CC BY
29
МОРФОЛОГИЯ. ПАТОЛОГИЯ -^-
УДК 616-007.274:617
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ МОДЕЛИРОВАНИЮ СПАЕЧНОГО ПРОЦЕССА
А. А. Воробьёв, С. В. Поройский, В. Б. Барканов, Ю. А. Дворецкая
Лаборатория моделирования патологии Волгоградского научного центра РАМН и администрации Волгоградской области
Уже длительное время послеоперационный спаечный процесс представляет собой актуальный и нерешенный вопрос хирургии. Основным путем решения данного вопроса является четкое представление этиопатогенетических звеньев спайкообразования, позволяющих обосновать новые направления его диагностики, профилактики и лечения. Однако исследование данного патофизиологического процесса на человеке имеет значительные ограничения, в связи с чем особую актуальность приобретает эксперимент. При этом адекватность и достоверность экспериментального исследования имеет четкую взаимосвязь с примененной моделью спаечного процесса. Ее особое значение определяется необходимостью приближения условий эксперимента к естественной направленности воздействия этиологических факторов, соблюдения условий и стандартности выполнения модели. В разное время было предложено большое количество экспериментальных образцов для моделирования процесса спайкообразования. Хирурги-исследователи в качестве объекта для моделирования спаечного процесса избирают тонкую и слепую кишку, большой сальник, париетальную брюшину перед-небоковых стенок живота, маточные рога, яйцеводы и яичники лабораторных животных. Большинство моделей связано с воздействием на париетальный и висцеральный листки брюшины лабораторных животных: различными химическими веществами (прижигание листков брюшины этиловым спиртом (di Zerega G. S., 1983), ее раздражение тальком [9] для воспроизведения асептического воспаления; механическим повреждением путем скарификации брюшины шершавой марлей, наложением швов [10], зажимов [Holz G., 1980], обрабатывали рога матки жесткой щеткой до появления капиллярного кровотечения [11]; а также применялись комбинированные способы
индуцирования спаек между боковыми стенками малого таза и маточными рогами [4]. Однако недостатком всех предложенных ранее экспериментальных моделей является отсутствие условий стандартности степени травмирования участков брюшины. Этот факт не позволяет достоверно сравнить результаты в различных экспериментальных группах.
В связи с этим в 1997 г. на кафедре оперативной хирургии и топографической анатомии Волгоградского государственного медицинского университета была разработана методика стандартной операционной травмы, обеспечивающая возможность сопоставления результатов моделирования спаечного процесса в различных экспериментальных группах. Вместе с тем эта модель выполнялась в условиях здорового экспериментального животного и не в полном объеме отражает объем и этапность существующих хирургических вмешательств. Особенно остро проблема образования перитонеальных сращений стоит в хирургической гинекологии, так как именно гинекологические операции сопровождаются наибольшим риском спайкообразования, зачастую выходящего за пределы малого таза. Так, послеоперационные спайки после надвлагалищной ампутации матки образуются 92,6 % случаях, после экстирпации матки - в 95 %. Именно эти сращения в 21-30 % случаев станут причиной спаечной непроходимости кишечника [3, 4]. Существующие экспериментальные модели спаечного процесса при гинекологических операциях не обеспечивают адекватного объема операционной травмы, которой сопровождаются операции по поводу ампутации и экстирпации матки. Экспериментаторами не учитывается фактор гормональной недостаточности, возникающей в ряде случаев при гинекологических операциях, включающих частичное или полное удаление яичников.
2-2007
БЮЛЛЕТЕНЬ ВОЛГОГРАДСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РАМН
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Разработать новую методику экспериментального моделирования спаечного процесса при гормональной недостаточности.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
С нашей точки зрения, объективная оценка послеоперационного спайкообразования возможна только при проведении сравнительного исследования с использованием экспериментальных моделей, отражающих различный объем гинекологической операционной травмы. Разрабатываемые экспериментальные модели должны отвечать следующим критериям: обеспечивать стандартность условий проведения эксперимента, максимально приблизить экспериментальную модель к реальному объему гинекологической травмы при выполнении ампутации матки с яичниками, без яичников и стандартной операционной травмы; создать условия течения послеоперационного адгезиогенеза на фоне недостаточности половых гормонов, обеспечить возможность проведения объективного сравнительного исследования спаечного процесса при операциях, сопровождающихся различной по объему операционной травмой.
На кафедре оперативной хирургии и топографической анатомии Волгоградского государственного медицинского университета была разработана новая методика экспериментального моделирования процесса спайкообразования при недостаточности половых гормонов. Модель воспроизводима на различных видах экспериментальных животных. Обязательными условиями являются: исходно здоровые животные одинакового возраста (половозрелые самки) и веса.
В качестве экспериментального животного нами использованы половозрелые самки крыс линии Вистар. По данным П. К. Бергхофа (1998), половозрелости самки крыс достигают в возрасте 60-70 дней, при этом их вес возрастает до 200400 г. На основании вышесказанного нами были применены крысы в возрасте 3 мес., достигшие массы 250-300 г. Методика реализуется путем сравнения результатов параллельно выполняемых экспериментальных моделей, учитывающих различный объем операционной травмы:
1) стандартная операционная травма;
2) ампутация матки с сохранением яичников;
3) ампутация матки с яичниками.
Все экспериментальные модели воспроизводились под внутримышечным этаминаловым наркозом (40 мг/кг). Операционное поле обрабатывалось йодонатом и ограничивалось стерильным материалом. Стандартным оперативным доступом для всех моделей явилась нижняя срединная ла-паротомия длиной 2 см. Завершение операции включало послойное ушивание раны с наложением пяти узловых швов из атравматического не-рассасывающегося шовного материала с интервалом в 4 мм на прямые мышцы живота и кожу.
Первую группу составили животные с экспериментально воспроизведенной стандартной опе-
рационной травмой, заключающейся в десерози-ровании участка париетальной брюшины в области правого отдела передней боковой брюшной стенки и висцеральной брюшины купола слепой кишки, дистальной части подвздошной кишки размером 0,5*0,5 см.
Вторую группу составили животные с расширенным объемом операционной травмы, достигаемой ампутацией матки без придатков. Модель включает следующие этапы.
После выполнения лапаротомии идентифицируется тело матки с расположенными на ее боковых поверхностях правой и левой маточными артериями. Капроновая лигатура накладывается на тело матки выше ее шейки и затягивается тремя узловыми швами. Аналогичные швы накладываются на правую и левую маточные трубы ниже яичника, не захватывая в лигатуру яичниковую артерию. Следующим этапом выполняется пересечение маточных труб и тела матки между наложенными лигатурами и кровоостанавливающими зажимами "Маскит". Пересечением широкой связки матки завершается ее ампутация с оставлением яичников.
Третью группу составили животные с экспериментальной моделью, сочетающей расширенный объем операционной травмы с недостаточностью половых гормонов, что достигается путем ампутации матки с яичниками. Модель отличается от предыдущей следующим: лигатуры накладываются на правую и левую связки яичника, содержащие яичниковые артерии. После чего выполняется пересечение яичниковых связок и тела матки между наложенными лигатурами и кровоостанавливающими зажимами "Маскит". Пересечение широкой связки матки завершает ее ампутацию с яичниками.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Разработанная новая методика экспериментального моделирования спаечного процесса при гормональной недостаточности может быть применена: для определения зависимости объема операционной травмы и уровня спаечного процесса; исследования влияния недостаточности половых гормонов на процесс адгезиогенеза; оценки динамики цитоморфологических показателей на различных этапах образования перито-неальных сращений в условиях различной выраженности операционной травмы. Подана заявка на изобретение "Способ экспериментального моделирования спаечного процесса в условиях недостаточности половых гормонов".
ЛИТЕРАТУРА
1. Ааамян Л. В., Мынбаев О. А., Отуо Ф. Л. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1993. - № 1. - С. 68-69.
2. Женчевский Р. А. // Вестник хирургии им. Грекова. - 1981. - Т. 127. - № 4. - С. 65-67.
3. Женчевский Р. А. Спаечная болезнь. - М.: Медицина, 1989. - 191 с.
4. Кулаков В. И., Кулаков В. И., Аадамян Л. В. и др. Послеоперационые спайки. - М.: Медицина, 1998. - 527 с.
БЮЛЛЕТЕНЬ ВОЛГОГРАДСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РАМН
5. Di Zerega G. S. // Pelvic surgery: adhesion formation and prevention / Eds: G. S. Di Zerega, A. H. DeCherney, R. C. Dunn, et al. - N.-Y.: Springer-Verlag, 1997. -P. 167-180.
6. Di Zerega G. S., Rodgers K. E. The peritoneum. -N.-Y.: Springer-Verlag, 1992. - 325 p.
7. Holtz J. // Fertil. Steril. - 1984. - Vol. 40, № 4. -P. 497-507.
2-20071
8. Hotz G. // Contemporari Ob. Gyn. - 1988. - Vol. 32, № 6. - P. 1-6.
9. Luttwak E. M., Feldman J. D., Neuman Z. // Arch Surg. - 1954. - Vol. 68. - P. 69-75.
10. Thompson J. N. // Lanset. - 1995. - Vol. 346. -P. 1382.
11. Swolin K. // Acta Obstet GynecolScand. - 1966. -Vol. 45. - P. 473-483.
УДК 616-018-092.4-003.96+616.432:591.481.2
СРАВНИТЕЛЬНАЯ МИКРОМОРФОЛОГИЯ ХРОМОФИЛЬНЫХ КЛЕТОК АДЕНОГИПОФИЗА В НОРМЕ И ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПСИХОЭМОЦИОНАЛЬНОМ И СМЕШАННОМ СТРЕССАХ В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ
ОНТОГЕНЕЗЕ БЕЛЫХ КРЫС
В. Л. Загребин, А. С. Бойко, Д. П. Иванова
Кафедра гистологии, эмбриологии, цитологии ВолГМУ, Волгоградский областной медицинский колледж №1
В мировой литературе описано влияние стресса на гипоталамо-гипофизарно-адренокор-тикальную систему посредством стимуляции выработки кортикотропин-рилизинг фактора клетками паравентрикулярного ядра гипоталамуса, который усиливает секрецию АКТГ базофильны-ми кортиктропоцитами аденогипофиза, стимулируя продукцию кортикостерона сетчатой зоной коры надпочечников - основного адренокорти-кального гормона белых крыс [3, 4].
Однако не имеется четкого положения о влиянии стресса на изменение поведенческих реакций и структурные изменения гипофиза в ходе адаптационных изменений нейроэндокринной системы.
Актуальность исследования заключается в выявлении онтогенетической зависимости изменения поведенческих реакций и структурных перестроек гипофиза в ходе адаптационных изменений нейроэндокринной системы при воздействии хронического стресса.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучить в сравнительном аспекте и составить микроморфологическую характеристику клеточного состава аденогипофиза белых крыс раннего постнатального онтогенеза в норме и после хронического стресса разной степени выраженности.
Были поставлены следующие задачи:
1. Определить изменение поведенческих реакций белых крыс после хронического стресса (как маркер адаптационных изменений нейроэндокринной системы).
2. Оценить микроморфологию хромофильных клеток аденогипофиза после воздействия хронического стресса в грудном, подсосном и инфант-ном периодах раннего постнатального онтогенеза.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
В эксперимент было взято 27 крыс линии "Вистар" грудного (14 дней), подсосного (21 день) и инфантного (30 дней) периодов по 9 особей в каждой группе, что экстраполируется на периодизацию возрастных групп человека от грудного периода до раннего детства (классификация Е. И. Аршавского, 1968) [1].
В каждой возрастной группе крысы подразделялись на подгруппы:
1) психоэмоционального "мягкого" стресса -заключение в перфорированный пластиковый бокс (Кветнански и соавт., 1981);
2) смешанного "жесткого" стресса (физиче-ский+эмоциональный) - иммобилизация на доске растяжкой за конечности [2];
3) контроль.
Хронический стресс достигался 5-часовой иммобилизацией в течение 7 дней. Все крысы во время эксперимента находились в изолированных помещениях для исключения контакта опытных и контрольной групп.
Животные ежедневно подвергались взвешиванию и оценке поведенческих реакций с помощью приподнятого крестообразного лабиринта (Elevated-plus maze) по разработанной S. Pellow и соавт. (1985). Методике в первый и последний день эксперимента [5, 6].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЕ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты исследования показали, что "жесткий" стресс вызывал более пролонгированное восстановление общей моторной активности и повышение познавательной активности крыс по сравнению с контролем (рис. 1).
Достоверно различная общая моторная активность была выявлена у крыс подсосного пе-
