CC BY
14
УДК 619:615.33:615.015.3:636.4 Ключевые слова: тилоколин, доза, поросята Key words: tylocolin, dose, pigs
Востроилова Г. А., Беляев В. И., Кабицкий С. Н.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОЙ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ДОЗЫ ТИЛОКОЛИНА ДЛЯ СВИНЕЙ
DEFINITION OF AN OPTIUM THERAPEURIC DOSE TYLOCOLIN FOR PIGS
ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии», г. Воронеж
All-Russian research veterinary institute of a pathology, pharmacology and therapy, Voronezh ТелЛЫ.: +7 4732 53-92-81. Факс/Fax: +7 4732 53-92-81
Востроилова Галина Анатольевна, д.б.н., зав. лаб. экспериментальной фармакологии Адрес: 394087. г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б, ВНИВИПФиТ
Vostroilova Galina A., Doctor of Biological Science, Head of Laboratory of Experimental Pharmacology Address: 394087, Russia, Voronezh, Lomonosov street, 1146, All-Russian research veterinary institute of a pathology, pharmacology and therapy Беляев Василий Иванович, д.б.н., проф., гл. науч. сотрудник лаб. экспериментальной фармакологии Адрес: 394087. г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б, ВНИВИПФиТ Belyaev Vasily I., Doctor of Biological Science, Professor, Main Scientific Employee of Laboratory of Experimental Pharmacology Address: 394087, Russia, Voronezh, Lomonosov street, 1146, All-Russian research veterinary institute of a pathology, pharmacology and therapy. Кабицкий Станислав Николаевич, к.в.н., мл. науч. сотрудник отдела экспериментальной терапии Адрес: 394087. г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б, ВНИВИПФиТ Kabitsky Stanislav N., Ph.D., Junior Scientific Employee of the Dept. of Experimental Therapy Address: 394087, Russia, Voronezh, Lomonosov street, 1146, All-Russian research veterinary institute of a pathology, pharmacology and therapy
Аннотация. На основании изучения индекса специфической защиты при экспериментальном сальмонеллезе белых мышей, определения терапевтической эффективности тилоколина при лечении сальмонеллеза поросят и фармакокинетики препарата установлено, что наиболее оптимальной терапевтической дозой тилоколина для поросят является 0,075 мл/кг массы тела.
Summary. On the basis of studying an index of specific protection at experimental a salmonellosis ofwhite mice, definitions of therapeutic efficiency tylocolin at treatment of a salmonellosis of pigs and pharmacokinetics of a preparation it is established, that the optimal therapeutic doze tylocolin for pigs are 0,075 ml/kg of weight of a body.
Введение
В настоящее время возрастает значение профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных, особенно в связи с появлением новых инфекций со сложной этиологией, обусловленной повышением вирулентности условно-патогенных микроорганизмов. Часто эти болезни, имеющие общую симптоматику поражения пищеварительного тракта, приобретают характер смешанных инфекций, отличающихся от классических форм проявления той или иной болезни осложненным течением [2]. Огромный экономический ущерб, причиняемый животноводческим хозяйствам
желудочно-кишечными заболеваниями, вызывает необходимость поиска путей и методов совершенствования и изыскания новых эффективных средств в их профилактике и лечении [1]. С другой стороны, применение одних и тех же традиционных антимикробных средств становится малоэффективным за счет усиления резистентности и толерантности патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также наслоения вторичной микрофлоры [3, 4].
В связи с этим создание комплексных антимикробных препаратов, содержащих в своем составе антимикробные вещества различной фармакологической природы, на-
учно обосновано, т. к. у данных препаратов наблюдается более выраженный клинический эффект за счет различного механизма действия по сравнению с однокомпонентны-ми антибиотиками [3].
Во Всероссийском НИВИ патологии, фармакологии и терапии разработан новый комплексный антибактериальный препарат тилоколин на пролонгированной основе, содержащий в своем составе тилозин и коли-стин. Антибактериальные препараты, входящие в состав тилоколина, за счет совместного применения обладают широким спектром действия и влияют на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы, в том числе на стафилококки, пастереллы, сальмонеллы, эшерихии.
Материалы и методы исследований
С целью определения оптимальной терапевтической дозы нами были проведены три серии опытов: изучение индекса специфической защиты тилоколина на моделях сальмонеллезной инфекции; определение терапевтической эффективности и изучение фармакокинетики препарата в различных дозах на поросятах крупной белой породы.
В первой серии опытов были взяты половозрелые нелинейные разнополые белые мыши массой 20-22 г. По принципу аналогов, учитывая массу тела, развитие и клиническое состояние, были сформированы 8 групп по 10 голов в каждой. Животные 1 и 5 групп служили контролем и тилоко-лин не получали. Мышам 2 и 6 групп с лечебной целью вводили тилоколин в дозе 0,05 мл/кг массы тела (м.т.); 3 и 7 групп -0,075 мл/кг м.т.; 4 и 8 групп - 0,1 мл/кг м.т. С лечебной целью препарат вводили мышам один раз в сутки внутримышечно через 6 часов после заражения. Для заражения, которое проводилось интроперитонеально смывом суточных агаровых культур возбудителей на изотоническом растворе натрия хлорида, использовали музейные штаммы Salmonella cholerae suis, Salmonella dublin. Для определения специфичности гибели лабораторных животных проводили бактериологическое исследование крови, взятой из камер сердца, а также легких, печени, селезенки и почек.
За подопытными животными вели клиническое наблюдение в течение 15 дней. Во время эксперимента учитывали заболеваемость, гибель, сроки выздоровления и особенности течения сальмонеллезной инфекции.
О терапевтической эффективности препарата судили по количеству выживших мышей после окончания лечения и числу мыше-дней для каждой группы через 15 дней после инфицирования.
Во второй серии опытов проводили изучение терапевтической эффективности ти-локолина в различных дозах на поросятах крупной белой породы, больных сальмонел-лезом. Поголовье животных было разделено по принципу парных аналогов на три группы по 10 поросят отъемного возраста в каждой. Диагностировали сальмонеллез комплексно на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических и лабораторных исследований. Препарат вводили внутримышечно с интервалом 24 часа: в первой опытной группе в дозе 0,05 мл/кг м.т.; во второй - в дозе 0,075 мл/кг м.т.; в третьей -в дозе 0,1 мл/кг м.т.
В третьей серии опытов для изучения фармакокинетики тилоколина в различных дозах компонентов препарата из организма поросят определяли содержание тилозина основания и колистина сульфата микробиологическим методом диффузии в агар, основанном на сравнении величин зон задержки роста, образуемых испытуемым биоматериалом и стандартными образцами антибиотиков известной концентрации. Были подобраны 48 клинически здоровых поросят массой тела 8,0-9,0 кг по принципу парных аналогов (вес, питание, содержание). Поросятам вводили тилоколин однократно внутримышечно в дозе 0,05-0,075-0,1 мл/кг м.т. Через 0,5, 1, 2, 3, 6, 9, 12 и 24 часа после введения препарата кровь для исследования брали у поросят из хвостовых сосудов и определяли содержание активно действующих веществ. Кровь отбирали в стерильные пробирки по общепринятой методике в количестве ~ 5,0 мл.
Результаты исследований и обсуждение
При изучении индекса специфической защиты в контрольных группах при сальмо-
неллезе гибель мышей отмечали уже на 1-е сутки. Для инфекции было характерно постепенно развивающееся глубокое угнетение со значительным ослаблением дыхательной функции, иногда с проявлением диареи. 100%-ая гибель контрольных животных, не подвергавшихся обработке тилоколином, наступала на 7-е сутки. При экспериментальном заражении мышей Salmonella cholerae suis лечение животных, где применяли тилоколин в дозах 0,075мл/кг и 0,1 мл/кг м.т., обеспечило сохранность 70 % мышей при 100 % гибели животных контрольной группы. Эффективность в группах, где применяли тилоколин в дозах 0,075мл/кг и 0,1 мл/кг м.т., при лечении белых мышей, зараженных Salmonella dublin, была ниже на 10 % по сравнению с таковой при сальмонеллезной инфекции, вызванной Salmonella cholerae suis. При применении ти-локолина в группах при использовании ти-
локолина в дозах 0,05 мл/кг м.т. при сальмо-неллезной инфекции, вызванной Salmonella cholerae suis и Salmonella dublin, индекс защиты был ниже на 14,3 и 16,7 %, чем при применении в группах, где применяли тилоколин в дозах 0,075 и 0,1 мл/кг м.т. (табл. 1).
Также отмечено увеличение суммарной продолжительности жизни белых мышей в зависимости от микроорганизма-возбудителя и применяемой дозы. При инфекциях, вызванных сальмонеллами, суммарная продолжительность жизни белых мышей составила 94-117 дней. Гибель мышей в опытных группах по сравнению с контролем отмечали в более отдаленные сроки (на 3-8 сутки). Следовательно, терапевтическая эффективность и суммарная продолжительность жизни у белых мышей были выше в группах, где применяли тилоколин в дозах 0,075 и 0,1 мл/кг м.т. (табл. 1).
^---^^Группа, доза Показатели""""^^.....,..^ Контрольная Опытная
0,05 мл/кг м.т. 0,075 мл/кг м.т. 0,1 мл/кг м.т.
1 2 3 4 5
Salmonella cholerae suis
1 2 3 4 5
Пало, животные / % 10 / 100 4 / 40 3 / 30 3 / 30
Выжило, животные / % 0 6 / 60 7 / 70 7 / 70
Мыше-дни жизни 33 107 117 115
Salmonella dublin
Пало, животные / % 10 / 100 5 / 50 4 / 40 4 / 40
Выжило, животные / % 0 5 / 50 6 / 60 6 / 60
Мыше-дни жизни 31 94 108 105
Таблица 2.
Терапевтическая эффективность тилоколина в различных дозах при сальмонеллезе поросят
------Группа Первая Вторая Третья
Показатели " -—
Количество поросят 10 10 10
% 100 100 100
Выздоровело поросят 8 9 9
% 80 90 90
Сроки выздоровления, дней 4,8±0,3 3,7±0,2 3,6±0,1
Терапевтическая эффективность, % 80,0 90,0 90,0
Таблица 1.
Терапевтическая эффективность тилоколина в различных дозах при экспериментальном заражении белых мышей
Рис. 1. Содержание тилозина основания в крови поросят после однократного введения внутримышечно тилоколина в дозах 0,05 мл/кг, 0,075 мл/кг, 0,1 мл/кг м.т.
Рис. 2. Содержание колистина сульфата в крови поросят после однократного введения внутримышечно тилоколина в дозах 0,05 мл/кг, 0,075 мл/кг, 0,1 мл/кг м.т.
При применении тилоколина больным сальмонеллезом поросятам-отъемышам из первой группы терапевтическая эффективность составила 80 % при продолжительности лечения 4,8±0,3 дня; во второй и третьей -90 % животных выздоровело при продолжительности лечения - 3,7±0,2 и 3,6±0,1 дня, что выше на 10 % и короче на 22,9 % (табл. 2).
Фармакокинетические исследования показали, что уже через 30 минут после введения препарата в дозах 0,05-0,075-0,1 мл/ кг м.т. как колистин, так и тилозин обнаруживаются в крови поросят. Как видно из данных, представленных на рисунках 1 и 2, после внутримышечного введения тилоколина в указанных дозах максимальная концен-
трация колистина в плазме крови достигает максимума через 1 час, а тилозина - через 1-2 часа, после чего их концентрация начинает плавно снижаться, но при этом дозы 0,075мл/кг и 0,1 мл/кг м.т. продолжают оставаться к 24 часам на уровне минимальной подавляющей концентрации для сальмонелл, в отличие от 0,05 мл/кг м.т.
Заключение
Тилоколин обладает наибольшей терапевтической эффективностью при применении в дозе 0,075 мл/кг м.т., т. к. при использовании препарата в данной дозе при сальмо-неллезе увеличивается суммарная продолжительность жизни белых мышей, лечебная концентрация препарата в организме поросят сохраняется 24 часа в концентрации 0,23 и 0,20 мг/мл, срок выздоровления животных сокращается на 22,9 %, а терапевтическая эффективность выше на 10 %, чем при применении препарата в дозе 0,05 мл/кг м.т.
Список литературы
1. Гафаров, Х. З. Инфекционные болезни свиней и современные средства их диагностики, лечения и профилактики / Х. З. Гаффаров, Е. А. Романов. - М. : Аквариум-Принт, 2004. - 192 с.
2. Ефанова, Л. И. Диагностика и профилактика наиболее распространенных инфекционных болезней телят и поросят. Учебное пособие / Л. И. Ефанова. -Воронеж : ВГАУ, 1991. - 120 с.
3. Шабунин, С. В. Антимикробное действие фармакологических композиций / С. В. Шабунин // Ветеринария. - 1999. - № 9. - С. 47-48.
4. Шахов, А. Г. Экологические проблемы здоровья животных и пути их решения / А. Г. Шахов с соавт. // Ветеринария. - 2003. - № 5. - С. 3-6.
Ф
МОСКОВСКИМ ВЕТЕРИНЯРНЫИ
webmvc .com
i-LLEHTP
Заболел Ваш домашний питомец? Не отчаивайтесь - посетите наш веб-центр!
У нас Вы найдете исчерпывающую информацию о болезни Вашего друга, лечении, профилактике и других вопросах ветеринарии. Также на нашем сайте Вы можете найти адрес ближайшей к Вам ветеринарной клиники, чтобы обратиться за помощью к специалистам.
Кроме этого, наш веб-центр располагает полным спектром информации по уходу за животными -будь то кошки или собаки, птицы или рыбы, черепахи или экзотические животные. Вы научитесь, как правильно разводить, кормить, дрессировать и воспитывать своих домашних питомцев. На страницах нашего сайта с Вами делятся опытом и советами признанные авторитеты в области ветеринарии и ухода за животными. К Вашим услугам - энциклопедические справочники и научные статьи о животном мире, фото и видеоматериалы, ежедневные новости и тематический форум.
Мы ждем Вас по адресу WWW. webmvc.com
