CC BY
12
УДК 674.031.973: 57.085.23
ОСОБЕННОСТИ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ВЫСОКОДЕКОРАТИВНЫХ КУЛЬТИВАРОВ ВЕЙГЕЛЫ
СТАХЕЕВА Т.С.,
младший научный сотрудник лаборатории биотехнологии растений, Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, e-mail: [email protected], тел. 8 (916)-489-31-04.
ВАСИЛЬЕВА О.Г.,
кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории биотехнологии растений, Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, e-mail: [email protected], тел. 8(916)- 232-60-50,
КОНОВАЛОВА Л.Н.,
научный сотрудник лаборатории защиты растений, Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, e-mail: [email protected], тел. 8(977)-747-65-86.
КУКЛИНА А.Г.,
кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории природной флоры, Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, e-mail: [email protected], тел. 8(903)-780-85-99,
БАРАНОВА Е.Н.,
кандидат биологических наук, младший научный сотрудник лаборатории защиты растений, Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, [email protected], тел. 8(903)-624-59-71,
Реферат. В статье представлены результаты изучения влияния гормонального состава питательной среды и генотипа на регенерационный потенциал высокодекоративных культиваров вейгелы (Weigela Thunb., Caprifoliaceae) в условиях in vitro. Основной метод, используемый в работе - активация развития пазушных меристем. У всех изученных культиваров вейгелы с повышением концентрации цитокинина в среде отмечено увеличение значения коэффициента размножения, самый высокий - на питательной среде, содержащей 2 мг/л ВАР. Показано, что на регенерационную способность in vitro оказывают влияние генетические особенности размножаемых сортов.
Ключевые слова: Weigela, клональное микроразмножение, регенерационный потенциал.
FEATURES OF CLONAL MICROPROPAGATION OF HIGHLY ORNAMENTAL WEIGELA CULTIVARS
STAKHEEVA T.S.,
Junior Researcher at the Laboratory of Plant Biotechnology, N.V. Tsitsin Main Botanical Garden of the Russian Academy of Sciences, e-mail: [email protected], tel. 8(916)-489-31-04.
VASILYEVA O.G.,
Candidate of Biological Sciences, Researcher at the Laboratory of Plant Biotechnology, N.V. Tsitsin Main Botanical Garden of the Russian Academy of Sciences, e-mail: [email protected], tel. 8(916)-232-60-50,
KONOVALOVA L.N.,
Researcher at the Plant Protection Laboratory, N.V. Tsitsin Main Botanical Garden of the Russian Academy of Sciences, e-mail: [email protected], tel. 8(977)-747-65-86,
KUKLINA A.G.,
Candidate of Biological Sciences, Leading researcher of the Laboratory of Natural Flora, N.V. Tsitsin Main Botanical Garden of the Russian Academy of Sciences, e-mail: [email protected], tel. 8(903)-780-85-99,
BARANOVA E.N.,
Candidate of Biological Sciences, Junior Researcher of the Plant Protection Laboratory, N.V. Tsitsin Main Botanical Garden of the Russian Academy of Sciences, [email protected], tel. 8(903)-624-59-71.
Essaу. In present study the effect of the hormonal composition of the nutrient medium and genotype on the regeneration potential of highly ornamental weigela cultivars (Weigela Thunb. Caprifoliaceae) under in vitro conditions was examined. The activation of the axillary meristem development was applied as a main method. Multiplication factor for all weigela cultivars increased as the cytokinin concentration in the medium raised. The highest rate was observed on a nutrient medium supplemented with 2 mg/l BAP. It is shown that in vitro regenerative capacity is influenced by the genetic features of micropropagated cultivars.
Keywords: Weigela, clonal micropropagation, regeneration potential.
Введение. Род Weigela Thunb. (Caprifoliaceae) насчитывает 15 видов, происходящих из регионов умеренного и субтропического климата Восточной Азии [1]. В России, на юге Дальнего Востока в природных условиях встречаются три вида: вейгела ранняя (W. praecox (Lemoine) Bailey), вейгела Миддендорфа (W. middendorffiana (Carriere) K.Koch) и вейгела приятная (W. suavis (Kom.) L.H. Bailey) [2]. Большинство красивоцветущих видов вейгелы требовательны к теплу, потому в средней полосе России могут расти только в оранжерее [3]. На территории бывшего СССР интродуцирова-ны девять видов вейгелы [4;5]. В Главном ботаническом саду им. Н.В. Цицина РАН (ГБС РАН) интродукция вейгелы ведется начиная с 1946 г. За это время интродуцированы: вейгела Миддендорфа в 1947 г, вейгела садовая (W. hortensis (Siebold & Zucc.) K.Koch) в 1948 г., вейгела гибридная - W. х hybrida Jaeg. (W. praecox x W. florida (Bunge) A. DC.) в 1948 г., вейгела цветущая (W. florida (Bunge) A.DC.) в 1954 г., вейгела ранняя в 1956 г., вейгела обильноцве-тущая (W. floribunda (Siebold&Zucc.) K.Koch) в 1990 г. [6].'
Вейгела - красивоцветущие листопадные кустарники, достигающие высоты 1,5-3,0 м, с крупными до 5 см цветками, Кроме обильного нарядного цветения, некоторые формы и сорта вейгелы ценятся необычной окраской листьев: от темно-зеленой до пурпурной, есть сорта с необычными листьями - зелеными с белым или кремовым окаймлением [7; 8]. В период цветения вейгелы являются украшением садов и парков, но из-за недостаточной изученности их
биологических особенностей, пока еще не нашли широкого распространения в озеленении [9]. В садах и парках России чаще других используют вейгелу раннюю, вейгелу Миддендорфа и вейгелу гибридную. Вейгела ранняя является более зимостойким и наиболее распространенным в культуре видом, известным в культуре с 1894 г. [10]. W. x hybrida отличается пышным, нарядным цветением. Ее многочисленные сорта имеют цветки разнообразной окраски [11].
Большинство видов и сортов вейгелы сосредоточены в коллекциях ботанических садов и представлены малым количеством экземпляров. Размножение вейгелы осуществляется посевом семян и вегетативно: одревесневшими и зелёными черенками [3]. Семена обладают неплохой всхожестью и вполне пригодны для размножения дикорастущих, не сортовых растений [8]. Широкое внедрение перспективных культи-варов вейгелы в садоводческую культуру сдерживается ограниченным количеством маточного материала [7]. Для быстрого размножения селекционного материала и сортов целесообразно применение биотехнологических методов.
В лаборатории биотехнологии растений ГБС РАН разработаны и усовершенствованы технологии микроразмножения декоративных, плодовых, лекарственных, а также редких и исчезающих растений, создан генетический банк in vitro [12 - 17]. Биотехнологические методики позволяют преодолеть сезонность производства, в кратчайшие сроки получить значительное количество растений, и наиболее полно реализо-
вать биологические возможности растений к размножению, получить потомство, генетически идентичное исходной форме. Особенно это относится к сортовому материалу и пестролистным формам, для которых неприемлемо семенное размножение из-за утрат сортовых признаков [18].
В литературе имеются сведения об использовании биотехнологических методов для получения активно пролиферирующих культур вей-гелы приятной и вейгелы пестролистной 'Kosteriana Variegata' [19]. Разработаны и оптимизированы условия ризогенеза W. suavis, W. florida 'Variegata' и вейгелы пестролистной 'Kosteriana Variegata' [19; 20]. Проведена оценка сомаклональной изменчивости растений-регенерантов с использованием RAPD-праймеров, показана идентичность микроклонов этих видов исходным маточным растениям [21].
Технология клонального микроразмножения включает следующие этапы: введение в культуру in vitro (инициация культуры), собственно микроразмножение (пролиферация), ризогенез и адаптация к условиям in vivo [22]. При разработке и оптимизации методики клонального микроразмножения для каждого таксона необходимо определить тип экспланта, подобрать условия культивирования, способствующие реализации его морфогенетического потенциала [17]. Среди факторов, оказывающих наибольшее влияние на морфогенетические процессы в культуре изолированных тканей и органов, в первую очередь необходимо выделить генетические особенности растений доноров, состав питательной среды, строение инициального экспланта, физиологическое состояние растения-донора и условия культивирования [12]. При реализации морфогенетического потенциала растений, при дедифференцировке клеток и их дальнейшей пролиферации, основным является взаимодействие генотип-среда [16]. Оно основано на том, что компоненты питательной среды, прежде всего фитогормоны, влияют на экспрессию генов, определяющих морфогенез. Генотипом определяются пределы изменчивости регенерационной способности эксплантов и количество формирующихся растений in vitro [17]. Для каждого генотипа существует предел нормы реакции, который изменяется под воздействием экзогенных факторов [16]. Для получения и поддержания активно пролиферирую-щей культуры in vitro весьма существенным является правильный выбор цитокинина. Успешные результаты были получены при использо-
вании 6-БАП для микроклонального размножения различных таксономических групп растений [23; 24]. Высокий уровень цитокинина в среде вызывает образование каллуса, что делает растения непригодными для дальнейшего размножения.
Цель исследования заключалась в изучении влияния гормонального состава питательной среды на регенерационный потенциал культи-варов рода Weigela в условиях in vitro.
Объекты и методика исследования. Объектами исследований служили культивары из коллекций ГБС РАН - сорта отечественной селекции: 'Барбара' и 'Сашенька'; сорта зарубежной селекции: 'Bristol Ruby' и 'Nana Variegata'. Донорные растения выращивали в условиях открытого грунта.
Сорт 'Барбара' относится к W. praecox. Авторы сорта - Г. А. Фирсов и А. Г. Куклина [25]. Среднерослый кустарник (высотой 3 м) с густооблиственной кроной, кора серо-бурая. Листья матовые, овальной формы (длиной 3-5 см, ширина 2,5 см) с заостренной вершиной и овальным основанием, опушенные снизу. Цветки собраны по 5- 10 штук. Бутоны пурпурные. Венчик воронковидно-трубчатый (длиной до 5 см), трубка узкая, расширяющаяся к середине. Снаружи венчик ярко-розовый со светлой полоской, внутри - бледно-розовый, зев желтый. Доли отгибы (длиной до 1,4 см) направлены вперед, назад не загибаются, диаметр отгиба 20-22 мм. Рыльце пестика зеленовато-желтое. Цветение обильное с третьей декады мая до начала июня. При загущенной посадке цветение превалирует в верхней части куста. Сорт относительно зимостоек. Легко размножается зелеными черенками, укореняемость черенков 98-100 %. Устойчивость к болезням и вредителям хорошая. Пригоден для солитерной и групповой посадки, желательны защищенные от холодных ветров места [26].
Сорт 'Сашенька' относится к W х hybrida. Авторы сорта: Г. А. Фирсов и А. Г. Куклина [27]. Компактный низкорослый кустарник (менее 1,2 м высотой) с серой корой. Крона плотная округлая, годичные побеги слабо искривлены. Листья матовые, эллиптические, небольшие (длина 3-5 см, ширина 2-3 см). Соцветия малоцветковые (по 2-4 цветка). Бутоны малиновые. Венчик колокольчатой формы, некрупный (длина 4 см), пурпурно-розовый снаружи, светло-розовый внутри. Доли отгиба отогнуты назад, диаметр отгиба 3 см. Внутри зева широкая желтая полоса неправильной формы. Чашечка глубоко рассечена. Цветение не обильное, но
продолжительное, с конца мая до середины июня. Наблюдается также повторное цветение теплой осенью. В суровую зиму обмерзают кончики однолетнего прироста. После обрезки хорошо восстанавливается. Легко черенкуется (98%). Пригоден для альпинария, бордюрной, солитерной и контейнерной посадки [26].
Сорт 'Bristol Ruby' получен в Англии (автор A. Cummings) в 1941 году [28], относится к W. x hybrida, получен в результате гибридизации W. florida и W. coraeensis Thunb. Раскидистый кустарник, высотой до 2,0 м. листья овально-заостренные, длиной 6-10 см, шириной 4-6 см. Листья ярко-зеленые. Осенью они долго остаются на ветвях, осенняя окраска не декоративна. Цветки собраны в соцветия по 3-5 штуки. Венчик колокольчатый, длиной 3,5-4 см, окраска по краям рубиново-красная, иногда с лилово-розовым зевом. Сорт очень популярен, выращивают одиночно и группами. В средней полосе России, особенно в первые годы после посадки, зимует с укрытием [29].
Сорт 'Nana Variegata' относится к W. х hybrida, при участии W. florida. Декоративный пестролистный сорт имеет зеленые листья с кремово-белым окаймлением. Куст высотой 0,81,2 м. Цветет - в июне, в течение 15 дней. Цветки светло-малиновые, собраны по 3-4 штуки. Возможно вторичное цветение, в августе-сентябре [7].
Основной метод, используемый в работе — активация развития пазушных меристем. Подготовка материала, питательных сред и работы в асептических условиях проводили согласно общепринятым классическим приемам с культурами изолированных тканей и органов растений [24]. Для индукции культуры в качестве экс-плантов использовали апикальные и латеральные почки побегов текущего года с небольшим участком стебля с одним узлом (8-10 мм) в период активного роста. В качестве стерилизаторов последовательно использовали 0,5%-й раствор «Бенлата» (экспозиция не менее 10 мин), 7%-й раствор гипохлорита кальция (экспозиция 5-7 мин) в сочетании с предварительной обработкой 70%-м этанолом (экспозиция 5 с). Экс-планты помещали на среду Мурасиге и Скуга (МС) [30], содержащую 30 г/л сахарозы, 7 г/л агара, 0,5 мг/л 6-бензиламинопурина (6-БАП). Для изучения влияния 6-БАП на регенерацион-ный потенциал разных генотипов вейгелы на этапе собственно микроразмножения использовали питательную среду МС, содержащую 30 г/л сахарозы, 7 г/л агара, с различными концентрациями 6-БАП: 0,5 мг/л; 1,0 мг/л; 1,5 мг/л и
2,0 мг/л. Контролем была питательная среда не содержащая гормонов. Через 30-35 дней культивирования анализировали морфометрические параметры развивающихся эксплантов: количество микропобегов и число узлов на микропобеге. В каждом варианте опыта анализировали не менее 30 эксплантов, в 3-х кратной повторно-сти. Для индукции ризогенеза использовали питательную среду МС с добавлением 1,0 мг/л ин-долил-3-масляной кислоты (ИМК) [19]. Культивирование проводили при температуре 21-23°С, освещенности - 2-3 тысячи люкс с фотопериодом 16 часов. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета программ Microsoft Excel. В таблицах представлены средние значения и их стандартные ошибки, а на графиках - средние значение и доверительные интервалы.
Результаты исследования. После проведения поверхностной стерилизации подготовленные экспланты помещали на питательную среду. В последующие дни инфицированные экс-планты выбраковывали. На стадии инициации у изученных генотипов жизнеспособность экс-плантов составила в среднем 70-75%. Через 2830 дней образовавшиеся побеги отсекали от исходного экспланта и переносили на питательную среду для микроразмножения.
Изученные культивары вейгелы характеризовались активным ростом пазушных и адвентивных побегов (рисунок 1).
'S tf*" I
к i
Рисунок 1 - Стадия пролиферации сорта 'Барбара'
На этапе микроразмножения через 30 суток культивирования анализировали морфометрические параметры развивающихся эксплантов: количество микропобегов и число узлов на микропобеге (таблица 1).
Условные обозначения: 1 - контроль (без гормонов); 2 - 0,5 мг/л; 3 - 1,0 мг/л; 4 - 1,5 мг/л;
5 - 2,0 мг/л
Рисунок 2 - Коэффициент размножения разных генотипов вейгелы на стадии пролиферации в зависимости от концентрации 6-БАП в питательной среде
Таблица 1 - Морфометрические показатели микропобегов вейгелы на этапе микроразмножения через 30 суток культивирования_
Сорт Концентрация 6-БАП (мг/л)
б/г 0,5 1,0 1,5 2,0
Число побегов на один эксплант, шт.
'Барбара' 2,30±0,38 2,35±0,18 2,45±0,58 2,50±0,93 2,67±0,35
'Сашенька' 1,95±0,89 1,98±1,14 2,08±0,21 2,30±0,67 2,70±0,82
'Bristol Ruby' 1,54±0,53 1,68±0,46 1,70±0,52 1,74±0,52 1,74±0,76
'Nana Variegata' 2,17±0,62 2,29±0,79 2,30±0,33 2,42±0,38 2,44±0,53
Число узлов на микропобеге, шт.
'Барбара' 1,30±0,81 1,45±0,79 1,50±0,52 1,55±0,69 1,94±0,77
'Сашенька' 2,41±0,79 2,47±0,83 2,51±0,41 2,65±0,49 2,56±0,75
'Bristol Rub' 2,01±0,64 2,08±0,77 2,08±0,70 2,13±0,80 2,15±0,67
'Nana Variegata' 2,40±0,95 2,53±0,83 2,54±0,73 2,56±0,48 2,59±0,81
'Барбара' 'Сашенька' 'Bristol Ruby' 'Nana Variegata'
Наиболее активное адвентивное побегообразование отмечено у сортов 'Сашенька' (2,70 побега/эксплант) и 'Барбара' (2,67 побе-га/эксплант) на среде содержащей 2,0 мг/л 6-БАП. Самая низкая побегообразующая способность отмечена у сорта 'Bristol Ruby' на всех вариантах питательной среды от (1,54 до 1,74 побега/эксплант).
Коэффициент размножения (КР) определяли как количество микропобегов, которое можно получить за одно субкультивирование, для этого количество образующихся на экс-планте побегов умножали на число узлов на микропобеге (рисунок 2).
У всех изученных культиваров вейгелы с повышением концентрации цитокинина в среде отмечено увеличение значения коэффици-
ента размножения, самый высокий - на питательной среде, содержащей 2 мг/л 6-БАП. Применение различных концентраций 6-БАП вызвало разные генотипические реакции, показатель КР варьировал от 3,0 до 6,9. Самые высокие значения КР - отмечены у сорта 'Сашенька' - 6,9 и 'Nana Variegata' - 6,33. Причем у сорта 'Сашенька' КР увеличился с 4,70 до 6,90, а у сорта 'Nana Variegata' - с 5,20 до 6,33. Самый низкий КР отмечен у сорта 'Bristol Ruby'. Причем, значение КР на низких концентрациях 6-БАП 0,5 мг/л и 1,0 мг/л практически одинаковые - 3,50 и 3,54 соответственно. С повышением концентрации до 1,5 мг/л и 2,0 мг/л значение КР увеличилось до 3,70 и 3,75, что также не имеет существенной разницы. Таким образом, для сорта 'Bris-
tol Ruby' характерна самая низкая ответная реакция на повышение концентрации данного цитокинина в питательной среде.
Выводы. Показано, что на регенерацион-ную способность in vitro оказывают влияние генетические особенности размножаемых сортов рода Weigela.
Сорта 'Сашенька' и 'Nana Variegata' характеризуются наилучшей регенерационной способностью. Самая низкая ответная реакция на повышение концентрации цитокинина в
питательной среде и регенерационный потенциал выявлены у сорта 'Bristol Ruby'.
Отмечено влияние содержания 6-БАП в питательной среде на регенерационный потенциал вейгелы на этапе микроразмножения in vitro.
У всех изученных культиваров рода Weigela с повышением концентрации цитоки-нина в среде происходит увеличение значения коэффициента размножения, самый высокий -на питательной среде, содержащей 2,0 мг/л 6-БАП.
Список использованных источников
1. Карпун Ю.Н. Субтропическая декоративная дендрология. - СПб: СПбГУ, 2010. - 580 с.
2. Маляровская В.И., Карпун Ю.Н. Краткая историко-систематическая характеристика рода вейгела (Weigela Thunb.) // Субтропическое и декоративное садоводство. - 2012. - № 47. - С. 73-77.
3. Энциклопедия декоративных садовых растений [Электронная версия]: - Режим доступа: flower. onego.ru/kustar/weigel-g.html.
4. Гусев Ю.Д. Род Вейгела - Weigela Thunb. / Ю.Д. Гусев // Деревья и кустарники СССР. - МЛ.: Наука, 1962. - Т. VI. - С. 301-309.
5. Мартынов Л. Г. Интродукция вейгелы (Weigela Thunb.) на европейском северо-востоке России // Известия Самарского научного центра РАН. - 2018. - № 5 (2) - С. 241-246.
6 Древесные растения Главного ботанического сада им. Н. В. Цицина Российской академии наук. - М.: Наука, 2005. - 586 с.
7. Куклина А.Г. Красивоцветущие кустарники. - М., 2004. - 64 с.
8. Савенко А.В., Чукурили С.С., Барчукова А.Я. Особенности адаптации сортов вейгелы (Weigela Thunb., Caprifoliaceae) в условиях города Краснодара // Научный журнал КубГАУ. -2015. - № 105 (01). - С.1-13. [Электронный ресурс]. Режим доступа http ://ej .kubagro.ru/2015/01/pdf/043 .pdf
9. Мурзабулатова Ф. К., Полякова Н. В. Интродукция представителей рода Weigela Thunb. и перспективы использования их в городском озеленении. - Известия Уфимского научного центра РАН. - 2017. - №. 4. - С. 57- 62.
10. Rehder A. Manual of cultivated trees and shrubs hardy in North America. - New York: The Macmillan Company, - 1949. - 996 p.
11. Hoffman M. H. A. Cultivar Classification of Weigela // Acta Hort. - 2008 - Vol. 799. - P. 31-35. D0I:10.17660/ActaHortic.2008.799.2
12. Васильева О. Г. Биолого-морфологические основы клонального микроразмножения некоторых представителей рода Rhododendron L.: автореф. дис. ... канд. биол. наук. М., 2009. - 20 с.
13. Молканова О.И., Чурикова О.А., Коновалова Л.Н., Окунева И.Б. Клональное микроразмножение интродуцированных сортов Syringa vulgaris L. // Вестн. МГУ. - 2002. - № 4. - С. 8-14.
14. Огахеева Т.С., Васильева О.Г., Коновалова Л.Н. Сохранение биологического разнообразия растений в генобанке in vitro ГБС РАН на примере семейства Ericaceae // В сборнике «Экологическая морфология растений. Материалы Х Международной конференции по экологической морфологии растений, посвященной памяти И.Г. и Т.И. Серебряковых. - М., 2019. - Т. 3. - С. 73-77.
15. Коновалова Л.Н., Малаева Е.В., Молканова О.И. Оценка ресурсного потенциала и оптимизация технологии клонального микроразмножения представителей семейства Actinidiaceae Van-Tiegh // Вестн. КрасГАУ. - 2008. - № 4. - С. 70-74.
16. Молканова О.И., Коновалова Л.Н., Стахеева Т.С. Формирование генетического банка in vitro плодовых и ягодных культур в ГБС РАН // Плодоводство и ягодоводство России. - 2016. - Т. 44. - С. 197-200.
17. Молканова О.И., Васильева О.Г., Коновалова Л.Н. Научные основы сохранения и воспроизводства генофонда ценных и редких видов растений в культуре in vitro // Бюллетень Главного ботанического сада. - 2015. - №2(201). - С. 78-82.
18. Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений. - М.: Наука, 1983. -97 с.
19. Землянухина О.А., Калаев В.Н., Воронина В.С. Микроклональное размножение вейгелы приятной и вейгелы пестролистной "Kosteriana Variegata" // Вестник Воронежского государственного университета. Сер. Химия. Биология. Фармация. - 2016. - № 1. - С. 72-75.
20. Землянухина О.А., Калаев В.Н., Воронина В.С. Различия в укоренении микрочеренков вейгелы приятной (Weigela suavis (Kom.) L.H. Bailey) и вейгелы цветущей "Вариегата" (Weigela florida «Variegata» Bunge A.D.C.) // В кн.: Современные экологические проблемы ЦентральноЧерноземного региона. Материалы заочной международной научно-практической конференции под науч. ред. Т. А. Девятовой, В. Н. Калаевой, А. А. Ворониной. - 2016. - С. 90-93.
21. Оценка сомаклональной изменчивости растений-регенерантов двух видов вейгелы при культивировании in vitro с использованием rapd-анализа / О.А. Землянухина, В.Н. Вепринцев, В.Н. Калаев, В.С. Воронина // В сборнике: Организация и регулирование физиолого-биохимических процессов.- Воронеж, 2017. - С. 57-60.
22. Слюсаренко А.Г. Проблемы масс-клонального размножения растений // Бюллетень Главного ботанического сада. - 2015. - №2 (201). - С. 78-82.
23. Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в системе производства оздоровленного посадочного материала и селекции плодовых и ягодных растений: автореф. дис. . д-ра с.-х. наук. - М., 1998. - 44 с.
24. Бутенко Р. Г. 1999. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе. - М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. -160 с.
25. Куклина А. Г., Фирсов Г. А. Вейгела сорт 'Барбара' // Патент на селекционное достижение № 5472. - 22.07.2010.
26. Куклина А. Г., Фирсов Г. А. Новые сорта декоративных кустарников // Древесные растения: фундаментальные и прикладные исследования. - М: Астра-Полиграфия, 2011. - Вып. 1. - С. 172-178.
27. Куклина А. Г., Фирсов Г. А. Вейгела сорт 'Сашенька' // Патент на селекционное достижение № 5473. - 22.07.2010.
28. Карпун Ю.Н., Маляровская В. И. Вейгела. - Сочи: ИП Кривлякин С.П., 2016. - 19 с.
29. Куклина А.Г., Комар-Темная Л.Д., Фирсов Г.А., Харченко А.Л. Оценка устойчивости декоративных сортов вейгелы (Weigela Thunb.), культивируемых в России // Экосистемы. - 2022. -№29. - С. 111-112.
30. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture // Physiol. plant. 1962. Vol. 15. - № 3. - P. 473-497.
Spisok ispoFzovanny'x istochnikov
1. Karpun Yu.N. Subtropicheskaya dekorativnaya dendrologiya. - SPb: SPbGU, 2010. - 580 s.
2. Malyarovskaya V.I., Karpun Yu.N. Kratkaya istoriko-sistematicheskaya xarakteristika roda vejgela (Weigela Thunb.) // Subtropicheskoe i dekorativnoe sadovodstvo. - 2012. - № 47. - S. 73-77.
3. E'nciklopediya dekorativny'x sadovy'x rastenij [E'lektronnaya versiya]: - Rezhim dostupa: flower. onego.ru/kustar/weigel-g.html.
4. Gusev Yu.D. Rod Vejgela - Weigela Thunb. / Yu.D. Gusev // Derev'ya i kustarniki SSSR. - M.-L.: Nauka, 1962. - T. VI. - S. 301-309.
5. Marty'nov L. G. Introdukciya vejgely' (Weigela Thunb.) na evropejskom severo-vostoke Rossii // Izvestiya Samarskogo nauchnogo centra RAN. - 2018. - № 5 (2) - S. 241-246.
6 Drevesny'e rasteniya Glavnogo botanicheskogo sada im. N. V. Cicina Rossijskoj akademii nauk. -M.: Nauka, 2005. - 586 s.
7. Kuklina A.G. Krasivoczvetushhie kustarniki. - M., 2004. - 64 s.
8. Savenko A.V., Chukurili S.S., Barchukova A.Ya. Osobennosti adaptacii sortov vejgely' (Weigela Thunb., Caprifoliaceae) v usloviyax goroda Krasnodara // Nauchny'j zhurnal KubGAU. - 2015. - № 105 (01). - S. 1-13. [E'lektronny'j resurs]. Rezhim dostupa http://ej.kubagro.ru/2015/01/pdf/043.pdf
9. Murzabulatova F. K., Polyakova N. V. Introdukciya predstavitelej roda Weigela Thunb. i perspektivy' ispofzovaniya ix v gorodskom ozelenenii. - Izvestiya Ufimskogo nauchnogo centra RAN. -2017. - №. 4. - S. 57- 62.
10. Rehder A. Manual of cultivated trees and shrubs hardy in North America. - New York: The Macmillan Company, - 1949. - 996 p.
11. Hoffman M. H. A. Cultivar Classification of Weigela // Acta Hort. - 2008 - Vol. 799. - P. 31-35. DOI:10.17660/ActaHortic.2008.799.2
12. Vasil'eva O. G. Biologo-morfologicheskie osnovy' klonal'nogo mikrorazmnozheniya ne-kotory'x predstavitelej roda Rhododendron L.: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. M., 2009. 20 s.
13. Molkanova O.I., Churikova O.A., Konovalova L.N., Okuneva I.B. Klonal'noe mikroraz-mnozhenie introducirovanny'x sortov Syringa vulgaris L. // Vestn. MGU. - 2002. - № 4. - S. 8-14.
14. Ctaxeeva T.S., Vasil'eva O.G., Konovalova L.N. Soxranenie biologicheskogo raznoobra-ziya rastenij v genobanke in vitro GBS RAN na primere semejstva Ericaceae // V sbornike «E'ko-logicheskaya morfologiya rastenij. Materialy' X Mezhdunarodnoj konferencii po e'kologiche-skoj morfologii rastenij, posvyashhennoj pamyati I.G. i T.I. Serebryakovy'x. - Moskva. - 2019. - T. 3, - S. 73-77.
15. Konovalova L.N., Malaeva E.V., Molkanova O.I. Ocenka resursnogo potenciala i opti-mizaciya texnologii klonal'nogo mikrorazmnozheniya predstavitelej semejstva Actinidiaceae Van-Tiegh // Vestn. KrasGAU. - 2008. - № 4. - S. 70-74.
16. Molkanova O.I., Konovalova L.N., Staxeeva T.S. Formirovanie geneticheskogo banka in vitro plodovy'x i yagodny'x kul'tur v GBS RAN // Plodovodstvo i yagodovodstvo Rossii. - 2016. - T. 44. - S. 197-200.
17. Molkanova O.I., Vasil'eva O.G., Konovalova L.N. Nauchny'e osnovy' soxraneniya i vos-proizvodstva genofonda cenny'x i redkix vidov rastenij v kul'ture in vitro // Byulleten' Glavnogo botanicheskogo sada. - 2015. -№2(201). - S. 78-82.
18. Kataeva N.V., Butenko R.G. Klonal'noe mikrorazmnozhenie rastenij. - M.: Nauka, 1983. - 97 s.
19. Zemlyanuxina O.A., Kalaev V.N., Voronina V.S. Mikroklonal'noe razmnozhenie vejgely' priyatnoj i vejgely' pestrolistnoj "Kosteriana Variegata" // Vestnik Voronezhskogo gosudarst-vennogo universiteta. Ser. Ximiya. Biologiya. Farmaciya. - 2016. - № 1. - S. 72-75.
20. Zemlyanuxina O.A., Kalaev V.N., Voronina V.S. Razlichiya v ukorenenii mikrocherenkov vejgely' priyatnoj (Weigela suavis (Kom.) L.H. Bailey) i vejgely' czvetushhej "Variegata" (Weigela florida «Variegata» Bunge A.D.C.) // V sbornike: Sovremenny'e e'kologicheskie problemy' Cen-tral'no-Chernozemnogo regiona. Materialy' zaochnoj mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii pod nauch. red. T. A. Devyatovoj, V. N. Kalaevoj, A. A. Voroninoj. - 2016. - S. 90-93.
21. Ocenka somaklonal'-noj izmenchivosti rastenij-regenerantov dvux vidov vejgely' pri kul'tivirovanii in vitro s ispol'zovaniem rapd-analiza / O.A. Zemlyanuxina, V.N. Veprincev, V.N. Kalaev, V.S. Voronina // V sbornike: Organizaciya i regulirovanie fiziologo-bioximicheskix processov.-Voronezh, 2017. - S. 57-60.
22. Slyusarenko A.G. Problemy' mass-klonal'nogo razmnozheniya rastenij // Byulleten' Glavnogo botanicheskogo sada. - 2015. - №2 (201). - S. 78-82.
23. Vy'soczkij V.A. Biotexnologicheskie metody' v sisteme proizvodstva ozdorovlennogo posadochnogo materiala i selekcii plodovy'x i yagodny'x rastenij: avtoref. dis. . d-ra s.-x. nauk. - M., 1998. - 44 s.
24. Butenko R. G. 1999. Biologiya kletok vy'sshix rastenij in vitro i biotexnologii na ix osnove. - M.; FBK-PRESS, 1999, -160 s.
25. Kuklina A. G., Firsov G. A. Vejgela sort 'Barbara' // Patent na selekcionnoe dostizhenie № 5472. - 22.07.2010.
26. Kuklina A.G., Firsov G. A. Novy'e sorta dekorativny'x kustarnikov // Drevesny'e rasteniya: fun-damental'ny'e i prikladny'e issledovaniya. - M: Astra-Poligrafiya, 2011. - Vy'p. 1. - S. 172-178.
27. Kuklina A. G., Firsov G. A. Vejgela sort 'Sashen'ka' // Patent na selekcionnoe dostizhenie № 5473. - 22.07.2010.
28. Karpun Yu.N., Malyarovskaya V. I. Vejgela. - Sochi: IP Krivlyakin S.P., 2016. - 19 s.
29. Kuklina A.G., Komar-Temnaya L.D., Firsov G. A., Xarchenko A. L. Ocenka ustojchivosti dekorativny'x sortov vejgely' (Weigela Thunb.), kul'tiviruemy'x v Rossii // E'kosistemy'. - 2022. -№29. - S. 111-112.
30. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture // Physiol. plant. 1962. Vol. 15. - № 3. - P. 473-497.
