CC BY
68
Isolation of Toxocara canis in puppies using digestion method of lung tissue. Panova O.A., Glamazdin I.G., Shibitov S.K. Moscow State University of Food Production; Central Scientific Veterinary Laboratory.
Summary. The developed method of isolation of migrating T. canis larvae can be applied for postmortem diagnosis of this infection even at low larvae level and absence of adult helminths in intestine. Also this procedure can be used for preparation of pure larval culture for future genetic investigations or proteins with high diagnostic properties. The results of the carried out investigations allow to develop and improve the methods of T. canis infection at the stage of migrating parasites.
НОВОЕ В МИКРОСТРУКТУРЕ ЯИЦ TRICHURIS (=TRICHOCEPHAL US) VULPIS (FROELICH, 1789)
Пасечник В.Е.
ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина
Введение. Паразитарный зооноз, вызываемый Trichuris (=Trichocephalus) vulpis (Froelich, 1789) - является возбудителем трихуроза (=трихоцефалёза), поражающего собак, волков, хорьков, лисиц, бурых медведей в условиях неволи (цирках), человека [1,2,3,4,5,6,7].
Необходимость фундаментального изучения микроструктуры яиц возбудителя тяжёлого заболевания трихоцефалёз-T.vulpis возникла давно, однако наиболее остро встала перед нами эта проблема с 2000г., когда мы впервые в России (в соответствии с литературными данными) зарегистрировали гибель клубных собак (щенков) породы лабрадор, а впоследствии при исследовании зоопарковых и цирковых животных впервые обнаружили: у цирковых бурых медведей трихоцефалёз и томинксоз, а у цирковых хорьков впервые - трихоцефалёз [1,2,3,4].
Известно по К.И.Скрябину и др. [7], что: яйца T.vulpis имеют бочонковидную, свойственную всем трихоцефалидам форму, с выступами в форме пробочек на полюсах. Размер яиц 0,083 - 0,093 х 0,037 - 0,040мм, яйца Th. aerophilus бочонковидной формы, 0,062 - 0,077 х 0,033мм длины и 0,033 -0,037ммширины.
Прижизненно заражение домашних, диких хищных и человека трихоцефалами, томинксами может быть установлено копроовоскопией, так как выделение яиц гельминтов во внешнюю средуиз организма дефинитивного хозяина (хищники, человек) происходитс экскрементами.
209
Поэтому практические врачи, учёные паразитологи сталкиваются с проблемой, т.к. идентификация до вида по имеющимся на сегодняшний день морфологическим данным отсутствовала. Видовая микроструктура яиц T. vulpis и Th. aerophilus до наших работ (В.Е.Пасечник - патент №2482481) практически не была изучена, так как внешне они очень похожи: бочонкообразные с пробочками на полюсах, а иногда размеры яиц почти совпадают (по результатам наших измерений 500 яиц): T.vulpis: 0,083мм х 0,037мм и Th. (Capillaria) aerophilus: 0,08мм х 0,037мм[6].
Следовательно, чтобы обнаружить разницу в размерах яиц T.vulpis и Th. aerophilus, необходимо измерение большого количества яиц, что на практике редко бывает особенно при субклинической инвазии и при исследовании обезличенных экскрементов от людей и домашних хищных в черте города - на детских площадках и др.
Известные методы диагностики (копроовоскопия) позволяют исследователю поставить только предположительный родовой диагноз: трихоцефалёз или/и возможно томинксоз.
А в научных и в практических условиях, необходимо уточнять диагноз болезни до вида возбудителя инвазии.
Это архиважно при заболевании высокоценных племенных, пушных, охотничье-промысловых, зоопарковых, цирковых, породистых домашних животных и зверей, на грани исчезновения видов, которых для уточнения диагноза до вида T.vulpis и Th. aerophilus - возбудителя болезни, необходимо исследовать посмертно (на вскрытии) [1,2,3,4,5,6].
Заболевание может быть вызвано и смешанной инвазией (T.vulpis+Th. aerophilus), что влечёт за собой иногда снижение эффективности методов лечения, т.к. при данной болезни отсутствовалдо наших работ (патент № 2482481) прижизненный способ диагностики до вида возбудителя болезни [6].
Поэтому цельюнашей работы было изучить более подробно видовую микроструктуру яиц T.vulpis и разработать новый метод прижизненной дифференциальной диагностики с видом Th.aerophilus.
Материалы и методы. Работу проводили в России, Республике Молдова, Украине, в музее, в лаборатории паразитарных зоонозов ВИГИС. Для изучения микроструктуры было использовано более 2500 оплодотворённых (=зрелых) яиц трихоцефалов Trichocephalus (=Trichuris) vulpis, извлечённых из вагины самок, которые были собраны методом гельминтологических исследований от 20собак и 4-х лисиц (из 6 вскрытых) спонтанно заражённых трихоцефалёзом.
Результаты. Яйца трихурисов (=трихоцефалов) вида Trichuris (=Trichocephalus) vulpis помещали на предметное стекло, просветляли их в 98,5%-ном растворе глицерина (плотностью 1,256) плюс 40% молочная кислота в соотношении 1:1, накрывали покровным стеклом и просматривали под микроскопом при увеличениях: 600,1200 и 900 под иммерсиейиизучали их микроструктуру, параллельно проводили фотографирование препаратов.
210
В результате подробного изучения микроструктуры яиц T.vulpis, были выявлены новые для науки видовые признаки яиц трихурисов (=трихоцефалов), которые отражены ниже в таблице.
Заключение. В результате подробного изучения микроструктуры яиц Trichuris (=Trichocephalus) vulpis (Froelich, 1789) были получены новые данные по видовой микроструктуре яиц возбудителя паразитарного зооноза, что позволило разработать прижизненную дифференциальную диагностику с другим паразитарным зоонозом Thominx (=Capillaria) aerophilus (Creplin, 1839) Travossos, 1915 (патент на изобретение № 2482481).
Таблица
Основые видовые микроструктурные признаки яиц Trichuris vulpis
Видовые микроструктурные признаки яиц трихоцефалов Trichuris (=Trichocephalus) vulpis (Froelich, 1789)
Пробочки на полюсах яиц Выступают над поверхностью оболочек; длинные с выраженной шейкой и широкими шапочками;
1-я наружная оболочка нежная, тонкая, прозрачная, которая охватывает всё яйцо и видна вблизи полюсов
На 2-й оболочке яйца имеют шипы и на полюсах стилеты;
3-я оболочка видна в области пробочек в виде полупрозрачной змеевидной трёхконечной микроструктуры, выходящей из яйца в жидкостное пространство 1-й оболочки;
Шейки пробочек винтообразной формы с 3 кольцами; 3-е кольцо выпуклое и шире остальных в 2 раза и скрепляет основание шейки пробочек с внутренней оболочкой зародыша.
Литература: 1. Пасечник В.Е. //Сб. мат. научн.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М.-2006.-Вып.7. - С.294-296. 2.Пасечник
B. Е.//Сб. мат. научн.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».М.-2010.-Вып.11.-С.351-353. 3.Пасечник В.Е. //Сб. мат. научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».М.-2011.-Вып.12.-С.377-379. 4.Пасечник В.Е. //Рос.паразитол. журнал. М.-2010-№1.-
C. 15 - 21. 5.Пасечник В.Е., Успенский А.В. и др. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и мерам борьбы с гельминтозами цирковых животных. М. Изд. Россельхозакадемии, 2008. -50с. б.Пасечник В.Е. Патент № 2482481.//Бюл.Фед.службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам РФ. - М. - 2013. - №14. 7. Скрябин К.И., Шихобалова Н.П., И.В.Орлов. Основы нематодологии. - М. - 1957. -Т.6. - 587с.
211
New data on microstructure of eggs of Trichuris (=Trichocephalus) vulpis (Froelich, 1789). Pasechnik V.E. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.
Summary. The new data on microstructure of Trichuris vulpis eggs were obtained what allowed to develop the vital differential diagnosis with other parasitose caused by Thominx aerophilus (patent № 2482481).
THOMINX (CAPILLARIA) AEROPHILUS TRAVASSOS, 1915 -НОВЫЕ ДАННЫЕ ПО МИКРОСТРУКТУРЕ ЯИЦ
ПасечникВ.Е.
ГНУ ВНИИ гельминтологииим. К.И. Скрябина
Введение. Вид: Thominx (Capillaria) aerophilus Travassos,1915-
возбудитель паразитарного зооноза (=гельминтозооноз), поражающего медведей, кошек, собак, волков, лисиц, барсуков, песцов, куниц, норок, соболей, и других пушных зверей семейств: собачьих, кошачьих, куньих и человека [1,2,3,4,5,6].
Локализация: носовые ходы, большие бронхи, лёгкие, трахея.
Вид Th. aerophilusо тносится к подотряду Trichocephalata Skrjabin et Schulz, 1928, роду Thominx Dujardin, 1845. Однако известно, что дикие и домашние животные могут заражаться и представителями паразитарных зоонозов других родов: Dioctophyme renale (Goeze, 1782), Trichuris
(=Trichocephalus) vulpis (Froelich, 1789), а человек (особенно дети!) и другим гельминтозоонозом: Trichuris (=Trichocephalus) trichiurus (L., 1771) [4].
Кроме того, известно, что инвазия может быть в «чистой форме» (Th. aerophilus) и в ассоциации: Th. aerophilus + D. renale; Th. aerophilus + T. vulpis; Th.aerophilus + D.renale +T.vulpis и другие сочетания инвазий.
Диагноз по морфологии яиц (по К.И.Скрябину и др.):
род Thominx Dujardin, 1845 -яйца с пробочками, слабо выступающими;
род Trichocephalus Schrank, 1788 - яйца типичной бочонкообразной формы с толстой оболочкой и пробочкой на полюсах [6].
Известно [2] что: яйца T.vulpis бочковидной формы, с пробочками на полюсах. Оболочка яицгладкая и довольно толстая. Размеры яиц 0,093 х 0,040мм; яйца Th. aerophilus бочонковидной формы.Размерыяиц 0,062 - 0,077 х 0,033 - 0,037 мм.
Известно, что в биоцикле этих паразитов естьобщая особенность: выделение яиц гельминтов во внешнюю средуиз организмадефинитивного хозяина (хищники, человек) происходитсэкскрементами [2].
Поэтому, исследователи (практические врачи, учёные паразитологи) сталкиваются с проблемой. Идентификация до вида по имеющимся на сегодняшний день основнымпризнакам отсутствовала, так как видовая микроструктура яиц Th. aerophilus и T.vulpis практически не была изучена
212
