CC BY
53
УДК 616.314.17-008.1+616-008.939
ОСОБЕННОСТИ СООТНОШЕНИЯ ЛОКАЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ АПИКАЛЬНОМ ПЕРИОДОНТИТЕ
Л.С. Латюшина, У.Г. Осьмуха, В.Э. Цейликман,
Ю.В. Павлиенко, А.П. Финадеев
Челябинская государственная медицинская академия, г. Челябинск
Представлены данные экспериментально-клинического исследования, направленного на изучение локального содержания липопероксидов и показателей антиоксидантной защиты в очаге периапикального воспаления различных по течению форм периодонтитов. Выявлены характерные изменения показателей свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты, зависящие от сроков течения экспериментального периодонтита и клинической формы апикального периодонтита.
Ключевые слова: апикальный периодонтит, свободнорадикальное окисление, периапикальные ткани, слюна, экспериментальная модель периодонтита.
Актуальность. На сегодняшний день заболевания периодонта занимают третье место по частоте обращаемости после кариеса и пульпита. Острые и хронические очаги инфекции в периапи-кальных тканях являются наиболее частой причиной потери функционально пригодных зубов у людей молодого и среднего возраста, а также представляют серьезную угрозу для развития гнойно-воспалительных процессов челюстно-лицевой области [3, 6, 10, 18, 19].
Несмотря на то, что за последние три десятилетия была получена значительная по объему информация о патобиологической природе апикального периодонтита, расширение представления о патогенезе данного заболевания сохраняет свою актуальность [3]. Одним из важнейших факторов в развитии периодонтитов является микробный фактор. Сформировалось мнение, что если между полостью рта и корневым каналом существует сообщение, то в нем развивается бактериальная флора, способная вызывать деструктивные изменения в периодонте [10]. Особые условия корневого канала стимулируют рост некоторых видов бактерий, большая часть которых является представителями облигатно-анаэробных групп (бактероиды, фузо-бактерии, пептострептококки); также методом генодиагностики были выделены труднокультиви-руемые виды вирулентных анаэробных возбудителей (Prevotella intermedia, Prevotella endodontis, Porphyromonas spp.) [5, 6].
В современном представлении патогенеза апикального периодонтита помимо микробного фактора равноценное значение придается различным защитным механизмам [3, 6, 19]. К ним относятся клеточные элементы (нейтрофилы, макрофаги, лимфоциты, плазматические клетки и прочие),
молекулярные медиаторы, прежде всего цитокины [3, 6, 11, 14, 22, 23].
Таким образом, в настоящее время апикальный периодонтит рассматривается как защитная реакция организма на разрушение пульпы зуба и «враждебную оккупацию» системы корневых каналов. Микробным клеткам противостоят иммунные механизмы, избыточная активация которых чревата развитием дополнительной альтерации периапикальной зоны, в результате чего развиваются различные типы поражений, свойственные апикальному периодонтиту [2, 3]. Однако известно, что любое воспаление, вызванное бактериальной инфекцией, сопровождается усилением свободнорадикального окисления [2, 8, 21]. Данные последних лет свидетельствуют, что активация свободнорадикального окисления играет существенную роль в развитии осложнений при периодонтите [15]. Тем не менее наблюдается дефицит экспериментальных и клинических исследовательских работ, посвященных изучению соотношения продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и параметров антиоксидантной защиты (АОЗ) при различных формах апикального периодонтита. Указанные предпосылки определили цель и направления настоящего исследования.
Цель исследования состояла в изучении соотношения продуктов липопероксидации и анти-оксидантной защиты в локальном очаге периапи-кального воспаления.
Материалы и методы исследования. За период с 2009 по 2011 годы на базе кафедры биохимии и стоматологии Челябинской государственной медицинской академии (ГБОУ ВПО «ЧелГМА Минздравсоцразвития России») было проведено экспериментально-клиническое исследование.
Проблемы здравоохранения
Экспериментальный периодонтит был моделирован по методу, описанному Наибовым О.В. (2007) [9]. Исследования выполняли у 49 белых беспородных половозрелых крыс-самцов массой 220-260 грамм, содержащихся в стандартных условиях и получающих общепринятый пищевой рацион. Контроль представили 7 особей. Объектом изучения были периапикальные ткани травмированного коренного зуба.
Материалом для клинической части исследования была нестимулированная смешанная слюна стоматологических пациентов [17], которая, как известно, релевантно отражает изменения в местном периапикальном воспалительном очаге. Было обследовано 76 пациентов, обращавшихся за стоматологической помощью в плановом и экстренном порядке. Контрольную группу составили 16 клинически здоровых человек, с санированной полостью рта, сопоставимых по полу, возрасту, месту проживания, соответствующих критериям включения.
Критериями включения в исследование были: мужской и женский пол; возраст от 18 до 74 лет; наличие не более одного очага одонтогенной инфекции при стоматологически санированной ротовой полости, индекс зубного налета не более 1,5, индекс зубного камня не более 1,0 (критерии индекса Green - Vermillion); отсутствие в полости рта ортопедических конструкций; отсутствие острых и обострения хронических заболеваний полости рта и носоглотки в течение 3-х последних месяцев; отсутствие общих соматических заболеваний, в том числе декомпенсированной и/или некомпенсированной патологии сердечно-сосудистой системы, пищеварительной, бронхолегочной системы, гепатобилиарного и урогенитального тракта; отсутствие вредных привычек; информированное согласие больного на проведение обследования.
Пациенты были разделены на три группы в зависимости от длительности и тяжести воспалительных явлений в периапикальных тканях причинного зуба. В 1-ю группу, n =34 человека (45 %), были включены больные с острым апикальным периодонтитом (К04.4) [7], что соответствовало острому периодонтиту в фазу интоксикации [18]. 2-я группа, n = 14 человек (18 %) - пациенты с хроническим апикальным периодонтитом (К04.5) [7], что соответствует деструктивным формам хронического периодонтита [18, 20]. 3-я группа, n = 28 (37 %) - больные с периапикальным абсцессом без свища - 25 пациентов и периапи-кальным абсцессом со свищом - 3 человека (К04.7) [7], что соответствует обострению хронических деструктивных форм периодонтитов [18, 20]. Средний возраст пациентов составил 39 ± 5,1 лет. Пациенты, распределенные в различные группы, были сопоставимы по полу и возрасту. Стоматологическое обследование проводили в соответствии с протоколом обследования стоматологического
пациента [12, 18]. После забора материала для исследования пациентам проводилось лечение по общепринятыми методиками [6, 18].
Биохимические показатели изучали в тканях периапикального воспаления крыс и в слюне пациентов с различными формами апикального периодонтита. Содержание продуктов ПОЛ оценивали спектрофотометрически в липидном экстракте исследуемых биологических сред, с выделением гептан- и изопропанолрастворимых липоперокси-дов (рассчитывали в единицах индекса окисления, е.и.о.: Е232/220 - относительное содержание диеновых конъюгатов, Е278/220 - уровень кетодиенов и сопряженных триенов) [20]. Определение конечных продуктов периокисления липидов (Е400/220 -шиффовы основания) и интенсивности аскорбат-индуцированного ПОЛ (индукция Fe^/аскор-бат) (е.и.о.) производилось спектрофотометрическим методом [16]. Содержание окислительно-модифицированных (кар бонилированных) белков (мкмоль/г ткани; мкмоль/г белка) определяли по методике Е.Е. Дубининой [1].
Помимо изучения свободнорадикального профиля, проводили гистологическое исследование периапикальных тканей экспериментальных животных [13] - в резецированных в зоне моделирования периодонтита фрагментах посуточно определяли численность нейтрофильных гранулоци-тов, макрофагов и лимфоцитов (ед./мм2).
Полученные результаты обрабатывались пакетом статистических программ Statistica 6,0 for Windows с вычислением средней арифметической и ее стандартной ошибки (М ± m). Различия между сравниваемыми группами считали статистически значимыми при Р < 0,05. О значимости различий показателей в сравниваемых группах судили по непараметрическим критериям Манна-Уитни (U), Вальда-Вольфовица (WW). Статистические взаимосвязи изучали при помощи непараметрического корреляционного анализа, выполняя расчет коэффициентов корреляции рангов по Спирмену (Rs) и Кенделлу (Rh).
Результаты исследования и их обсуждение. В результате экспериментального моделирования апикального периодонтита по данным гистологического исследования в 1-е сутки после альтерации в периапикальных тканях наблюдалась лейкоцитарная инфильтрация. Это проявлялось в трёхкратном приросте количества (ед./мм2) нейтро-филов, моноцитов/макрофагов (P = 0,03U) и пятикратном увеличении числа лимфоцитов (P = 0,005U) в тканях периодонта по сравнению с контрольными животными. Данные изменения сохранялись в период со 2-х по 4-е сутки. На 5-е сутки содержание лейкоцитов в периапикальных тканях статистически значимо не отличалось от контрольного уровня. Однако, начиная с 6-7-х суток, отмечено появление «второй волны лейкоцитарной инфильтрации». Это проявлялось в четырёхкратном приросте содержания нейтрофилов, моноцитов на
(Р = 0,028WW). При этом уровень молекулярных продуктов ПОЛ в эти сроки не претерпел статистически значимых изменений.
Обращает на себя внимание наличие положительных корреляционных связей между содержанием гептанрастворимых кетодиенов и сопряжённых триенов с количеством моноцитов воспалительного очага (Я^ = 0,794; Р = 0,024), а также между содержанием этих же продуктов ПОЛ и числом лимфоцитов в тканях очага (Я^ = 0,689; Р = 0,034). Кроме того, отмечено наличие положительной корреляции между содержанием карбони-лированных белков и количеством лимфоцитов в лейкоцитарном инфильтрате (Яз = 0,756; Р = 0,026). Данные корреляционные связи могут отражать способность молекулярных продуктов липоперок-сидации выступать в роли хемоаттрактантов для лейкоцитарных клеток [9].
Известно, что саливаторные показатели вполне корректно отражают изменения в локальном очаге одонтогенного воспаления. Поэтому на следующем этапе исследования мы провели изучение биохимических показателей слюны пациентов с различными клиническими формами апикального периодонтита.
В 1-й группе пациентов (с острым апикальным периодонтитом) наблюдалось увеличение уровня Бе+2/аскорбат индуцированного ПОЛ и содержания карбонилированных белков, а также гептанрастворимых продуктов ПОЛ (табл. 3). Было определено снижение содержания изопропанол-растворимых диеновых конъюгатов, а также кетодиенов и сопряжённых триенов. Исследование показателей больных с хроническим апикальным периодонтитом (2-я группа) выявило существенное превышение содержания карбонилированных белков. При этом снижалось содержание изопро-панолрастворимых кетодиенов и сопряжённых триенов на фоне прироста содержания Бе2+/аскор-батиндуцированного ПОЛ. Для периода обострения хронического апикального периодонтита (3-я группа пациентов) характерно увеличение содер-
Таблица 1
Содержание гептанрастворимых молекулярных продуктов ПОЛ в периапикальных тканях в динамике экспериментального периодонтита
Показатель (е.и.о.) ДК КД и СТ ШО
Контроль (п = 7) 0,416 ± 0,0021 0,085 ± 0,0013 0,015 ± 0,001
1 сутки (п = 7) 0,423 ± 0,0014* 0,096 ± 0,0011* 0,014 ± 0,003
2 сутки (п = 7) 0,418 ± 0,0036 0,093 ± 0,001* 0,012 ± 0,004
3 сутки (п = 7) 0,417 ± 0,0027 0,094 ± 0,0009* 0,012 ± 0,004
4 сутки (п = 7) 0,419 ± 0,0036 0,094 ± 0,0009* 0,014 ± 0,006
5 сутки (п = 7) 0,415 ± 0,0046 0,088 ± 0,001 0,014 ± 0,004
6 сутки (п = 7) 0,411 ± 0,0034 0,085 ± 0,0014 0,005 ± 0,0004*
7 сутки (п = 7) 0,412 ± 0,0076 0,085 ± 0,001 0,014 ± 0,004
10 сутки (п = 7) 0,426 ± 0,0031 0,081 ± 0,0014 0,006 ± 0,0002**
Примечание. В табл. 1-3 статистическая разница различий с контролем * - Р < 0,05; ** - Р < 0,005, критерий Манна-Уитни. ДК - диеновые коньюгаты, Е232/220; КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены, Е278/220; ШО - шиффовы основания, Е400/220.
6-е сутки (Р = 0,01и) и в пятикратном приросте на 7-е сутки (Р = 0,005и) при четырёхкратном увеличении содержания лимфоцитов на 6-е сутки (Р = 0,01и) и трёхкратном увеличении на 7-е сутки (Р = 0,028и).
Выявленный в процессе морфологических исследований волнообразный рост клеток, вероятно, связан с фазами течения периодонтита. В первые сутки после травмирования периапикальных тканей зуба у крыс формировался острый апикальный периодонтит, для которого характерно увеличение числа лейкоцитов в зоне воспаления [11]. В дальнейшем (на 6-7-е сутки) под действием микробных агентов и протекторных противоинфекцион-ных факторов (вторичная альтерация тканей периодонта) в очаге наблюдалась хронизация острого воспаления, также сопровождающаяся увеличением числа лейкоцитов [4].
Серия биохимических исследований в эксперименте показала, что первичному развитию лейкоцитарного инфильтрата соответствовало двухкратное увеличение содержания карбонилиро-ванных белков с 0,166 ± 0,026 мкмоль/г белка (п = 7) до 0,387 ± 0,014 мкмоль/г белка (п = 7; Р = 0,047и) на фоне увеличения содержания геп-танрастворимых диеновых конъюгатов, а также кетодиенов и сопряжённых триенов (табл. 1). При этом наблюдалось снижение содержания изопро-панолрастворимых диеновых конъюгатов, кето-диенов и сопряжённых триенов с последующим переходом их во фракции неполярных липидов (табл. 2). Известно, что в гептановой фазе детектируются продукты переокисления эйкозаноидов, играющие важную роль в развитии воспалительного инфильтрата [20]. Следует отметить, что на 5-е сутки от начала воздействия наблюдалось усиление Ре+2/И202 индуцированного карбонилирования белков с 6,23 ± 0,052 мкмоль/г ткани (п = 7) до 7,11 ± 0,034 мкмоль/г ткани (п = 7; Р = 0,028WW). На 10-е сутки было отмечено увеличение содержания карбонилированных белков с 7,95 ± 0,33 мкмоль/г ткани до 8,55 ± 0,64 мкмоль/г ткани
Проблемы здравоохранения
Таблица 2
Содержание изопропанолрастворимых молекулярных продуктов ПОЛ периапикальных тканей в динамике экспериментального периодонтита
Показатель (е.и.о.) ДК КД и СТ ШО КД и СТ (индукция Fe^/аскорбат)
Контроль (п = 7) 0,808 ± 0,035 0,155 ± 0,021 0,0054 ± 0,001 1,25 ± 0,057
1 сутки (п = 7) 0,656 ± 0,068** 0,116 ± 0,015* 0,022 ± 0,008** 1,58 ± 0,084**
2 сутки (п = 7) 0,797 ± 0,048* 0,157 ± 0,044 0,14 ± 0,004* 1,28 ± 0,092*
3 сутки (п = 7) 0,703 ± 0,024 0,15 ± 0,041 0,09 ± 0,005 1,27 ± 0,092
4 сутки (п = 7) 0,801 ± 0,032 0,153 ± 0,017 0,052 ± 0,001 1,4 ± 0,15
5 сутки (п = 7) 0,815 ± 0,04 0,155 ± 0,065 0,053 ± 0,001 1,27 ± 0,15
6 сутки (п = 7) 0,755 ± 0,014** 0,147 ± 0,015* 0,022 ± 0,0087* 1,4 ± 0,015**
7 сутки (п = 7) 0,801 ± 0,053 0,151 ± 0,031 0,09 ± 0,001 1,31 ± 0,057**
10 сутки (п = 7) 0,839 ± 0,01 0,165 ± 0,021 0,0021 ± 0,001* 1,28 ± 0,53
Таблица 3
Содержание молекулярных продуктов ПОЛ и карбонилированных белков в слюне пациентов с апикальным периодонтитом
Показатель Клинически Стоматологические
здоровые лица (n = 16) пациенты (n = 76)
Группа 1 (n = 34)
КД и СТ [г] (е.и.о.) 0,122 ± 0,028 0,173 ± 0,017*
КД и СТ [и] (е.и.о.) 0,402 ± 0,023 0,276 ± 0,044*
КД и СТ (е.и.о.) (индукция Fe2+/аскорбат) 0,894 ± 0,06 1,057 ± 0,03*
ОМБ (мкмоль/гр. белка) 1,47 ± 0,19 4,55 ± 0,29*
Группа 2 (n = 14)
КД и СТ [и] (е.и.о.) 0,402 ± 0,023 0,32 ± 0,024*
КД и СТ (е.и.о.) (индукция Fe2+/аскорбат) 0,894 ± 0,06 0,94 ± 0,041*
ОМБ (мкмоль/гр. белка) 3,82 ± 0,19 7,16 ± 0,53*
Группа 3 (n = 28)
КД и СТ (е.и.о.) (индукция Fe2+/ аскорбат) 0,894 ± 0,06 0,97 ± 0,035*
ШО [и] (е.и.о.) 0,14 ± 0,017 0,185 ± 0,01*
ОМБ (мкмоль/гр. белка) 1,81 ± 0,14 1,03 ± 0,24*
Примечание. [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопро-панольной фазами; ОМБ - продукты окислительной модификации белка.
жания изопропанолрастворимых шиффовых оснований и уровня Ре2+/аскорбатиндуцированного ПОЛ. Интересно отметить, что во время обострения обнаружено снижение содержания карбонили-рованных белков. То есть полученные результаты свидетельствуют об усилении липопероксидации в период обострения и об увеличении уровня карбо-нилированных белков при его отсутствии. Примечательно, что в период ремиссии апикального периодонтита в воспалительном очаге наблюдалось не только усиление окислительной деструкции белков, но и снижение содержания молекулярных продуктов ПОЛ.
Заключение. Резюмируя полученные в исследовании данные, можно заключить, что результаты эксперимента, соотносятся с саливаторными
показателями пациентов с апикальным периодонтитом. Показатели локального очага воспаления в 1-е и 2-е сутки экспериментального периодонтита, также как и данные исследования слюны пациентов с острым апикальным периодонтитом, продемонстрировали усиление ПОЛ на фоне одновременного увеличения окисляемости липидов и увеличения содержания карбонилированных белков, среди которых имеются вещества, обладающие антиоксидантной активностью. Для хронического периодонтита характерно увеличение содержания карбонилированных белков и снижение содержания изопропанолрастворимых диеновых конъюгатов, а также кетодиенов и сопряжённых триенов. Аналогичные изменения были выявлены соответственно на 10-е и 6-е сутки эксперимента. При
Латюшина Л. С., Осьмуха У.Г., Цейликман В.Э. и др.
этом гистологические исследования, проводимые в эти сроки, зафиксировали координированные с динамикой биохимических показателей морфологические изменения, связанные с увеличением соединительно-тканных компонентов, что, вероятно, характеризует благоприятное течение хронических форм апикального периодонтита [4, 12]. Обращает на себя внимание наличие положительной корреляции между содержанием карбонилирован-ных белков и содержанием соединительно-тканных элементов. Вполне возможно, что усиление карбо-нилирования белков способствует образованию экстрацеллюлярных белковых агрегатов. Аналоги результатов исследования пациентов третьей группы в эксперименте отсутствуют, однако выявленное снижение содержания карбонилированных белков в слюне при обострении хронического пе-риапикального процесса может служить критерием усугубления тяжести заболевания.
Литература
1. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод её определения / Е.Е. Дубинина // Вопросы медицинской химии. - 1995. - № 41. - С. 24-26.
2. Зайчик, А.Ш. Общая патофизиология с основами иммунопатологии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чу-рилов. - СПб.: ООО «ЭЛБИ-СПб», 2008. - 650 с.
3. Коэн, С. Эндодонтия / С. Коэн, Р. Бернс; под ред. А.М. Соловьевой. - 8-е изд., перераб. и доп. -М.: Издат. дом ST book, 2007. - 1021 с.
4. Маянский, Д.Н. Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский. - М.: Медицина, 1991. - 272 с.
5. Микробиологическая и клинико-рентгенологическая характеристика болезней периапикаль-ных тканей при применении разных программ эн-додонтического лечения / В.Н. Царев, Л.А. Дмитриева, С.Е. Нисанова, Т.В. Селезнева // Российская стоматология. - 2009. - № 2. - С. 36-44.
6. Митронин, А.В. Комплексное лечение и реабилитация больных с деструктивными формами хронического периодонтита: автореф. дис. ... д-ра мед. наук /А.В. Митронин. - М., 2004. - 50 с.
7. МКБ-С: Международная классификация стоматологических болезней на основе МКБ-10: пер. с англ. / науч. ред. А.Г. Колесник. - 3-е изд. -М.: Медицина, 1997. - 248 с.
8. Молекулярные механизмы воспаления / под ред. академика В.А. Черешнева. - Екатеринбург, 2010. - 261 с.
9. Наибов, О. В. Клинико-экспериментальное обоснование использования диодного лазера при лечении деструктивных форм верхушечных периодонтитов у подростков: автореф. дис. ... канд. мед. наук / О.В. Наибов. - Екатеринбург, 2007. -26 с.
10. Нисанова, С.Е. Эффективность сочетанного применения антибактериальных и иммуно-
моделирующих препаратов в комплексном лечении апикального периодонтита: автореф. дис. ... канд. мед. наук / С.Е. Нисанова. - М., 2009. - 27 с.
11. Притчина, И.А. Морфологические изменения периодонта после лечения хронического деструктивного периодонтита в зависимости от возраста и пола пациента: автореф. дис. ... канд. мед. наук /И.А. Притчина. - Новосибирск, 2006. -25 с.
12. Протокол ведения больных «Кариес зубов», утвержден 17 октября 2006 г. // Проблемы стандартизации в здравоохранении. - 2007. - № 6. -С. 33-80.
13. Саркисов, Д. С. Микроскопическая техника / Д.С. Саркисов, Ю.Л. Перов. - М.: Медицина, 1996. -548 с.
14. Симбирцев, А.С. Интерлейкин-8 и другие хемокины /А.С. Симбирцев //Иммунология. - 1999. -№ 4. - С. 9-14.
15. Синица, В. В. Применение антиоксидантов в комплексном лечении хронических верхушечных периодонтитов: автореф. дис. ... канд. мед. наук/
B. В. Синица. - Львов, 2003. - 20 с.
16. Спектрофотометрическое определение конечных продуктов перекисного окисления липидов / Е.И. Львовская, И.А. Волчегорский, С.Е. Ше-мяков, Р.И. Лифшиц // Вопросы мед. химии. - 1991. -№ 4. - С. 92-94.
17. Теплова, С.Н. Секреторный иммунитет /
C.Н. Теплова, А.Д. Алексеев. - Челябинск: УрО РАН, 2002. - 200 с.
18. Терапевтическая стоматология: учеб. для студентов мед. вузов / под ред. Е.В. Боровского. -М.: МИА, 2004. - 840 с.
19. Шаргородский, А.Г. Клиника, диагностика, лечение и профилактика воспалительных заболеваний лица и шеи / А.Г. Шаргородский. - М.: ГЭОТАР-Мед, 2002. - 527 с.
20. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптационных реакций организма /И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников, В.Э. Цейликман. - Челябинск, 2000. -167 с.
21. Chung, H.Y. Molecular inflammation as an underlying mechanism of the aging process and age-related diseases / H.Y. Chung, E.K. Lee, Y.J. Choi et al. // J. Dent Res. - 2011. - Vol. 90, № 7. -P. 830-840.
22. Gaffen, S.L. A new inflammatory cytokine on the block: Re-thinking periodontal disease and the Th1/Th2 paradigm in the context of the Th17 cells and IL-17 /S.L. Gaffen, G. Hajishengallis // J. Dent Res. -2008. - Vol. 87. - P. 817.
23. Weaver, C. T. IL-17 family cytokines and the expanding diversity of effector T cell lineages / C.T. Weaver, R.D. Hatton, P.R. Mangan, L.E. Harrington // Annu Rev Immunol. - 2007. - Vol. 25. -P. 821.
Поступила в редакцию 12 апреля 2011 г
