CC BY
50
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ НАУКИ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ CЕРТРАЛИНА ИЗ КРОВИ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ Жалилов Ф.С.1, Зокирова Г.Р.2, Мустафаев У.Г.3, Бекчанов Б.С.4, Жалилова Ф.С.5, Пулатова Л.Т.6 Email: [email protected]
'Жалилов Фазлиддин Содикович — кандидат фармацевтических наук, доцент; 2Зокирова Гулрух Рахматуллаевна — старший преподаватель; 3Мустафаев Уммат Гайратович — ассистент; 4Бекчанов Бекзод Салижанович — ассистент; кафедра стандартизации и менеджмента качества лекарственных средств, Ташкентский фармацевтический институт,
г. Ташкент; 5Жалилова Феруза Содиковна — ассистент, кафедра фармакологии и клинической фармакологии, Бухарский государственный медицинский институт, г. Бухара; 6Пулатова Лола Таирхановна - доктор технических наук, профессор, кафедра классификации и сертификации товаров, Институт высшей военной таможни, г. Ташкент, Республика Узбекистан
Аннотация: изучен хроматографический метод идентификации сертралина на тонком слое сорбента с использованием различных систем, состоящих из смеси органических растворителей. Наиболее приемлемой оказалась система, содержащая эталнол-хлороформ-бензол в соотношении 2:':2. Для детектирования пятен сертралина на хроматограмме был использован раствори бромфенолового синего и реактив Драгендорфа. При этом пятно сертралина окрашивается в фиолетовый и оранжевый цвет. При этом значения Rf сертралина 0,59 соответственно.
Ключевые слова: сертралина, ртралинаветственно.тствензначэкспертиза.
DETERMINATION OF SERTRALINE FROM BLOOD BY THIN-LAYER CHROMATOGRAPHY Jalilov F.S.1, Zokirova G.R.2, Mustafayev U.G.3, Bekchanov B.S.4, Jalilova F.S.5, Pulatova L.T.6
'Jalilov Fazliddin Sodikovieh - PhD, Assooiate Professor; 2Zokirova Gulrukh Rakhmatullaevna - Senior Leoturer; 3Mustafaev Ummat Gayratovwh — Assistant; ''Be^hanov Bekzod Salijanovioh — Assistant, DEPARTMENT OF STANDARDIZATION AND QUALITY MANAGEMENT OF MEDICINES, TASHKENT PHARMACEUTICAL INSTITUTE, TASHKENT; 5Jalilovа Feruza Sodikovna—Assistant, DEPARTMENT OF PHARMACOLOGY AND CLINICAL PHARMACOLOGY, BUKHARA STATE MEDICAL INSTITUTE, BUKHARA; 6Pulatova Lola Tairhanovna - Dootor of Teohnioal Sdernes, Professor, DEPARTMENT OF CLASSIFICATION AND CERTIFICATION OF GOODS, INSTITUTE OF HIGHER MILITARY CUSTOMS, TASHKENT, REPUBLIC OF UZBEKISTAN
Abstract: the ohromatographio method for the identifioation of sertraline on a thin sorbent layer using various systems oonsisting of a mixture of organio solvents was studied. The most aooeptable was the system oontaining ethalnol-ohloroform-benzene in a ratio of 2: ': 2. To deteot sertraline spots on the ohromatogram, a solution of bromphenol blue and Dragendorf reagent were used. In this oase, the sertraline stain turns purple and orange. The values of Rf of sertraline are 0.59, respeotively. Keywords: sertraline, TLC, biologioal fluids, expertise.
УДК. 615.454.2.547 DOI: '0.244''/23'2-8089-20'9-'2304
Актуальность работы: Сертралин, (Altruline; Serad; Zoloft; Асентра; Серлифт; Стимулотон) - лекарственное средство. Белый или почти белый кристаллический порошок [1, 2]. Сертралин(С17Н17С12^ — это антидепрессант. Несмотря на широкое применение сертралина в медицинской практике, не исключены случаи проявления их токсического действия (при передозировке и индивидуальной непереносимости), о чем свидетельствуют описанные в литературе случаи острых и хронических отравлений данным препаратам [8, 9]. Для сертралина характерен повышенный суицидальный риск у разных возрастных категорий: у молодёжи, у подростков и у взрослых. В связи с этим изучение сертралина в химико-токсикологическом отношении является актуальной задачей.
Цель исследования: - разработать специфичные, чувствительные экспресс-методы качественного обнаружения сертралина методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) [3-6], пригодного для целей химико-токсикологических и биофармацевтических исследований.
Материалы и методы: Изучение условий ТСХ анализа сертралина. Для этой цели были использованы хроматографические готовые пластинки с закрепленным слоем силикагеля фирмы Merck, а также пластинки марки Силикагель, Sorbfil и Silufol UV 254 . Для хроматографирования препарата были применены следующие системы растворителей: эталнол-хлороформ-бензол (2:1:2), этил ацетат-метанол-сув (87:3:1.5), хлороформ-ацетон (9:1) и др. Для разработки условий хроматографического анализа сертралина были приготовлены стандартные растворы препаратов в этаноле. Объектами исследования были стандартные образцы сертралина, таблетки сертралин, а также экстракты, полученные из биологических объектов. Были приготовлены модельные смеси стандартных образцов препаратов в этаноле, которые наносили с помощью капилляров или микрощприца на хроматографические пластинки. После высушивания пластинки с нанесенными образцами помещали в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную парами растворителей. При достижении фронта растворителей до 10 см высоты от линии старта, пластинку вынимали с камеры и высушивали при комнатной температуре. Для обнаружения зон локализации препарата хроматографических пластинках, последние предварительно смотрели под хемископом, затем опрыскивали реагентами в различной последовательности и наблюдали за изменение окраски фона и цвета пятна. Для проявления зоны локализации сертралина на пластинках были использованы различные реактивы такие как, раствор железа (Ш) хлорида, реактив Драгендорфа, реактив Марки, раствор бромфенолового синего, реактив дифенилкарбазида с раствором ртути сульфата и др[5-8].
Отделение сертралина от крови. Подготовку модельной смеси для разработки методики изолирования сертралина из крови проводили согласно следующим этапам: в коническую колбу вместимостью 50 мл вносили 5 мл крови, добавляли 10 мл воды и 0,1 мл этанольного раствора сертралина, содержащего 0,15 мг препарата. Содержимое колбы оставляли на 2 часа при периодическом перемешивании. Затем разбавленную кровь подкисляли 2 М раствором хлористоводородной кислоты до рН 2,0 по универсальной индикаторной бумажке. Колбу с содержимым герметично закрывали и помещали на водяную баню при температуре 50-60°С (для осаждения белков) на 15-20 мин. Затем колбу с содержимым охлаждали до комнатной температуры, фильтровали, осадок на фильтре промывали тем же щелочным раствором.
Полученный объединенный фильтрат подщелачивали раствором натрия гидроксида до рН 9,09,5 и производили трехкратную экстракцию оптимальным для сертралина органическим растворителем (10, 10, 5 мл). Объединенный слой органического растворителя центрифугировали при 3000 об/мин в течение 5 минут и, отделив от слоя воды, фильтровали в сухую фарфоровую чашку через бумажный фильтр, содержащий 5 г безводного натрия сульфата. Содержимое чашки упаривали до сухого остатка, который затем растворяли в 2 мл хлороформа, использовали для идентификации сертралина, Результаты проведенных исследований представлены в табл. 1-2.
Результаты: Для разделения сертралина наиболее оптимальной является система: эталнол-хлороформ-бензол (2:1:2) и самым подходящим проявителем оказался раствор бромфенолового синего и реактив Драгендорфа.
Таблица 1. Цветные реакции зон локализации сертралина методом ТСХ
Реактив Цвет и чувствительность пятен (мкг)
Бромфенол синий Голубой (4,0)
Пары йода Коричневое (2,5 )
Реактив Бушарда Коричневое (1,5)
Драгендорфа модиф. по Мунье Оранжевое (0,75)
Название препарата Хроматографические пластинки
Сорбфил КСК
Сертралин 0,58-0,62 0,51-0,55
При этом пятно сертралина окрашивается в фиолетовый и оранжевый цвета. При этом значения Rf сертралина 0,59 соответственно.
Выводы: Разработаны методы идентификации сертралина ТСХ. Методы рекомендованы для использования в анализе лекарственных форм и кровь на наличие сертралина. Данный метод можно использовать для очистки исследуемых препаратов от балластных веществ при количественном определении их методом УФ-спектрофотометрии.
Список литературы / References
1. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в Узбекистане: Справочник. М.: АстраФармСервис, 2008. 133 с.
2. Жалилов Ф.С. Антидепрессантларнинг узбекистон фармацевтика бозорида тутган урни // Аптеки Узбекиста, 2016. № 3. С. 8-11.
3. Жалилов Ф.С., Тожиев М.А., Сафарова Д.Б. Гексамидинни хроматоспектрофотометрик усулида тахдилини урганиш // Farmatsevtika jumali. Тошкент, 2006. № 3. Б. 32-34.
4. Жалилов Ф.С., Султонова Г.М, Тожиев М.А. Депрес дори воси тасини юща катламли хроматография усулида тахлилини урганиш // Узбекистон фармацевтик хабарномаси, 2009. № 2. Б. 22-25.
5. TadjievM.A., Usmanalieva Z. W., Jalilov F.S. On the development of detection mebendazole TLC //The 52th Annual Meeting of TIAFT Joint Meeting of JSLM & TIAFT (Buenos Aires, Argentina 9-13 November), 2014. № 52. P. 209.
6. Жалилов Ф.С., Тожиев М.А. Гексамидиннинг юпка катламли хроматография усулида тахлилини урганиш Farmatsevtika jurnali, 2005. № 2. Б. 17-19.
7. Жалилов Ф.С., Тожиев М.А., Ахмеджанов ИТ., Мадгазина М.А., Байрамова Н.Р. Карбамазепин дори воситасини юпка катламли хроматография усулида тахлилини урганиш // Актуальные вопросы судебной медицины и медицинского права: межд. конф (Ташкент -Самарканд, 14-15 май 2009). Ташкент-СМЭ, 2009. С. 114-117.
8. Эрова Т.Х., Жалилов Ф.С., Ахмедова М.О., Жалилова Ф.С., Худойбердиев А.И. Юпка катламли хроматография усулида опий алкалоидларини кимё криминалистик тахлилини урганиш //Фармацияда таълим, фан ва ишлаб чикариш интеграцияси", илмий амалий анжуман материаллари. (10-12 октябрь 2012). Тошкент: Тошфарми. Б. 403-405.
9. Li Q., Yu X., Yang Y., Liu X. Simple Determination of Diacylglycerols Using Thin Layer Chromatography and Visible Spectrophotometry // Food Analytical Methods, 2018. Volume 11. Issue 1. Pp. 236-242.
