Биология
Перед проведением микроманипуляций ооциты с ППТ культивировали в течение 15 мин. в среде ТС199, содержащей 7,5 мкг/мл Цитохалазина Б. В контроле обработку цитохалазином Б не проводили.
Норму реконструирования ооцитов определяли в 6 независимых экспериментах как отношение числа морфологически полноценных ооцитов к общему числу ооци-тов, подвергнутых процедуре энуклеации/пересадки.
Результаты исследования.
Показано, что обработка ооцитов в течение 15 мин. в среде, содержащей цитохалазин Б, перед проведением процедуры энуклеации и пересадки в перивителлиновое пространство эмбриональных фибробластов не влияла на эффективность реконструирования ооцитов (табл. 1).
Вывод.
Получение клонированных цитогибридов крупного рогатого скота возможно без использования цитохала-зина Б.
Литература
1. Brendan G., Tatham Aneta Т., Dowsing and Alan O. Trounson. Enucleation by Centrifugation of In Vitro-Matured Bovine Oocytes for Use in Nuclear Transfer // Biol. Reprod. 1995. V. 53. P. 1088-1094.
2. Du F., Jiang S., Yang X. Beneficial effect of oocyte activation prior to and during nuclear transfer in cattle using in vitro matured oocytes 24 h of age // Reprod. Nutr. 1995. V. 35 (6). P. 703-712.
3. Jonathan R. Hill, Quinton A. Winger, Robert C. Burghardt, Mark E. Westhusin Bovine nuclear transfer embryo development using cells derived from a cloned fetus // Anim. Reprod. 2001. V. 67. P. 17-26.
4. Xiang Chen Li, Yong Zhang, Song Hua, Jian Hong Shu, Zhi Peng Zhang and Jun Wei Cao. The use of demecolcine for enucleation of bovine oocytes // J. Zool. 2007. V. 137 (2). P. 209-214.
5. Zhu Xiu-ping, Zhu Shu-wen, Zhang Jing, Hua Xiu-guo, Tang Feng. Effect of Cytochalasin B on Porcine Oocyte Enucleate // J. Agric. Science. 2005.
6. Ricardo Felmer D., María Elena Arias. Developmental rates of bovine nuclear transfer embryos derived from different fetal non transfected and transfected cells // Animal Biotechnology. 2011. V. 14 (3).
ОСОБЕННОСТИ БИОХИМИЧЕСКОГО И БИОЭЛЕМЕНТНОГО СТАТУСА ИМПОРТИРОВАННОГО КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ГОЛШТИНО-ФРИЗСКОЙ ПОРОДЫ В УСЛОВИЯХ ЮЖНОГО УРАЛА
Т. А. ШЕПЕЛЕВА,
. . . 457100, Челябинская область, г. Троицк,
кандидат ветеринарных наук, Уральская 1АВМ ул. Гагарина, д. 13; тел. 89043020419
Ключевые слова: биогеохимические провинции, адаптация, микроэлементы, нарушение обмена веществ, биохимические показатели крови, рацион кормления животных, голштино-фризская порода.
Keywords: biogeochemical provinces, adaptation, trace substances, metabolism disturbance, biochemical indicators of a blood, a ration of feeding of animals, golshtino-frizskaja breed.
Процесс адаптации крупного рогатого скота, завезенного из Германии и Голландии, в биогеохимических провинциях Уральского региона проходит через глубокие изменения в состоянии обменных процессов и связан с нарушением белкового, углеводного, жирового и особенно минерального обмена [1, 2, 4].
Целью нашей работы явилось изучение влияния биогеохимической провинции на биохимический и микроэлементный статус крупного рогатого скота голштино-фризской породы, импортированного из Германии и Голландии, в условиях ООО «Агрофирма Магнезит» Саткинского района и ООО «Песчаное» Увельского района Челябинской области.
Материал и методы.
Содержание макро- и микроэлементов в кормах, крови, молоке и моче определяли на атомно-абсорбционном спектрофотометре ААS-3. Общий белок — рефрактометрически, глюкозу — с ортотолуидиновым реактивом, мочевину — уреазным и белковые фракции — нефелометрическим методами, кальций и магний — триллонометрически, фосфор — по
Бригсу-Юделовичу с дополнениями Ивановского, титруемую кислотность молока — по Тернеру в модификации А. А. Кабыша.
Результаты исследований и их обсуждение.
Исследование макро- и микроэлементного состава кормов и воды ООО «Агрофирмы Магнезит» показали, что в них имеет место аномальное содержание макро-и микроэлементов, характерное для биогеохимиче-ской провинции. Так, количество кальция снижено до 1,67 г/кг при норме 10-14 г/кг, магния — 0,5 г/кг при норме 2,2-4,0 г/кг и фосфора — 0,37-0,51 г/кг при норме 4-5 г/кг. Содержание меди в кормах ниже нормативных данных и составляет 1,4-3,4 мг/кг при норме 7-10 мг/кг. Количество железа — 44,8-62,9 мг/кг при норме 50-70 мг/кг. Уровень кобальта составляет 0,28 мг/кг при норме 1-1,5 мг/кг. Цинк снижен до 0,64 мг/кг при норме 50-100 мг/кг. Уровень марганца — 16,84-22,8 мг/кг при норме 60-80 мг/кг.
Исследование кормов ООО «Песчаное» показали, что они бедны по содержанию кальция. Количество кальция в сене — 3,95 г/кг при норме 4,2-8,3 г/кг, в силосе —
18
www. m-avu. narod. ru
Биологий 1ь
0,53-0,78 г/кг при норме 1,2-1,4 г/кг. Количество фосфора в силосе и сенаже составляет 0,54-0,77 г/кг при норме 0,7 г/кг Магний во всех видах корма снижен — 0,39-0,4 г/кг (при норме 2,2-4,0 г/кг). Содержание меди в сене луговом, сенаже и концентратах на нижней границе нормативных данных. Количество железа — 31,4-79,12 мг/кг при норме 50-70 мг/кг.
Уровень кобальта составляет 0,40-1,72 мг/кг при норме 1-2 мг/кг. Цинк снижен до 18,6 мг/кг при норме 60-80 мг/кг.
Уровень марганца — 17,9-31,84 мг/кг при норме 60-80 мг/кг.
Особый интерес представляет минеральный состав крови животных. У коров ООО «Агрофирма Магнезит» нарушено соотношение между кальцием, магнием и фосфором. Так, на фоне снижения щелочных элементов кальция до 1,86 ± 0,02 ммоль/л при норме 2,5-3,1 ммоль/л и магния — 0,66 ± 0,04 ммоль/л при норме 0,81,2 ммоль/л, возрастает количество фосфора до 2,7 ± 0,03 ммоль/л при норме 1,45-1,94 ммоль/л.
Нами отмечено снижение кобальта на 50 % от нормы, цинка — 83,5 %, меди — 23 % и марганца — 86,7 %, повышение железа на 55,1 %. Следовательно, в крови животных наблюдается антагонизм между железом и марганцем, медью и цинком, медью и свинцом, цинком и свинцом, т. е. низкое содержание меди и цинка не снижает токсического влияния свинца, несмотря на низкое содержание его в крови. Низкий уровень марганца в крови не снижает токсического влияния железа.
Аномальное содержание макро- и микроэлементов в кормах оказало существенное влияние и на показатели крови животных ООО «Песчаное». Так, нарушено соотношение между кальцием, магнием и фосфором, на фоне снижения щелочных элементов: кальция до 1,54 ± 0,02 ммоль/л при норме 2,5-3,1 ммоль/л и магния —
0,86 ± 0,02 ммоль/л при норме 0,82-1,23 ммоль/л — возрастает количество фосфора до 2,44 ± 0,02 ммоль/л при норме 1,45-1,94 ммоль/л. Указанные отклонения сопровождаются патологией костной ткани (артриты, артрозы, остеодистрофия, остеомаляция). Снижено количество марганца до 0,01 ± 0,001 мг/л при норме 0,05-0,1 мг/л. Цинк, кобальт и медь на нижней границе физиологической нормы. Количество железа в крови коров —
17,5 ± 0,2 мкмоль/л.
Щелочной резерв крови у животных «Агрофирмы Магнезит» снижен до 31,4 ± 1,8 об % СО2, ООО «Песчаное» — 27,4 ± 2,1 об % СО2 (при норме 46-66 об % СО2), что свидетельствует о сдвиге кислотнощелочного равновесия в кислую сторону.
У животных «Агрофирмы Магнезит» на фоне высокого содержания в крови общего белка 90,2 ± 0,4 г/л
отмечается снижение мочевины до 0,58 ± 0,1 ммоль/л. В ООО «Песчаное», наоборот, уровень общего белка снижен до 70,8 ± 0,2 г/л, что соответствует нижней границе физиологической нормы (72-86 г/л), количество мочевины также снижено до 1,29 ± 0,2 ммоль/л (при норме 0,85-6,91 ммоль/л). Нарушено соотношение белковых фракций крови. Отмечено повышение гамма-глобулинов, на фоне снижения р-глобулинов. Указанные отклонения свидетельствуют о патологии печени и нарушении синтеза мочевины в ней, а также интенсификации иммунологических процессов и нарушении синтетической функции печени.
Уровень глюкозы в первом случае снижен до 1,7 ± 0,2 ммоль/л, во втором повышен до 3,8 ± 0,4 ммоль/л при норме 2,2-3,3 ммоль/л.
Количество каротина, несмотря на окончание летнего содержания, когда каротин в крови возрастает, в обоих хозяйствах на нижней границе нормы — 0,87 ± 0,0,2 мг % и 0,62 ± 0,01 соответственно (при норме 0,8-1,2 мг %).
При исследовании молока коров хозяйств установлено, что количество белка снижено до 2,4 ± 0,3 % при норме 2,7-5,0 %. Молоко бедно кальцием — 93,9 ± 4,9 мг % при норме 125-130 мг % — и особенно фосфором — 9,9 ± 1,1 мг % при норме 95-105 мг %. Разница при титровании по А. А. Кабышу — 9,5-10,8, или выше 9, что соответствует нарушению фосфорно-кальциевого обмена в организме коров.
Нами проведен сравнительный анализ крови у коров голштино-фризской породы, завезенной из Германии и Голландии, и местной Уральской черно-пестрой породы. Исследования показали, что у местного скота содержание общего белка составляет в ООО «Агрофирма Магнезит» 83,5 ± 0,1 г/л, на фоне более высокого уровня мочевины — 0,99 ± 0,4 ммоль/л. Уровень гамма-глобулинов ниже, а альбуминов — выше. В крови коров уральской черно-пестрой породы количество каротина, магния икальция в 1,4 раза выше, а глюкозы — ниже. В ООО «Песчаное» в крови общего белка содержится
82,5 ± 0,3 г/л, мочевины — 1,9 ± 0,1 ммоль/л. Уровень кальция и фосфора выше, а глюкозы ниже, чем у коров голштино-фризской породы.
Таким образом, в зависимости от наличия макро- и микроэлементов в биогеохимических провинциях, у животных поражаются те или иные обменные процессы, структура патологических процессов имеет как общие моменты, так и особенности, связанные с экологогеографической характеристикой региона, которые необходимо учитывать при разработке комплекса лечебно-профилактических мероприятий.
Литература
1. Кабыш А. А. Нарушение фосфорно-кальциевого обмена у животных на почве недостатка и избытка микроэлементов в зоне Южного Урала. Челябинск, 2006. 408 с.
2. Колб В. Г., Камышников В. С. Клиническая биохимия. Минск, 1976. С. 195-200.
3. Лукашик Н. А., Тащилин В. А. Зоотехнический анализ кормов. М. : Колос, 1967. 216 с.
4. Скальный А. В., Рудаков И. А. Биоэлементы в медицине. М. : Мир, 2004. 271 с.
www.m-avu. па^. ги
19