферирующих клеток почек мыши. В норме NGAL экс-прессируется на очень низких уровнях в различных тканях человека: почках, трахее, легких, желудке и толстой кишке, но в стимулированном эпителии (при воспалении, неопла-зиях) или сыворотке, при острых бактериальных инфекциях его экспрессия значительно возрастает. В моче NGAL появляется уже через 2 ч после повреждения, пик его повышения приходится на 6-12 ч, а к 24 ч уровень NGAL снижается, если повреждение носило одномоментный характер. Рост уровня маркера наблюдается и в культуре клеток проксимальных канальцев, если она помещена в условия гипоксии. Предполагаемой функцией NGAL является регенерация: он может вырабатываться поврежденными канальцами для индукции реэпителизации, забирая из поврежденных эпителиоцитов железо и доставляя его в здоровый эндотелий (NGAL обнаружен в PCNA-положительных пролиферирующих и регенерирующих клетках почечных канальцев).
Имея высокую специфичность, быстрота определения в моче этих маркеров открывает широкую возможность использования их в клинической практике у взрослых: использование NGAL постепенно входит в рутинную диагностику контрастной нефропатии, но применение их в неонатологии еще носит экспериментальный характер [21,22] и требует дополнительных исследований. Данные экспериментов со взрослыми крысами характеризуют NGAL и К1М-1 как высокочувствительные маркеры ОПП. Возникавшие ранее сомнения о специфичности NGAL (из-за его наличия в нейтрофилах) были развеяны исследованием на взрослых крысах [23]: показано, что уровни экспрессии NGAL в поврежденной почке коррелируют с его содержанием в моче, но не в сыворотке. Следует лишь помнить о необходимости центрифугирования образцов мочи для удаления слущенного эпителия и лейкоцитов и повышения точности получаемых результатов [24]. В различных моделях ишемии почки у взрослых крыс подтверждена универсальность NGAL и К1М-1 для диагностики ОПП [8, 20, 23, 25]. Накапливается аналогичная информация и по нео-натальному повреждению: убедительно доказана неэффективность определения уровня сывороточного креатинина и остаточного азота для диагностики поражения почки у новорожденных [10, 26], при достоверном увеличении в моче новых маркеров [8, 20, 27].
Заключение
Несмотря на появление новых данных о диагностике илечении ОППу новорожденных, проблема остается не решенной. Актуальность и острота проблемы ОПП у новорожденных заставляет ученых, работающих в различных областях биомедицинской науки, искать новые возможности диагностики илечения повреждения почек, причем неоценимый вклад в эту работу вносят лабораторные животные. Использование ново-
рожденных крысят открывает большие возможности для экспериментальной работы, однако следует учитывать анатомо-физиологические особенности животных в планировании и проведении исследований, а также в интерпретации полученных данных и переносе результатов в клиническую практику.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 14-15-00147).
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Плотников Егор Юрьевич - доктор биологических наук, профессор РАН, ведущий научный сотрудник НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова» E-mail: [email protected]
Силачев Денис Николаевич - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова» E-mail: [email protected]
Павленко Татьяна Алексеевна - младший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова» E-mail: [email protected]
Павлова Варвара Сергеевна - аспирант ФГБУ «Национальный исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинато-логии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России
Крючко Дарья Сергеевна - кандидат медицинских наук, заведующая отделом анализа и координации работы по совершенствованию оказания неонатальной помощи ФГБУ «Национальный исследовательский центр акушерства, гинекологии и пери-натологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России E-mail: [email protected]
Зубков Виктор Васильевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделом неонатологии и педиатрии, заведующий кафедрой неонатологии ФГБУ «Национальный исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России E-mail: [email protected]
Зоров Дмитрий Борисович - доктор биологических наук, профессор, заведующий отделом НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова» E-mail: [email protected]
Сухих Геннадий Тихонович - академик РАН, профессор, директор ФГБУ «Национальный исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-mail: [email protected]
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. El-gammal A.A.-R.A., Ibrahim O.Y., Shaban S.F., Dessouky A.A. Postnatal Development of the Albino Rat Renal Cortex (Histological Study). Egypt J Histol. 2010; 33 (4): 745-56.
2. Nobakht M., Taki M., Rezazadeh M., Torbaghan S. Stages of development of renal glomeruli in the newborn rat kidney. MJIRI. 1995; 9 (2): 47-52.
3. Rookmaaker M.B., Joles J.A. The nephron number counts - from womb to tomb. Nephrol Dial Transplant. 2013; 28 (6): 1325-8.
4. Faa G., Gerosa C., Fanni D., Nemolato S., et al. Marked interindividual variability in renal maturation of preterm infants: lessons from autopsy. J Matern Fetal Neonatal Med. 2010; 23 (suppl 3): 129-33.
5. Gubhaju L., Sutherland M.R., Yoder B.A., Zulli A., et al. Is nephro-genesis affected by preterm birth? Studies in a non-human primate model. Am J Physiol Renal Physiol. 2009; 297 (6): F1668-77.
6. Bernhardt W.M., Schmitt R., Rosenberger C., Munchenhagen P.M., et al. Expression of hypoxia-inducible transcription factors in developing human and rat kidneys. Kidney Int. 2006; 69 (1): 114-22.
7. Jiang J.S., Chou H.C., Yeh T.F., Chen C.M. Neonatal hyperoxia exposure induces kidney fibrosis in rats. Pediatr Neonatol. 2015; 56 (4): 235-41.
8. Stojanovic V.D., Vuckovic N.M., Barisic N.A., Srdic B., et al. Early biomarkers of renal injury and protective effect of erythropoietin on kidneys of asphyxiated newborn rats. Pediatr Res. 2014; 76 (1): 11-6.
9. Adachi S., Zelenin S., Matsuo Y., Holtback U. Cellular response to renal hypoxia is different in adolescent and infant rats. Pediatr Res. 2004; 55 (3): 485-91.
10. Yamate J., Machida Y., Ide M., Kuwamura M., et al. Cisplatin-induced renal interstitial fibrosis in neonatal rats, developing as solitary nephron unit lesions. Toxicol Pathol. 2005; 33 (2): 207-17.
11. Copland I.B., Martinez F., Kavanagh B.P., Engelberts D., et al. High tidal volume ventilation causes different inflammatory responses in newborn versus adult lung. Am J Respir Crit Care Med. 2004; 169 (6): 739-48.
12. Wagner W.,Wehrmann M. Differential cytokine activity and morphology during wound healing in the neonatal and adult rat skin. J Cell Mol Med. 2007; 11 (6): 1342-51.
13. Lavine K.J., Epelman S., Uchida K., Weber K.J., et al.Distinct macrophage lineages contribute to disparate patterns of cardiac recovery and remodeling in the neonatal and adult heart. Proc Natl Acad Sci USA. 2014; 111 (45): 16 029-34.
14. Haubner B.J., Adamowicz-Brice M., Khadayate S., Tiefenthaler V., et al. Complete cardiac regeneration in a mouse model of myocardial infarction. Aging (Albany NY). 2012; 4 (12): 966-77.
15. Ronco C., McCullough P., Anker S.D., Anand I., et al. Cardio-renal syndromes: report from the consensus conference of the acute dialysis quality initiative. Eur Heart J. 2010; 31 (6): 703-11. 16. Sumida M., Doi K., Ogasawara E., Yamashita T., et al. Regulation of mitochondrial dynamics by dynamin-related protein-1 in acute cardiorenal syndrome. J Am Soc Nephrol. 2015; 26 (10): 2378-87.
17. Kelly K.J. Distant effects of experimental renal ischemia/reperfu-sion injury. J Am Soc Nephrol. 2003; 14 (6): 1549-58.
18. Mussap M., Noto A., Fanos V., Van Den Anker J.N. Emerging bio-markers and metabolomics for assessing toxic nephropathy and acute kidney injury (AKI) in neonatology. Biomed Res Int. 2014: 602526.
19. Bonventre J.V. Kidney injury molecule-1 (KIM-1): a urinary bio-marker and much more. Nephrol Dial Transplant. 2009; 24 (11): 3265-8.
20. Mishra J., Ma Q., Prada A., Mitsnefes M., et al .Identification of neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a novel early urinary biomarker for ischemic renal injury. J Am Soc Nephrol. 2003; 14 (10): 2534-43.
21. Stojanovic V.D., Barisic N.A., Vuckovic N.M., Doronjski A.D., et al. Urinary kidney injury molecule-1 rapid test predicts acute kidney injury in extremely low-birth-weight neonates. Pediatr Res. 2015; 78 (4): 430-5.
22. Sarafidis K., Tsepkentzi E., Agakidou E., Diamanti E., et al. Serum and urine acute kidney injury biomarkers in asphyxiated neonates. Pediatr Nephrol. 2012; 27 (9): 1575-82.
23. Han M., Li Y., Liu M., Li Y., et al. Renal neutrophil gelatinase associated lipocalin expression in lipopolysaccharide-induced acute kidney injury in the rat. BMC Nephrol. 2012; 13: 25.
24. Schinstock C.A., Semret M.H., Wagner S.J., Borland T.M., et al. Urinalysis is more specific and urinary neutrophil gelatinase-associated lipo-calin is more sensitive for early detection of acute kidney injury. Nephrol Dial Transplant. 2013; 28 (5): 1175-85.
25. Zhu J., Chen X., Wang H., Yan Q. Catalpol protects mice against renal ischemia/reperfusion injury via suppressing PI3K/Akt-eNOS signaling and inflammation. Int J Clin Exp Med. 2015; 8 (2): 2038-44.
26. Labossiere J.R., Pelletier J.S., Thiesen A., Schulz R., et al. Doxycy-cline attenuates renal injury in a swine model of neonatal hypoxia-reoxy-genation. Shock. 2015; 43 (1): 99-105.
27. Plotnikov E.Y., Pavlenko T.A., Pevzner I.B., Zorova L.D., et al. The role of oxidative stress in acute renal injury of newborn rats exposed to hypoxia and endotoxin. FEBS J. 2017; 284 (18): 3069-78.
