CC BY
17
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Т. 8, №4, 2022 Судебная медицина - 47
DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
обнаружение клобазама и его метаболита в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием при отравлении
А .А . Волкова1, 2, Р .А . Калёкин1, 2, А .М . Орлова1
1 Российский центр судебно-медицинской экспертизы, Москва, Российская Федерация
2 Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация
АННОТАЦИЯ
Обоснование. Проблема определения факта острого и летального отравления клобазамом до настоящего времени остаётся актуальной задачей аналитической токсикологии . Лекарственное вещество клобазам относится к группе бензодиазепинов, включённых в список психоактивных веществ, оборот которых ограничен, так как имеет высокий профиль токсичности при передозировке и злоупотреблении
Цель исследования — предложить простую, достоверную и чувствительную методику идентификации клобазама и его метаболита в моче современным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-QqQ-MC/MC) .
Материал и методы. Нами описан простой и чувствительный метод ВЭЖХ-QqQ-MC/MC для качественного определения клобазама в моче
Результаты. По результатам исследования, время удерживания в подобранных условиях хроматографирования для клобазама составило 5,17 мин, а его метаболита (норклобазама), найденного в моче, — 4,56 мин . Наиболее интенсивный (основной) пик для клобазама — 259 m/z, для норклобазама — 245 m/z .
Заключение. Впервые представлена валидированная методика химико-токсикологического исследования при отравлении клобазамом методом ВЭЖХ-МС/МС, апробированная как на модельной смеси, так и на реальной биологической матрице мочи пациента после приёма клобазама . Данная методика, применяемая в качестве подтверждающего метода исследования, является дополнением к клинической картине в судебно-медицинской экспертизе
ключевые слова: клобазам; высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемным масс-спектрометрическим детектированием; масс-анализатор QqQ; ВЭЖХ-QqQ-MC/MC; детекция; подготовка образца мочи
как цитировать
Волкова А.А., Калёкин Р.А., Орлова А.М. Обнаружение клобазама и его метаболита в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием при отравлении // Судебная медицина. 2022. Т. 8, № 4. С. 47-55. DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
Рукопись получена: 12 . 03 . 2022 Рукопись одобрена: 13 .10 . 2022 опубликована: 30 .1 1. 2022
эко* вектор Статья доступна по лицензии CC BY-NC-ND 4.0 International
© Эко-Вектор, 2022
ORiGiNAL sTuDY ARTicLEs 48 -
DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
Detection of clobazam and its metabolites in urine during poisoning using HPLC-QqQ-Ms/Ms
Alla A . Volkova1, 2, Roman A . Kalekin1, 2, Alevtina M . Orlova1
1 Russian Centre of Forensic Medical Expertise, Moscow, Russian Federation
2 Peoples> Friendship University of Russia, Moscow, Russian Federation
ABSTRACT
BACKGROUND: Determining the incidence of acute and lethal poisoning with clobazam remains an urgent task of analytical toxicology. The medicinal substance clobazam belongs to the group of benzodiazepines, which is included in the list of psychoactive substances whose turnover is limited because of its high toxicity profile in overdose and abuse .
AIM: To propose a simple, reliable, and sensitive technique for the identification of clobazam and its metabolite in the urine by the modern high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-QqQ-MS/MS) .
MATERIALS AND METHODS: We have described a simple and sensitive HPLC-QqQ-MS/MS method for the qualitative determination of clobazam in the urine
RESULTS: The retention time in the selected chromatography conditions for clobazam was 5 .17 min, and its metabolite (norclobazam) in urine was 4 . 56 min . The base peaks for clobazam and norclobazam were 259 m/z and 245 m/z, respectively .
CONCLUSION: For the first time, this study provides a validated method of chemical-toxicological examination for poisoning with clobazam by HPLC-MS/MS, tested both on a model mixture and real biological matrix of the patient's urine after taking clobazam This technique can be a confirmatory research method in addition to the clinical picture in forensic medical examination
Keywords: clobazam; high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection; QqQ mass analyzer; HPLC-QqQ-MS/MS; detection; urine sample preparation .
To cite this article
Volkova AA, Kalekin RA, Orlova AM. Detection of clobazam and its metabolites in urine during poisoning using HPLC-QqQ-MS/MS. Russian Journal of Forensic Medicine. 2022;8(4):47-55. DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
Received: 12 . 03 . 2022
ecosvector
Accepted: 13 .10 . 2022
Published: 30 .1 1. 2022
Article can be used under the CC BY-NC-ND 4.0 International License
© Eco-Vector, 2022
Russian Journal of Forensic Medicine - 49
DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
Alla A . Volkova1' 2, Roman A . Kalekin1 2, Alevtina M . Orlova1
1 Russian Centre of Forensic Medical Expertise, Moscow, Russian Federation
2 Peoples> Friendship University of Russia, Moscow, Russian Federation
IHHPLC-QqQ-MS/MS^^ifttMEiLM^iWo 259 m/z,i№M^245 m/zo
To cite this article
Volkova AA, Kalekin RA, Orlova AM. Russian Journal of Forensic
Medicine. 2022;8(4):47-55. DOI: https://doi.org/10.17816/fm705
^SJ: 12 .03 .2022 gg: 13 .10 . 2022 30 .1 1.2022 ? -
"»■«"'»« Article can be used under the CC BY-NC-ND 4.0 International License
© Eco-Vector, 2022
ОБОСНОВАНИЕ
По данным ежегодного токсикологического мониторинга, острые отравления наркотическими средствами остаются актуальной проблемой, а определение факта острого и летального отравления клобазамом до настоящего времени является первостепенной задачей аналитической токсикологии [1] . Судебно-медицинская диагностика отравлений наркотическими средствами и психотропными веществами со смертельным исходом основана на совокупности морфологических данных и результатов определения веществ в биологических жидкостях и тканях трупа . Но только результаты судебно-хи-мического и химико-токсикологического исследования помогают установить вид наркотических средств и психотропных веществ, их концентрацию, что позволяет высказать суждение о времени приёма и принятой дозе этих веществ [2-4] .
Лекарственное вещество клобазам относится к группе бензодиазепинов . Клобазам включён в список психоактивных веществ, оборот которых, а также незаконное приобретение, хранение, перевозка, изготовление, переработка без цели сбыта в Российской Федерации ограничены
Химическое название клобазама: 7-хлор-1-метил-5-фенил-1Н-1,5-бензодиазепин-2,4(3Н,5Н)-дион. Молекулярная формула: С16Н13С1М202 > Торговое название: Фризиум . Лекарственная форма: таблетки по 10 и 20 мг .
Клобазам — противосудорожное, анксиолитиче-ское средство, действует как транквилизатор, считается сильнодействующим препаратом Клобазам купирует эпилептические приступы, уменьшает напряжённость, раздражение, возбуждение, агрессивность Клобазам относится ко второму поколению противоэпилептических препаратов [5-7] Несмотря на то, что клобазам является лекарственным препаратом с меньшими побочными эффектами в сравнении с другими производными бензо-диазепинов, он оказывает фармакокинетическое взаимодействие на такие препараты, как карбамазепин, фенито-ин, фенобарбитал, примидон, вальпроат, ламотриджин, левитирацетам, окскарбазепин, топирамат, вигабатрин, что обусловливает его влияние на сопутствующую терапию и увеличение или наличие побочных эффектов [8-11] .
Клобазам быстро метаболизируется в печени и потом выводится путём почечной элиминации . Через почки выводится менее 1% клобазама и менее 10% метаболита М-дезметилклобазама (норклобазама) . Норклобазам значительно более устойчив в организме, чем клобазам, его период полураспада примерно вдвое меньше, чем у клобазама (78-82 и 36-41 ч соответственно), а в терапевтических дозах концентрация в сыворотке крови в 3-5 раз
выше [12-16] . При терапевтическом приёме клобазам обнаруживается в биологических жидкостях в диапазоне концентраций 0,1-1 мг/л, токсический эффект начинает проявляться при десятикратном увеличении дозы, а острое отравление может наступить при пероральном приёме 300 мг .
В настоящее время лабораторные методы, которые позволяют обнаружить клобазам и его метаболиты при исследовании биологического объекта (моча) с использованием неинвазивного метода отбора пробы, на современном уровне не описаны . Существует несколько опубликованных методик [16] определения клобазама и норклобазама методом жидкостной и газовой хроматографии с использованием тандемной масс-спектрометрии, которые апробированы на крови или плазме крови . Имеется руководство1 по пробоподготовке жидкость-жидкостной экстракции при исследовании биологического объекта (мочи)
Актуальность использования при химико-токсикологическом исследовании биологических объектов, отобранных у пациентов (потерпевших), имеет большую важность ввиду того, что применение в медицине клобазама достаточно часто встречается в детском возрасте, тем более что с мочой выводится более 90% препарата .
Цель исследования — предложить простую, достоверную и чувствительную методику для идентификации клобазама и его метаболита в моче современным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-QqQ-MC/MC) после твердофазной экстракции, не требующую инвазивного вмешательства
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Пробоподготовка
Для анализа использовали жидкостный хроматограф Nexera X2 (Shimadzu, Япония) с масс-спектрометрическим детектором Shimadzu LCMS-8050 .
Реактивы: 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде с 2 мМ формиата аммония, ацетонитрил, этанол, метанол (чистый для анализа; ч . д . а . ), 0,1 M раствора монофосфата калия (KH2PO4; химически чистый; х . ч . ), 5% уксусной кислоты (ч . д. а . ), 2% раствор гидроксида аммония (NH4OH; ч д а )
В данном исследовании пробоподготовка была выполнена при помощи патронов Agilent Bond Elut Certify (Agilent, США), 130 мг, 3 мл . После кондиционирования патрона 2 мл метанола (ч д а ) и уравновешивания 2 мл 0,1 M KH2PO4 (х . ч . ) пробу мочи человека, употреблявшего клобазам, объёмом 1 мл вводили в патрон . Весь элюат собирали во флакон Элюент для стадий промывки был
1 Guidance for industry: BioanaLytical method validation . Food and Drug Administration . U . S . Department of Health and Human Services [accessed December 4, 2020] . Режим доступа: https://www. fda . gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry. pdf.
Таблица 1. Программа градиентного элюирования Table 1. Gradient elution program
Время, мин
A, %
В, %
0 . 00 1. 00 8 . 00 9 . 00 9 .10 11 00
99,0 99,0 1,0 1,0 99,0 99,0
1,0 1,0 99,0 99,0 1,0 1,0
разделён на три аликвоты по 1 мл каждая . Первую промывку выполняли 1 мл 5% уксусной кислоты (ч .д.а . ), а остальные две — по 1 мл метанола . Каждую фракцию элюата собирали отдельно во флакон . Элюирование выполняли трижды с помощью 1 мл смеси ацетонитрила (ч . д . а . ) с 2% NH4OH (ч . д . а . ) . Каждую фракцию собирали отдельно и объединяли для дальнейшего исследования .
Условия хроматографирования
Параметры хроматографической системы LC-System Nexera X2 Shimadzu. Хроматографическая колонка Kinetex (Phenomenex) 2 . 6u XB-C18 100A 100x2,1 мм . Температура колонки 40°C . Использовалась комбинированная подвижная фаза с двумя компонентами: А — 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде с 2 мМ формиата аммония; B — ацетонитрил, объём вводимой пробы 5 мм3 .
Условия градиентного режима подачи элюента приведены в табл 1
Условия масс-спектрометрического детектирования
Параметры масс-спектрометрического детектирования приведены в табл . 2 . Условия регистрации аналитических сигналов были проведены в режиме мониторинга множественных реакций (multiple reaction monitoring, MRM): энергия соударений 20 эВ; напряжение на фрагментаторе 100 В; скорость сканирования 5 спектров/сек. Оптимизацию условий детектирования проводили с использованием
рабочего раствора концентрацией 0,1 мкг/см3 .Энергию соударений (collision energy, CE) оптимизировали с шагом 10 В по максимальному отклику характеристичного продукт-иона .
Этическая экспертиза
Этический комитет Медицинского центра «Азбука Здоровья» дал положительное заключение (протокол № 1 от 17 . 01. 2022) . Забор проб биологической жидкости производили неинвазивным способом, добровольно, с письменного согласия пациентов, на анонимных условиях и обезличенных данных
РЕЗУЛЬТАТЫ
Предварительно изучали раствор стандартного образца клобазама . Для этого получали 0,1% спиртовой раствор клобазама, который количественно стандартизовали методом ультрафиолетовой (УФ) спектрофотометрии . Затем из мерной колбы отбирали 1 мл 0,1% раствора и добавляли 9 мл этанола для получения 0,01% (0,1 мг/мл) раствора клобазама (испытуемый раствор), который количественно стандартизовали методом УФ-спектрофотометрии
Далее исследовали полученные извлечения из мочи методом ВЭЖХ-QqQ-MC/MC .
Результаты хроматографирования и обнаружения кло-базама и норклобазама представлены на рис 1 и 2
В вышеописанных условиях хроматографирования время удерживания рабочего стандартного образца составило 5,17 мин, а его метаболита, найденного в моче, — 4,56 мин (см . рис . 1) .
Согласно данным рис . 2, МС/МС-параметры анали-та следующие: ион-прекурсор клобазама (m/z*) — 259; фрагментатор (V**) — 224; ион-прекурсор норклобазама (m/z) — 245; фрагментатор (V) — 210 . (* После ионизации вещества ионы разделяются в масс-анализаторе в соответствии с их отношением массы к заряду; ** Селективное деление вещества электрическим разрядом, измеряемое в вольтах) .
Таблица 2. Параметры масс-спектрометрического детектирования (трёхквадрупольный масс-селективный детектор, МС QqQ) Table 2. Parameters of mass spectrometric detection (three quadrupole mass selective detector, MS QqQ)
Параметры интерфейса
Характеристики, ед. изм.
Поток газа-нагревателя (Heating gas flow), л/мин Температура интерфейса (Interface Temperature), °C Температура линии десольвации (DL Temperature), °C Распыление (Nebulizer), л/мин Поток газа-осушителя (Drying Gas Flow), л/мин Температура блока нагревателя (Heat Block Temperature), Температура растворения (Dezolvatation Temperature), °C Напряжение на интерфейсе (Interface Voltage), V Режим детектирования 1 Режим детектирования 2
10 300 250 3 10 400 520 4000
MS2 (Full SCAN) 70-1000 а . е . м . MRM
a
b
Рис. 1. Хроматограммы клобазама (a) и норклобазама (b) при исследовании методом ВЭЖХ-QqQ-MC/MC . Fig. 1. Chromatograms of clobazam (a) and norclobazam (b) in the study by HPLC-QqQ-MS/MS .
a
b
Рис. 2. Масс-спектры клобазама (a) и норклобазама (b) при исследовании методом ВЭЖХ-QqQ-MC/MC . Fig. 2. Mass spectra of clobazam (a) and norclobazam (b) in the study by HPLC-QqQ-MS/MS .
ORiGiNAL STUDY ARTiCLES Vol В (4) 2022 Russian Journal of Forensic Medicine - 53
Таблица 3. Параметры режима мониторинга множественных реакций (MRM) клобазама и норклобазама Table 3. Parameters of the multiple reaction monitoring mode (MRM) of clobazam and norclobazam
Аналит Масса на Q1 —> (переход) масса на Q3 Энергия соударений, эБ Напряжение на фрагменторе, Б Бремя сканирования одного MRM-перехода
Клобазам 301—»210 224 25 37 100 5 спектров/сек
Норклобазам 287—>184 210 25 31 100 5 спектров/сек
Таблица 4. Статистическая обработка результатов хроматографирования клобазама и норклобазама Table 4. Statistical processing of chromatography results of clobazam and norclobazam
параметр
Обнаруженное соединение
клобазам
Норклобазам
Время удерживание, n=6 Дисперсия, о2
Среднеквадратическое отклонение, о Коэффициент вариации, V
Отношение показателя асимметрии к его ошибке, A/ma Отношение показателя эксцесса к его ошибке, E/me Среднее линейное отклонение, а
5,174 0,00009 0,00929 0,18% -0,54265 -3,19999 0,00638
4,555 0,06452 0,25402 5,58/ -0,72547 -3,07923 0,18087
Полученные результаты хроматографирования были статистически обработаны (табл . 3, 4). Как видно из табл . 4, относительное стандартное отклонение норклобазама при хротаматографировании извлечения из мочи составляет 5,5%, что оптимально для извлечения из биологической матрицы с учетом её влияния .
ОБСУЖДЕНИЕ
Получены результаты оптимального хроматографиче-ского разделения клобазама/норклобазама от соэкстрак-тивных веществ биологической матрицы мочи . Поскольку пациенты обычно скрывают приём клобазама, а также в случае намеренного отравления клобазамом сторонним лицом, для окончательного диагноза отравления клобо-замом требуется инструментальный токсикологический анализ . Следует отметить, что в России анализ мочи является обязательным при проведении токсикологического анализа По этой причине в настоящем исследовании сообщается о проверенном методе определения клобазама в моче . Разработанный метод чувствителен, включает в себя простую и быструю пробоподготовку, для которой требуется всего 0,5 мл биологического образца .
ВАЯИДАЦИЯ МЕТОДИКИ
Клобазам и норклобазам были измерены в образцах биологического объекта (моча) качественно в соответствии с руководством Управления по санитарному
надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (Food and Drug Administration, FDA) по ва-лидации биоаналитического метода2 . Хроматограммы образцов мочи не выявили интерферирующих соединений в матрице во время удерживания анализируемых веществ . Нижний предел количественной оценки (lower limit of quantification, LLOQ) был установлен на уровне 0,1 нг/мл для клобазама/норклобазама в обеих матрицах . Отношение сигнал/шум при LLOQ составило >10 . Предел обнаружения (limit of detection, LOD) был определён как 0,05 нг/мл для клобазама/норклобазама . Точность и прецизионность внутрисуточных и межсуточных измерений соответствовали критериям FDA, принятым для анализа аналитов в моче
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Разработан и валидирован простой и чувствительный метод ВЭЖХ-QqQ-MC/MC для идентификации клобазама и норклобазама в образцах мочи пациентов с отравлением клобазамом Впервые представлена валидирован-ная методика химико-токсикологического исследования при отравлении клобазамом методом ВЭЖХ-МС/МС, апробированная как на модельной смеси, так и на реальной биологической матрице мочи пациента после приёма клобазама
Данная методика может применяться в качестве подтверждающего метода исследования и дополнять клиническую картину в судебно-медицинской экспертизе .
2 Guidance for industry: BioanaLytical method validation . Food and Drug Administration . U . S . Department of Health and Human Services [accessed December 4, 2020] . Режим доступа: https://www. fda . gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry. pdf.
ДОПОЛНИТЕЛЬНО
Источник финансирования. Авторы заявляют об отсутствии внешнего финансирования при проведении исследования. Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией). Наибольший вклад распределён следующим образом: А.А. Волкова, Р.А. Калёкин, А.М. Орлова — сбор данных, написание текста рукописи, научное редактирование текста рукописи, рассмотрение и одобрение окончательного варианта рукописи.
ADDITIONAL INFORMATION
Funding source. This study was not supported by any external sources of funding.
Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.
Authors' contribution. Ail authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work. A.A. Voikova, R.A. Kaiekin, A.M. Oriova — data collection, writing the text of the manuscript, critical revition of the manuscript for important inteiiectuai content, review and approve the finai manuscript.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Волкова А.А., Орлова А.М., Калёкин Р.А., Невмятова С.Р. Анализ возможности проведения судебно-химического исследования при отравлении клобазамом // Судебно-медицинская экспертиза. 2022. Т. 65, № 1. С. 35-40. doi: 10.17116/sudmed20226501 135
2. Маркин П.А., Москалева Н.Е., Апполонова С.А., и др. Разработка метода тонкослойной хроматографии для одновременного определения клобазама и залеплона в смеси // Актуальные вопросы судебной медицины и права: сборник научно-практических статей. Казань, 2021. С. 158-161.
3. Орлова А.М., Калёкин Р.А., Волкова А.А., и др. Обнаружение клобазама в моче методом тонкослойной хроматографии // Вестник Воронежского государственного университета. 2021. № 3. С. 106-113.
4. Gauthier A.C., Mattson R.H. Ciobazam: A safe. Efficacious and newly rediscovered therapeutic for epilepsy // CNS Neurosci Ther. 2015. Vol. 21, N 7. Р. 543-548. doi: 10.1111/cns.12399
5. Arya R., Giridharan N., Anand V., Garg S.K. Clobazam monotherapy for focal or generalized seizures// Cochrane Database Syst Rev. 2018. Vol. 2018, N 7. Р. CD009258. doi: 10.1002/14651858.CD009258.pub3
6. Tolbert D., Larsen F. A comprehensive overview of the clinical pharmacokinetics of Clobazam // J Clin Pharmacol. 2019. Vol. 59, N 1. Р. 7-19. doi: 10.1002/jcph.1313
7. Kheireldin R. A case report of Clobazam toxicity related to cannabidiol and Clobazam drug-drug interaction // Translation University Toledo J Med Sci. 2019. N 6. Р. 35-36. doi: 10.46570/utjms.vol6-2019-339
8. Brigo F., Lattanzi S. Anticonvulsant agents: Benzodiazepines (Clobazam. Clonazepam. Diazepam. Lorazepam. Midazolam) // Riederer P., Laux G., Nagatsu T., et al., editors. NeuroPsychopharmacotherapy. Springer Nature Switzerland AG, 2020. Р. 1-8. doi: 10.1007/978-3-319-56015-1_440-1
9. Kheireidin R. A case report and literature review of Ciobazam toxicity reiated to CBD and Ciobazam drug-drug interaction // J Ciin Med Res. 2019. doi: 10.37191/Mapsci-2582-4333-1(2)-012
10. Aung T. Rare but iife-threatening aspiration pneumonia reiated to initiation of Ciobazam therapy // Epiiepsy Behavior Rep. 2020. N 14. P. 100406. doi: 10.1016/j.ebr.2020.100406
11. Huddart R., Leeder J.S., Aitman R.B., KieinT.E. Pharm GKB summary: Ciobazam pathway. Pharmacokinetics // Pharmacogenet Genomics. 2018. Voi. 28, N 4. P. 110-115. doi: 10.1097/FPC.0000000000000327
12. Hammer H., Ebert B., Jensen H.S., Jensen A.A. Functionai characterization of the 1.5-benzodiazepine Ciobazam and its major active metaboiite N-desmethyiciobazam at human GABAA receptors expressed in xenopus iaevis oocytes // PLoS One. 2015. Voi. 10, N 3. P. e0120239. doi: 10.1371/journai.pone.0120239
13. Souri E., Farahani A.D., Ahmadkhaniha R., Amini M. A stabiiity indicating HPLC method for the determination of Ciobazam and its basic degradation product characterization // Daru. 2014. Voi. 22, N 1. P. 49. doi: 10.1 186/2008-2231-22-49
14. Jensen H.S., Nichoi K., Lee D., Ebert B. Ciobazam and its active metaboiite N-desmethyiciobazam dispiay significantiy greater affinities for a2- versus a1-GABAA-receptor compiexes // PLoS One. 2014. Voi. 9, N 2. P. e88456. doi: 10.1371/journai.pone.0088456
15. Bajaja A.O., Ly D., Johnson-Davisab K.L. Retrospective anaiysis of metaboiite patterns of Ciobazam and N-desmethyiciobazam in human piasma by LC-MS/MS // J Mass Spectrom Adv Ciin Lab. 2022. N 24. P. 100-106. doi: 10.1016/j.jmsaci.2022.04.005
16. Laioup M., Fernandez M.R., De Boeck G., et ai. Vaiidation of a iiquid chromatography-tandem mass spectrometry method for the simuitaneous determination of 26 benzodiazepines and metaboiites, zoipidem and zopicione, in biood, urine, and hair // J Anai Toxicoi. 2005. Voi. 29, N 7. P. 616-626. doi: 10.1093/jat/29.7.616
REFERENCES
1. Voikova AA, Oriova AM, Kaiekin RA, Nevmyatova SR. Analysis of the possibility of conducting a forensic chemical study in case of Ciobazam poisoning. Forensic Medical examination. 2022;65(1):35— 40. (In Russ). doi: 10.17116/sudmed20226501 135
2. Markin PA, Moskaieva NE, Appoionova SA, et ai. Development of a thin-iayer chromatography method for simuita-neous determination of Ciobazam and zaiepion in a mixture. In: Topicai issues of forensic medicine and iaw. Coiiection of scientific and practicai articies. Kazan; 2021. Р. 158-161. (In Russ).
3. Oriova AM, Kaiekin RA, Voikova AA, et ai. Detection of Ciobazam in urine by thin-iayer chromatography. Bulletin Voronezh State University. 2021;(3):106—113. (In Russ).
4. Gauthier AC, Mattson RH. Ciobazam: A safe. Efficacious and newiy rediscovered therapeutic for epiiepsy. CNS Neurosci Ther. 2015;21(7):543—548. doi: 10.1111/cns.12399
5. Arya R, Giridharan N, Anand V, Garg SK. Ciobazam monotherapy for focai or generaiized seizures. Cochrane Database Syst Rev. 2018;2018(7):CD009258. doi: 10.1002/14651858.CD009258.pub3
6. Toibert D, Larsen FA. A comprehensive overview of the ciinicai pharmacokinetics of Ciobazam. J Clin Pharmacol. 2019;59(1):7—19. doi: 10.1002/jcph.1313
7. Kheireidin R. A case report of Ciobazam toxicity reiated to cannabidioi and Ciobazam drug-drug interaction. Translation University Toledo J Med Sci. 2019;(6):35—36. doi: 10.46570/utjms.voi6-2019-339
8. Brigo F, Lattanzi S. Anticonvuisant agents: Benzodiazepines (Ciobazam. Cionazepam. Diazepam. Lorazepam. Midazoiam). In book: Riederer P., Laux G., Nagatsu T., et ai., editors. NeuroPsychopharmacotherapy. Springer Nature Switzeriand AG; 2020. Р. 1—8. doi: 10.1007/978-3-319-56015-1_440-1
ОБ АВТОРАХ
* Калёкин Роман Анатольевич, д.фарм.н.,
адрес: Россия, 125284, Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-4989-351 1;
eLibrary SPIN: 2473-7421; e-maii: [email protected]
Волкова Алла Андреевна, к.фарм.н.;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9882-2330;
e-maii: [email protected]
Орлова Алевтина Михайловна, к.фарм.н.;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5419-1418;
eLibrary SPIN: 7685-2315; e-maii: [email protected]
* Автор, ответственный за переписку / Üorresponding author
9. Kheireidin R. A case report and literature review of Ciobazam toxicity related to cbd and Ciobazam drug-drug interaction. J Clin Med Res. 2019. doi: 10.37191/Mapsci-2582-4333-1(2)-012
10. Aung T. Rare but iife-threatening aspiration pneumonia related to initiation of Ciobazam therapy. Epilepsy Behavior Rep. 2020;14:100406. doi: 10.1016/j.ebr.2020.100406
11. Huddart R, Leeder JS, Aitman RB, Kiein TE. Pharm GKB summary: Ciobazam pathway. Pharmacokinetics. Pharmacogenet Genomics. 2018;28(4):110—115. doi: 10.1097/FPC.0000000000000327
12. Hammer H, Ebert B, Jensen HS, Jensen AA. Functionai characterization of the 1.5-benzodiazepine Ciobazam and its major active metaboiite N-desmethyiciobazam at human GABAA receptors expressed in xenopus iaevis oocytes. PLoS One. 2015;10(3):e0120239. doi: 10.1371/journai.pone.0120239
13. Souri E, Farahani AD, Ahmadkhaniha R, Amini M. A stabiiity indicating HPLC method for the determination of Ciobazam and its basic degradation product characterization. Daru. 2014;22(1):49. doi: 10.1 186/2008-2231-22-49
14. Jensen HS, Nichoi K, Lee D, Ebert B. Ciobazam and its active metaboiite N-desmethyiciobazam dispiay significantiy greater affinities for a2- versus a1-GABAA-receptor compiexes. PLoS One. 2014;9(2):e88456. doi: 10.1371/journai.pone.0088456
15. Bajaja AO, Ly D, Johnson-Davisab KL. Retrospective anaiysis of metaboiite patterns of Ciobazam and N-desmethyiciobazam in human piasma by LC-MS/MS. J Mass Spectrom Adv Clin Lab. 2022;(24):100-106. doi: 10.1016/j.jmsaci.2022.04.005
16. Laioup M, Fernandez MR, De Boeck G, et ai. Vaiidation of a iiquid chromatography-tandem mass spectrometry method for the simuitaneous determination of 26 benzodiazepines and metaboiites, zoipidem and zopicione, in biood, urine, and hair. J Anal Toxicol. 2005;29(7):616-626. doi: 10.1093/jat/29.7.616
AUTHORS' INFO
* Roman A. Kalekin, Dr. Sci. (Pharm);
address: 12/13, Poiikarpov Street, Moscow, 125284 Russia;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-4989-351 1;
eLibrary SPIN: 2473-7421; e-maii: [email protected]
Alla A. Volkova, Cand. Sci. (Pharm.);
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9882-2330;
e-maii: [email protected]
Alevtina M. Orlova, Cand. Sci. (Pharm.);
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5419-1418;
eLibrary SPIN: 7685-2315; e-maii: [email protected]
