Особенности хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных раком прямой кишки в динамике Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Medical Immunology (Russia)/ Медицинская иммунология СООбШ,@НЫЯ Meditsinskaya Immunologiya

2019, Т. 21, № 1, стр. 157-164 . . 2019, Vol. 21, No 1, pp. 157-164

© 2019, СПбРО РААКИ ShOVt COmmUniCtttlOnS © 2019, SPb RAACI

ОСОБЕННОСТИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРЯМОЙ КИШКИ В ДИНАМИКЕ

Смирнова О.В.1, Каспаров Э.В.1, Перепечай Я.И.1, Несытых А.А.2, Беляев В.С.2

1 Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера — обособленное подразделение ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук"», г. Красноярск, Россия

2 КГБУЗ «Красноярский краевой клинический онкологический диспансер имени А.И. Крыжановского», г. Красноярск, Россия

Резюме. Рак прямой кишки — одно из самых распространенных злокачественных заболеваний не только в России, но и во всем мире, составляет 5-6% всех злокачественных опухолей человека. Ней-трофильные гранулоциты активно вовлекаются в реализацию противоопухолевого ответа. Ключевую роль в регрессии опухоли отводят активным формам кислорода, продуцируемым нейтрофилами.

В связи с этим целью нашей работы явилось изучение особенностей спонтанной и индуцированной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных раком прямой кишки до начала патогенетической терапии и в динамике.

В работе приведены результаты лабораторного исследования показателей функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов 36 больных раком прямой кишки, больные находились на разных стадиях онкологического процесса. Контрольная группа состояла из 112 практически здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с группой обследованных больных. Объектом исследования служила венозная кровь, которую брали у пациентов из локтевой вены в вакуумные пробирки с литий-гепарином утром натощак до проведения оперативного лечения и на 7 сутки после операции. Оценку спонтанной и индуцированной хемилюминесценции осуществляли в течение 90 минут на 36-канальном хемилюминесцентном анализаторе "CL 3606" (Россия). Определялись следующие характеристики: время выхода кривой на максимум интенсивности хемилюминесценции (Tmax), максимальное значение интенсивности хемилюминесценции (Imax), площадь под кривой хемилюминесценции (S). В качестве усилителя хемилюминесценции использовали люминол. Индуктором респираторного взрыва служил опсонизированный зимозан. Усиление хемилюминесценции, индуцированной опсонизированным зимозаном, оценивали по соотношению площади индуцированной (SH4I].) к площади спонтанной ^спонт) хемилюминесценции и обозначали индексом активации.

Анализ хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов показал достоверное увеличение активности спонтанной хемилюминесценции на III и IV стадиях заболевания. Индуцированная опсонизированным зимозаном продукция активных форм кислорода нейтрофильными гранулоцитами повышается во всех исследуемых группах относительно контрольных параметров.

Адрес для переписки:

Смирнова Ольга Валентиновна

Научно-исследовательский институт медицинских

проблем Севера

660022, Россия, г. Красноярск,

ул. Партизана Железняка, 3г.

Тел.: 8 (913) 567-97-19.

E-mail: [email protected]

Address for correspondence:

Smirnova Olga V.

Research Institute of Medical Problems of the North 660022, Russian Federation, Krasnoyarsk, Partizan Zheleznyak str, 3g. Phone: 7 (913) 567-97-19. E-mail: [email protected]

Образец цитирования:

О.В. Смирнова, Э.В. Каспаров, Я.И. Перепечай, А.А. Несытых, В.С. Беляев «Особенности хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных раком прямой кишки в динамике» // Медицинская иммунология, 2019. Т. 21, № 1. С. 157-164. doi: 10.15789/1563-0625-2019-1-157-164 © Смирнова О.В. и соавт., 2019

For citation:

O.V. Smirnova, E.V. Kasparov, Ya.I. Perepechay, A.A. Nesytykh, V. Belyaev. "Features of neutrophil chemiluminescence in the patients with advanced rectal cancer", Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya, 2019, Vol. 21, no. 1, pp. 157-164. doi: 10.15789/1563-0625-2019-1-157-164

DOI: 10.15789/1563-0625-2019-1-157-164

Площадь под кривыми спонтанной и индуцированной хемилюминесценции у больных раком прямой кишки на всех стадиях онкологического процесса меньше по отношению к контрольной группе, что, несмотря на высокие показатели максимальной активности хемилюминесценции, может свидетельствовать о недостаточной суммарной продукции активных форм кислорода. Показатели времени выхода на максимум кривых хемилюминесценции у больных раком прямой кишки на всех стадиях заболевания не имели статистически значимых различий от группы контроля.

Ключевые слова: спонтанная хемилюминесцентная активность, индуцированная хемилюминесцентная активность нейтрофильные гранулоциты, рак прямой кишки

FEATURES OF NEUTROPHIL CHEMILUMINESCENCE IN THE PATIENTS WITH ADVANCED RECTAL CANCER

Smirnova O.V.a, Kasparov E.V.a, Perepechay Ya.I.a, Nesytykh A.A.b, Belyaev V.S.b

a Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences, Krasnoyarsk, Russian Federation

b Krasnoyarsk Regional A.I. Kryzhanovsky Clinical Cancer Center, Krasnoyarsk, Russian Federation

Abstract. Colorectal cancer is one of the most common malignant diseases in Russia worldwide making up 5-6% of all human malignant tumors. Neutrophilic granulocytes are actively involved in development of antitumor response. A key role in tumor regression is assigned to active forms of oxygen produced by neutrophils. In connection with these pre-requisites, our goal was to study functional characteristics of spontaneous and induced chemiluminescent activity of neutrophil granulocytes in patients with rectal cancer before starting pathogenetic therapy and in subsequent dynamics. The paper presents some laboratory results, i.e., functional indices of neutrophilic granulocytes' activity in 36 patients with rectal cancer being at different stages of oncological process. The control group consisted of 112 practically healthy volunteers, comparable in sex and age to the group of patients under study. To perform the study venous blood was taken from patients to vacuum test tubes with lithium heparin in the morning time before surgical treatment, and on day 7 after the surgical intervention. Evaluation of spontaneous and induced chemiluminescence was performed for 90 minutes in a 36-channel "CL 3606" chemiluminescence analyzer (Russia). The following characteristics were determined: time of the curve transition to maximal chemiluminescence intensity (Tmax), maximal value of chemiluminescence intensity (Imax), integral area under the chemiluminescence curve (S). Luminol was used as the chemiluminescence enhancer. Opsonized zymosan was used to induce the respiratory explosion. Chemiluminescence amplification induced by opsonized zymosan was evaluated by the ratio of induced-to-spontaneous chemiluminescence (Sind/spont) designated as an activation index.

Analysis of chemiluminescence activity in neutrophilic granulocytes showed a significant increase in spontaneous chemiluminescence activity at the stages III and IV of the disease. The production of active oxygen forms induced in neutrophilic granulocytes by opsonized zymosan increased in all the study groups, relative to control parameters. The area under the curves of spontaneous and induced chemiluminescence in patients with colorectal cancer at all stages of the oncological process is less, as compared to the control group, which, despite high indices of maximal chemiluminescence activity, may indicate insufficient total production of reactive oxygen species. The time-to-peak values of the chemiluminescence curves in patients with rectal cancer at all stages of the disease did not show statistically significant differences from the control group.

Keywords: spontaneous chemiluminescent activity, induced chemiluminescent activity, neutrophil granulocytes, rectal cancer

Введение прямой кишки занимает от 4 до 6% всех злокачественных опухолей человека [5]. В России среди

Рак прямой кишки (рпк) - сегодня одно онкологических больных рак прямой кишки со-

из самых распространенных злокачественных за- ставляет 8,7%. Подавляющее число заболевших

болеваний не только в России, но и во всем мире находится в возрасте старше 50 лет [1].

рост заболеваемости раком прямой кишки наи- Раковые опухоли прямой кишки характеризу-

более выражен в экономически развитых странах. ются медленным ростом и постепенным появле-

В структуре онкологической заболеваемости рак нием клинических симптомов. Выраженные про-

явления болезни возникают тогда, когда опухоль достигает больших размеров. Одним из первых, но вместе с тем достаточно поздним проявлением заболевания являются выделения из прямой кишки слизи, а затем крови и гноя [8]. До 80% больных поступают в клинику с III и IV стадиями заболевания, а у каждого третьего больного из числа оперированных диагностируют отдаленные метастазы, преимущественно в печень (до 70%) [3].

Важнейшим звеном патогенеза рака прямой кишки, как и новообразований иной локализации, является процесс взаимодействия генетически измененной опухолевой ткани с иммунной системой организма человека. Нейтрофильные гранулоциты активно вовлекаются в реализацию противоопухолевого ответа — участвуют в уничтожении мутировавших клеток и первыми из клеток иммунной системы мигрируют к опухоли на ранних стадиях ее формирования [7]. Нейтрофильные гранулоциты способны осуществлять как непосредственную цитотоксич-ность, которая проявляется при активации секретной дегрануляции, респираторного взрыва, антителозависимой клеточной цитотоксичности, так и опосредованную с помощью привлечения других клеток иммунной системы [7].

Одним из первых этапов взаимодействия организма с чужеродным объектом являются реакции неспецифического иммунитета, в частности респираторный взрыв. При этом потребление кислорода фагоцитом может увеличиться в течение нескольких секунд во много раз. В результате дыхательного взрыва образуются цитотоксич-ные метаболиты кислорода, свободные радикалы и перекисные продукты органических и неорганических соединений [2]. Образование АФК происходит в мембране фаголизосом за счет инициации фермента NADPН-оксидазы [6].

В то же время злокачественная опухоль неоднозначно влияет на функцию НГ, уменьшает их хемотаксическую активность, подавляя адаптивный иммунитет [10, 11, 12]. Несомненно, что от состояния противоопухолевого иммунитета будут зависеть как распространенность, так и скорость прогрессирования онкологического заболевания [4]. Продукция активных форм кислорода (АФК) нейтрофилами направлена на уничтожение чужеродных объектов, при этом низкая продукция АФК может указывать на недостаточность защитного потенциала организма [5, 8]. Следовательно, способность нейтрофильных гранулоцитов продуцировать достаточное количество АФК может служить прогностическим признаком для оценки защитных сил организма [13]. Существуют различные способы оценки образования АФК, одним из наиболее чувстви-

тельных является хемилюминесцентный метод. В качестве активаторов хемилюминесценции (ХЛ) наиболее широко используются люминол и люцигенин. Известно, что существует химическая специфичность активаторов: люминол вступает в реакцию с АФК образуемыми различными ферментами, а люцигенин — только с супероксидным анион-радикалом. В качестве неспецифического индуктора дыхательного взрыва в хемилюминесцентной реакции применяют зимозан, который представляет собой полисахарид, получаемый из культуры Saccharomyces cerevisiae [14]. Целью нашего исследования явилось изучение особенностей спонтанной и индуцированной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных раком прямой кишки до начала патогенетической терапии и в динамике.

Материалы и методы

В исследование включены 36 больных раком прямой кишки в возрасте от 26 до 78 лет. Средний возраст обследованных больных составил 61±11,5 лет. Среди пациентов с РПК мужчин было 43%, а женщин 57%. На I и II стадии заболевания находились 50% исследуемых больных (5 человек на I стадии и 13 человек на II стадии), на III стадии — 25% (9 пациентов) и на IV стадии — 25% (9 пациентов). Всем пациентам выполнена морфологическая верификация опухоли: высокодиф-ференцированная аденокарцинома выявлена у 6 больных, умеренно дифференцированная — у 24, низкодифференцированная — у 4, перстневидно-клеточный рак — у 1 больного, плоскоклеточный рак — у 1 больного. Всем больным выполнено хирургическое вмешательство в различных объемах. Контрольная группа состояла из 112 практически здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с группой обследованных больных. Группа контроля была отобрана при профилактических осмотрах в ЛПУ города Красноярска. Исследование проводилось с разрешения этического комитета КГБУЗ «Красноярский краевой клинический онкологический диспансер им. А.И. Крыжановского» и ФГБНУ ФИЦ КНЦ СО РАН «НИИ медицинских проблем Севера», каждый участник исследования подписал форму добровольного информированного согласия. Объектом исследования служила венозная кровь, которую брали у пациентов из локтевой вены в вакуумные пробирки с литий-гепарином утром натощак до проведения оперативного лечения и на 7 сутки после операции.

В качестве метода изучения противоопухолевой активности нейтрофильных гранулоцитов использовался хемилюминесцентный анализ спонтанной и индуцированной продукции АФК

НГ больных РПК. Оценку спонтанной и индуцированной хемилюминесценции осуществляли в течение 90 минут на 36-канальном хемилюми-несцентном анализаторе "CL 3607" (Россия). Регистрация результатов и управление анализатором осуществлялись через персональный компьютер. Определялись следующие характеристики: время выхода кривой на максимум интенсивности хемилюминесценции (Tmax), максимальное значение интенсивности хеми-люминесценции (Imax), площадь под кривой хемилюминесценции (S). В качестве усилителя хемилюминесценции использовали люминол. Индуктором респираторного взрыва служил оп-сонизированный зимозан. Усиление хемилюми-несценции, индуцированной опсонизированным зимозаном, оценивали по соотношению площади индуцированной (SH4D.) к площади спонтанной (Scnom-.) хемилюминесценции и обозначали индексом активации [9].

Статистическая обработка данных проводилась с помощью пакетов прикладных программ Statistica 8.0 (StatSoft Inc., США, 2008). Для всех данных определяли медиану (Me) и персинтили (Q025-Q0 75), статистическую значимость различий определяли с использованием рангового критерия Манна—Уитни.

Результаты и обсуждение

Люминол-зависимая хемилюминесценция формируется в системе миелопероксидазы и отражает суммарную активность кислородных и других радикалов. Анализ хемилюминесцент-ной активности нейтрофильных гранулоцитов показал достоверное увеличение активности спонтанной хемилюминесценции на III и IV стадиях заболевания. На I и II стадии РПК спонтанная хемилюминесцентная активность НГ не имела достоверных отличий от контрольной группы, на III стадии спонтанная хемилюминес-центная активность НГ превышала показатели контрольной группы в 2,49 раза (p < 0,05), а на IV стадии в 2,83 раза (p < 0,05). Площадь под кривой спонтанной хемилюминесцентной активности НГ у больных РПК на всех стадиях была меньше относительно группы здоровых людей, на I-II стадии в 5,25 раза (p < 0,001), на III стадии в 4,56 раза, а на IV стадии в 4,79 раза (p < 0,001). Время выхода кривой спонтанной хемилюминесценции НГ на максимум не имело статистически достоверных различий между группами.

После индукции хемилюминесцентного ответа опсонизированным зимозаном у больных РПК отмечалось статистически значимое увеличение интенсивности индуцированной хемилю-минесцентной активности НГ на всех стадиях заболевания. На I-II стадии заболевания в 2,84 раза

(p < 0,05) относительно контроля, у пациентов на III стадии РПК активность индуцированной хемилюминесценции превышала таковую у здоровых людей в 3,36 раза (p < 0,05), а на IV стадии в 4,36 раза.

Таким образом, на фоне повышенной спонтанной активности дополнительная стимуляция «респираторного взрыва» нейтрофильных грану-лоцитов опсонизированным зимозаном приводит к соответствующему увеличению продукции АФК нейтрофилами крови, что свидетельствует о наличии резервных метаболических возможностей данной клеточной популяции больных РПК.

Площадь под кривой индуцированной хеми-люминесценции у пациентов с раком прямой кишки была статистически значимо меньше относительно контрольной группы на I-II стадии в 3,86 раза (p < 0,001), на III стадии в 2,75 раза (p < 0,05). На IV стадии РПК площадь под кривой индуцированной хемилюминесценции достоверных отличий от контрольной группы не имела.

Анализ функциональной активности НГ не показал достоверного изменения времени выхода на максимум кривой индуцированной хемилюминесценции нейтрофилов пациентов с раком прямой кишки относительно контроля. Индекс активации НГ у больных раком прямой кишки на I-II и на IV был выше, чем в группе здоровых людей в 1,55 (p < 0,05) и 1,60 (p < 0,05) раза соответственно (табл. 1).

На 7 сутки после операции активность спонтанной хемилюминесцентной активности ней-трофильных гранулоцитов остается повышенной относительно группы здоровых людей. На III стадии РПК активность спонтанной хемилюми-несцентной активности НГ в 2,49 раза (p < 0,05) выше активности в контрольной группе, а на IV стадии в 2,83 раза выше (p < 0,05) (табл. 2).

Площадь под кривой спонтанной хемилюми-несценции у больных на всех стадиях онкологического процесса меньше по сравнению с группой контроля, на I-II стадиях в 5,25 (p < 0,001), на III стадии в 4,55 (p < 0,05) и на IV стадии в 4,79 раза (p < 0,05).

Изучение параметров зимозан-индуцирован-ной хемилюминесценции нейтрофильных гра-нулоцитов больных РПК после оперативного лечения показало достоверное усиление свечения на всех стадиях онкологического процесса по сравнению с аналогичным параметром в контрольной группе, у больных на I-II стадиях в 2,15 (p < 0,05), на III стадии в 4,01 (p < 0,05) и на IV стадии в 5,71 раза (p < 0,05).

Площадь под кривой индуцированной хеми-люминесценции на всех стадиях болезни была меньше относительно показателя в контрольной группе, на I-II стадиях в 5,51 (p < 0,001), на III

ТАБЛИЦА 1. ПОКАЗАТЕЛИ СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОИ АКТИВНОСТИ НЕИТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРЯМОЙ КИШКИ, Me (Q0,25-Q0,75)

TABLE 1. INDICES OF SPONTANEOUS AND INDUCED CHEMILUMINESCENT ACTIVITY OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTES IN PATIENTS WITH RECTAL CANCER, Me (O025-O0

Показатели Indicators Контрольная группа Control group n = 112 (1) Больные с РПК (I и II стадия) Patients with RC (I and II stages) n = 18 (2) Больные с РПК (III стадия) Patients with RC (III stage) n = 9 (3) Больные с РПК PIMC (IV stage) n = 18 (4)

Tmax спонтанная (сек.) Tmax spontaneous (sec.) 981 604-1522 1348 975-1798 1227 886-1416 1198 1055-1444

Imax спонтанная (у. е.) Imax spontaneous (с. u.) 7978 3148-19815 17358 5213-24177 19852 16262-40324 22612 9432-149772

Pi-3< 0,05 P1-4 < 0,05

Squr спонтанная (x 108) Square spontaneous (x 108) 2,78 1,42-7,27 0,53 0,21-0,69 0,61 0,34-1,50 0,58 0,33-2,03

Pt_2 < 0,001 Pi-3< 0,05 P1-4 < 0,05

Tmax индуцированная (сек.) Tmax induced (sec.) 1117 766-1495 1084 853-1379 953 809-1396 944 861-1372

Imax индуцированная (у. е.) Imax induced (с. u.) 16864 6940,0-32096,5 47939 24201-80078 56783 25503-91785 73466 34305-229974

P1-2 < 0,05 Pi-3< 0,05 P1-4 < 0,05

Squr индуцированная (x Ю8) Square induced (x 10s) 6,06 2,21-12,70 1,57 0,68-1,91 2,20 1,20-2,93 3,20 1,58-3,84

p.,.2 < 0,001 P1-3 < 0,05 pi-4< 0,05

Индекс активации Activation index 1,71 1,31-2,45 2,65 1,36-3,88 2,52 1,88-5,47 2,40 2,31-2,78

P1-2 < 0,05 pi-4< 0,05

ISO ISO Ki Ki

ISO ^ io>

?! 3

R OS Ж О

о

3

о* Ж

л R;

S ^

S §

fl о R

я-

»

v? л

3 I §

О ?!

a r

» £ ^ *

^ R

Примечание. p,.2 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (I-II стадии) и контрольной группой; р,.3 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (III стадии) и контрольной группой; р14 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (IV стадии) и контрольной группой.

Note, р 12 is a statistical significant difference between the group of patients with RC (l-ll stages) and control group; p13, statistically significant differences between the group of patients with RC (III stage) and control group; p 14, statistically significant differences between the group of patients with RC (IV stage) and a control group.

ТАБЛИЦА 2. ПОКАЗАТЕЛИ СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОИ АКТИВНОСТИ НЕИТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРЯМОЙ КИШКИ НА 7 СУТКИ ПОСЛЕ ОПЕРАЦИИ, Me (Q0,25-Q0,75)

TABLE 2. INDICES OF SPONTANEOUS AND INDUCED CHEMILUMINESCENT ACTIVITY OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTES IN PATIENTS WITH RECTAL CANCER ON THE 7 DAY AFTER OPERATION, Me (Q0.25-Q0 75)

Показатели Indicators Контрольная группа Control group n = 112 (1) Больные с РПК (I и II стадия) Patients with RC (I and II stages) n = 18 (2) Больные с РПК (III стадия) Patients with RC (III stage) n = 9 (3) Больные с РПК (IV стадия) Patients with RC (IV stage) n = 18 (4)

Tmax спонтанная (сек.) Tmax spontaneous (sec.) 981 604-1522 1087 676-1505 1632 1024-1911 1025 861-1377

Tmax спонтанная (сек.) Tmax spontaneous (sec.) 981 604-1522 1087 676-1505 1632 1024-1911 1025 861-1377

Imax спонтанная (у. е.) Imax spontaneous (с. u.) 7978 3148-19815 20142 5588-33015 21277 5606-25979 27213 22740-50208

Pi-3< 0,05 P1-4 < 0,05

Squr спонтанная (x 108) Square spontaneous (x 10s) 2,78 1,42-7,27 0,39 0,13-0,69 0,56 0,17-0,64 0,78 0,59-1,22

Pt_2 < 0,001 p.,.3 < 0,001 P1-4 < 0,05

Tmax индуцированная (сек.) Tmax induced (sec.) 1117 766-1495 1285 1120-1499 1632 1024-1911 1286 1001-1509

Imax индуцированная (у. е.) Imax induced (с. u.) 16864 6940,0-32096,5 36311 26528-88430 69122 46090-78479 96281 48289-115587

P1-2 < 0,05 Pi-3< 0,05 P1-4 < 0,05

Squr индуцированная (x 108) Square induced (x 10s) 6,06 2,21-12,70 1,11 0,48-1,22 1,91 0,93-2,42 3,20 1,58-3,84

Pt_2 < 0,001 p.,.3 < 0,001 P1-4 < 0,05

Индекс активации Activation index 1,71 1,31-2,45 2,19 1,58-3,98 3,83 3,46-4,49 2,40 2,31-2,78

P1-2 < 0,05 Pi-4< 0,05

^ О s к

¡'1 § §

I §

о

to

5.

r- ►a

I

<y

й

Ь

§ о

Sa

s

и

I

I?

ft. ÜJ

S: S

Й Ä s' s

sa. ж

ft ?! ^ §

s s

S ж S- g

о ~

S

^ F

ft So

Примечание. р,.2 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (I-II стадии) и контрольной группой; р,.3 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (III стадии) и контрольной группой; р14 - статистически значимые различия между группой больных с РПК (IV стадии) и контрольной группой.

Note, р is а statistical significant difference between the group of patients with RC (I-II stages) and control group; p13, statistically significant differences between the group of patients with RC (III stage) and control group; p 14, statistically significant differences between the group of patients with RC (IV stage) and a control group.

стадии в 3,17 (p < 0,001) и на IV стадии в 1,89 раза (p < 0,05). Индекс активации нейтрофильных гранулоцитов больных РПК на 7 сутки после операции выше относительно контрольной группы на I-II стадии в 1,2 раза, а на IV стадии в 1,4 раза.

Хемилюминесцентный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, характеризующий уровень продукции первичных и вторичных АФК у больных РПК, не показал достоверного изменения времени выхода на максимум кривых спонтанной и индуцированной хе-милюминесценции на всех стадиях заболевания относительно контроля.

Заключение

Проведенные исследования показали, что развитие рака прямой кишки сопровождается изменением функциональных свойств периферических нейтрофильных гранулоцитов. По мере прогрессирования заболевания наблюдается уве-

личение спонтанной продукции АФК нейтро-филами. Так, показатели спонтанной продукции АФК у больных РПК на III и IV стадии достоверно выше показателей контрольной группы, что доказывает роль нейтрофильных гранулоцитов не только как клеток первой линии неспецифической противомикробной защиты, но и как цитотоксических эффекторов на опухолевые клетки. Индуцируемая продукция АФК нейтро-филами повышается во всех исследуемых группах относительно контрольных параметров.

Площадь под кривыми спонтанной и индуцированной хемилюминесценции у больных раком прямой кишки на всех стадиях онкологического процесса меньше по отношению к контрольной группе, что, несмотря на высокие показатели максимальной активности хемилю-минисценции, может свидетельствовать о недостаточной суммарной продукции активных форм кислорода.

Список литературы / References

1. Балканов А.С., Гуров А.Н., Катунцева Н.А., Белоусова Е.А. Заболеваемость раком прямой кишки населения Московской области в 2010-2014 гг. // Альманах клинической медицины, 2016. Т 44, № 5. С. 599-605. [Balkanov A.S., Gurov A.N., Katuntseva N.A., Belousova E.A. Incidence of rectal cancer in the population of the Moscow region in 2010-2014. Almanakh klinicheskoy meditsiny = Almanac of Clinical Medicine, Vol. 44, no. 5, pp. 599-605. (In Russ.)]

2. Грачева Т.А. Совершенствование хемилюминесцентного метода исследования функциональной активности фагоцитирующих клеток // Клиническая лабораторная диагностика, 2008. № 2. С. 54-55. [Gracheva T.A. Improvement of the chemiluminescence technique for investigating the functional activity of phagocytes. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2008, no. 2, pp. 54-55. (In Russ.)]

3. Давыдов М.И., Патютко Ю.И., Личиницер М.Р., Расулов А.О., Ткачев С.И., Подлужный Д.В., Алиев В.А., Татаев И.Ш., Овчинникова А.И. Современная лечебная тактика при раке прямой кишки с синхронными отдаленными метастазами (клиническое наблюдение) // Онкологическая колопрокторология, 2014. № 1. С. 33-39. [Davydov M.I., Patyutko Yu.I., Lichinitser M.R., Rasulov A.O., Tkachev S.I., Podluzhny D.V., Aliev V.A., Tataev I.Sh., Ovchinnikova A.I. Current treatment policy for rectal cancer with synchronous distant metastases (a clinical case). Onkologicheskaya koloproktorologiya = Colorectal Oncology, 2014, no. 1, pp. 33-39. (In Russ.)]

4. Кит О.И., Франциянц Е.М., Никипелова Е.А., Комарова Е.Ф. Состояние свободнорадикальных процессов в ткани злокачественной опухоли толстой кишки // Сибирское медицинское обозрение, 2014. № 1. С. 30-34. [Kit O.I., Frantsiyants E.M., Nikipelova E.A., Komarova E.F. Condition of free radical processes in the tissue of a malignant tumor of the colon. Sibirskoe meditsinskoe obozrenie = Siberian Medical Review, no. 1, pp. 30-34. (In Russ.)]

5. Кохнюк В.Т. Рак прямой кишки в Республике Беларусь: распространенность, диагностика и результаты лечения // Онкологическая колопрокторология, 2013. № 2. С. 31-34. [Kokhniuk V.T. Rectal cancer in the Republic of Belarus: prevalence, diagnosis and treatment outcomes. Onkologicheskaya koloproktorologiya = Colorectal Oncology, 2013, no. 2, pp. 31-34. (In Russ.)]

6. Мальцева В.Н., Сафронова В.Г. Неоднозначность роли нейтрофила в генезе опухоли // Цитология, 2009. Т. 51, № 6. С. 467-474. [Maltseva V.N., Safronova V.G. Ambiguity role of neutrophils in oncogenesis. Tsitologiya = Cytology, 2009, Vol. 51, no. 6, pp. 467-474. (In Russ.)]

7. Нестерова И.В., Ковалева С.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Евглевский А.А. Двойственная роль нейтрофильных гранулоцитов в реализации противоопухолевой защиты // Иммунология, 2012. № 5. С. 281-285. [Nesterova I.V., Kovaleva S.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V., Yevglevsky A. A. The dual role of neutrophils in the antitumor protection. Immunologiya = Immunology, no. 5, pp. 281-285. (In Russ.)]

8. Райков Н.С., Чупин Р.Н., Попов И.Н., Сбродов О.В., Дорогина Л.В., Роговских А.Н. Рак прямой кишки // Тюменский медицинский журнал, 2010. № 3-4. С. 75-77. [Raykov N.S., Chupin R.N., Popov I.N.,

Sbrodov O.V., Dorogina L.V., Rogovskikh A.N. Rectal cancer. Tyumenskiy meditsinskiy zhurnal = Tyumen Medical Journal, 2010, no. 3-4, pp. 75-77. (In Russ.)]

9. Смирнова О.В., Манчук В.Т., Агилова Ю.Н. Роль неспецифического иммунитета при прогрессиро-вании миеломной болезни // Современные проблемы науки и образования, 2014. № 2. С. 515. [Smirnova O.V., Manchuk V.T., Agilova Yu.N. Role nonspecific immunity in the progression of myeloma diseas. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya = Modern Problems of Science and Education, 2014, no. 2, p. 515. (In Russ.)]

10. Fridlender Z.G., Sun J., Kim S. Polarization of tumor-associated neutrophil (TAN) phenotype by TGF-P: "N1" versus "N2" TAN. Cancer Cell, 2009, Vol. 16, no. 3. pp. 183-194.

11. Galdiero M.R., Garlanda C., Jaillon S., Montovani. A.Tumor associated macrophages neutrophils in tumor progression. J. Cell. Physiol., 2013, Vol. 228, no. 7. pp. 1404-1412.

12. Mishalian I., Bayuh R., Levy L., Zolotarov L., Michaeli J., Fridlender Z.G. Tumor-associated neutrophils (TAN) develop pro-tumorigenic properties during tumor progression. Cancer Immunol. Immunother., 2013, Vol. 62, no. 11, pp. 1745-1756.

13. Prestwich R.J., Errington F., Hatfield Р., Roodman D.G. The immune system - is it relevant to саnсеr development, progression and treatment? Clin. Oncol., 2008, Vol. 20, pp. 101-112.

14. Schins R.P.F., Воrm P.J.A., van Schooten F.J. Neutropihis and respiratory tract DNA damage and mutagenesis: а review. Mutagenesis, 2006, Vol. 21, pp. 225-236.

Авторы:

Смирнова О.В. — д.м.н., заведующая лабораторией клинической патофизиологии, Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера — обособленное подразделение ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук"», г. Красноярск, Россия

Каспаров Э.В. — д.м.н., профессор, директор Научно-исследовательского института медицинских проблем Севера, заместитель директора ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук"», г. Красноярск, Россия Перепечай Я.И. — аспирант, младший научный сотрудник, Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера — обособленное подразделение ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр „Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук"», г. Красноярск, Россия

Несытых А.А. — заведующий отделением онкоколопроктологической хирургии, врач-онколог КГБУЗ «Красноярский краевой клинический онкологический диспансер имени А.И. Крыжановского», г. Красноярск, Россия

Беляев В.С. — врач-онколог КГБУЗ «Красноярский краевой клинический онкологический диспансер имени А.И. Крыжановского», г. Красноярск, Россия

Поступила 24.11.2017 Принята к печати 28.11.2017

Authors:

Smirnova O.V., PhD, MD (Medicine), Head, Laboratory of Clinical Pathophysiology, Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences, Krasnoyarsk, Russian Federation

KasparovE.V., PhD, MD (Medicine), Professor, Director, Research Institute of Medical Problems of the North, Deputy Director, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch Russian Academy of Sciences, Krasnoyarsk, Russian Federation

Perepechay Ya.I., Postgraduate Student, Junior Research Associate, Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences, Krasnoyarsk, Russian Federation

Nesytykh A.A., Head, Department of Oncoproctological Surgery, Clnical Oncologist, Krasnoyarsk Regional A. Kryzhanovsky Clinical Cancer Center, Krasnoyarsk, Russian Federation

Belyaev V.S., Clinical Oncologist, Krasnoyarsk Regional A. Kryzhanovsky Clinical Cancer Center, Krasnoyarsk, Russian Federation

Received 24.11.2017 Accepted 28.11.2017