CC BY
87
УДК 618.3-06:616.61-002.3:612.017
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА У БЕРЕМЕННЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ
А. М. Талаев1’ 2*, доктор медицинских наук,
Н. Ю. Сотникова1, 2, доктор медицинских наук,
Е. М. Талаева2, кандидат медицинских наук
1 ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России,
153012, Россия, г. Иваново, Шереметевский просп., д. 8
2 ФГБУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В. Н. Городкова» Минздрава России, 153045, Россия, г. Иваново, ул. Победы, д. 20.
РЕЗЮМЕ Проведено исследование иммунного статуса у 93 беременных с первичным хроническим пиелонефритом во втором триместре гестации. Выявлены значительные изменения показателей иммунитета пациенток с хроническим пиелонефритом по сравнению с параметрами здоровых беременных. Вне обострения заболевания изменения проявляются достоверным повышением уровней IgG, циркулирующих иммунных комплексов, спонтанной НСТ-активности нейтрофилов и уменьшением результатов индуцированного зимозаном НСТ-теста, что свидетельствует о снижении функциональных резервов иммунитета и необходимости его коррекции. При обострении воспалительного процесса в почках достоверно снижается содержание CD8+ лимфоцитов, резервы функциональной активности нейтрофилов и достоверно повышается уровень IgA, IgM, циркулирующих иммунных комплексов, спонтанной НСТ-активности нейтрофилов, что способствует длительному и упорному течению обострения заболевания.
Ключевые слова: хронический пиелонефрит, иммунология, беременность.
* Ответственный за переписку (corresponding author): [email protected]
Исследования последних лет свидетельствуют о важной роли иммунной системы как в развитии беременности, так и в течении первичного хронического пиелонефрита [1, 2, 12, 13]. Возникновению иммунной недостаточности при первичном хроническом пиелонефрите способствует продолжительная персистенция микроорганизмов в почках [4, 5, 6, 8].
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Проведено исследование иммунного статуса у 93 беременных с первичным хроническим пие-
лонефритом в сроки гестации 16-20 недель. В первую группу вошли 47 пациенток без обострения заболевания, во вторую - 46 женщин с обострением воспалительного процесса в почках. По возрасту и клинической характеристике обе группы были практически одинаковыми. Контрольную группу составили 25 здоровых беременных со сроками гестации 16-20 недель.
Иммунологические исследования проводились сотрудниками отдела клинической иммунологии ФГБУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В. Н. Городкова» Минздрава России.
PECULIARITIES OF IMMUNE STATUS IN PREGNANTS WITH CHRONIC PYELONEPHRITIS Talaev A. M., Sotnikova N. Yu., Talaeva E. M.
ABSTRACT The authors studied immune status in 93 pregnant women with primary chronic pyelonephritis in the second trimester of gestation. Considerable alterations in the immune indices were revealed in patients with chronic pyelonephritis in comparison with the same parameters of healthy pregnants. Over the exacerbation of the disease these changes manifested themselves by increase in levels of IgG, circulating immune complexes, spontaneous NBT-reduction activity of neutrocytes and zymosan-induced NSTz test that indicated the decline in functional reserves of immunity and need for its correction. The content of CD8 + lymphocytes and the reserves of functional activity of neutrocytes were reliably decreased but the levels of IgA, IgM, circulating immune complexes, spontaneous NBT activity of neutrophils were reliably increased in the exacerbation of kidney inflammatory process. It was conducive to the prolonged and persistent course of acute illness.
Key words: chronic pyelonephritis, immunology, pregnancy.
Кровь для исследования бралась в утренние часы из локтевой вены в объёме 10 мл. Выделение мононуклеарных клеток осуществлялось стандартным методом путём скоростного центрифугирования при градиенте плотности фиколла -верографина d 1,078. Экспрессию CD-маркеров на поверхности лимфоцитов определяли методом проточной цитофлюорометрии на аппарате «FACScan» («Becton Dickinson», USA). Для ме-чения клеток периферической крови использовались следующие моноклональные антитела, конъюгированные с FITC и PE: CD3, CD4, CD8, CD16, CD 22, CD25, CD11b, HLA-DR («Медбио-спектр», Москва). Анализ результатов проводился по программе «LYSYS II». Оценивалось содержание зрелых Т-лимфоцитов (CD3), Т-хелперов (CD4), цитотоксических клеток (CD8), естественных киллеров (CD16), параметров активации (CD25, CD11b, HLA-DR), соотношение числа CD4 и CD8 (ИРИ). Определялся уровень иммуноглобулинов G, A, M в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии по Манчини; уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови осадочным методом в 4%-ном растворе полиэтиленгликоля с последующей спектрофотометрией. Устанавливалась функцио-
нальная активность нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте и после нагрузки зимозаном, а также индекс нейтрофильной активности (ИНА).
результаты и обсуждение
Содержание основных популяций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD22+) и показателей экспрессии маркеров активации и адгезии лимфоцитов (CD25+, HLA-DR+, CD11b+) существенно не отличалось у женщин первой группы от значений контроля (р > 0,05 во всех случаях) (табл.). Полученные результаты, отражающие нормальный уровень Т-лимфоцитов в периферической крови у женщин с хроническим пиелонефритом вне обострения, совпадают с данными других исследований [6, 7, 9].
При анализе показателей гуморального звена иммунитета было выявлено статистически значимое повышение содержания IgG у беременных первой группы (р < 0,01) и отсутствие статистически значимой разницы в уровне IgA, IgM (р > 0,05 во всех случаях) по сравнению с показателями здоровых беременных, что, по-видимому, связано с хронизацией процесса в почках. Кроме того, при беременности, протекающей на фоне
Таблица. Характеристика иммунного статуса беременных в 16-20 недель гестации
Показатель Беременные с хроническим пиелонефритом вне обострения (п = 47) Беременные с обострением хронического пиелонефрита (п = 46) Контроль (n = 25)
CD3+, % 71,25 ± 1,39 62,55 ± 2,96 68,83 ± 1,09
CD4+, % 41,24 ± 1,46 39,68 ± 1,49 39,48 ± 0,82
CD8+, % 21,26 ± 1,52 15,69 ± 1,22** 23,07 ± 0,91
CD16+, % 9,87 ± 0,89 10,61 ± 1,19 11,74 ± 0,38
CD22+, % 7,48 ± 0,38 7,85 ± 0,48 * 6,17 ± 0,49
CD25+, % 7,22 ± 0,51 6,55 ± 0,21 6,19 ± 0,64
HLA-DR, % 9,11 ± 0,95 8,99 ± 0,83 9,83 ± 0,42
CD11b+, % 13,15 ± 1,02 10,63 ± 0,82 12,54 ± 0,96
IgA, г/л 1,68 ± 0,09 1,84 ± 0,09* 1,43 ± 0,07
IgM, г/л 1,20 ± 0,08 1,53 ± 0,08** 1,00 ± 0,05
IgG, г/л 13,29 ± 0,97* 10,92 ± 0,95 8,80 ± 0,89
ЦИК, % 4,01 ± 0,32** 3,85 ± 0,42** 1,69 ± 0,34
НСТ, % 20,27 ± 1,52* 24,95 ± 2,11** 13,77 ± 1,41
НСТз, % 31,33 ± 1,32** 36,79 ± 1,82 40,00 ± 2,54
ИНА 0,51 ± 0,12** 0,48 ± 0,22* 1,89 ± 0,33
Примечание. Статистическая значимость различий между показателями беременных с хроническим пиелонефритом и здоровых женщин: * - р < 0,05, ** - р < 0,01.
первичного хронического пиелонефрита вне обострения, содержание ЦИК было выше (р < 0,01), чем у здоровых беременных, что обусловлено наличием воспалительного процесса.
Иммунный статус беременных с первичным хроническим пиелонефритом вне обострения также отличался более высоким уровнем спонтанной НСТ-активности нейтрофилов (р < 0,01), достоверным снижением показателей индуцированного зимозаном НСТ-теста и ИНА (р < 0,05 в обоих случаях). Увеличение спонтанной НСТ-активности нейтрофилов, по-видимому, связано с тем, что фагоциты первыми реагируют на микробную инфекцию. Ключевым звеном в цепи реакций, приводящих к восстановлению нитро-синего тетразолия, является активация НАДФН-оксидазы в плазменной мембране нейтрофилов, что ведёт к синтезу высокоактивных форм кислорода, в частности гидроксильного радикала [10, 12, 13]. Снижение уровня ИНА, возможно, обусловлено угнетением резервных возможностей полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови. В литературе имеются данные о том, что отсутствие реакции фагоцитов на дополнительную стимуляцию является неблагоприятным показателем, чаще всего свидетельствующим о переходе воспалительного процесса в хроническую форму [6, 9, 13]. Снижение показателя стимулированного НСТ-теста может свидетельствовать о неспособности нейтрофилов к завершенному фагоцитозу.
Таким образом, иммунологические показатели обследованных беременных с первичным хроническим пиелонефритом вне обострения отличались от показателей контроля достоверным повышением уровней IgG, ЦИК, спонтанной НСТ-активности нейтрофилов и достоверным снижением ИНА и результатов индуцированного зимозаном НСТ-теста. При таких показателях дополнительная нагрузка на организм женщины при беременности могла спровоцировать обострение хронического воспалительного процесса в почках.
У беременных с обострением первичного хронического пиелонефрита выявлено достоверное снижение содержания цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+) (р < 0,001) и тенденция к снижению уровня CD3+ клеток (р > 0,05) по сравнению с таковыми у здоровых беременных (табл.). В содержании основных популяций лимфоцитов (CD4+, CD16+, CD22+) при первичном хроническом пиелонефрите в стадии обострения существенных отличий от показателей контрольной группы не наблюдалось (р > 0,05 во всех случаях). Аналогичные данные об уменьшении уровня Т-лимфоцитов (CD3+) и CD8+ клеток в активной фазе хронического пиелонефрита при-
водят и другие исследователи [6, 7, 9, 11]. По нашему мнению, снижение относительного содержания Т-клеток может свидетельствовать об остроте процесса, поскольку имеются данные о таком явлении в острой стадии инфекционновоспалительного заболевания [3, 7, 15].
Анализ экспрессии маркеров активации и адгезии лимфоцитов у беременных с первичным хроническим пиелонефритом в стадии обострения по сравнению со здоровыми беременными не выявил достоверных различий в содержании CD25+, HLA-DR+, CD11b+ клеток (р > 0,05).
При анализе показателей гуморального звена иммунитета при обострении первичного хронического пиелонефрита у беременных было выявлено достоверное повышение количества сывороточного IgA (р < 0,05), IgM (р < 0,01), уровня ЦИК (р < 0,05) и отсутствие достоверной разницы в уровне IgG (р > 0,05) по сравнению с показателями здоровых. Полученные результаты согласуются с научными данными о возрастании уровней IgA и IgM в активной фазе пиелонефрита [9, 11, 14]. Увеличение содержания ЦИК, IgA, IgM свидетельствует об активации иммунной реакции гуморального типа в результате развития воспалительного процесса.
Иммунный статус беременных с пиелонефритом в стадии обострения отличался от такового у здоровых беременных высоким уровнем спонтанной НСТ-активности нейтрофилов (р < 0,05) при отсутствии существенных различий в показателях индуцированного зимозаном НСТ-теста (р > 0,05). ИНА при этом был существенно ниже у беременных с обострением пиелонефрита (р < 0,05) по сравнению контролем. Полученные результаты не противоречат данным других исследований [2, 6, 12]. Высокий уровень спонтанной НСТ-активности нейтрофилов связан со стимуляцией фагоцитов в ответ на действие инфекционных агентов. Снижение ИНА свидетельствует об угнетении резервных возможностей палочкоядерных лейкоцитов [10].
выводы
У беременных с первичным хроническим пиелонефритом наблюдаются значительные изменения показателей иммунитета по сравнению с параметрами здоровых беременных. Вне обострения заболевания изменения проявляются достоверным повышением уровня IgG, циркулирующих иммунных комплексов, спонтанной НСТ-активности нейтрофилов и уменьшением индуцированного зимозаном НСТ-теста, что свидетельствует о снижении функциональных резервов иммунитета и необходимости его коррекции.
При обострении воспалительного процесса в почках достоверно снижается содержание CD8+ лимфоцитов, резервы функциональной активности нейтрофилов и достоверно повышаются уровень
IgA, IgM, циркулирующих иммунных комплексов, спонтанной HCT-активности нейтрофилов, что связано с длительным и упорным течением обострения заболевания.
литература
1. Беляева, Н. В. Клинико-иммунологические особенности беременности в 18-20 и 21-22 недели и периода после её прерывания у женщин различных возрастных групп / Н. В. Беляева, И. К. Богатова, Н. Ю. Сотникова // Репродуктивное здоровье детей и подростков. - 2009. - № 1. - С. 75-80.
2. Иммунологическая загадка беременности / под ред. Н. Ю. Сотниковой. - Иваново : МИК, 2005. - 276 с.
3. Крошкина, Н. В. Изменения содержания Тгед в периферической крови женщин I триместра при привычном невынашивании беременности / Н. В. Крошки-на, С. И. Чухина, Е. Л. Бойко // Вестн. Уральской медицинской академической науки. - 2010. - № 2/1 (29). Тематический вып. по аллергологии и иммунологии. - С. 155-156.
4. Кулаков, В. И. Научно-практические итоги диагностики и лечения пиелонефрита беременных и родильниц (30-летний опыт) / В. И. Кулаков, Б. Л. Гуртовой, А. И. Емельянова // Акушерство и гинекология. - 2005. - № 6. - С. 3-8.
5. Макаров, И. О. Оценка эффективности цефексима (супракс) при неосложнённом гестационном пиелонефрите / И. О. Макаров, Е. И. Боровкова, Т. Р. Ше-манаева // Рос. вестн. акушера-гинеколога. - 2011.
- № 1. - С. 67-72.
6. Петричко, М. И. Инфекции мочеполовой системы у беременных женщин / М. И. Петричко, Г. В. Чижова.
- Новосибирск : Наука, 2002. - 268 с.
7. Роль урогенитальной инфекции в развитии акушерской и перинатальной патологии / Н. Ю. Сотникова [и др.] // Рос. иммунологический журн. - 2007. - Т. 9, № 4. - P. 99-100.
8. Серов, В. Н. Гестационный пиелонефрит: диагностика, профилактика, лечение / В. Н. Серов,
B. Л. Тютюнник // РМЖ. - 2008. - Т. 16, № 1. -
C. 10-13.
9. Сидорова, И. С. Особенности системного и локального иммунодефицита у беременных с обострением хронического пиелонефрита / И. С. Сидорова, М. Р. Бабина // Рос. вестн. акушера-гинеколога. -2002. - № 6. - С. 27-30.
10. Сухих, Т. Г. Иммунология беременности / Т. Г. Сухих, Л. В. Ванько. - М. : Изд-во РАМН, 2003. - 398 с.
11. Тареева, И. Е. Нефрология : рук-во для врачей. -М.: Медицина, 2000. - 688 с.
12. Ширшев, С. В. Иммунология материнско-фетальных взаимодействий / С. В. Ширшев. - Екатеринбург : УрО РАН, 2009. - 582 с.
13. Шмагель, К. В. Иммунитет беременной женщины / К. В. Шмагель, В. А. Черешнев. - М., 2003. - 226 с.
14. Inders, P. Pregnancy and renal disease / P. Inders,
D. Chanvean // Kidney int. - 1997. - Vol. 52, № 6. -P. 87-88.
15. Lymphocyte subpopulation in pregnancy complicaited by hypertension / F. Mahmound [et al.] // J. Obstet. Gynecol. - 2003. - Vol. 23, № 1. - P. 20-21.
