CC BY
13
XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС
ПОСТЕРЫ
ГИНЕКОЛОГИЯ
Опыт использования жидкостной цитологии и иммуноцитохимии в морфологической диагностике неоплазий различной локализации
И.Л. Пурлик', А.А. Полуэктова', И. С. Колесникова', И.H. Мо-сунов'
Место работы: 'Томский областной онкологический диспансер, патологоанатомическое отделение e-mail: [email protected]
Цель. Оценить валидность применения жидкостной цитологии с использованием CellPrep (Biodyne), выявить наиболее информативные иммуноцитохимические маркеры злокачественной неоплазии.
Материалы и методы. Материал (114 пациенток), полученный при соскобе из цервикального канала щеткой типа CervixBrush, с последующим нанесением клеток «традиционным» методом и помещением в виалу (CellPrep Biodyne) для гинекологического материала. Материал (асцитическая, плевральная жидкость) (16 пациенток), с центрифугацией, нанесением клеток «обычным» методом и помещением осадка в виалу (CellPrep Biodyne) для биожидкостей. Приготовление препаратов на CellPrep, окраска гематоксилином и эозином для иммуноцитохимического исследования на роботе-автомате BondMax (Leica) c СК7, CK20, TTF-1, WT1, CEA, Mesothelin, CDX2, MUC2, MUC5AC, CA19.9, GCDFP15, ER/PR, CK5/6, p63.
Результаты. Сравнительный анализ стеклопрепаратов, полученных методом «обычной» и CellPrep, выявил тождественность морфологической картины эпителиального компонента в 91,2% случаев. Очевидно, что несущественная разница обусловлена малой клеточностью первично забранного материала при заборе с первоначальным нанесением на стекло и последующим погружением оставшегося материала в виалу. Препараты, приготовленные с помощью CellPrep, в 98% характеризовались ожидаемым монослоем клеток. Среднее число полученных препаратов с одной виалы — 6 (от 3 до 13). Наиболее информативными маркерами ЗНО яичника оказались WT1, CEA только в сочетании с ER/PR, без которых нельзя было полностью исключить мезотелиому плевры, имеющей схожий фенотип. Использование CK7/CK20 наиболее информативно только для дифференциальной диагностики серозной нео-плазии от муцинозной. Использование только CDX2 может привести к ошибкам в случаях дифференциальной диагностики ЗНО колоректальной зоны, яичника, панкреатобили-арной системы. Использование «коротких» панелей (от 1 до 3 антител) не позволяет проводить дифференциальную диагностику в 21, 6% случаев.
Заключение. Метод CeIIPrep Biodyne позволяет получать препараты хорошего качества с изготовлением необходимого количества (от 3 до 13) с реализацией расширения иммуно-цитохимической панели антител (не менее 6). Диагностическая ценность иммуноцитохимии повышается при оценке экспрессии нескольких антител (от 3 до 5). «Монорежим» иммуноцитохимии может сопровождаться ошибками диагностики в виду схожести иммунофенотипа.
Комплексный анализ герминальных и соматических мутаций в генах BRCA1/2 у больных раком яичников: промежуточный анализ проспективного наблюдательного исследования OVATAR*
А. С. Тюляндина', Т. В. Кекеева2, В.А. Горбунова', Л.А. Коло-миец3, М. Л. Филипенко4, И. А. Демидова5, Л. H. Любченко',
Е. Н. Имянитов6, Н. В. Чердынцева3, Ю. К. Моляка7, Д. И. Во-долажский8, С. Ю. Андреев9, Г. Б. Стаценко10, В. В. Сае-вец", С. В. Хохлова1, С. А. Ткаченко12, И.А. Королева13, А. С. Лисянская14, О. А. Бакашвили15, Л. Ю. Владимирова7, Л. И.Крикунова16, О. Ю.Новикова17,Е. П. Соловьева18,Л. С.Загумен-нова19, Д. М. Пономаренко20, С. Э. Красильников21, В. В. Гороб-цова22, Е. В. Черепанова23, Е. Н. Пашкова24, В. Б. Ширин-кин25, Д. Д. Сакаева26, В. М. Моисеенко27, Е.А. Румянцева28, С.А. Емельянов29, Ф. Г. Иванова30, Д. Л. Строяковский5, Е. Г. Новикова31, Д. П. Удовица32, В. И. Владимиров33, С.А. Тюляндин1, И. В. Тимофеев34, О. В. Ведрова9, В. В. Кара-
сева9
Цели. Определить распространенность терминальных и соматических мутаций генов BRCA1 /2 в популяции больных с впервые выявленным серозным и эндометриоидным раком яичников. Дополнить отсутствующие эпидемиологические данные о частоте соматических мутаций и крупных перестроек генов BRCA1/2 при раке яичников. Проанализировать эффективность выявления мутаций в крови и ткани опухоли в рутинной практике различными методами молеку-лярно-генетической диагностики.
Материалы и методы. Многоцентровое российское проспективное наблюдательное исследование включило 498 пациенток. Мутации BRCA1 /2 определялись различными методами, в том числе наиболее информативным методом — секвенированием следующего поколения (NGS) как в крови, так и в опухолевой ткани пациенток. Также у значительной части больных применялся метод мультиплексной лигаза-зависимой амплификации зонда (MLPA) образцов крови для определения мутаций в виде крупных перестроек генов BRCA1 /2.
Результаты. Промежуточный анализ включил данные от 336 пациенток, у которых были доступны для анализа как образцы крови, так и образцы ткани (медиана возраста 54 (22—84) года; семейный онкологический анамнез присутствовал у 79 больных (23,5%)). Частота всех мутаций составила 29,2% (98/336). Из них: 80,6% (79/98) составили герминальные и 19,4% (19/98) — соматические мутации; «частые» мутации были выявлены у 42/98 (42,9%) пациенток, а мутация 5382^С — у 29/98 (29,6%) пациенток. MLPA крови было выполнено у 142/336 (42,2%) пациенток. Герми-нальные мутации в виде крупных перестроек генов выявлены у 2/142 (1,4%) больных.
Результаты NGS крови и ткани одних и тех же пациенток представлены в таблице.
NGS опухолевой ткани
Мутация BRCA1/2 не выявлена
Мутация BRCA1 /2 обнаружена
Мутация BRCA1 /2 обнаружена
Заключение. Применение метода NGS позволяет определять редкие мутации BRCA1 /2, которые составляют 57,1% (56/98) всех выявляемых при раке яичников мутаций; более того, использование NGS опухолевой ткани увеличивает обнаружение мутаций при раке яичников за счет выявления соматических мутаций, которые составляют 19% от всех выявленных мутаций. Частота герминаль-ных мутаций в виде крупных перестроек BRCA1 /2 у больных раком яичников в данном исследовании невелика.
Злокачественные опухоли
www.malignanttumours.org
Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017
Malignant Tumours
www.malignanttumours.org
