CC BY
25
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ТЕХНОЛОГИИ
УДК 616.33 - 018.73: 6161.9] - 053.2
ОСОБЕННОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ HELICOBACTER PYLORI У ПОДРОСТКОВ
И. С. Кормщиков1, Е. М. Спивак1*, Р. М. Левит2
1Ярославская государственная медицинская академия, 2Детская клиническая больница № 1, г. Ярославль, Россия
PECULIARITIES OF CHRONIC INFLAMMATORY PROCESS IN GASTRIC MUCOSA DEPENDING ON MOLECULAR-GENETIC CHARACTERISTIC OF HELICOBACTER PYLORI IN ADOLESCENTS
I. S. Kormschikov1, E. M. Spivak1', R. M. Levitt2
1Yaroslavl State Academy of Medicine, 2Children's Clinical Hospital №1, Yaroslavl, Russian Federation
Цель. Установить особенности хронического воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка у подростков в зависимости от молекулярно-генетических характеристик Helicobacter pylori (Нр) для оптимизации диагностики данной патологии.
Материалы и методы. Проведено эндоскопическое и морфологическое обследование 56 подростков в возрасте 15-18 лет с Нр-ассоциированным хроническим гастродуоденитом. На материале гастробиоптатов осуществлено генетическое типирование Нр.
Результаты. Установлена значительная частота (42,86 %) высокопатогенных штаммов Нр с выявлением VacA, CagA, IceA, BabA и UreI-субъединицы уреазы. Доказано, что воспалительный процесс при наличии Нр с такими молекулярно-генетическими характеристиками имеет большую выраженность и активность. Степень воспаления прямо коррелирует с возникновением микроэрозий, очагов гиперплазии и морфологических признаков начальной атрофии слизистой оболочки желудка. Ключевые слова. Слизистая оболочка желудка, воспаление, Helicobacter pylori, подростки.
Aim. To establish the peculiarities of chronic inflammatory process in gastric mucosa depending on molecular-genetic characteristic of Helicobacter pylori (Hp) in adolescents.
© Кормщиков И. С., Спивак Е. М., Левит Р. М., 2014 e-mail: [email protected] тел.: 8 (4852) 44-32-17
[Кормщиков И. С. - ассистент кафедры патологической физиологи; Спивак Е. М. (*контактное лицо) -доктор медицинских наук, профессор кафедры факультетской педиатрии с пропедевтикой детских болезней; Левит Р. М. - заведующая диагностическим отделением, кандидат медицинских наук].
Пермский медицинский журнал
2014 том XXXIII № 5
Materials and methods. Endoscopic and morphological examination of 56 adolescents aged 15-18 years with .Hp-associated chronic gastroduodenitis was carried out. Genetic typing of Hp was performed in gastrobiopsy material.
Results. High frequency (42,86 %) of high-pathogenic Hp strains with detection of VacA, CagA, IceA, BabA and Urel-subunit of urease was stated. Inflammatory process involving Hp with such molecular-genetic characteristics was proved to be well marked and active. The degree of inflammation directly correlates with occurrence of microerosions, hyperplasia foci and morphological signs of initial gastric mucosa atrophy. Key words. Gastric mucosa, inflammation, Helicobacter pylori, adolescents.
Введение
В настоящее время ведущим этиологическим и патогенетическим фактором хронической патологии верхних отделов пищеварительного тракта считается инфекция Helicobacter pylori (Нр). Ее распространенность в популяции детей и подростков весьма высока. По данным репрезентативного исследования, проведенного в одном из регионов России, Нр выявляется у 548 человек на 1000 в возрастной группе 3-18 лет [4].
Несмотря на значительную частоту пи-лорического хеликобактериоза, далеко не у всех инфицированных лиц имеют место клинические и морфологические проявления патологии. Поэтому важнейшей практической задачей является определение моле-кулярно-генетических особенностей микроорганизма. Это связано с тем, что характер воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка (СОЖ) зависит от генотипов Нр, которые имеют различную вирулентность. К генам, обусловливающим высокую патогенность Нр, относят VacA, CagA, IceA, BabA. Их присутствие ассоциируется со значимыми гастродуоденальными заболеваниями, в первую очередь - язвенной болезнью, атрофическим гастритом и аденокарцино-мой желудка. Следовательно, типирование Нр имеет большое значение для выработки терапевтической тактики и оценки прогноза у этой категории больных [1].
В практической гастроэнтерологии такое исследование производится очень редко,
что формализует диагностический и лечебный процесс, способствуя снижению эффективности антихеликобактерной терапии.
Цель работы - установить особенности хронического воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка у подростков в зависимости от молекулярно-генетических характеристик Helicobacter pylori для оптимизации диагностики указанной патологии.
Материалы и методы
ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для работы послужили данные обследования 56 подростков в возрасте от 15 до 18 лет, в том числе 31 юноши и 25 девушек. У всех пациентов в условиях специализированного гастроэнтерологического стационара верифицирован диагноз «хронический гастродуоденит (ХГД), ассоциированный с Нр».
Кроме стандартного клинико-эндоско-пического обследования дизайн работы предусматривал морфологическую оценку гаст-робиоптатов из тела и антрального отдела желудка с применением визуально-аналоговой шкалы.
Нр выявляли с помощью быстрого уре-азного теста, полимеразной цепной реакции (ПЦР), бактериоскопии гастробиоптатов. Дополнительно определяли также уровень анти-Нр-IgG (иммуноферментный анализ, набор Biohit, Финляндия). Для молекулярно-генетической характеристики Нр использовали отечественные тест-системы фирмы «ДНК-Технология».
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ТЕХНОЛОГИИ
Математическая обработка цифрового материала осуществлялась с помощью пакета прикладных программ 81а1Р1ш 2009.
Результаты и их обсуждение
Практически у половины пациентов (42,86 %) выявлены штаммы Нр, в геноме которых имеется так называемый «островок патогенности» - РА1. Чаще других (в 33,9 % случаев) обнаруживался вакуолизирующий цитотоксин А (УаеА). Известно, что он стимулирует поступление из внеклеточного пространства внутрь эпителиоцитов аммиака и других веществ, притягивающих воду. В результате внутриклеточно образующиеся вакуоли набухают, сливаются между собой, что приводит к разрыву цитоплазматиче-ской мембраны и гибели клетки. Кроме того, УаеА способствует увеличению секреции пепсиногена I, ингибирует пролиферацию эпителия, повреждает митохондрии и обла-
дает рядом других цитопатологических эффектов [3].
У каждого пятого подростка (21,4 %) регистрировали ген цитотоксичности - IceA (induced by contact with epithelium). Такие факторы патогенности, как CagA (цитоток-синассоциированный ген, кодирующий образование одноименного протеина) и BabA (blood-group associated binding adhesion, относящийся к группе адгезинов) встречались значительно реже (у 12,5 и 8,9 % больных соответственно).
Последующий анализ показал, что при Яр-ассоциированном гастродуодените у подростков имеется тесная сопряженность молекулярно-генетических особенностей инфекта и выраженности процесса в СОЖ. Это заключается в том, что доля больных, у которых обнаруживаются штаммы Яр с факторами патогенности, достоверно возрастает по мере увеличения степени воспаления (табл. 1).
Таблица 1
Частота выявления факторов патогенности Нр у подростков с хроническим гастродуоденитом в зависимости от выраженности хронического воспаления слизистой
оболочки желудка (%)
Характеристика хронического воспаления слизистой оболочки желудка Факторы патогенности Яр
UreI CagA BabA VacA IceA
Незначительное 14,8 3,7 0,0 14,8 7,4
Умеренное 60,0** 10,0 0,0 50,0* 10,0
Выраженное 47,4* 26,3* 26,3*** 52,6** 47,4***
Примечание: здесь и в табл. 2 * - р<0,05; ** - р<0,01 и *** - р<0,005.
Хорошо известно, что особенностью Нр является способность продуцировать уреазу. Расщепляя мочевину до углекислого газа и аммиака, этот фермент нейтрализует соляную кислоту желудочного сока, в результате чего локально снижается рН, что создает для бактерии благоприятную среду обитания [2]. Структура уреазы весьма сложна и содержит ряд субъединиц, среди которых выделяется №е1, имеющая отношение к перемещению мочевины в цитоплазму Нр. Сле-
довательно, наличие №е1 наряду с перечисленными составляющими РА1 является дополнительным маркером высокой патоген-ности Нр.
По нашим данным, при наличии умеренного или выраженного воспаления в СОЖ №е1 обнаруживается более чем у половины больных (51,7 %), тогда как при незначительном процессе - только в 14,8 % случаев (р<0,01).
Пермский медицинский журнал
2014 том XXXIII № 5
Морфологическая оценка гастробиоп-татов показала, что микроэрозии и очаги гиперплазии СОЖ характерны для пациентов с выраженным процессом. Частота указанных изменений в этой клинической группе составила 42,1 и 57,9 %, что существенно выше, чем у подростков с умеренным или незначительным воспалением (р<0,005). Появление признаков начальной атрофии
СОЖ антрального отдела также прямо связано с выраженностью воспаления. При незначительном процессе они выявлялись у трети подростков (33,3 %), при умеренном -у 60 % (р>0,05), а при выраженном - у всех больных (р<0,005). Обнаружена сопряженность симптомов начальной атрофии с наличием Са^ ^ = +0,35, р<0,01) и 1сеА ^ = = +0,50, р<0,001).
Таблица 2
Характер корреляционных связей факторов патогенности Нр с выраженностью и активностью воспаления слизистой оболочки антрального отдела желудка у подростков с хроническим гастродуоденитом (коэффициент ранговой корреляции Спирмена - Я)
Характеристика хронического воспаления слизистой оболочки желудка Факторы патогенности Нр
UreI CagA BabA VacA IceA
Выраженность 0,34 0,30 0,39 0,37 0,46
Активность - 0,39 0,42 - 0,50
Примечание: все значения R достоверны.
Результаты корреляционного анализа взаимосвязей между характеристиками процесса в СОЖ и молекулярно-генетическими особенностями Нр представлены в табл. 2. Установлено, что наличие высокопатогенных штаммов Нр способствует увеличению выраженности и активности хронического воспаления слизистой оболочки желудка.
Выводы
1. Высокопатогенные штаммы Нр выявляются у 42,86 % подростков с хроническим гастродуоденитом: при этом треть пациентов является VacA-позитивными, а каждый пятый - 1сеА-позитивным. Такие факторы патогенности, как CagA и БаЬА, встречаются значительно реже.
2. Хронический гастродуоденит, ассоциированный с Нр, в геноме которого обнаруживаются VacA, CagA, 1сеА, БаЬА, а также №е1-субъединица уреазы, характеризуется большей выраженностью и активностью воспаления слизистой оболочки желудка.
3. Частота микроэрозий, очагов гиперплазии и морфологических признаков на-
чальной атрофии слизистой оболочки желудка прямо коррелирует со степенью воспалительного процесса.
Библиографический список
1. Барышникова Н. В. Клинико-микробиологи-ческая характеристика микробиоценоза кишечника и коррекция его нарушений у больных хроническим гастродуоденитом, ассоциированным с Helicobacter pylori:: автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб., 2006; 3-9.
2Ивашкин В. Т., Мегро Ф., Лапина Т. Л. Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. М.: Триада Х 1999; 255
3. Исаков В. А Молекулярно-генетические ос-
новы патогенности Helicobacter pylori. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колонопроктологии 2002; 12: 82-85.
4. Кораблева Э. В. Клинико-эпидемиологичес-
кие особенности Helicobacter pylori инфекции у детей и подростков: автореф. дис. . канд. мед. наук. Владивосток 2010; 3-15.
Материал поступил в редакцию 20.08.02014
