Особенности формирования токсемии у больных с патологией гепатопанкреатодуоденальной зоны Текст научной статьи по специальности «Медицинские технологии»

Оригинальные исследования

Original Researches

МЕДИЦИНА

НЕОТЛОЖНЫХ состояний

®

УДК 616-053.2

КАГЛИЧЕНКО В.В.2, ШЕЙМАН Б.С13, ОСАДЧАЯ О.И.4

1ГП «Научный центр превентивной токсикологии, пищевой и химической безопасности имени академика Л.И. Медведя МЗ Украины», г. Киев

Национальный медицинский университет им. А.А. Богомольца, г. Киев 3Национальная детская специализированная больница «Охматдет» МЗ Украины, г. Киев 4Институт гематологии и трансфузиологии НАМН Украины, г. Киев

ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ ТОКСЕМИИ У БОЛЬНЫХ С ПАТОЛОГИЕЙ ГЕПАТОПАНКРЕАТОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ

Резюме. В работе представлены результаты исследований параметров эндотоксикоза у пациентов с заболеваниями органов гепатопанкреатодуоденальной зоны. Продемонстрированы особенности развития и формирования токсемии, процессы распределения токсинов в кровяном русле, прочность их связи с токсиннесущими фракциями плазмы крови. На основании полученных данных сделаны выводы об особенностях формирования токсемии у больных.

Ключевые слова: болезни органов гепатопанкреатодуоденальной зоны, эндотоксикоз, особенности развития, распределение токсинов в кровяном русле, детоксикационная терапия.

Введение

Традиционный взгляд на формирование и развитие токсикоза у больных в целом и при заболеваниях гепатопанкреатодуоденальной зоны в частности предполагает образование (синтез) в кровяном русле аутоагрессивных веществ (АВ) эндогенного происхождения, обладающих повреждающим действием на биологические мишени организма. Естественно, что в условиях синтеза АВ происходит их накопление в кровяном русле и распределение на токсиннесущих фракциях — альбуминах, глобулинах, клеточных мембранах и в так называемом свободном (не связанном с белковыми фракциями крови) состоянии. При этом важным является возникновение связи АВ (токсинов) с токсиннесущими фракциями плазмы крови и ее прочность. Ассоциация токсинов с токсиннесущими фракциями белковой природы осуществляется путем возникновения прочных и непрочных связей. От характеристики этой связи во многом зависят основные пути физиологической элиминации токсинов из кровяного русла. Характеристика этой связи имеет также большое значение для выбора метода детоксикационной терапии. В частности, при наличии непрочной связи токсина с белковой токсиннесущей фракцией ряд методов (гемодилюция, квантовая гемотерапия, гемодиафильтрация и др.) позволяют осуществить разрыв этой связи, тем самым снимая нагрузку с систем печени, которые обеспечивают возникновение биотрансформационных реакций, ускоряя элиминацию токсического вещества из кровяного русла. Наличие же прочной связи между токсином

и токсиннесущей фракцией делает нерациональным использование этих методов и должно указать клиницисту на целесообразность назначения и выбора других методов (плазмаферез, криоплазмафе-рез и др.) детоксикационной терапии [1—5, 7].

Следует указать на то, что во многих случаях тяжелого течения заболевания, особенно на фоне возникновения синдрома полиорганной недостаточности, получение информации об эндотоксинах, их токсикокинетике и токсикодинамике, периоде полувыведения, размерах молекул и частиц, местах преимущественного накопления в кровяном русле и других характеристиках составляет значительные сложности. Возникающие вместе с этим ошибки и проблемы при оказании медицинской помощи во многих случаях обусловлены неправильным выбором метода детоксикационной терапии, что отражается на эффективности лечения.

Вполне понятно, что детоксикационная терапия должна быть индивидуализированной с учетом физико-химических свойств АВ, их размеров, мест накопления на токсиннесущих фракциях в кровяном русле (белок-ассоциированные или безбелковые), прочности связи с токсиннесущими фракциями плазмы крови (альбуминами, глобулинами, клеточными мембранами).

Цель работы: изучить процессы распределения аутоагрессивных веществ и их связи с токсиннесу-

© Кагличенко В.В., Шейман Б.С., Осадчая О.И., 2014 © «Медицина неотложных состояний», 2014 © Заславский А.Ю., 2014

щими фракциями в кровяном русле у пациентов с заболеваниями гепатопанкреатодуоденальной зоны для разработки подходов к назначению и выбору методов детоксикационной терапии.

Материалы и методы

Проведены клинико-лабораторные исследования 40 больных с тяжелым течением эндотоксикоза на фоне заболеваний гепатопанкреатодуоденаль-ной зоны. Из них у 12 пациентов эндотоксикоз возник на фоне острого панкреатита, у 28 — на фоне острого гепатита различного генеза. Возраст больных колебался от 11 до 53 лет. Все больные в остром периоде заболевания получали традиционную терапию основного заболевания в отделениях интенсивной терапии, токсикологии и экстракорпоральных методов детоксикации на базе ГКБ № 1 и НДСБ «Охматдет» г. Киева.

Особенности формирования и развития токсикоза (распределение АВ в кровяном русле и их связь с токсиннесущими фракциями плазмы крови) изучали с помощью известных и модифицированных нами методик.

Статистический анализ и расчеты других параметров проведены с помощью программы Statistica 6.0 фирмы StatSoft Inc. (США).

Выделение токсиннесущих фракций из плазмы осуществляли методом высаливания сульфатом аммония 50 и 100% концентрации по общепринятой методике. Выделение фракции, которая содержала токсины с молекулами и частицами размером 10—200 нм и < 10 нм, проводили методом фильтрации через полупроницаемые мембраны с порами диаметром 200 и 10 нм. Исследование прочности связи токсинов с токсиннесущими фракциями (альбуминовой, глобулиновой и клеточными мембранами) осуществляли методом 30% дилюции физиологическим раствором с последующей фильтрацией через фильтры с вышеуказанным диаметром пор.

Для изучения характеристик токсинов, обладающих опосредованным механизмом повреждающего действия на биологические мишени, определяли содержание лимфоцитов, которые образуют розетки с аутологичными эритроцитами (АРОЛ), после их инкубирования с цельной плазмой, токсинне-сущими фракциями плазмы и АВ с молекулами различных размеров. Для изучения характеристик токсинов, обладающих прямым механизмом повреждающего действия на биологические мишени, нами был использован метод цитолитической активности лейкоцитов (ЦАЛ). Полученный результат оценивали после инкубирования аутолейкоци-тов больного с цельной плазмой, токсиннесущими фракциями плазмы и АВ с молекулами различных размеров [1, 6].

На основании результатов исследований ЦАЛ и АРОЛ делали выводы о повреждающей активности токсинов, которые обладают прямым и опосредованным механизмами повреждающего действия на клетки крови.

Все больные в зависимости от основного механизма повреждения биологической мишени токсинами (прямой — цитолитический или опосредованный — аутоиммунный), обладающими наиболее выраженной повреждающей активностью, были разделены на 2 группы. В 1-ю группу вошли больные, у которых наиболее выраженной повреждающей активностью обладали токсины с прямым механизмом повреждения биологической мишени (ЦАЛ цельной плазмы 51,36 ± 2,07 %); во 2-ю группу — с опосредованным механизмом (АРОЛ цельной плазмы 63,78 ± 5,46 %).

Результаты исследований

1. Средний уровень повреждающей активности накопленных в кровяном русле токсинов с молекулами различных размеров

При исследовании среднего значения повреждающей активности токсинов, обладающих прямым механизмом повреждения биологической мишени, у больных 1-й группы обнаружено, что наиболее высоким уровнем активности обладали токсины с молекулами размером 10—200 нм (39,9 ± 2,07 %) и > 200 нм (34,49 ± 1,83 %). При этом различия между их значениями были недостоверными (р > 0,05). Уровень повреждающей активности токсинов с молекулами размером менее 10 нм был достоверно ниже такового токсинов с молекулами иных размеров и составил 28,10 ± 1,64 %. У больных 2-й группы обнаружено, что наиболее высоким уровнем активности обладали токсины с частицами размером 10—200 нм (42,51 ± 2,35 %). Уровень повреждающей активности токсинов с молекулами размером менее 10 и частицами > 200 нм был достоверно ниже (р < 0,05) такового токсинов с частицами размером 10-200 нм и составил 28,26 ± 2,60 и 27,72 ± 2,06 % соответственно (рис. 1).

При исследовании среднего значения повреждающей активности токсинов, обладающих опосредованным механизмом повреждения биологической мишени, у больных 1-й группы обнаружено, что наиболее высоким потенциалом обладали токсины с частицами размером > 200 нм

60 50 40 '30 20 10 0

10-200 нм < 10 нм

Размеры молекул токсинов

> 200 нм

I 11-я группа - ♦ - Токсичность плазмы (1)

|2-я группа

-Токсичность плазмы (2)

Рисунок 1. Средний уровень повреждающей активности токсинов с молекулами и частицами различных размеров, обладающих прямым механизмом повреждения

(30,86 ± 1,63 %). Уровень повреждающей активности токсинов с частицами размером 10—200 нм и молекулами < 10 нм был достоверно ниже такового токсинов с частицами размером > 200 нм и составил 24,23 ± 1,58 % и 24,40 ± 1,80 % соответственно. У больных 2-й группы обнаружено, что наиболее высоким уровнем повреждающей активности обладали токсины с частицами размером > 200 нм (38,28 ± 3,40 %). Однако их уровень не имел достоверных отличий (р > 0,05) от таковых токсинов с частицами размером 10—200 нм и молекулами < 10 нм (30,61 ± 2,95 % и 28,52 ± 5,26 % соответственно; рис. 2).

Для уточнения причин, обусловливающих уровень токсичности цельной плазмы крови, проведено исследование корреляционной зависимости между потенциалом повреждающей активности (токсичности) цельной плазмы и таковым токсинов с молекулами и частицами различных размеров, накопленных в кровяном русле. Установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) у

80

70-

60

Со 50-

^ 40-о % 30-

20

10

0

38,28

30,61 244 28,52 зо,8б ^Г - 24,23 ^^.....'- 3-Т.....ГТ-!

: РЛ ПГ Ш

10-200 нм <10 нм

Размеры молекул токсинов

> 200 нм

| 11-я группа - ♦ - Токсичность плазмы (1)

■ 2-я группа

-Токсичность плазмы (2)

Рисунок 2. Средний уровень повреждающей активности токсинов с молекулами различных размеров, обладающих опосредованным механизмом повреждения

больных 1-й группы между уровнем повреждающей активности цельной плазмы и таковым токсинов с частицами размером 10—200 нм и молекул < 10 нм; у пациентов 2-й группы — у токсинов с частицами размером 10—200 нм и > 200 нм, молекулами < 10 нм (рис. 3).

2. Токсичность цельной плазмы и токсиннесущих фракций

При исследовании показателя токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций, обусловленного повреждающей активностью токсинов, обладающих прямым механизмом повреждения биологической мишени, у больных 1-й группы обнаружено, что уровни повреждающей активности (токсичности) были приблизительно равными у всех токсиннесущих фракций и составили 52,05 ± 1,83 % у глобулиновой, 54,14 ± 2,87 % у альбуминовой и 46,57 ± 3,09 % у свободно циркулирующей фракции (р > 0,05). При этом уровень токсичности цельной плазмы составил 51,36 ± 2,07 % и не имел достоверных отличий (р > 0,05) от такового у токсиннесущих фракций. У больных 2-й группы наиболее высокий уровень повреждающей активности (токсичности) был обнаружен в свободно циркулирующей фракции (51,49 ± 6,01 %), хотя он и не имел достоверных отличий (р > 0,05) от такового у глобулиновой (42,76 ± 4,32 %) и альбуминовой (47,68 ± 5,68 %) фракций. При этом уровень токсичности цельной плазмы составил 45,68 ± 4,85 % и также не имел достоверных отличий (р > 0,05) от такового у ток-синнесущих фракций (рис. 4).

При исследовании показателя токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций, обусловленного повреждающей активностью токсинов, обладающих опосредованным механизмом повреждения биологической мишени, у больных 1-й группы обнаружено, что наибольшие уровни

(ЦАЛ, %)

10

20

1-я группа больных

______________________i___________________« • * >____________________ « » » 4 —♦----------: А ; • :

• ................• А i *». 1» . _ < -------------------1 ▲ Ai 1

А .........А........а к Ж 1 д *, • 1 А А

1 ; г А : •

30

40 50 60

Токсичность плазмы

70 (ЦАЛ, %)

-•— Токсины с молекулами размером 10-200 нм --*-- Токсины с молекулами размером < 10 нм

(АРОЛ, %)

2-я группа больных

□ □ А Л-""":

А А 6С " А А : а :

А А А ! ,У-" ЭЕьс-а*6' о Чо О □ : □ о_______:

______ L С о _ □ □ :

с о 4 о □ о □

10

20

30

40 50 60 Токсичность плазмы

70

80

(АРОЛ, %)

^СХ Токсины с молекулами размером 10-200 нм

Токсины с молекулами размером < 10 нм ""Ж,^ Токсины с молекулами размером > 200 нм

Рисунок 3. Корреляционная зависимость: уровни токсичности цельной плазмы и повреждающая активность токсинов с молекулами различных размеров (p < 0,05)

повреждающей активности (токсичности) были у глобулиновой и свободно циркулирующей фракций (37,97 ± 1,85 % и 37,23 ± 3,11 % соответственно). Их уровень достоверно отличался ф < 0,05) от такового у альбуминовой фракции (28,26 ± 2,64 %) и фракции клеточных мембран (23,46 ± 1,98 %). При этом уровень токсичности цельной плазмы составил 32,52 ± 1,85 % и имел достоверные отличия ф < 0,05) от такового у токсиннесущей глобулиновой фракции. У больных 2-й группы наибольшие уровни повреждающей активности (токсичности) были у глобулиновой и свободно циркулирующей фракций (59,11 ± 8,37 % и 50,00 ± 6,12 % соответственно). Их уровень достоверно отличался ф < 0,05) от такового у альбуминовой фракции (17,33 ± 3,80 %) и фракции клеточных мембран (30,44 ± 8,65 %). При этом уровень токсичности цельной плазмы составил 63,78 ± 5,46 % и имел

достоверные отличия ф < 0,05) от таковых у ток-синнесущей альбуминовой и фракции клеточных мембран и не имел достоверных отличий от таковых у глобулиновой и свободно циркулирующей фракции (рис. 5).

Для уточнения причин, обусловливающих уровень токсичности цельной плазмы крови, проведено исследование корреляционной зависимости между потенциалом повреждающей активности (токсичности) цельной плазмы и таковым у токсиннесущих фракций плазмы крови. Установлена достоверная корреляционная зависимость ф < 0,05) у больных 1-й группы между уровнем повреждающей активности цельной плазмы и таковым у глобулиновой, альбуминовой и свободно циркулирующей фракций; у пациентов 2-й группы — у глобулиновой, свободно циркулирующей и фракции клеточных мембран (рис. 6).

60 50 40 '30 20 10 0

54,14

Глобулины Альбумины Свободные

Токсиннесущие фракции

i 11-я группа - » - Токсичность плазмы (1)

■ 2-я группа

-Токсичность плазмы (2)

Глобулины Альбумины Свободные Токсиннесущие фракции

Мембраны

i 11-я группа - ♦ - Токсичность плазмы (1)

2-я группа -Токсичность плазмы (2)

Рисунок 4. Параметры токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций с токсинами, обладающими прямым механизмом повреждения биологической мишени

Рисунок 5. Параметры токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций с токсинами, обладающими опосредованным механизмом повреждения биологической мишени

(ЦАЛ, %)

1-я группа больных

80 70 60 50 40 30 20 10

♦ ;

♦ а :: ' J2T

О ■ а-*? „<г " :

♦ D о Й Г'" :

-*' * - н 'ff с ® о с о :

■п ^ L о

-.......оГ.....Г7ГГ ----------------с ]-----------------:

f ♦

(АРОЛ, %)

2-я группа больных

20 30 40 50 60

Токсичность плазмы

70

80 70 60 50 40 30 20 10 0 -10

♦ □ : пО J

■О :

♦

♦ п . в* □ # ♦ ♦ :

: 1=1 : ♦ □ .«с □

: ♦ sr^-g^-o- ^заг-и D „ ♦

!r J3-р ♦ о О :

о о

i о° " □ О :

(МАЛ, %)

10 20 30 40 50 60 70 80

Токсичность плазмы (АрОЛ, %)

0

^О.^ Токсиннесущая фракция (глобулиновая) ТП^ Токсиннесущая фракция (альбуминовая) "Ж. Токсиннесущая фракция (свободно циркулирующая)

^О., Токсиннесущая фракция (клеточные мембраны) Тц. Токсиннесущая фракция (глобулины)

Токсиннесущая фракция (свободно циркулирующая)

Рисунок 6. Корреляционная зависимость: уровни токсичности цельной плазмы и повреждающая

активность токсиннесущих фракций (p < 0,05)

Оригинальные исследования / Original Researches ^w

3. Распределение потенциала повреждающей активности токсинов в кровяном русле на токсиннесу-щих фракциях

При проведении сравнительных исследований у больных 1-й и 2-й групп обнаружены достоверные отличия между показателями повреждающей активности следующих токсинов, обладающих опосредованным механизмом повреждения биологической мишени:

— глобулин-ассоциированных токсинов с частицами размером 10—200 нм и > 200 нм;

— свободно циркулирующих токсинов с молекулами размером < 10 и частицами > 200 нм;

— альбумин-ассоциированных токсинов с частицами размером > 200 нм.

При этом наиболее высокие уровни повреждающей активности были зарегистрированы у больных 1-й группы — у свободно циркулирующих токсинов с частицами размером > 200 нм; у больных 2-й группы — у глобулин-ассоциированных токсинов с частицами размером > 200 нм и у свободно циркулирующих токсинов с частицами размером > 200 и 10-200 нм.

При проведении сравнительных исследований у больных 1-й и 2-й групп обнаружены достоверные отличия между показателями повреждающей активности альбумин-ассоциированных токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм, об-

ладающих прямым механизмом повреждения биологической мишени. При этом наиболее высокие уровни повреждающей активности были зарегистрированы у больных 1-й группы — у альбумин-ассоциированных, глобулин-ассоциированных, свободно циркулирующих токсинов с частицами размером > 200 нм и альбумин-ассоциированных, свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм; у больных 2-й группы — у альбумин-ассоциированных, свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и у свободно циркулирующих токсинов с частицами размером > 200 нм (табл. 1).

При проведении сравнительных исследований у больных 1-й и 2-й групп обнаружены достоверные отличия между показателями распределения парциальных долей повреждающей активности следующих токсинов, обладающих опосредованным механизмом повреждения биологической мишени:

— свободно циркулирующих токсинов с молекулами размером менее 10 нм;

— альбумин-ассоциированных токсинов с частицами размером > 200 нм.

При проведении сравнительных исследований у больных 1-й и 2-й групп обнаружены достоверные отличия между показателями распределения парциальных долей повреждающей активности альбу-мин-ассоциированных и свободно циркулирующих

Таблица 1. Повреждающий потенциал токсинов, ассоциированных с токсиннесущими фракциями, у больных с патологией гепатопанкреатодуоденальной зоны (п = 40)

Место накопления токсинов в кровяном русле Повреждающий потенциал

1-я группа (n = 31) 2-я группа (n = 9)

Токсины с опосредованным механизмом повреждения

Токсины (10-200 нм) на клеточных мембранах 8,65 ± 1,19 9,00 ± 2,14

Токсины (10-200 нм) на глобулинах 18,71 ± 1,60* 31,78 ± 5,28

Токсины (10-200 нм) на альбуминах 32,35 ± 2,32 31,67 ± 5,92

Токсины (10-200 нм) свободно циркулирующие 37,23 ± 3,11 50,00 ± 6,12

Токсины (< 10 нм) на глобулинах 21,10 ± 2,20 21,78 ± 5,94

Токсины (< 10 нм) на альбуминах 26,16 ± 2,17 24,22 ± 6,49

Токсины (< 10 нм) свободно циркулирующие 25,94 ± 2,29* 39,56 ± 5,97

Токсины (> 200 нм) на клеточных мембранах 15,71 ± 1,47 23,33 ± 7,28

Токсины (> 200 нм) на глобулинах 36,84 ± 2,21* 58,33 ± 8,92

Токсины (> 200 нм) на альбуминах 14,45 ± 3,79* 2,00 ± 1,29

Токсины (> 200 нм) свободно циркулирующие 56,45 ± 3,60* 69,44 ± 5,24

Токсины с прямым механизмом повреждения

Токсины (10-200 нм) на глобулинах 30,65 ± 2,56 26,14 ± 2,62

Токсины (10-200 нм) на альбуминах 42,16 ± 2,49* 49,89 ± 2,73

Токсины (10-200 нм) свободно циркулирующие 46,90 ± 3,12 51,49 ± 6,01

Токсины (< 10 нм) на глобулинах 21,56 ± 1,78 24,26 ± 4,53

Токсины (< 10 нм) на альбуминах 29,87 ± 1,93 27,82 ± 2,83

Токсины (< 10 нм) свободно циркулирующие 32,86 ± 2,88 32,71 ± 4,48

Токсины (> 200 нм) на глобулинах 49,00 ± 2,92 39,71 ± 6,10

Токсины (> 200 нм) на альбуминах 47,43 ± 4,59* 16,01 ± 9,99

Токсины (> 200 нм) свободно циркулирующие 40,00 ± 0,02 41,00 ± 0,02

Примечание (здесь и далее): * — отличия между группами являются достоверными (p < 0,05).

токсинов с частицами размером > 200 нм, обладающих прямым механизмом повреждения биологической мишени (табл. 2).

Для уточнения причин, обусловливающих уровни токсичности токсиннесущих фракций плазмы крови, проведено исследование корреляционной зависимости между потенциалом повреждающей активности (токсичности) токсинне-сущих фракций плазмы и таковыми у токсинов с молекулами различных размеров (рис. 7). У больных 1-й группы установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между следующими параметрами:

— уровнем повреждающей активности свободно циркулирующей фракции и таковым свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм;

— уровнем повреждающей активности глобу-линовой фракции и таковым глобулин-ассоцииро-ванных токсинов с молекулами размером < 10 нм и частицами > 200 нм;

— уровнем повреждающей активности альбуминовой фракции и таковым альбумин-ассоцииро-ванных токсинов с молекулами размером < 10 нм, частицами 10-200 нм и > 200 нм.

У больных 2-й группы установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между следующими параметрами:

— уровнем повреждающей активности свободно циркулирующей фракции и таковым свободно

циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм;

— уровнем повреждающей активности глобу-линовой фракции и таковым глобулин-ассоцииро-ванных токсинов с частицами размером > 200 нм и у альбумин-ассоциированных токсинов с молекулами размером < 10 нм.

4. Прочность связи токсинов с токсиннесущими фракциями плазмы крови

Результаты исследования прочности связи токсинов с токсиннесущими фракциями представлены в табл. 3.

Как следует из представленных данных, у больных 1-й и 2-й групп токсины в большинстве случаев имели непрочную связь с белковыми токсиннесу-щими фракциями плазмы крови. При этом достоверные различия между группами больных в содержании прочно и не прочно связанных с белками токсинов мы наблюдали в отношении аутоагрессив-ных веществ с прямым механизмом повреждающего действия на биологические мишени.

Обсуждение

Отсутствие эффекта или недостаточная эффективность детоксикационной терапии позволяет нам предположить, что традиционные подходы к назначению и выбору методов детоксикации не учитывают индивидуальных особенностей формирования токсикоза, в частности — параметров распределе-

Таблица 2. Распределение парциальных долей повреждающей активности токсинов с молекулами разных размеров в кровяном русле у пациентов с заболеваниями гепатопанкреатодуоденальной зоны

Токсиннесущие фракции плазмы крови Размеры молекул токсинов и их парциальные доли (%) распределения в кровяном русле

< 10 нм (100 %) 10-200 нм (100 %) > 200 нм (100 %)

Токсины с опосредованным механизмом повреждающей активности

1-я группа

Глобулины 28,33 ± 1,52 19,46 ± 1,12 30,49 ± 1,81

Альбумины 36,30 ± 1,74 33,72 ± 1,57 9,70 ± 2,34*

Свободные 35,36 ± 1,78* 37,73 ± 1,69 46,54 ± 2,38

Мембраны - 9,09 ± 1,26 13,27 ± 1,20

2-я группа

Глобулины 23,39 ± 2,53 24,78 ± 3,06 35,92 ± 4,90

Альбумины 27,00 ± 4,71 24,81 ± 4,82 2,21 ± 1,42*

Свободные 49,60 ± 6,28* 42,49 ± 5,64 48,25 ± 5,21

Мембраны - 7,92 ± 1,60 13,62 ± 3,50

Токсины с прямым механизмом повреждающей активности

1-я группа

Глобулины 25,88 ± 1,51 25,47 ± 1,55 36,27 ± 2,37

Альбумины 35,98 ± 1,62 35,52 ± 1,37 34,09 ± 3,36*

Свободные 38,14 ± 1,91 39,01 ± 1,79 29,64 ± 2,70*

2-я группа

Глобулины 27,93 ± 3,02 20,87 ± 2,15 40,89 ± 5,86

Альбумины 33,74 ± 2,61 39,70 ± 2,01 9,86 ± 6,23*

Свободные 38,33 ± 4,06 39,42 ± 3,72 49,25 ± 7,23*

(ЦАЛ, %) 1-я группа больных (свободно циркулирующая фракция)

□"[ j i i i

ü 1 1

□ , □

□ £ i-i " A *

i r i

▲ ! L-Ь D ь а □ □ С

А

(АРОЛ, %)

2-я группа больных (свободно циркулирующая фракция)

0 10 20 30 40 50 60 70

Токсичность свободно циркулирующей фракции

(ЦАЛ, %)

Парциальная доля токсинов (10-200 нм) свободно циркулирующих Парциальная доля токсинов (> 200 нм) свободно циркулирующих

(ЦАЛ, %)

1-я группа больных (глобулиновая фракция)

□ в

A □ ud u n

: с □ □ ________________£

: □ ▲ й s

: i .. : A Г—-A------A ü*»1 "J A k

A t M A

20

30 40 50 60

Токсичность глобулиновой фракции

70 (ЦАЛ, %)

-А- Парциальная доля токсинов (< 10 нм) на глобулинах ТИ^Парциальная доля токсинов (> 200 нм) на глобулинах

(ЦАЛ, %)

1-я группа больных (альбуминовая фракция)

70

50

30

u :

] о_______

l=P □ ▲ uB A K □ :

□ A________ A * У **

k 4 A D □ A

1_1

0 10 20 30 40 50 60 70 80

Токсичность свободно циркулирующей фракции (АРОЛ %)

~ А. Парциальная доля токсинов (10-200 нм) свободно циркулирующих "ГШ, Парциальная доля токсинов (> 200 нм) свободно циркулирующих

(АРОЛ, %)

2-я группа больных (глобулиновая фракция)

80 70 60 50 40 30 20 10 0 -10

О Or О 5__________ c;

ft э __ __----

6 —~o if3 ОС A A

■___A_ A A ' 4 A A-^ *A ►------ A —i" A A

—о 4 A О A

10 20 30 40 50 60 70 80

(АРОЛ, %)

Токсичность глобулиновой фракции

"ХХ, Парциальная доля токсинов (> 200 нм) на глобулинах ~ А.. Парциальная доля токсинов (< 10 нм) на глобулинах

. A A k A A A

: a О A 0 6° C :

С A с с 0 3

:___________ д о KJ^Ji A :

i D i ^ r^i ] □ :

gn LE Г С n □ >

DO -i

30 40 50 60 70 Токсичность альбуминовой фракции

(ЦАЛ, %)

Ж., Парциальная доля токсинов (10-200 нм) на альбуминах Парциальная доля токсинов (< 10 нм) на альбуминах Парциальная доля токсинов (> 200 нм) на альбуминах

Рисунок 7. Корреляционная зависимость: уровни токсичности токсиннесущих фракций и парциальные доли повреждающей активности токсинов с молекулами разных размеров ф < 0,05)

0

60

40

20

10

0

10

20

80

ния аутоагрессивных веществ в кровяном русле, что обусловливает неправильный выбор самого метода лечения. Вполне понятно, что детоксикационная терапия должна быть индивидуализированной, с учетом физико-химических свойств АВ, их размеров, мест накопления на токсиннесущих фракциях в кровяном русле (белок-ассоциированные или безбелковые), прочности связи с токсиннесущими фракциями плазмы крови (альбуминами, глобулинами, клеточными мембранами).

Все пациенты с заболеваниями органов гепато-панкреатодуоденальной зоны были разделены на 2 группы в зависимости от механизма повреждающего действия АВ (прямой или опосредованный). В 1-ю группу вошел 31 больной, у которых был определен наиболее выраженный потенциал АВ, обладающих прямым механизмом повреждающего действия на биологические мишени; во 2-ю группу вошли 9 больных, у которых был определен наиболее выраженный потенциал АВ, обладающих опосредованным механизмом биоповреждения.

Исследование параметров распределения токсинов в кровяном русле и прочность их связи с ток-синнесущими фракциями плазмы крови оценивали по результатам расчета среднего уровня повреждающей активности накопленных в кровяном русле токсинов с молекулами различных размеров; расчета распределения парциальных долей повреждающей активности токсинов с молекулами разных размеров; расчета парциальной доли прочно и не прочно связанных с токсиннесущими фракциями токсинов в кровяном русле.

У больных 1-й группы исследования показателей среднего уровня повреждающей активности накопленных в кровяном русле токсинов с молекулами и частицами различных размеров показали, что наиболее высоким уровнем активности обладали токсины с частицами размером 10-200 нм (39,9 ± 2,07 %) и > 200 нм (34,49 ± 1,83 %). При этом установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между уровнем токсичности цельной плазмы и таковым токсинов с частицами размером 10-200 нм, > 200 нм и молекулами < 10 нм.

При исследовании показателя токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций, обусловленного повреждающей активностью токсинов, обнаружено, что уровни повреждающей активно -

сти (токсичности) были приблизительно равными (р > 0,05) у всех токсиннесущих фракций (глобули-новой, альбуминовой и свободно циркулирующей фракции). При этом уровень токсичности цельной плазмы не имел достоверных отличий (р > 0,05) с таковым токсиннесущих фракций. Установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между уровнем повреждающей активности цельной плазмы и таковым глобулиновой, альбуминовой и свободно циркулирующей фракции.

При исследовании распределения потенциала повреждающей активности токсинов, накопленных в кровяном русле на токсиннесущих фракциях, установлено, что наиболее высокие уровни повреждающей активности АВ обнаружены у альбумин-ассоциированных, глобулин-ассоциированных, свободно циркулирующих токсинов с частицами размером > 200 нм и у альбумин-ассоциированных, свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм. Установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между уровнем повреждающей активности свободно циркулирующей фракции и таковым свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм; между уровнем повреждающей активности глобулиновой фракции и таковым глобулин-ас-социированных токсинов с молекулами размером менее 10 и частицами > 200 нм; между уровнем повреждающей активности альбуминовой фракции и таковым альбумин-ассоциированных токсинов с молекулами размером менее 10 нм, частицами 10200 нм и > 200 нм.

Исследования прочности связи токсинов с ток-синнесущими белковыми фракциями плазмы крови указали на превалирование в кровяном русле АВ, имеющих непрочные связи с токсиннесущими фракциями.

Таким образом, установлено, что у больных 1-й группы наиболее выраженным потенциалом повреждающей активности обладали токсины с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм. Распределение потенциала повреждающей активности токсинов с частицами размером > 200 нм происходило в кровяном русле равномерно на всех токсиннесущих фракциях, а токсинов с частицами размером 10-200 нм — преимущественно на альбу-мин-ассоциированной и свободно циркулирующей

Таблица 3. Прочность связи токсинов с токсиннесущими фракциями плазмы крови у пациентов с заболеваниями гепатопанкреатодуоденальной зоны

Характеристика связи Прочность связи токсинов с токсиннесущими фракциями и распределение их парциальных долей (%)

1-я группа 2-я группа

Токсины с опосредованным механизмом повреждающей активности

Прочная 42,57 ± 1,56 43,18 ± 1,96

Непрочная 57,43 ± 1,56 56,82 ± 1,96

Токсины с прямым механизмом повреждающей активности

Прочная 40,41 ± 1,51* 30,57 ± 3,07

Непрочная 59,59 ± 1,51* 69,43 ± 3,07

Оригинальные исследования / Original Researches ^w

фракциях. При этом токсины с частицами размером > 200 нм имели прочные связи с глобулинами и альбуминами, а с частицами размером 10-200 нм — непрочные связи с альбуминами. Показатель токсичности цельной плазмы является интегративным параметром, отражающим уровни повреждающей активности токсинов с частицами размером 10200 нм, > 200 нм и молекулами < 10 нм, которые накапливаются в кровяном русле на всех токсин-несущих фракциях. При этом токсичность каждой из токсиннесущих фракций имеет индивидуальные особенности и зависит от преимущественного накопления на фракции токсинов с теми или иными размерами молекул и частиц.

У больных 2-й группы исследования показателей среднего уровня повреждающей активности накопленных в кровяном русле токсинов с молекулами различных размеров обнаружено, что наиболее высоким уровнем активности обладали токсины с частицами размером > 200 нм. Однако их уровень не имел достоверных отличий (р > 0,05) с таковым токсинов с частицами размером 10-200 нм и молекулами < 10 нм. При этом установлена достоверная корреляционная зависимость между уровнем токсичности цельной плазмы и таковым токсинов с частицами размером 10-200 нм, > 200 нм и молекулами < 10 нм.

При исследовании показателя токсичности цельной плазмы и токсиннесущих фракций, обусловленного повреждающей активностью токсинов, обнаружено, что наибольшие уровни повреждающей активности (токсичности) наблюдались у глобулиновой и свободно циркулирующей фракции. При этом уровень токсичности цельной плазмы имел достоверные отличия (р < 0,05) от таковых токсиннесущей альбуминовой и фракции клеточных мембран и не имел достоверных отличий от таковых глобулиновой и свободно циркулирующей фракции. Установлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между уровнем повреждающей активности цельной плазмы и таковым гло-булиновой, свободно циркулирующей и фракции клеточных мембран.

При исследовании распределения потенциала повреждающей активности токсинов, накопленных в кровяном русле на токсиннесущих фракциях, установлено, что наиболее высокие уровни повреждающей активности АВ обнаружены у глобулин-ассоциированных токсинов с частицами размером > 200 нм и свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм. Выявлена достоверная корреляционная зависимость (р < 0,05) между уровнем повреждающей активности свободно циркулирующей фракции и таковым свободно циркулирующих токсинов с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм; между уровнем повреждающей активности глобулиновой фракции и таковым глобулин-ассоциированных токсинов с молекулами размером < 10 и частицами > 200 нм и у альбу-мин-ассоциированных токсинов с молекулами размером < 10 нм.

Исследования прочности связи токсинов с ток-синнесущими белковыми фракциями плазмы крови показали превалирование в кровяном русле АВ, имеющих непрочные связи с токсиннесущими фракциями.

Таким образом, установлено, что у больных 2-й группы наиболее выраженным потенциалом повреждающей активности обладали токсины с частицами размером > 200 нм. Распределение потенциала повреждающей активности токсинов с частицами размером > 200 нм происходило в кровяном русле преимущественно на глобулин-ассоциированной и свободно циркулирующей фракциях. При этом токсины с частицами размером > 200 нм имели прочные связи с глобулинами. Показатель токсичности цельной плазмы является интегративным параметром, отражающим уровни повреждающей активности токсинов с частицами размером 10-200 нм, > 200 нм и < 10 нм, которые накапливаются в кровяном русле на глобулиновой, свободно циркулирующей и фракции клеточных мембран. При этом токсичность каждой из токсиннесущих фракций имеет индивидуальные особенности и зависит от преимущественного накопления на фракции токсинов с теми или иными размерами молекул и частиц.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что у больных с заболеваниями гепатопанкреа-тодуоденальной зоны наблюдается токсемия, которая имеет индивидуальные особенности формирования и проявления, обусловленные различиями в механизмах повреждения биологической мишени токсинами, преимущественном накоплении в кровяном русле токсинов с молекулами и частицами различных размеров, распределении токсинов на токсиннесущих фракциях плазмы крови, прочности связи АВ с белковыми фракциями. Обнаруженные особенности формирования и проявления токсемии, несомненно, играют важную роль при назначении и выборе методов детоксикационной терапии и указывают на целесообразность индивидуализированного подхода в решении этих вопросов у больных с патологией гепатопанкреатодуоде-нальной зоны.

Выводы

1. Комплексные токсикометрические исследования накопленных в кровяном русле АВ позволяют выделить основные звенья развивающейся токсемии и систематизировать их по размерам молекул и частиц, величине повреждающего потенциала, распределению токсинов на токсиннесущих фракциях плазмы крови, прочности связи с белковыми фракциями.

2. У большинства пациентов (77,5 %) с заболеваниями гепатопанкреатодуоденальной зоны наблюдается токсемия тяжелой степени, которая сопровождается накоплением в кровяном русле АВ, обладающих прямым механизмом повреждения биологической мишени, в некоторых случаях (22,5 %) — обладающих опосредованным механизмом.

3. Установлено, что токсемия при заболеваниях гепатопанкреатодуоденальной зоны сопровождается накоплением в кровяном русле АВ с частицами размером 10-200 нм и > 200 нм.

4. Токсины с частицами размером > 200 нм, обладающие опосредованным механизмом повреждения, преимущественно накапливаются на гло-булиновой и свободно циркулирующей фракции и имеют прочные связи с белковыми фракциями плазмы крови.

5. Токсины с частицами размером 10-200 нм, обладающие прямым механизмом повреждения, преимущественно накапливаются на альбуминовой и свободно циркулирующей фракции и имеют непрочные связи с белковыми фракциями плазмы крови.

6. Показатель токсичности цельной плазмы является интегративным параметром, отражающим уровни повреждающей активности токсинов с молекулами и частицами различных размеров, которые накапливаются в кровяном русле на различных токсиннесущих фракциях. При этом токсичность каждой из токсиннесущих фракций имеет индивидуальные особенности и зависит от преимущественного накопления на фракции токсинов с различными размерами молекул и частиц.

7. Информация о закономерностях и особенностях развития и формирования токсемии у больных

с патологией гепатопанкреатодуоденальной зоны представляется важной для индивидуализации показаний к назначению и выбору методов детоксика-ционной терапии.

Список литературы

1. Андрейчин М.А., Бех М.Д., Дем'яненко В.В., Ничик А.З., Ничик Н.А. Методи до^дження ендогенног штоксикаци оргатзму // Методичт рекомендаци МОЗ Украгни. — К., 1998. — C. 1-31.

2. Аристов М.А. Клиническое значение гемодилюции как метода интенсификации гемодиализа у детей с ОПН: Дис... канд. мед. наук. — К., 1994. — 26 с.

3. Бойко В.В., Криворучко 1.А. Патофiзiологiя та л^вання гострого некротичного панкреатиту. — Хартв, 1н-т загальног та невiдкладног хiрургiг АМН Украгни, ДМУ, 2000.

4. ЗверевД.В., ДолецкийА.С., МузуровА..Л. Активныемето-ды детоксикации у детей раннего возраста // Анестезиология и реаниматология. — 1996. — № 6. — C. 48-51.

5. Козинец Г.П., Цыганков В.П., Боярская А.М. Способы определения токсических свойств сыворотки и экстрактов кожи обожженных. — Киев. — Рацпредложение № 591 от 29.09.1991.

6. Проданчук Н.Г., Шейман Б.С., Осадчая О.И., Волошина Н.А. Спойб дiагностики та лжування ендотоксикозу (заявка на винахiд № 2004010546 в^д 26.01.2004р.).

7. Шейман Б.С., Осадчая О.И., Козинец К.Г. Дифференциально-диагностические признаки определения схемы детоксика-ционной терапии у больных с различной патологией // Лабораторная диагностика. — 1999. — № 4. — С. 11-13.

Получено 12.01.14 ■

Кагл1ченко В.В.2, Шейман Б.С.1,3, Осадча О.!.4 1ДП «Науковий центр превентивно! токсикологи, харчово! та х1м1чно! безпеки IменI академ1ка Л.!. Медведя МОЗ Украгни», м. Ки!в

2Нац1ональний медичний ун1верситет 1м. О.О. Богомольця, м. Ки!в

3Нац1ональная дитяча спец1ал1зована л1карня «Охматдит» МОЗ Украгни, м. Ки!в

4!нститут гематологП та трансфузюлогй НАМН Украгни, м. Ки!в

ОСОБЛИВОСП ФОРМУВАННЯ ТОКСЕМИ У ХВОРИХ ¡3 ПАТОЛОПеЮ гепатопанкреатодуоденальнот

ЗОНИ

Резюме. У робота наведено результата дослщжень па-раметрiв ендотоксикозу в пащенттв iз захворюваннями оргашв гепатопанкреатодуоденально! зони. Продемон-стровано особливосп розвитку та формування токсеми, процеси розподшу токсишв у кров'яному русл^ мщшсть 1х зв'язку з токсиннесучими фраками плазми кров1 На пщсташ отриманих даних зроблено висновки про особливосп формування токсеми у хворих.

Ключовi слова: хвороби оргашв гепатопанкреатодуоденально! зони, ендотоксикоз, особливосп розвитку, розпо-дш токсишв у кров'яному русл^ детоксикацшна терапiя.

Kaglichenko V.V.2, Sheyman B.S.13, Osadchaya O.I.4 1State Enterprise «Scientific Center for Preventive Toxicology, Food and Chemical Safety named after Academician L.I. Medved of Ministry of Healthcare of Ukraine» 2National Medical University named after A.A. Bogomolets 3National Children's Specialized Hospital «Mother and Child Healthcare» of Ministry of Healthcare of Ukraine 4Institute of Hematology and Blood Transfusion Gastroenterology of National Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kyiv, Ukraine

FEATURES OF TOXEMIA FORMATION IN PATIENTS WITH

PATHOLOGY OF HEPATOPANCREATODUODENAL ZONE

Summary. The article presents results of studies of endotox-emia parameters in patients with diseases of the hepatopancre-atoduodenal zone. Features of the development and formation of toxemia, processes of toxin distribution in the bloodstream, the strength of their relationship with toxin-containing blood plasma fractions are shown. Based on the data conclusions about the features of the formation of toxemia in patients were made.

Key words: diseases of hepatopancreatoduodenal zone, en-dotoxemia, features of development, distribution of toxins in the bloodstream, detoxification therapy.