CC BY
103
№ 6 - 2013 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 615.32:543.544
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЛАВОНОИДОВ И ГИДРОКСИКОРИЧНЫХ КИСЛОТ В ТРАВЕ TAGETES ERECTA L., TAGETES PATULA L. И ТАGETES TENUIFOLIA CAV.
МЕТОДОМ ВЭЖХ
С. М. Марчишин, Т. С. Бердей, С. С. Козачок, О. Л. Демыдяк
ГВУЗ «Тернополъский государственный медицинский университет имени И. Я. Горбачевского МЗ Украины» (г. Тернополъ, Украина)
Методом ВЭЖХ с УФ-детектором определены фенольные соединения в траве трех видов бархатцев (Tagetes erecta L., Tagetes patula L., Tаgetes tenuifolia Cav.). Установлено, что исследованные объекты в наибольшем количестве содержат гликозиды кверцетина и хлорогеновую кислоту.
Ключевые слова: фенольние соеденения,гидроксикоричныекислоты, флавоноиды, Tagetes erecta L., Tagetes patula L., Tаgetes tenuifolia Cav., ВЭЖХ.
Марчишин Светлана Михайловна — доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с медицинской ботаникой ГВУЗ «Тернопольский государственный медицинский университет имени И. Я. Горбачевского МЗ Украины», рабочий телефон: 0352520518, e-mail: [email protected]
Бердей Татьяна Степановна — магистр фармации, ассистент кафедры фармакогнозии с медицинской ботаникой ГВУЗ «Тернопольский государственный медицинский университет имени И. Я. Горбачевского МЗ Украины», рабочий телефон: +380969431712, e-mail: [email protected]
Козачок Соломия Степановна — магистр фармации, ассистент кафедры фармакогнозии с медицинской ботаникой ГВУЗ «Тернопольский государственный медицинский университет имени И. Я. Горбачевского МЗ Украины», рабочий телефон: +380969431712, e-mail: [email protected]
Демыдяк Ольга Лютославовна — кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармакогнозии с медицинской ботаникой ГВУЗ «Тернопольский государственный медицинский университет имени И. Я. Горбачевского МЗ Украины», рабочий телефон: +380969431712, e-mail: [email protected]
Бархатцы (лат. Tagétes) — род однолетних и многолетних растений семейства Астровые. Бархатцы широко применяются в народной медицине при болезнях печени и почек, как противовоспалительные средства. Они снимают болевые ощущения, улучшают обмен веществ, обладают гипогликемическим действием. В некоторых странах Европы и Латинской Америки высушенные цветы употребляются как приправа, известная в России и на Кавказе под названием имеретинский шафран. Листья употребляются в Мексике от лихорадки, запоров, как мочегонное и потогонное средства, а в больших дозах — как рвотное [2].
Актуальным является исследование биологически активных веществ растений рода Tagétes L., которые обусловливают его фармакологическую активность.
Флавоноиды и гидроксикоричные кислоты — наиболее распространенные фенольные соединения в высших растениях. Они проявляют выраженные антиоксидантные, антирадикальные, иммуностимулирующие, противовирусные и противовоспалительные свойства. Поэтому целесообразно определить их качественное и количественное содержание в исследуемых видах бархатцев.
Цель нашей работы — определение качественного состава и количественного содержания гидроксикоричных кислот и флавоноидов в траве Tagetes erecta L., Tagetes patula L., Tаgetes tenuifolia Cav. методом ВЭЖХ.
Материалы и методы. Хроматографическое разделение проводили на жидкостном хроматографе Agilent 1200 3 D LC System Technologies (США) с диодноматричным детектором, на колонке Supeico Discovery C18, при температуре термостата колонок 25 °С. Ввод пробы осуществлялся автосамплером, объем пробы 10 мкл.
Подготовка проб для анализа: около 1 г растительного сырья (точная навеска), экстрагировали 50 мл 60 % раствора метанола в течение 15 мин на водяной бане с обратным холодильником при перемешивании. После этого фильтровали, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили до метки объем раствора 60 % метанолом. Полученный раствор отфильтровывали через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм [1, 3, 4].
Для разделения фенольных соединений применялись следующие условия: градиентное элюирование смесью бидистиллированной воды подкисленной ортофосфорной кислотой до рН = 2,85 (А) и ацетонитрила (В): 0 хв 5 % «В», 8 хв 8 % «В», 15 хв 10 % «В», 30 хв 20 % «В», 40 хв 40 % «В», 41-42 хв 75 % «В», 43-50 хв 5 % при длине детектирования 330, 320 нм (гидроксикоричние кислоты) и 0 хв 12 % «В», 30 хв 25 % «В», 33 хв 25 % «В», 38 хв 30 % «В», 40 хв 40 % «В», 41 хв 80 % «В», 49 хв 12 % при длине детектирования 255, 340 нм (флавоноиды). Общее время анализа — 50 мин.
Рис. 1. Хроматограмма фенольных соеденений Tagetes tenuifolia при А = 330 нм: 1 —
хлорогеновая кислота, 2 — розмариновая кислота, 3 — апигенин, 3.1 — гликозид апигенина, 4 — скополетин; при А = 320 нм: 5 — n-кумаровая кислота, 6 — кофейная
кислота
Рис. 2. Хроматограмма фенольных соединений Tagetes patula при А = 330 нм: 1 — хлорогеновая кислота, 1.1. — изомер хлорогеновой кислоты, 2 — розмариновая кислота, 3 апигенин, 3.1 — гликозид апигенина; при А = 320 нм: 4 — кофейная кислота, 5 —
феруловая кислота
Рис. 3. Хроматограмма фенольных соеденений Tagetes erecta при А = 330 нм: 1 — хлорогеновая кислота, 1.1. — изомер хлорогеновой кислоты, 2 — розмариновая кислота; при А = 320 нм: 3 — кофейная кислота, 4 — феруловая кислота
Рис. 4. Хроматограмма фенольных соеденений Tagetes tenuifolia при А = 255 нм: 1 ■ рутин, 2 — гиперозид, 3 — изокверцитрин, 4.1, 4.2, 4.3 — гликозиды кверцетина, 4
кверцетин; при А = 340 нм: 5 — лютеолин
Рис. 5. Хроматограмма фенольных соеденений Tagetes patula при А = 255 нм: 1 — рутин, 2 — гиперозид, 3 — изокверцитрин, 4.1, 4.2, 4.3 — гликозиды кверцетина, 4 — кверцетин
Рис. 6. Хроматограмма фенольных соеденений Tagetes erecta при А = 255 нм: 1 — рутин, 2 — гиперозид, 3 — изокверцитрин, 4.1, 4.2, 4.3 — гликозиды кверцетина, 4 — кверцетин
Количественное содержание фенольных соеденений в траве Tagetes erecta L., Tagetes patula L., Tаgetes tenuifolia Cav. (%)
Фенольные соединения Tagetes tenuifolia Tagetes patula Tagetes erecta
Хлорогеновая кислота 0,09 0,30 0,25
Розмариновая кислота 0,19 0,14 0,08
п-кумаровая кислота 0,01 — —
Кофейная кислота 0,02 0,05 0,03
Феруловая кислота — 0,10 0,17
Скополетин 8,5 х 10-3 — —
Апигенин 0,08 0,14 —
Рутин 0,24 0,16 0,03
Гиперозид 0,05 0,18 0,03
Изокверцитрин 0,05 0,12 0,26
Гликозиды кверцетина в пересчете на кверцетин 0,31 0,25 0,14
Кверцетин 0,03 0,05 0,04
Лютеолин 5,9 х 10-3 — —
Результаты эксперимента показали (см. табл., рис. 1-6), что все исследуемые объекты содержат хлорогеновую, розмариновую, кофейную кислоты, рутин, гиперозид, изокверцитрин, кверцетин и его гликозиды. Tagetes tenuifolia содержит также п -кумаровую кислоту, апигенин, следы лютеолина и кумарина скополетина; Tagetes patula — феруловую кислоту и апигенин, Tagetes erecta — феруловую кислоту.
По результатам ВЭЖХ анализа установлено, что Tagetes erecta L., Tagetes patula L., Tаgetes tenuifolia Cav. в наибольшем количестве содержат гликозиды кверцетина.
Список литературы
1. Марчишин С. М. Определение гидроксикоричных кислот в антиаллергическом сборе методом ВЭЖХ [Электронный ресурс] / С. М. Марчишин, С. С. Козачок // Медицина
и образование в Сибири : сетевое научное издание. — 2013. — № 4. — Режим доступа : http://ngmu.ru/cozo/mos/article/text_full.php?id=1101
2. Машковська С. П. Чорнобривщ — джерело ефективних лшв / С. П. Машковська, I. П. Григорюк // Фгготератя. Часопис. — 2003. — № 4. — С. 41-47.
3. Определение гидроксикоричных кислот в лекарственном растительном сырье
и обьектах растительного происхождения / Ю. В. Медведев, О. И. Передеряев, А. П. Арзамасцев [и др.] // Вопр. биол., мед. и фармацевт. химии. — 2010. — № 3. — С. 25-31.
4. Determination of caffeoylquinic acids and flavonoids in Cynara scolymus L. by high perfomance liquid chromatography / M. Häuser, M. Ganzera, G. Abel [et al.] // Chromatographia. — 2002. — Vol. 56, N 7/8. — Р. 407-411.
DEFINITION OF FLAVONOIDS AND HYDROXYCINNAMIC ACIDS IN HERBS TAGETES ERECTA L., TAGETES PATULA L. AND ТАGETES TENUIFOLIA CAV. BY HELC METHOD
S. M. Marchishin, T. S. Berdey. S. S. Kozachok. O. L. Demydyak
SHPE «Ternopol state medical university n. a. I. Y. Gorbachevsky» of Ministry of Health of the
Ukraine (Ternopol, the Ukraine)
Phenolic bonds in herbs of three types of marigolds (Tagetes erecta L. Tagetes patula L. Tagetes tenuifolia Cav.) are determined by the HELC method with the UV-detector. It is established that the studied objects contain glycosides of Quercetinum and chlorogenic acid in the greatest number.
Keywords: phenolic bonds, hydroxycinnamic acid, flavonoids, Tagetes erecta L. Tagetes patula L. Tagetes tenuifolia Cav., HELC.
About authors:
Marchishin Svetlana Mikhaelovna — doctor of pharmaceutical sciences, professor, head of chair of pharmacognosy with medical botany at SHPE «Ternopil state medical university n. a. I. Y. Gorbachevsky», office phone: 0352520518, e-mail: [email protected]
Berdey Tatyana Stepanovna — magister of pharmaceutics, assistant of chair of pharmacognosy with medical botany at SHPE «Ternopil state medical university n. a. I. Y. Gorbachevsky», office phone: +380969431712, e-mail: [email protected]
Kozachok Solomia Stepanovna — master of pharmaceutics, assistant of chair of pharmacognosy with medical botany at SHPE «Ternopil state medical university n. a. I. Y. Gorbachevsky», office phone: +380969431712, e-mail: [email protected]
Demydyak Olga Lyutoslavovna — candidate of pharmaceutical sciences, senior teacher of of chair of pharmacognosy with medical botany at SHPE «Ternopil state medical university n. a. I. Y. Gorbachevsky», office phone: +380969431712, e-mail: [email protected]
List of the Literature:
1. Marchishin S. M. Definition the gidroksikorichnykh of acids in the antiallergenic collecting the VEZhH method [An electron resource] / S. M. Marchishin, S. S. Kozachok//Medicine and education in Siberia: mains-operated scientific edition. — 2013. — № 4. — Access mode: http://ngmu.ru/cozo/mos/article/text_full.php? id=1101
2. Mashkovska S. P. Marigolds as sourse of effective drugs / S. P. Mashkovska, I. P. Grigoryuk // Phythotherapy. Chasopis. — 2003. — № 4. — P. 41-47.
3. Definition of hydroxycinnamic acids in medicinal vegetable raw materials and objects
of phytogenesis / Y. V. Medvedev, O. I. Perederyaev, A. P. Arzamastsev [etc.] // Quest. of biol. medical and pharmaceutist chemistry. — 2010. — № 3. — P. 25-31.
