CC BY
22
УДК 612.11.12
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ЖЕНЩИН,
БОЛЬНЫХ УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ
FEATURES OF IMMUNE SYSTEM OF WOMEN WITH UROGENITAL CHLAMYDIOSIS
Ю. В. Егорова1, А. С. Нестеров1, Н. А. Ильина2, А. В. Нестерова1 Y. V. Egorova1, A. S. Nesterov1, N. A. Ilyina2, A. V. Nesterova1
гФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск,
2ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет им. И. Н. Ульянова», г. Ульяновск
Аннотация. В статье представлены данные об изменениях состояния звеньев иммунной системы у женщин с урогенитальным хламидиозом. В работе особое внимание уделяется изменениям функциональных показателей иммунной системы. Показано, что у всех больных выявлены морфологические и функциональные изменения клеточного и гуморального иммунитета, которые приводят к нарушению процесса элиминации возбудителей и, как следствие, определяют хронический характер течения урогенитального хламидиоза и развитие его осложнений.
Abstract. The article presents the data on changes in the status of immune system components in women with urogenital chlamydiosis. This paper focuses on the changes in functional parameters of immune system. It is shown that the morphological and functional changes in cellular and humoral immunity have been revealed in all the patients. These changes cause the disturbance of the process of elimination of pathogens and, consequently, they determine the course of chronic urogenital chlamydiosis and development of complications.
Ключевые слова: состояние иммунитета, урогенитальный хламидиоз.
Keywords: immune status, urogenital chlamydiosis.
Актуальность исследуемой проблемы. В последние годы на фоне социальных и экологических стрессов населения обострилась проблема инфекций, передающихся половым путем (ИППП). Многие исследователи обращают внимание на распространенность инфекций репродуктивного тракта даже в популяциях «низкого риска» - у детей, беременных, людей из социально благополучных слоев общества [1]. Установлено, что такие возбудители, как Chlamydia trachomatis, Herpes simplex virus I и II, Human papillomavirus и др., постепенно вытесняют возбудителей классических бактериальных заболеваний. Этих возбудителей иногда называют «новыми», их зачастую трудно идентифицировать, а вызываемые ими инфекции сложнее лечить [5]. Они могут вызывать тяжелые осложнения, приводящие к хроническим нарушениям здоровья, инвалидности и даже смерти [3]. Заболевания, вызываемые инфекциями «нового» поколения, значительно влияют на количественные и функциональные показатели иммунной системы, что приходится учитывать при выборе схемы терапии [6].
В связи с этим целью работы явилось исследование особенности иммунной системы женщин, больных урогенитальным хламидиозом (УГХ).
Материал и методика исследований. Иммунологический статус определяли у 104 женщин с УГХ. Этот диагноз ставится на основании результатов обследования с применением полимеразной цепной реакции (ПЦР) в модификации real time [2].
Иммунный статус оценивали по показателям Т-звена - количество Т-лимфоцитов и их субпопуляций (метод Е-розеткообразования). Функциональную активность Т-лимфоцитов у пациенток с УГХ и здоровых женщин определяли при помощи реакции торможения миграции лейкоцитов периферической крови (РТМЛ) и бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) вследствие неспецифической стимуляции конканавали-ном А (Кон А). Состояние гуморального звена иммунной системы и его функциональную активность определяли по таким показателям, как: ЕАС-розеткообразования, содержание Ig A, Ig M, Ig G в сыворотке крови (метод радиальной иммунодиффузии по Манчини), фагоцитарная активность нейтрофилов (фагоцитарное число, фагоцитарный индекс), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) [4]. Результаты сравнивали с соответствующими показателями 52 лиц группы сравнения, репрезентативных по возрасту. Обработка и анализ данных выполнялся на IBM-совместимых компьютерах с использованием статистического программного пакета Statistica версии 6.0. Для всех параметров при статистической обработке вариационных рядов вычислялись значения средней арифметической (M-Mean), среднеквадратического отклонения ^=Std. Dev.). Достоверность различий между показателями оценивалась t-критерием Фишера-Стьюдента, но в силу того, что значительная часть параметров распределялась «не нормально», оценка уровней значимых (р<0,05) межгрупповых различий по количественным признакам производилась с использованием непараметрических методов статистической обработки (U-критерий Манна-Уитни).
Результаты исследований и их обсуждение. С целью изучения клеточного иммунитета определяли содержание различных субпопуляций лимфоцитов у женщин с хлами-дийной инфекцией. Установлено, что у пациенток формировалась статистически значимая CD4 Т-лимфоцитопения. Содержание CD4-лимфоцитов было снижено до 1,36±0,12-109/л (р<0,05) по сравнению с группой здоровых женщин (1,65±0,09). Выявлено статистически недостоверное снижение уровня CD8-лимфоцитов - до 0,69±0,09-10 /л (р>0,05), в группе сравнения - 0,73±0,07-109/л. Таким образом, выявлено достоверное снижение абсолютного содержания субпопуляций Т-лимфоцитов, экспрессирующих CD4-рецепторы, по сравнению с результатами здоровых женщин из группы сравнения.
В ответ на действие Кон А показатели РТМЛ у больных УГХ были понижены до 38,71±8,43 % (p<0,05) по сравнению со здоровыми женщинами (47,59±7,95 %). Проведенные исследования выявили общую для всех пациенток с УГХ тенденцию к снижению способности лимфоцитов к трансформации в бласты. Следует также отметить, что показатели спонтанной РБТЛ (171,8±21,5 имп./мин.; р<0,05) и индуцированной РБТЛ (4682,9±862,3 имп./мин.; p<0,05) были статистически значимо снижены при УГХ по сравнению с группой сравнения (316,7±28,5 имп./мин. и 6137,4±653,1 имп./мин. соответственно). Изучение аффинности Е-рецепторов Т-лимфоцитов, т. е. количества «активных» T-лимфоцитов, связывающих антиген, показало, что у больных УГХ количество всех фракций Еа-РОК было снижено (табл. 1), однако статистически достоверным оно было лишь у высокоаффинных Еа-РОК (р<0,05).
Таблица 1
Изменение аффинности Т-лимфоцитов больных урогенитальным хламидиозом (10 /л)
Г руппы Содержание Содержание Содержание
обследованных низкоаффинных среднеаффинных высокоаффинных
Ті-клеток Т2-клеток Т3-клеток
Урогенитальный хламидиоз 0,351±0,042 0,295±0,031 0,281±0,032*
Здоровые 0,361±0,047 0,329±0,056 0,368±0,041
* - показатель достоверности между женщинами с УГХ и здоровыми (р<0,05)
Из представленных в таблице данных видно, что у больных УГХ по сравнению со здоровыми женщинами снижение показателей аффинности Т1- и Т2-клеток было недостоверным (р>0,05), статистической значимости эти показатели достигали лишь у Т3-лимфоцитов (р<0,05).
Изучение функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов с помощью реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) представляет значительный интерес, так как этот показатель позволяет выявить наличие «респираторного взрыва», который возникает в нейтрофильных гранулоцитах в связи с процессом фагоцитоза. НСТ-тест не только выявляет фагоцитирующие нейтрофилы, но и характеризует их ферментные системы, поскольку интенсивность восстановления НСТ отражает энергетические процессы, обеспечивающие наработку биоокислителей с бактерицидным действием.
В связи с этим следующим этапом нашей работы явилось изучение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных УГХ. Результаты изучения показателей НСТ-теста представлены на рисунке 1.
1,39*
у.е.
□ Спонтанный НСТ-тест И Стимулированный НСТ-тест
* - показатель достоверности между женщинами с УГХ и здоровыми (р<0,05)
Рис. 1. Показатели спонтанного и стимулированного НСТ-теста у больных УГХ (у. е.)
Из данных, представленных в диаграмме, видно, что у пациенток отмечалось увеличение показателей спонтанного НСТ-теста при урогенитальном хламидиозе (р<0,05). При стимуляции количество положительно реагирующих на НСТ нейтрофилов у пациенток снижалось, что свидетельствует о снижении активности нейтрофильных гранулоци-тов к высвобождению продуктов восстановления кислорода, восстанавливающих соли НСТ до диформазана.
Поскольку стимулированный НСТ-тест является информативным методом оценки резистентности при изучении иммунного статуса организма и характеризует резервы бактерицидной функции нейтрофилов, то можно утверждать, что данная функция у больных хламидийной инфекцией женщин страдает, что приводит к хронизации инфекционного процесса в урогенитальном тракте.
Далее проводилось изучение фагоцитарной активности нейтрофилов. Активность фагоцитов выражали через фагоцитарный показатель. Фагоцитарный показатель у больных УГХ составил 53,9±3,8 % (р<0,05), в контрольной группе этот показатель равнялся 69,4±4,1 %.
Следовательно, процент нейтрофильных лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе, на фоне урогенитального хламидиоза статистически значимо снижался, что свидетельствует о нарушении процесса элиминации возбудителей и, как следствие, хронизации процесса.
Одним из важных показателей, характеризующих протективную роль системы фагоцитоза, является фагоцитарное число, отражающее способность клеток к захвату возбудителей. Установлено, что показатели фагоцитарного числа были выше контрольных значений у женщин с урогенитальным хламидиозом, однако выявленные изменения не имели статистической разницы с группой сравнения.
Определение индекса завершенности фагоцитоза (ИЗФ), наоборот, выявило значительное снижение переваривающей функции фагоцитов. Так, у больных с УГС ИЗФ был снижен до 0,87±0,07 (в группе сравнения - 1,19±0,08; р<0,05).
Таким образом, изучение фагоцитарных реакций нейтрофилов периферической крови у женщин с УГХ выявило достоверное снижение значений фагоцитарного показателя, что свидетельствует о сокращении количества нейтрофильных лейкоцитов с функциями фагоцитов. Одновременно увеличивалась способность поглощать чужеродные агенты, однако установлена резко сниженная бактерицидная активность фагоцитов.
Результаты исследования гуморального иммунитета выявили, что абсолютное количество CD19-лимфоцитов при урогенитальном хламидиозе имело статистически значимое повышение (0,653±0,049-109/л; р<0,05) по сравнению с группой здоровых лиц (0,549±0,03 7-109/л).
С целью изучения функционального состояния В-системы иммунитета определяли уровень сывороточных иммуноглобулинов А, М, G (табл. 3).
Уровень всех сывороточных иммуноглобулинов (А, М, G) у пациенток с УГХ имел тенденцию к понижению. Наиболее выраженные супрессии наблюдались в показателях ^ G (10,08±1,54 г/л) и ^ А (2,07±0,05 г/л) (р<0,05).
Это свидетельствует о развитии адаптационных механизмов, направленных на эра-дикацию инфекционных агентов, и, возможно, является своеобразной компенсаторной реакцией в ответ на недостаточную активность клеточного звена иммунной системы.
Таблица 3
Уровень сывороточных иммуноглобулинов при урогенитальном хламидиозе
Группы обследованных Показатели (г/л)
Ig А Ig М Ig G
Урогенитальный хламидиоз 2,07±0,05* 2,74±0,17 10,98±1,22*
Группа сравнения 2,28±0,07 2,76±0,10 12,35±1,11
* - показатель достоверности между больными УГХ и здоровыми (p<0,05)
Связывание антигена и антитела с образованием иммунного комплекса является одним из механизмов, направленных на элиминацию антигена из организма. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) способны присоединять компоненты комплемента и образовывать комплексы, которые вызывают гибель возбудителей инфекционного процесса. В связи с этим уровень ЦИК в сыворотке крови является одним из диагностических показателей активности и степени тяжести иммунологического процесса.
Определение уровня ЦИК выявило его изменение у всех женщин с УГХ. Установлено, что этот уровень в сыворотке крови больных УГХ значительно повышался -217,6±28,2 у. е. (p<0,05), в группе сравнения - 111,5±19,8 у. е.
Резюме. Полученные нами данные можно охарактеризовать, с одной стороны, как проявление ответа иммунной системы на урогенитальную хламидийную инфекцию, с другой стороны, как признак иммунного дисбаланса, который создает предпосылки для персистирования инфекционных агентов в половых путях женщин. Изменение количественных и/или функциональных показателей звеньев иммунной системы приводит к нарушению процесса элиминации возбудителей и, как следствие, определяет хронический характер течения урогенитального хламидиоза и развитие его осложнений.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гасанова, Т. А. Микробиоценозы при воспалительных заболеваниях репродуктивных органов женщин и перинатальной патологии : автореф. дис. ... д-ра биол. наук : 03.00.07 / Т. А. Гасанова. - Саратов, 2005. - 47 с.
2. Дмитриев, Г. А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций / Г. А. Дмитриев. - М. : Медицинская книга, 2003. - 336 с.
3. Ковалев, Ю. Н. Особенности клинико-иммунологических показателей у детей с артритами и хла-мидиозом / Ю. Н. Ковалев, И. И. Лысенко // Инфекции, передаваемые половым путем. - 1999. - № 1. - С. 54.
4. Федосеева, В. Н. Руководство по иммунологическим и аллергическим методам в гигиенических исследованиях / В. Н. Федосеева, Г. В. Порядин, Л. В. Ковальчук. - М. : Промедэк, 1999. - 319 с.
5. Фицпатрик, Т. Дерматология. Атлас-справочник / Т. Фицпатрик, Р. Джонсон, К. Вулф ; пер. с англ. - М. : Практика, 1999. - 1088 с.
6. Demidovich, C. W. Deep dermatophyte infection with chronic draining nodules in an immunocompromised patient / C. W. Demidovich, B. W. Kornfeld, R. H. Gentry // Cutis. - 2001. - No. 55 (4). - P. 237-240.
