CC BY
23
tives of glycin prevent the development of stress stomach ulcers, reduce the level of eosinopenia, reduce hypo-thyreosis, normalize activity of zones of bark of adrenal glands.
Литература
1. Андреев Б.В., Галустьян Г.Э., Игнатов Ю.Д., Никитина З.С., Сытинский И.А. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность системы гамма-аминомасляной кислоты // Укр. биохим. журн. -
1983. - Т.55. №6. - С.652-656.
2. Бредбери М. Концепция гематоэнцефалического барьера. - М.: Мир. 1983. - 480 с.
3. Вальдман А.В. Молекулярно-биологические процессы динамики эмоционально-стрессовой реакции //Вестник АМН СССР. - 1987. - №6. - С.11-15.
4. Васюкова Е.А., Писаревская И.В. Пролактин и его клиническое значение // Клин. Медицина. - 1982. -№3. - С.9-15.
5. Малышев В.В., Трещук Л.И., Попова Н.С. Изменение содержания эозинофилов, кортикостерона и катехоламинов в процессе восстановления печени после резекции // Бюлл. экспер. биол. и мед. -1978. -№>12. -С.663-664.
6. Малышев В.В., Стрижков B.C. Антистрессорный эффект пролактина // Бюлл. экспер. биол. и мед. -
1984. - №1. - С.28-30.
7. Малышев В.В., Петрова В.А., Манухин Б.Н. Изменения уровня эозинофилов, кортикостерона и метаболизма катехоламинов в динамике эмоционально-болевого стресса // Бюлл. экспер. биол. и мед. -
1985. -№3. -С.267-269.
8. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. -М.: Наука, 1981. - 278 с.'
9. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и роль в нем стресс-реакции, основные стадии процесса // Физиология адаптационных процессов. - М., 1986. -С.77-123.
10. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Стресс-лими-тирующие системы организма и новые принципы
профилактической кардиологии. - М., 1989. -
Вып.З. - 72 с.
11. Раевский К.С., Георгиев В.П. Медиаторные аминокислоты: нейрофармакологические и нейрохимические аспекты. - М.: Медицина, София: Медицина и физкультура, 1986. - 240 с.
12. Стрижков B.C. Изменение количественных параметров структур щитовидной железы в период адаптации организма к эмоционально-болевому стрессу и влияние на эти параметры гормона пролактина // Здравоохранение Туркменистана. - 1988. -№1. - С.3-6.
13. Стрижков B.C. Влияние пролактина на активность окислительно-восстановительных ферментов в клетках сетчатой зоны коры надпочечников при воздействии на организм гипокинезии и эмоцио-налыю-болевого стресса // Здравоохранение Туркменистана. - 1991,-№4.-С.30-33.
14. Desiderata О.. Mac Kinnon J.H., Hissem Н. Development of gastric ulcers in rats following stress termination // J. Сотр. Physiol. - 1974. - Vol.87. N.I. -P.208-213.
15. Earley C. J., Leonard B.E. Consequence of reward nonreward conditions: runway behaviour, neurotransmitters and physiological indicators of stress // Pharmacol. Biochem. and Behav. - 1979. - Vol. 11. N.2. -P.215.
16. Matsuki M„ Nishida S.. Kashiwa J. et al. Effect of dophaminen ACTH-induced glucocorticoid secretion in rat adrenal suspended cells // Horm. Metab. Res. -
1985. - Vol.17. -P.429-431.
17. Paris J.M., Lorens S.A., Van de Kar L.D. et al. A comparison of acute stress paradigms: hormonal responses and hypothalamic serotonin // Physiol. Behav. - 1987. -Vol.3*9, N.I. -P.33-43.
О САВЧЕНКО А.А., МАРТЫНОВА Г.П., КОТОВА Я.А. -УДК 616.98:578-053.2+612.112.94
ОСОБЕННОСТЬ УРОВНЕЙ АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ У ДЕТЕЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ
Л.Л. Савченко. Г.П. Мартынова. Я.А. Котова.
(Институт медицинских проблем Севера СО РАМН, ректор - член-корр. РАМН, д.м.п., проф. В.Т. Манчук, Красноярская государственная медицинская академия, ректор - акад. РАЕН и АН ВШ, д.м.н., проф. В.И. Прохоренков)
Резюме. У детей 1-3 и 4-7 лет в зависимости от степени тяжести ОКИ исследованы особенности уровней активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови. При исследовании уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови обнаружены выраженные особенности интенсивности различных метаболических процессов, причем уровни терминальных стадий гликолиза у детей исследуемых возрастных групп с легкой степенью ОКИ снижаются, тогда как у больных со среднетяжелой и тяжелой степенью тяжести - повышаются. Предполагается, что установленные особенности метаболизма лимфоцитов у детей с ОКИ разного возраста определяются регуляторными и обменными процессами всего организма, которые специфичны для каждого возрастного периода.
Острые кишечные инфекции (ОКИ) остаются наиболее распространенными заболеваниями детского возраста. Более того, в последние годы отмечается отчетливая тенденция к росту заболе-
ваемости ОКИ, утяжелению их клинической картины, длительному негладкому течению [2,7]. Именно тяжелые формы заболеваний, с развитием токсикоза, дегидратации и других неотложных
состояний могут быть причинами летальных исходов, регистрирующихся преимущественно у детей первых лет жизни [4], Не следует упускать из вида тот факт, что развитие критических состояний у детей с ОКИ обусловлены иногда быстрым и непредсказуемым развитием болезни, при этом, существующие традиционные методы лабораторной диагностики не позволяют своевременно на ранних этапах заболевания оценить ответную реакцию организма на патогенное действие инфекционно-токсических факторов, В связи с этим весьма актуальной остается проблема прогнозирования степени тяжести ОКИ,
Энтеропатогенные бактерии, поражая желудочно-кишечный тракт, стимулируют активность сложнейших взаиморегулируемых процессов иммунной защиты, направленных на поддержание и сохранение гомеостаза организма. Между тем доказано, что уровень иммунореактивности определяется не только морфологическим составом им-мунокомпетентных клеток и концентрацией иммуноглобулинов в сыворотке крови, но и уровнем метаболических процессов в иммунокомпетент-ных клеток, которые в значительной степени определяют функциональную активность иммуно-цитов [3,6,11],
Целью исследования явилось изучение особенностей уровней активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови в зависимости от степени тяжести ОКИ у детей 1-3 и 4-7 лет. Материалы и методы
Обследовано 243 детей с ОКИ в возрасте 13 лет (139 детей) и 4-7 лет (104 ребенка). Во всех случаях имела место этиологическая расшифровка заболевания, В обеих возрастных группах преобладали шигеллез (45,1% у детей 1-3 лет и 65,4% у детей 4-7 лет) и сальмонеллез (16,7% и 13,6%, соответственно по возрастным группам). Условнопатогенная флора чаще являлась причиной заболеваний у детей более раннего возраста (27,1%) по сравнению с детьми 4-7 лет (13,6%), У небольшого количества больных диагностирована сочетанная этиология заболевания (соответственно по возрастным группам 11,1% и 7,4%), Легкая форма заболевания была зарегистрирована у 2,9% больных 1-3 лет и 20,2% детей с ОКИ в возрасте 4-7 лет. Среднетяжелая форма заболевания выявлялась у 41,7% детей 1-3 лет с ОКИ и 52,9% больных 4-7 лет, тяжелая - у 55,4% и 26,9% больных, соответственно. Всем детям при поступлении в стационар (1-3 день болезни) и в динамике заболевания проводили комплексное клиниколабораторное обследование, у части больных проводилось исследование микробиоценоза кишечника, В качестве контроля обследовано 26 здоровых ребенка в возрасте 1-3 лет и 49 детей 4-7 лет,
У всех обследуемых детей утром натощак забиралось 5 мл венозной крови. Определение активности НАД( Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах проводили биолюминесцентным методом [5], Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфат-
дегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатде-гидрогеназы (ГЗФДГ), прямой и обратной реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и Обр.ЛДГ), прямой и обратной реакции малатдегидрогеназы (МДГ и Обр.МДГ), НАДФ- и НАД-зависимых глутаматдегидрогеназ (НАДФГДГ и НАДГДГ), НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ) и глутатионредукта-зы (ГР), Активность дегидрогеназ выражали в ферментативных единицах (1 Е=1 мкмоль/мин [1]) на 10000 клеток,
Статистртческая обработка результатов проводилась с использованием критерия Манна-Уитни с помощью пакета прикладных программ ЗРББ 8.0.
Результаты и обсуждение При исследовании уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови детей 1-3 лет с ОКИ в зависимости от степени тяжести патологического процесса обнаружено повышение активности ГЗФДГ и снижение уровня НАДГДГ (Рис,1А и Рис,1Б), Снижение активности НАДФМДГ в лимфоцитах крови становится статистически достоверным у детей с тяжелой степенью ОКИ (Рис. 1 В). Статистически достоверное снижение активности Обр.ЛДГ в лимфоцитах крови у детей с легкой и среднетяжелой степенью ОКИ по сравнению с контрольным диапазоном нивелируется у больных с тяжелой степенью патологического процесса за счет повышения активности (Рис. 1 Г). Уже у детей с легкой степенью ОКИ увеличена активность ГР в лимфоцитах крови, причем уровень данного фермента повышается у больных со среднетяжелой и тяжелой степенью тяжести инфекционного процесса, что выражается в увеличении достоверности различий по сравнению с контрольными показателями (Рис. 1Д), Практически не зависит от степени тяжести повышение активности Обр, НАДФГДГ в лимфоцитах крови больных детей 1-3 лет (Рис, 1Е), При всех степенях тяжести ОКИ у детей в лимфоцитах крови повышена активность НАД-ФИЦДГ (при легкой степени: 36,16± 14,30 мкЕ, Р<0,05; при среднетяжелой степени: 25,24±
3,80 мкЕ, Р<0,05; при тяжелой степени: 28,56± 3,04 мкЕ, Р<0,01) по сравнению с контрольным значением (12,87+4,21 мкЕ), Только у детей со среднетяжелой степенью ОКИ в лимфоцитах крови статистически достоверно понижается активность Г6ФДГ (1,20±0,24 мкЕ, Р<0,05; в контроле -2,21±0,40 мкЕ) и повышается уровень НАДИЦДГ (2,16±0,46 мкЕ, Р<0,05; в контроле - 0,92+
0,25 мкЕ), У больных с легкой, среднетяжелой и тяжелой степенью ОКИ в иммунокомпетентных клетках понижена активность Обр.МДГ (41,70± 6,09 мкЕ, Р<0,05; 66,85±9,27 мкЕ, Р<0,05 и 67,88±7,03 мкЕ, Р<0,05, соответственно; в контроле - 132,78+47,21 мкЕ), Только у детей с тяжелой степенью ОКИ в лимфоцитах крови обнаружено выраженное снижение активности МДГ (8,31 + 1,40 мкЕ, Р<0,05; в контроле - 18,58±2,91 мкЕ), Уровни активности ЛДГ и Обр,НАДГДГ в лимфоцитах
Рис, 1, Активность НАД- и НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови у детей 1 -3 лет с разной степенью тяжести ОКИ,
Примечание: 1 - здоровые дети; 2 - больные с легкой степенью ОКИ; 3 - больные со среднетяжелой степенью ОКИ; 4 - больные с тяжелой степенью ОКИ,
крови больных детей 1-3 лет при легкой, среднетяжелой и тяжелой степени ОКИ соответствует контрольному диапазону.
Исследуемые ферменты находятся на разных метаболических путях иммунокомпетентных клеток, где занимают ключевые позиции. Так, ГЗФДГ является ферментом, определяющим перенос продуктов липидного катаболизма на окислительновосстановительные реакции гликолиза [1,12], Увеличение активность данного фермента у больных 1-3 лет, сочетающееся с ростом степени тяжести инфекционного процесса (Рис,1А), характеризует повышенное использование липидного
пула в анаэробных процессах. Причем, связанное со степенью тяжести ОКИ повышение активности ГЗФДГ совпадает с увеличением интенсивности анаэробной реакции ЛДГ (Рис,1Г), уровень которой определяется наработанным в гликолизе пи-руватом и НАДН, При этом необходимо отметить, что если у детей с легкой степенью ОКИ уровень анаэробной реакции ЛДГ значительно снижен, то у больных с тяжелой степенью ОКИ активность данной ферментативной реакции соответствует контрольному диапазону. Между тем, именно у детей 1-3 лет с тяжелой степенью ОКИ выявлено выраженное снижение активности малик-фермен-
та, который определяет интенсивность внутриклеточного анаболизма липидов [12],
Лимфоциты являются клетками, в которых энергетические процессы определяются не только интенсивностью анаэробного окисления глюкозы, но и активностью аэробных реакций [3,6], Обнаружено, что только в иммунокомпетентных клетках крови у детей 1-3 лет с тяжелой степенью ОКИ значительно снижается активность МДГ (одного из регуляторных ферментов цикла Кребса), При этом активность другого фермента лимонного цикла - НАДИЦДГ - в лимфоцитах у детей со среднетяжелой степенью ОКИ возрастает. По-видимому, одним из механизмов поддержки высокого уровня интенсивности субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот при пониженном уровне образовании пирувата в гликолизе является повышение активности НАДФИЦДГ -вспомогательной дегидрогеназы цикла Кребса, позволяющей поддерживать ферментативные реакции за счет НАДФ-зависимого окисления [1,10], Однако активность дыхательной цепи митохондрий зависит также и от водородного градиента, который в значительной степени определяется малат-аспартатным шунтом. Установлено, что активность ключевой реакции малат-аспартатного шунта митохондрий - Обр.МДГ [1] - в лимфоцитах крови у детей с легкой, среднетяжелой и тяжелой степенью ОКИ снижена.
Между тем, при исследовании ферментов, отражающих наработку интермедиатов для пластических процессов, обнаружена активация обратной реакции НАДФГДГ, которая характеризует уровень переноса субстратов на реакции аминокислотного обмена [1], При этом внутриклеточная активность НАДГДГ у детей со среднетяжелой и тяжелой степенью ОКИ снижена (Рис,1Б), что позволяет предположить пониженный уровень переноса интермедиатов с реакций аминокислотного обмена на окислительно-восстановительные реакции цикла Кребса,
Необходимо также отметить выраженное повышение активности ГР в лимфоцитах крови больных ОКИ, ГР - фермента антиоксидантной системы, повышение активности которого отражает увеличение интенсивности внутриклеточных перекисных процессов [1,8], Кроме того доказано, что восстановленный глутатион может непосредственно модулировать пролиферативные процессы лимфоцитов [9],
При исследовании активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови у детей 4-7 лет с ОКИ в зависимости от степени тяжести заболевания обнаружены значительные особенности как относительно контрольного диапазона, так и выявленных среднестатистических значений у больных 1-3 лет. Так, активность ГЗФДГ в лимфоцитах крови больных 4-7 лет значительно повышена только при среднетяжелой степени ОКИ, тогда как в иммунокомпетентных клетках у больных с тяжелой степенью инфекции уровень данного фермента достоверно снижен
(Рис,2А), Значительно снижена активность аэробной реакции ЛДГ в лимфоцитах крови больных 47 лет с легкой степенью ОКИ, затем при среднетяжелой и тяжелой степени ОКИ уровень данной ферментативной реакции повышается (Рис,2Б), В отличие от особенностей активности анаэробной реакции ЛДГ в лимфоцитах крови больных 13 лет (Рис,1Г), у детей 4-7 лет с ОКИ уровень данной реакции значительно повышен при легкой степени тяжести инфекционного процесса, при среднетяжелой и тяжелой степени ОКИ снижается до контрольного диапазона (Рис,2В), Подобным образом в зависимости от степени тяжести ОКИ изменяется активность Обр.МДГ в лимфоцитах крови больных 4-7 лет при легкой и среднетяжелой степенях - повышение, при тяжелой степени ОКИ - относительное понижение активности до контрольного диапазона (Рис,2Г), В зависимости от степени тяжести заболевания аналогичным образом изменяется активность ГР (Рис,2Д) и Обр,НАДФГДГ (Рис,2Е) в лимфоцитах больных 4-7 лет. Кроме того, обнаружено, что у детей 47 лет с легкой и тяжелой степенью ОКИ в лимфоцитах значительно снижена активность Г6ФДГ (0,36+0,08 мкЕ, Р<0,01 и 0,50±0,08 мкЕ, Р<0,001, соответственно; в контроле - 2,02±0,34 мкЕ),
МДГ (3,96±1,26 мкЕ, Р<0,001 и 8,36±1,75 мкЕ, Р<0,001, соответственно; в контроле - 21,96± 2,35 мкЕ) и НАДГДГ (0,29+0,10 мкЕ, Р<0,05 и
0,ЗОЮ,09 мкЕ, Р<0,05, соответственно; в контроле - 0,69+0,14 мкЕ), При всех степенях тяжести ОКИ статистически достоверно снижена внутриклеточная активность НАДФМДГ, НАДИЦДГ и Обр,НАДГДГ, Уровни активности НАДФГДГ и НАДФИЦДГ в иммунокомпетентных клетках крови у детей с ОКИ при всех степенях тяжести соответствуют контрольному диапазону.
Анализ уровней активности исследуемых НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови у детей 4-7 лет с различной степенью тяжести ОКИ позволяет установить значительные особенности метаболизма иммунокомпетентных клеток крови как относительно контрольных показателей, так и относительно выявленных у больных детей 1-3 лет. Так, только у больных 47 лет с легкой и тяжелой степенью ОКИ в лимфоцитах крови снижена активность ключевой и инициализирующей реакции пентозофосфатного цикла - Г6ФДГ, Основными продуктами пентозофосфатного цикла являются рибозо-5-фосфат и НАДФН, используемые в разнообразных реакциях макромолекулярного синтеза [1,13], в связи с чем можно предположить ингибирование ряда синтетических процессов. Также как и у больных 13 лет, у детей 4-7 лет в лимфоцитах крови независимо от тяжести ОКИ повышена активность ГР, Кроме того, у больных 4-7 лет с легкой степенью ОКИ в лимфоцитах крови значительно повышена активность анаэробной реакции ЛДГ, что позволяет предположить высокую интенсивность анаэробного дыхания иммунокомпетентных клеток. Однако при среднетяжелой и тяжелой степени
Рис,2, Активность НАД- и НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови у детей 4-7 лет с разной степенью тяжести ОКИ,
Примечание: 1 - здоровые дети; 2 - больные с легкой степенью ОКИ; 3 - больные со среднетяжелой степенью ОКИ; 4 - больные с тяжелой степенью ОКИ,
ОКИ активность данной реакции снижается до контрольного диапазона. Между тем, активность ГЗФДГ повышена только в лимфоцитах крови у больных 4-7 лет со среднетяжелой степенью ОКИ, тогда как у детей с тяжелой степенью инфекционного процесса уровень фермента снижен практически до нуля, В то же время, при тяжелой степени ОКИ уровень переноса продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстанови-тельные
реакции гликолиза через ГЗФДГ значительно снижен.
При исследовании в лимфоцитах крови у детей 4-7 лет с ОКИ уровней активности ферментов митохондриального компартмента установлено выраженное снижение активности МДГ при легкой и тяжелой степени ОКИ, Активность другого фермента цикла трикарбоновых кислот - НА-ДИЦДГ - снижена при всех степенях тяжести ин-
фекционного процесса, что, по-видимому, отражает пониженную интенсивность субстратного потока по циклу Кребса, При этом отсутствует изменение активности вспомогательных дегидро-геназных реакций. Необходимо также отметить, что в иммунокомпетентных клетках крови у детей 4-7 лет с легкой и тяжелой степенью ОКИ снижена активность НАДГДГ, которая осуществляет перенос продуктов аминокислотного обмена на реакции цикла Кребса [ 1 ],
Своеобразно изменяется активность обратных реакций НАД- и НАДФ-зависимых глутаматде-гидрогеназ в иммунокомпетентных клетках крови у больных 4-7 лет: активность Обр,НАДГДГ значительно снижена при всех степенях тяжести ОКИ, тогда как уровень Обр.НАДФГДГ повышен в лимфоцитах крови при легкой и средней степени тяжести ОКИ, Подобное состояние активности данных ферментов, осуществляющих соответственно НАДН- и НАДФН-зависимый перенос интермедиатов с реакций лимонного цикла на реакции аминокислотного обмена, отражает недостаточность в митохондриальном компартменте НАДН и высокий уровень содержания НАДФН при легкой и среднетяжелой степени острого инфекционного процесса.
Таким образом, установлены выраженные зависимые от возраста различия в метаболическом
THE PECULIARITIES OF THE ACTIVITY OF METABOLIC ENZYMES IN BLOOD
LYMPHOCYTES IN CHILDREN ACCORDING TO THE STAGE OF ACUTE INTESTINE INFECTION
A,A, Savchenko, G,P, Martynova, Y,A, Kotova
(Medical Research Institute for Northern Problems - Siberian Division of Russian Academy of Medical Sciences, Krasnoyarsk, Krasnoyarsk State Medical Academy, Russia,)
We studied the peculiarities of the activity of metabolic enzymes in blood lymphocytes in children in ages from 1 to 3 and from 4 to 7 according to the stage of acute intestine infection (All), We revealed that the activity of NAD- and NADP-dependent dehydrogenases in blood lymphocytes described of peculiarities in the intensity of different metabolic processes. While the levels of terminal stages of glycolysis according to All
stage in junior and senior children are changing in diametrically different way. We assume that the revealed
peculiarities oflymphocyte metabolism in children (All patients) in different ages are determined by regulatory and metabolism processes in the whole body, which are specific in every age period.
статусе иммунокомпетентных клеток у больных с различной степенью тяжести ОКИ, Так, анализ исследуемых уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови у детей 1 -3 лет позволяет предположить снижение интенсивности анаэробного окисления глюкозы уже при легкой степени ОКИ, причем при тяжелой степени ОКИ уровень гликолиза достигает диапазона нормы, тогда как у детей 4-7 лет обнаружены совершенно обратные изменения. Кроме того, если у детей 1-3 практически не изменяются уровни активности исследуемых оксидоредуктаз цикла трикарбоновых кислот, то у детей 4-7 лет с ОКИ обнаружено снижение активности ферментов, характеризующих интенсивность аэробных реакций. Независимо от возраста в иммунокомпетентных клетках больных ОКИ повышена активность ГР, Можно предположить, что установленные особенности метаболизма лимфоцитов у детей с ОКИ разного возраста определяются регуляторными и обменными процессами всего организма, которые специфичны для каждого возрастного периода. Следовательно, при разработке иммунореабили-тационных методов необходимо учитывать и степень нарушения метаболических процессов иммунокомпетентных клеток.
Л итература
1,Березов Т.Т., Коровкин Б,Ф, Биологическая химия, - М.: Медицина, 1998,
2, Горелов А,В,, Милютина Л.Н., Воротынцева Н,В, Изучение острых кишечных инфекций у детей // Эпидемиол, иинфек, болезни, - 1999, -№2. -С.41-46,
3, Куртасова Л.М., Савченко А,А,, Манчук В,Т, Метаболические аспекты иммунных нарушений у детей с заболеваниями органов дыхания, - Новосибирск: СО РАМН, 2001
4, НисевичН.И. Современные проблемы инфекционных заболеваний у детей // Педиатрия, - 1995, -№4, - С,67-69,
5, Савченко А,А,, Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолю-минесцентным методом // Лаб, дело, - №11, - С,23-25,
6, Труфакин В,А,, Шурлыгина А,В,, Дергачева Т.И., Литвиненко Г, И, Циркадные вариации метаболи-
ческой реакции лимфоцитов крови людей на гормональные стимулы в норме и при развитии иммунодефицита // Бюлл, эксперим, биол, и мед, -1995, - Т, 119, №2, - С, 181-183,
7, Учайкин В.Ф., Соколова В.Ф., Новокшонов А,А,, Корнюшин М,А, Современные подходы к лечению острых кишечных инфекций у детей // Педиатрия, - 1996, -№3. -С,49-54,
8, Abiaka С„ Al-Awadi F„ Olusi S, Effect of prolonged storage on the activities of superoxide dismutase, glutathione reductase, and glutathione peroxidase // Clin, Chem, - 2000, - Vol,46, N.4. - P.566-567,
9, Bansal M.P., Sood S, In vivo and in vitro influence of selenium on DNA/RNA synthesis in spleen and lymphocytes in culture - possible mediation of changes in GSH/GSSG ratio // Indian J, Exp, Biol, - 2001, -Vol.39, N.I. -P.25-28.
10. Barroso J.B., Peragon J., Garcia-Salguero L. et al. Carbohydrate deprivation reduces NADPH-production in fish liver but not in adipose tissue // Int. J. Biochem, Cell Biol, - 2001, - Vol.33, N.8. - P.785-796.
11. De Azevedo R.B., Rosa L.F., Lacava Z.G., Curi R. Gonadectomy impairs lymphocyte proliferation and macrophage function in male and female rats. Correlation with key enzyme activities of glucose and glutamine metabolism // Cell Biochem. Funct. - 1997. -Vol.15, N.4. -P.293-298.
12. MacDonald M.J., Marshall L.K. Survey ofnonnal appearing mouse strain which lacks malic enzyme and NAD+-linked glycerol phosphate dehydrogenase:
normal pancreatic beta cell function, but abnormal metabolite pattern in skeletal muscle // Mol. Cell. Biochem. - 2001. - Vol.220, N.l-2. - P.117-125.
13. Tuttle S., Stamato T„ Perez M.L., Biaglow J. Glu-coses-phosphate dehydrogenase and the oxidative pentose phosphate cycle protect cells against apoptosis induced by low doses of ionizing radiation // Radiat. Res. - 2000. - Vol. 153, N.2. - P.781-787.
& КУРТАСОВА Л.М., ГУЛЬМАН Л.А.. ОЛЬХОВСКИЙ И.А., АНДРЕЕВА А. А. -УДК 616.366-002:615.833.1/.9(571.54)
ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО ОТВЕТА В ДИНАМИКЕ ВЭБ-ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ
Л.М. Куртасова. А.А. Гульман. И.А. Ольховский. А.А. Андреева.
(Красноярская государственная медицинская академия, ректор - акад. РАЕН и АН ВШ, д.м.п., проф.
В.И. Прохоренков, кафедра детских инфекционных болезней, зав. - д.м.п., проф. Л.А. Гульман, кафедра клинической иммунологии, зав. - д.м.п.. проф. Г.В. Булыгин, Краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД, г. Красноярск, гл. врач - Л.А. Рузаева)
Резюме. Проведены наблюдения за 54 детьми с инфекционным мононуклеозом в возрасте 114 лет. Выявлены особенности иммунного ответа в динамике заболевания от возраста детей. Обнаружено, что в период реконвалесценции иммунологические показатели не восстанавливаются до нормативных параметров. Данное обстоятельство свидетельствует о необходимости проведения в этот период заболевания иммунореабилитации, которая должна быть строго дифференцированной.
В настоящее время известно, что вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) относится к семейству гамма-герпесвирусов и обладает способностью вызывать различные формы заболеваний на фоне иммунной дисфункции [9]. Кроме того, ВЭБ может оказывать непосредственно цитопатическое воздействие на иммунокомпетентные клетки. Так, в литературе имеются данные об инфицировании ВЭБ не только В-лимфоцитов, но и Т-лимфоцитов, в результате чего может нарушаться их функция, а так же происходить активация аутореактивных клонов, приводящая к запуску аутоиммунных процессов [7,8]. При поражении ВЭБ естественных киллеров значительно страдает противовирусная и противоопухолевая защита [11]. В данный момент обнаружено, что ВЭБ вырабатывает ИЛ-10 - подобный пептид, который обладает
свойствами, сходными с человеческим ИЛ-10 [6, 12]. В то же время установлено, что ИЛ-10 подавляет выработку ИФН-у, рост и дифференцировку Т-лимфоцитов [4]. Широко известно, что одной из клинических форм инфекционного процесса, вызванного ВЭБ является инфекционный мононуклеоз. При этом, следует отметить, что в последние годы наблюдается значительный рост заболеваемости инфекционным мононуклеозом среди детского населения [1,2.1.
В связи с вышеизложенным, целыо настоящего исследования явилось изучение параметров иммунного ответа у детей в различных возрастных группах в острый период и в фазу реконвалесценции инфекционного мононуклеоза.
Материал и методы Проведены динамические наблюдения за 54 детьми с ВЭБ - инфекцией в трех возрастных группах: 1-3 года - 18 чел., 4-6 лет - 13, 7-14 лет -21. Клинической формой заболевания являлся инфекционный мононуклеоз среднетяжелой степени тяжести. Исследования проводились в острый период болезни и в период реконвалесценции. Контрольную группу составили 107 практически здоровых детей аналогичных возрастов. В течение 2-х месяцев, предшествующих обследованию, дети не болели и не получали профилактических прививок.
Общую фракцию лимфоцитов периферической крови выделяли по общепринятому методу в градиенте плотности фиколл-верографина [3].
Методом непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами серии CD фирмы "Дако" определяли CD3', CD4', CDS', CD72' -лимфоциты. Содержание иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови изучалось методом радиальной иммунодиффузии в геле [10]. Концентрация ЦИК в сыворотке крови определялась в реакции с полиэтиленгликолем [5]. Фагоцитарная активность нейтрофилов в крови исследовалась в тесте с латексом.
Полученные результаты обработаны с использованием пакета прикладных программ "Statistika 6,0".
Результаты и обсуждение Сравнительное изучение содержания атипичных мононуклеаров (AM) в периферической кро-
