CC BY
38
У больных сальмонеллезом, злоупотребляющих алкоголем, в отличие от не злоупотребляющих наблюдались значительно более высокий относительный уровень ТГ, СХ, ЛФЛ, ФЭ и более низкий - ЭХ и ФХ.
Выявленные изменения показывают, что на фоне злоупотребления алкоголем у больных сальмонеллезом происходят более глубокие изменения метаболизма липидов, что может привести к неблагоприятному течению болезни, и это необходимо учитывать в клинической практике.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гейвандова Н. И., Ягода А. В., Малыхина Л. И. и др. // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол. и колопрок-тол. - 2006. - Т. 16, № 1. Прил. № 27: Материалы 11-й Российской конференции «Гепатология сегодня» 27-29 марта 2006., Москва. - С. 67.
2. Каргаполов А. В. // Биохимия. - 1981. - № 4. -С. 691-698.
3. Комаров Ф. И., Коровкин Б. Ф., Меньшиков В. В. Биохимические исследования в клинике. - Элиста, 1999.
4. Комаров Ф. И. и др. // Педиатрия. - 2000. - № 4. - С. 76-80.
5. Курдыбайло Ф. В., Механик З. И. // Врач. дело. - 1979. - № 9. -С. 21-23.
6. Макаров В. К. // Биомед. химия. - 2004. - Т. 50. - С. 498-501.
7. Огурцов П. // Врач. - 1998. - № 11. - С. 6-9.
8. Рахманин Ю. А., КушныреваН. Ф., Буланов А. Е. // Гиг. и сан. -1991. - № 2. - С. 69-70.
9. Султанова У. К., Борщева Л. И., Мансурова И. Д. // Вопр. мед. химии. - 1992. - Т. 38, вып. 1. - С. 50-52.
10. Adachi J. // Nihon Hoigaku Zasshi. - 2000. - Vol. 54, N 3. - P. 356360.
11. Ceccanti M., Attili A., Balducci G. et al. // J. Clin. Gastroenterol. -2006. - Vol. 40, N 9. - P. 833-841.
Таблица 4
характеристика фосфолипидного состава сыворотки крови у здоровых лиц, больных сальмонеллезом, не злоупотребляющих и злоупотребляющих алкоголем
Показатели фосфолипидов (X ± m) в мг%
ФЛ здоровые лица (n = 50) 1-я группа больные саль-монеллезом, не злоупотребляющие алкоголем (n = 50) 2-я группа больные сальмо-неллезом, злоупотребляющие алкоголем (n = 30) 3-я группа Л Рг
ЛФЛ 18,3 ± 0,4 18,9 ± 0,7 42,9 ± 2,4*** < 0,001 > 0,05
СФМ 15,6 ± 0,5 31,9 ± 0,9 43,2 ± 1,5*** < 0,001 < 0,001
ФХ 23,5 ± 0,6 62,7 ± 2,1 70,4 ± 3,9*** > 0,05 < 0,001
ФЭ 6,6 ± 0,3 13,0 ± 0,5 28,7 ± 2,3*** < 0,001 < 0,001
12. CrainR. C. // Subcell. Biochem. - 1990. - N 16. - Р. 45-67.
13. Folch J., LeesM, Stanley G. H. G. // J. Biol. Chem.. - 1957. - Vol. 226. - Р. 497-509.
14. KaphaliaB. S. et al. // Alcohol. - 2004. - Vol. 34, N 2-3. - Р. 151158.
15. Kendell R. et al. WHO. Technical Report Series N 650. - Geneva, 1980.
16. Krawiec A. et al. // Pol. Merkur Lek. - 2008. - Vol. 24, N 144. - Р. 521-525.
17. Langridge G. C, Nair S., Wain J. // J. Infect. Dis. - 2009. - Vol. 199, N 4. - P. 602-603.
18. Lieber C. S, // J. Addict. - 2001. - Vol. 10 (suppl.). - P. 29-50.
19. Marsh J. B. // J. Lipid. - 1966. - Vol. 7. - P. 574-576.
20. SimardG., PerretB. // Ann. Clin. - 1990. - Vol. 48, N 2. - P. 61-76.
Поступила 15.09.11
© з. и. микашинович, с. а. чепурненко, 2012 удК 616.126.424-007.43-074
З. И. Микашинович, С. А. Чепурненко
окислительная модификация липопротЕинов у юношей с первичным пролапсом митрального клапана
ГОУ БПО Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону
У 137 юношей с пролапсом митрального клапана исследовано содержание липопротеинов, малонового диальдегида, модифицированных липопротеинов в зависимости от состояния адаптивных возможностей организма. Снижение адаптивных возможностей организма документировалось повышенным содержанием окисленных липопротеинов в 2,84 раза (p < 0,05) и малонового диальдегида в 1,85 раза по сравнению с таковым в контрольной группе (p < 0,05). Достоверной разницы между данными липидограммы у больных с высокими и сниженными адаптивными возможностями не выявлено.
Ключевые слова: липопротеины, окисленные и резистентные к окислению, малоновый диальдегид, пролапс митрального клапана
Z.I. Mykashynovitch, S.A. Tchepurnenko THE OXIDATIVE MODIFICATIONS OF LIPOPROTEINS IN MALE YOUTHS WITH PRIMARY MITRAL
VALVE PROLAPSE
The .sampling of 137 male youths with primary mitral valve prolapse underwent the analysis of content of lipoproteins, malonic dialdehyde and modified lipoproteins depending on conditions of adaptive reserves of organism. The decrease of adaptive reserves of organism documented by higher content of oxidized lipoproteins up to 2.84 times (p<0.05) and malonic dialdehyde up to 1.85 times as compared with control group (p<0.05). The reliable difference between lipidogram data in patients with high and lower adaptive reserves was not established.
Key words: lipoprotein, oxidized and oxidation resistant, malonic dialdehyde, mitral valve prolapse
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 10, 2012
Материалы и методы. Обследовано 137 юношей с пролапсом митрального клапана (ПМК) I степени без регурги-тации в возрасте от 17 до 21 года, находящихся на обследовании в кардиологическом диспансерном отделении ГУЗ РОКБ. Для верификации ПМК использовали одно-, двухмерную и допплер-эхокардиоскопию, выполняемую на аппарате Sim 5000 plus с датчиком 2 мГц по стандартной методике [6]. Диагноз ставили при наличии выбухания одной и/или обеих створок митрального клапана в полость левого предсердия на 2 мм и более над уровнем митрального кольца по горизонтальной оси в парастернальной позиции [7]. Провисание на 2-5 мм расценивали как I степень пролаби-рования. (Пациенты с ПМК II и III степени в нашей выборке представлены не были).
Велоэргометрию (ВЭМ) проводили в положении сидя по методике ступенчатообразной непрерывно возрастающей мощности. Величина начальной нагрузки и последующих ступеней 50 Вт. Продолжительность каждой ступени 3 мин. Проба осуществлялась до достижения субмаксимальной частоты сердечных сокращений либо до появления других критериев прекращения физической нагрузки [1].
В соответствии с целью работы пациенты с ПМК были разделены на 2 группы. В 1-ю группу (64 человека) с высокими адаптивными возможностями организма вошли пациенты, отличающиеся высокой толерантностью к физической нагрузке. 2-ю группу (73 человека) составили пациенты, имеющие среднюю толерантность к физической нагрузке, которую определяли на основании ВЭМ. Время работы на велоэргометре у больных 1-й клинической группы достоверно не отличалось от такового в контрольной группе (8,7 ± 0,4 мин), во 2-й группе было достоверно ниже, чем в контрольной (на 22,5%; p < 0,05) и составило 6,9 ± 0,5 мин. Это объяснялось ранним достижением субмаксимальной частоты сердечных сокращений, а также появлением одышки, усталости, нарушений ритма, что служило критериями прекращения пробы с физической нагрузкой. В качестве контрольных оценивались показатели у 30 доноров того же пола, возраста без указаний в анамнезе на сердечно-сосудистые заболевания.
Определение холестерина (ХС), холестерина липопро-теинов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерина липо-протеинов низкой и очень низкой плотности (ХС ЛПНП и ОНП), триглицеридов (ТГ) (в ммоль/л) проводили на биохимическом анализаторе Olympus AU-400. Индекс атерогенно-сти (ИА), выражающий соотношение атерогенных и антиате-рогенных липопротеинов в плазме крови, рассчитывали по формуле, предложенной А. Н. Климовым: ИА = (ХС общий - ХС ЛПВП) / ХС ЛПВП [2].
Определение окисленных липопротеинов сыворотки крови (ОЛП) осуществляли по методу K. Yagi, описанному Г. И. Музя и соавт. [3]. Определение степени окисления ли-попротеинов в сыворотке крови проводили после ее предварительной инкубации в течение 1 ч при температуре 37°С в присутствии 50 мкмоль сульфата меди. О степени окисляе-мости липопротеинов судили по последующему определению малонового диальдегида (МДА) колориметрическим способом [6]. Результат выражали в нмоль МДА на 1 грамм белка липопротеина.
Определение резистентности к окислению ХС ЛПНП и ОНП (гепариносажденных ß-липопротеинов) сыворотки крови (РЛП) осуществляли по методу, предложенному Ю. И. Рагино и соавт. [4]. Метод основан на предрасположен-
Для корреспонденции:
Чепурненко Светлана Анатольевна, канд. мед. наук, ассистент каф. общей и клин. биохимии
Адрес: 346880, Ростовская обл., г. Батайск, ул. Крупской, 42/31 Телефон: (8918)507-28-93 Е-таП:айоп_Леритепк@таП.га
Таблица 1
основные показатели липидограммы у юношей с первичным пмК (X± m)
Группы пациентов
Показатель контрольная (n = 30) 1-я (n = 64) 2-я (n = 73)
ХС, ммоль/л 4,45 ± 0,25 4,52 ± 0,23 4,4 ± 0,21
ХС ЛПВП, ммоль/л 1,48 ± 0,12 1,27 ± 0,12 1,25 ± 0,11
ХС ЛПНП и ОНП, ммоль/л 2,97 ± 0,22 3,25 ± 0,21 3,19 ± 0,23
ИА, усл. ед. 2,00 ± 0,13 2,55 ± 0,14 2,63 ± 0,14
ТГ, ммоль/л 1,65 ± 0,13 1,84 ± 0,12 1,85 ± 0,12
Таблица 2
содержание модифицированных липопротеинов у юношей с пмК (X ± m)
Группы пациентов
Показатель контрольная (n = 30) 1-я (n = 64) 2-я (n = 73)
ОЛП, нмоль МДА на 1 г белка 3,31 ± 0,045 7,55 ± 0,023* 9,40 ± 0,021**
РЛП, нмоль на 1 г МДА на 1 г белка В-ЛП 4,28 ± 0,054 1,94 ± 0,012* 2,84 ± 0,011**
МДА, нмоль на 1 мг липидов 5,52 ± 0,56 7,64 ± 0,38* 10,23 ± 0,42**
Примечание. * - p < 0,05 по сравнению с контрольной группой; * - p < 0,05 по сравнению с 1-й группой.
ности гепариносажденных p-липопротеинов к окислению в присутствии ионов металлов переменной валентности при нормальных условиях. Гепарин в присутствии солей марганца преимущественно осаждает p-фракцию липопротеинов (ХС ЛПНП и ОНП). О резистентности к окислению судили по уровню концентрации МДА. Результат выражали в нано-молях МДА на 1 грамм белка липопротеинов.
Количество МДА определяли колориметрическим способом [5]. Метод основан на образовании в кислой среде триметинового комплекса, состоящего из одной молекулы МДА и двух молекул 2-тиобарбитуровой кислоты, который обладает розовым цветом. Количество МДА рассчитывали исходя из s0 = 1,56 • 105М-1см-1 и выражали в наномолях на 1 мг окисленных липопротеинов.
Статистическую обработку полученного материала проводили с использованием компьютерной программы Microsoft Excel Windows. Рассчитывались следующие статистические показатели: средняя арифметическая X, среднее квадратичное отклонение (S), средняя ошибка средней арифметической (m). Сравнение средних значений двух выборок производилось методом Стьюдента. Разница считалась достоверной приp < 0,05.
Результаты и обсуждение. Как видно из табл. 1, достоверной разницы между данными липидограммы у больных 1-й и 2-й клинических и контрольной групп не выявлено. Отсутствие достоверных изменений показателей липидограм-мы у юношей с различными адаптивными возможностями организма и контрольной группой свидетельствовало о том, что патогенез ПМК не ассоциирован с нарушениями липид-ного обмена. Кроме того, среди обследованных нами пациентов не было лиц с наследственной гиперхолестеринемией, которая характеризуется изменениями в липидограмме уже в юношеском возрасте.
Учитывая, что патогномоничным при гипоксии является усиление радикалообразования, сопровождающееся моди-
фикацией макромолекул, представлялось интересным оценить уровень модифицированных липопротеинов у данного контингента пациентов.
Активные кислородные метаболиты вызывают окислительную модификацию ХС ЛПНП и ОНП, в ходе которой они приобретают свойства цитотоксических соединений, что может служить интегральным показателем окислительного повреждения в организме. Результаты анализа процессов модификации липопротеинов приведены в табл. 2.
Нами обнаружено значительное повышение концентрации ОЛП в 1-й и 2-й группах больных с ПМК соответственно в 2,28 и 2,84 раза (р < 0,05) по сравнению с таковым в контрольной группе. Содержание РЛП было наоборот достоверно снижено в 2,21 и 1,51 раза по отношению к таковому в контрольной группе (р < 0,05), что свидетельствовало о наличии оксидативного стресса. Липопротеины крови участвуют во многих процессах информационного обмена с клеточными структурами организма, и степень их окис-ленности отражает устойчивость организма к накоплению прооксидантных метаболитов, в частности активных форм кислорода.
Окисление ЛПНП и ОНП возможно только в том случае, если они сами являются антиоксидантами. Устойчивость липопротеинов к Си-индуцированному окислению коррелирует с содержанием в них а-токоферола, а накопление продуктов ПОЛ возможно только после полного исчезновения витамина. Поскольку основной антиоксидантный эффект ЛПНП и ОНП реализуется через их способность сорбировать органические гидроперекиси, то такой характер течения метаболических процессов в ЛПНП и ОНП на фоне выраженного изменения активности антиоксидантных ферментов эритроцитов можно считать адаптационной реакцией организма юношей с ПМК на оксидативный стресс. Очевидно, что и нарушение захвата ОЛП рецепторами не случайно, так как это позволяет пролонгировать их время жизни в токе крови и тем самым обеспечивает их использование в качестве «спасательного круга» неспецифической АОЗ организма в условиях дискоординации специфического звена.
Менее выраженные расстройства в группе пациентов с высокими адаптивными возможностями организма, возможно, говорят о большей устойчивости гепариносажден-ной фракции липопротеинов (ЛПНП и ОНП) к окислению в условиях гипоксии, что можно считать одним из механизмов клеточной адаптации, направленной на сохранение транспортных форм липидов - липопротеинов.
В то же время во 2-й группе сдвиги в липидном метаболизме свидетельствовали о более выраженном повреждении транспортных форм липидов - липопротеинов. Это подтверждалось более высокими концентрациями как ОЛП (на 24,5%), так и РЛП (на 46,4%) по сравнению с таковыми у пациентов 1-й группы (р < 0,05).
Интегральным качественным показателем развития процессов ПОЛ служат его молекулярные продукты, одним из которых является МДА. Нами установлены статистически
достоверно более высокие значения МДА, как в 1-й, так и во 2-й группе (соответственно на 38,41 и 85,33%) относительно контрольной группы. Следует отметить, что во 2-й группе концентрация МДА превышала значения у пациентов 1-й группы на 33,9% (p < 0,05).
В организме имеется нормальный физиологический уровень (фоновый) МДА, диеновых конъюгатов, других продуктов ПОЛ, свидетельствующий о существовании строгого контроля над окислением липидов со стороны всей иерархической системы регуляции, и в первую очередь ДНК. Статистически достоверно более высокие значения МДА, как в 1-й, так и во 2-й группе, обнаруженные в нашем исследовании, подтверждали заинтересованность процессов ПОЛ в формировании разного адаптивного потенциала у юношей с ПМК. Пероксидация липидного бислоя клеточных мембран, сопровождающаяся их деструкцией, приводит к высвобождению лизосомальных ферментов, что в свою очередь ускоряет образование вазоактивных веществ (гистамин и брадикинин) и вызывает дальнейшее истощение внутренних энергетических резервов при недостаточной оксигенации. Это приводит к замедлению дальнейшего окисления лактата и пирувата и накоплению их в клетках и тканях и таким образом к развитию метаболического ацидоза, что представляет собой дополнительный повреждающий фактор при гипоксии.
Выводы. 1. Будучи сорбентом органических гидроперекисей, ЛПНП и ОНП не только защищают клетки от повреждающего действия ПОЛ, что документируется более низкими значениями МДА в группе больных с высокими адаптивными возможностями организма, но и поддерживают процессы свободнорадикального окисления в организме на регулируемом стационарном уровне.
2. Снижение адаптивных возможностей организма документировано повышением содержания окисленных липо-протеинов в эритроцитах - в 2,84 раза (p < 0,05) и МДА в 1,85 раза по сравнению с таковым в контрольной группе (p < 0,05).
ЛИТЕРАТУРА
1. Аронов Д. М., Лупанов В. П. Функциональные пробы в кардиологии. - М., 2002.
2. Климов А. Н. // Превентивная кардиология. - М., 1987. - С. 300307.
3. Музя Г. И., Куликов В. И., Пономарёва И. В. и др. // Клин. лаб. диагн. - 1993. - № 3. - С. 8-10.
4. Рагино Ю. И., Полонская Я. В., Садовский Е. В. // Клин. лаб. диагн. - 2007. - № 6. - С. 14-17.
5. Стальная И. Д., Гаришвили М. Г. Современные методы в биохимии. - М., 1974. - С. 66-68.
6. Шиллер Н., Осипов М. А. Клиническая эхокардиография. - М., 2005.
7. ACC/AHA 2006 guidelines for the management of patients with valvular heart disease: a report of the American College of Cardiology / American Heart Association Task Force on Practice Guidelines // J. Am. Coll. Cardiol. - 2006. - Vol. 48, N 3. - P. 1-148.
Поступила 31.05.11
