CC BY
11
Реферат
СТРУКТУРН0-ФУНКЦЮНАЛЫН1 АСПЕКТИ ПРОТЕКТОРНОГО ВПЛИВУ М1КР0П0ЛЯРИЗАЦИ НЕОКОРТЕКСУ I К1РК0ВИХ НЕЙР0ТР0Ф1ЧНИХ ФАКТ0Р1В ПРИ ГЕМ0РАГ1ЧН0МУ 1НСУЛЬТ1 (ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛЩЖЕННЯ) Кульчиков А.Е., КосЩин Н.С., Васильева 1.Г., Макаренко A.M.
Ключов1 слова: експериментальний геморрапчний ¡нсульт, мкрополяризацт неокортексу, KipKOBi нейротрофннп фактори.
Дослщжували протекторний вплив м1крополяризаци неокортексу i юркових нейротроф1чних фактор1в у щур1в з експериментальним геморрапчним ¡нсультом. Показано, що макрополяризац1я неокортексу у тварин з ¡нсультом мае протекторну дш на структуру i функцП' нервових кгптин, знижуючи ступшь ви-раженосп невролопчного дефщиту, зменшуе ктькють загиблих кл1тин в першсультнш 30Hi i в сенсо-моторному неокортеш (р<0,05 у пор1вняны з тваринами з ¡нсультом). Бтьш ефективним виявилось поеднання використання м1крополяризаци неокортексу i юркових нейротроф1чних фактор1в у тварин з геморрапчним ¡нсультом.
Summary
STRUCTURAL AND FUNCTIONAL ASPECTS OF PROTECTIVE EFFECT PRODUCED BY MICROPOLARIZATION OF NEOCORTEX AND CORTEX NEUROTROPHIC FACTORS UNDER HEMORRHAGIC STROKE (EXPERIMENTAL STUDY) Kultchikova A.Ye., Kositsyn N.S., Vasilieva I.G., Makarenko A.N.
Key words: experimental hemorrhagic stroke, micropolarization of neocortex, cortex neurotrophic factors.
The paper presents the study of protective effect produced by micropolarization of neocortex and cortex neurotrophic factors in rats under modeled hemorrhagic stroke. It has been demonstrated the micropolarization of neocortex in the animals with the stroke provides the protective effect on the structure and functions of neurons, reducing the intensity of neurological deficiency, decreases the number of destroyed cells within the peristroke area and within the sensomotor neocortex (p<0,05 in comparison with the animals having stroke). The combination of micropolarization of neocortex and cortex neurotrophic factors in rats under modeled hemorrhagic stroke has appeared more effective.
УДК 616.34-007.272 : 615.916475
NO-ЗАЛЕЖН! ЗМ1НИ ПРОДУКЦИ СУПЕРОКСИДНОГО АНЮН-РАДИКАЛУ В ТКАНИНАХ T0HK0Ï КИШКИ ЗА УМОВ M Г0СТР01 НЕПР0Х1ДН0СТ1
Левкое А. А, Костенко В. О.
Вищий державний навчальний заклад УкраУни «УкраУнська медична стоматолопчна академия», м. Полтава
У eKcnepuMeumi на 70 бших щурах досл{джено продукщю супероксидного атон-радикала (.0 2 ) у тканинах тонког кишки за умов и гострог Henpoxiduocmi та змт функщоналъного стану NO-синтаз (NOS). Виявлено, що застосування неселективного imiôimopy NO-синтаз (метилового eçfiipy Himpo-L-apziuiHy, L-NAME), селективних imiôimopie тдуцибелъног (амтогуатдину) та
нейроналъног (7-ттрспндазолу) NOS попереджуе icmomue збшъшення продукци ■ 02 мтросома-
ми. Застосування селективного imiôimopy iNOS попереджуе збшъшення вироблення ■ О 2 Mimo-xondpiajibHUM електронно-транспортним ланцюгом. Застосування L-NAME тдвищуе вироблення ■ О 2 за умов 6 годинног Henpoxidnocmi, що вказуе на роль конституцшних NOS у попере-джент у цей термт патолог{чного процесу гтерпродукцп • О 2 м{тохондр{ями. У тзньому
nepiodi розвитку Henpoxidnocmi (через 18 годин) гтерпродукщя • 02 MimoxoHdpiajibHUM електронно-транспортним ланцюгом пов'язана з функщонуванням як тдуцибелъног, так i нейроналъног NOS. Застосування неселективного imiôimopy NOS, селективних imiôimopie iNOS та
nNOS обмежуе вироблення 02 мimoxoндpiямu. BidMiueuo здаттстъ Ь-аргтту обмежувати zi-
перпродукщю • 02 мшросомальним i MimoxondpiajibHUM електронно-транспортними ланцюга-ми. Застосування скевенджеру перокситтриту (Ь-селенометюшну) обмежуе гтерпродукцп ■
О 2 мimoxoндpiямu (за умов 6- та 18 годинног кишковог Henpoxidnocmi) та збшъшуе вироблення ■ О 2 НАДФН-оксидазою лeйкoцumiв (за умов 6- годинног Henpoxidnocmi).
Ключов1 слова: гостра тонкокишкова непрохщнють, супероксидний анюн-радикал, оксид азоту, NO-синтази, пероксинприт.
* Стаття е фрагментом плановоï НДР ВДНЗУ «УкраУнська медична стоматолог/чна академ'м» "Кисень- та NO-3ane>KHi мехашзми ушкодження внутр/'шн/'х органе та ïx корекц/я ф/'зюлог/'чно активными речовинами" (№ держреестрацп 0108U010079).
Вступ
Гостра тонкокишкова непрохщнють (ГТКН) все ще вважаеться невир1шеною проблемою абдо-мшально'Г xipypriï. Незважаючи на прогрес, який був досягнутий протягом останжх рок1в, резуль-тати лкування цього захворювання не можуть задовольнити клшщиспв, осктьки шсляопера-цшна летальнють залишаеться високою i сягае 13-17% i не мае тенденци до зменшення [2,6].
Вщома здатнють NO впливати на широкий спектр ф1зюлопчних i патолопчних процеав у кишечнику, зокрема, на моторну функцш, киш-кову секрецш й абсорбцш, мехаызми пошкод-ження та репараци тканин, ¡нфекцшний процес [8]. У той же час повщомляеться про роль NO у кишечнику як потужно'Г цитотоксично'Г речовини. Одним ¡з механ1зм1в тако'Г дП' е утворення в реак-ци з супероксидним анюн-радикалом пероксиш-триту [17].
Даш лп"ератури по вщношенню до протективно'| або ж агресивно'Г дiï NO на кишечник е вкрай суперечливими. Незначна ктькють публкацш присвячена рол1 NO р1зного похо-дження у мехаызмах змш рухпивосп кишки та бактер1ально'| транслокаци за умов khlukoboï не-прохщност1 [14].
Проте не юнуе едино'!' думки щодо учасп pi3-них ланок системи NO у мехаызмах розвитку ГТКН. При цьому практично вщсуш дослщження про роль функцюнально'Г активносп NO-синтаз та утворення пероксиштриту у патогенез! пору-шень слизового бар'еру кишечнику та, зокрема, стану втьнорадикальних процеав у тканинах тонко! кишки за умов ГТКН.
Метою роботи було вивчення продукци актив-них форм кисню (супероксидного анюн-радикала) у тканинах tohkoï кишки за умов м го-стро'| непрохщност1 та змш функцюнального стану NO-синтаз (NOS).
Матср1али та методи
Дослщження були проведен! на 70 бтих щурах лжи BiCTap масою 180-200 г. У першш cepiï HeoôxiflHi показники вивчали у ¡нтактних тварини (контрольна); у друпй вщтворювали ГТКН (контрольна); у третш, четвертш та п'ятш сер1ях -тваринам з модельованою ГТКН вводили
вщповщно неселективний ¡нпбпчэр NOS - мети-ловий еф1р HiTpo-L-apriHiHy (L-NAME), селектив-ний ¡нпбпчэр нейронально'| NOS (nNOS) - 7-нпрождазол (7-NI) та селективний ¡нпбпчэр ¡ндуцибельно'1 NOS (¡NOS) - амжогуанщин; у шостш i сьомш сер1ях - щурам з ГТКН вводили вщповщно субстрат NOS - L-apriHiH та скевенд-жер пероксиштриту - L-селенометюнж (L-Sem). L-NAME вводили у доз1 5 мг/кг [12], 7-NI - 30 мг/кг [12], амшогуанщин - 20 мг/кг [18], L-apriHiH - 500 мг/кг [1] та L-Sem - 3 мг/кг [12]. Yci сполуки вводили внутршньоочеревинно за 20 хв. до початку вщтворення ГТНК.
Для вщтворення у пщдослщних тварин ГТКН проводили оперативне втручання пщ тюпенталовим наркозом (40 мг/кг маси тта). Ви-конували лапаротомш, в рану виводили петлю tohkoï кишки, знаходили та перев'язували одну з мапстральних вен брижк Кишку скпадали по типу "двостволки" [4]. Пюляоперацшну рану зашивали. Евтаназш тварин виконували методом дислокаци шийних хреб^в пщ еф1рним наркозом.
Для оцжки продукци супероксидного анюн-радикала (0~) у тканинах, що контактують ¡з зоною некрозу за умов ГТКН, нами визначена стандартна дтянка tohkoï кишки впродовж 2 см.
Утворення О 2 гомогенат1 кишки оцжювали при проведены тесту з штросишм тетразол1ем з ¡н-дукторами у вигляд1 шкотинамщаденждинукпео-тиду вщновленого (НАДН), шкотинамщаденж-динуклеотидфосфату вщновленого (НАДФН) i бактер1альних лтополюахарид1в (трогенал) [5].
Отримаш дат обробляли вар1ацшно-статистичним методом з використанням крите-piio Ст'юдента.
Результати дослпджснни та ïx обговорення
Через 6 годин шсля вщтворення ГТКН у тканинах стандартно!' дтянки tohkoï кишки вщм1ча-
еться суттеве збтьшення продукцП' О~ (табл. 1) м1кросомальним i мпч)хондр1альним ETJ1 вщповщно на 46.4% (р<0,001) та 45.0% (р<0,001), а також НАДФН-оксидазною системою лейкоци-tîb - на 46.3%(р<0,01).
Таблиця 1.
Змми продукци супероксидного ашон-радикала у стандартнШ дтянцi тонко)'кишки бтих uiypie за умов моделювання пгост-
poï HenpoxidHocmi протягом 6 годин та введения iHziôimopie NOS (М±т, п=25)
Показники Cepiï дослав
1нтактна група ГТКН ГТКН + NAME ГТКН + 7-NI ГТКН + амшо-гуанщин
Продукта О j кпкросомальним ETJ1 22.2±0.7 32.5±0.9 * 26.6±0.9 */** 25.2±1.0 */** 20.9±0.7 **
Продукта О j мп"охондр1альним ETJ1 24.2±0.8 35.1±1.2 * 39.4±1.0 */** 38.1±0.8 * 29.0±0.7 */**
Продукта О j НАДФН-оксидазою лейкоци"пв 1.08±0.11 1.58±0.12 * 1.52±0.16* 1.64±0.19* 1.48±0.22
ÎIpuMimKa. В табл. 1. /' наступних: *- р<0,05 у пор1внянн1 з iнтактною групою тварин; **- р<0,05 у пор1внянн1 з даними контрольно'!' серп з eidnoeidHUM термтом в1дтворення ГТКН.
Нами виявлено, що на продукцш 02 у тканинах тонко! кишки у значнш Mipi впливае функцю-нальна активнють NOS.
Так, введения L-NAME перед вщтворенням 6-годинноГ ГТКН обмежуе пщвищення вироблення
О 2 м1кросомальним ETJ1 у тканинах tohkoï кишки - на 18.2 % (р<0,001), проте збтьшуе його продукцш мпч)хондр1альним ETJ1 - на 12.3% (р<0,02). Введения селективного ¡нпбпчэру nNOS
7-NI обмежуе зростання вироблення 02 м1кросомальним ETJ1 - на 22.5% (р<0,001) та ¡стотно не позначаеться на продукцП' 02 mîto-хондр1ями та лейкоцитами. Введения селективного ¡Hri6iTopy ¡NOS амшогуанщину попереджае
збтьшення продукцП' 02 у тканинах tohkoï кишки за умов ГТКН. При цьому вироблення О 2 м1кросомальним i мпч)хондр1альним ETJ1 вщповщно на 35.7% (р<0,001) та 17.4% (р<0,001) поступаеться даним друго'Г cepiï (з вщтворенням ГТКН).
Вщомо, що м1кросомальний ETJ1, з яким пов'язана НАДФНчндукована продукц1я 02, мае сшльы компоненти з НАДФН-диафоразою -маркером NOS [10]. Тому пригычення NO-синтаз
може позначатися на продукцП' О ~ [15,19].
Властивютю конституцюнальних NOS е мож-ливють утворення О ~ за умов дефщиту L-арпшну чи тетрагщробюптерину. Коли мае м1сце роз'еднання переносу електрошв в оксигеназних ферментах, кисень стае единим акцептором
електрошв, що призводить до утворення О ~ [15,19]. Якщо р1вень L-apriHiHy стае нижче 100 мкмоль/л, ¡нщшоване НАДФН окиснення не спо-лучаеться ¡з синтезом NO NOS, що збтьшуе
продукцш 02. При дефщит1 тетрагщробюпте-рину ендотел1альна NOS генеруе на конкурентна ochobî 02, Н202 та NO. Вщновлення р1вня тетрагщробюптерину призводить до вщновлення максимально'!' продукцП NO [7,9].
Таблиця 2.
Змми продукцп супероксидного ашон-радикала у стандартнШ дтянцi тонко)'кишки бтих uiypie за умов моделювання iïaocm-poï HenpoxidHocmi протягом 6 годин та введения субстрату NOS та скевенджера nepoKCUHimpumy (М±т, п=20)
ПримИ"но, що введения бтим щурам субстрату NOS L-Arg перед моделюванням 6-годинноГ ГТКН (табл. 2) також не ттьки не
сприяе збтьшенню продукцП' 02, але й обмежуе цей процес. Так, вироблення О 2 MiKpo-сомальним ETJ1 за цих умов зменшуеться - на 16.0% (р<0,01), мп"0Х0ндр1альним ЕТЛ - на 15.7% (р<0,01) у пор1внянш з даними друго'Г cepiï.
Вплив L-Sem за умов 6-годинно'Г ГТКН неоднозначно впливае на продукцш О 2 р1зними дже-релами у тканинах tohkoï кишки: достов1рно не позначаеться на виробленш О ~ м1кросомаль-ним ЕТЛ, обмежуе його продукцш м1тохондр1а-льним ЕТЛ (на 13.4%, р<0,02), збтьшуе вироблення О 2 НАДФН-оксидазною системою лейкоците (на 19.6%, р<0,05) у пор1внянш з даними друго'Г cepiï.
Вщома здатнють пероксиштриту пригшчувати НАДФН-залежш шляхи продукцП 02, пов'язана з НАДФН-цитохром Р450 редуктазою [16] та НАДФН-оксидазою нейтрофт1в (за цГМФ-незалежним мехашзмом) [11].
Обмеження вироблення О ~ мпч)хондр1альним ЕТЛ при дП L-Sem, очевидно, вщбивае здатнють пероксиштриту пригшчувати бюенергетичнш процеси у кл1тинах (¡нактивувати НАДН- та сук-цинат-залежш мп"охондр1альш ферменты ком-плекси (МФК), руйнувати Ре5-кластер1в, штрува-ти акоштазу, окиснювати тюлов1 групи аденшну-клеотидтранслокази та креатинкшази) [17]. По-рушення функцюнування мпч)хондр1ального ЕТЛ (особливо МФК-1) та зменшення ресинтезу АТФ (про цей факт за умов вщтворення ГТКН ми по-вщомляли рашше [3]) вважаються кпючовими
чинниками пперпродукци О мембраною мпчэхондрш [13,17].
внутр!шньою
Показники Cepiï дослав
1нтактна трупа ГТКН ГТКН + L-apriHiH ГТКН + селеио-MeTioHiH
Продукта О 2 кпкросомальним ЕТЛ 22.2±0.7 32.5±0.9 * 27.3±0.9 */** 35.0±0.7 *
Продукта О 2 м1тохондр1альним ЕТЛ 24.2±0.8 35.1±1.2 * 29.6±1.1 */** 30.4±1.2 */**
Продукта О 2 НАДФН-оксидазою лейкоци"пв 1.08±0.11 1.58±0.12 * 1.55±0.14* 1,89±0.06 */**
У динамщ! ГТКН продукц1я О Г у тканинах ЕТЛ та НАДФН-оксидазою лейкоцитт у тканинах
,, 2 „„ Т0НК01 кишки - ВЩП0В1ДН0 на 80.2% (р<0,001),
тонко! кишки збтьшуеться. Через 18 годин 847% (р<0,001) та 68.5% (р<0,01) перевищуе
(табл. 3) mсля вщтворення ГТКН вироблення дан| ¡нтакгноТ серп.
02 (табл. 3) м1кросомальним, мпч)хондр1альним
Таблиця 3
Змши продукцп супероксидного ашон-радикала у стандартнШ дтянцi тонко)'кишки бтих uiypie за умов моделювання ))'гостро)' HenpoxidHocmi протягом 18 годин та введения ¡Hzi6imopie NOS (М+т, п=25)
Показники Cepiï дослав
1нтактна група ГТКН ГТКН + NAME ГТКН + 7-NI ГТКН + амшо-гуанщин
Продукта О j кпкросомальним ЕТЛ 22.2± 0.7 40.0±0.8 * 26.1 ±1.1 */** 25.8±0.7 */** 24.1 ±1.4 **
Продукта О j мггохондр1альним ЕТЛ 24.2±0.8 44.7±1.0 * 39.3±1.2 */** 39.0±0.8 */** 37.1 ±1.6 */**
Продукта О j НАДФН-оксидазою лейкоци"пв 1.08±0.11 1.82±0.14* 1.77±0.2 * 1.79±0.14* 1.69±0.18*
Введения 1_-ЫАМЕ перед вщтворенням модел1 18-годинноТ ГТКН обмежуе пщвищення продукцп'
О 2 у тканинах тонкоТ кишки м1кросомальним \ мп"0Х0ндр1альним ЕТЛ - вщповщно на 34.7% (р<0,001) та 12.1% (р<0,01). При введения 7-Ы1 результати дослщження под1бы до
данихпопередньо!' серп: вироблення О ~ у тканинах тонко'!' кишки м1кросомальним \ мпч)хондр1альним ЕТЛ вщповщно на 35.5%
Змти продукцп супероксидного ашон-радикала у стандартнШ ро1' непрох1дност1 протягом 18 годин та введения
(р<0,001) та 12.8% (р<0,001) поступаеться да-ним друго!' cepiï (з вщтворенням ГТКН). Введения амшогуанщину перед вщтворенням модел1 18-годинно!' ГТКН попереджае збтьшення
продукцП' О 2 у тканинах тонко!' кишки м1кросомальним ЕТЛ - на 39.7% (р<0,001), мп"0Х0ндр1альним ЕТЛ - на 17.0% (р<0,01) у пор1вняны з даними друго!' cepiï.
Таблиця 4
дтянцi тонко)'кишки бтих mypie за умов моделювання ))' гост-субстрату NOS та скевенджера nepoKCUHimpumy (М±т, п=20)
Показники Cepiï дослав
1нтактна група ГТКН ГТКН +L-apriHiH ГТКН +селено-метюнш
Продукта О j кпкросомальним ЕТЛ 22.2±0.7 40.0±0.8 * 36.2±1.1 */** 34.8±1.7 *
Продукта О j мггохондр1альним ЕТЛ 24.2±0.8 44.7±1.0 * 40.6±0.7 */** 35.8±0.9 */**
Продукта О j НАДФН-оксидазою лейкоци"пв 1.08±0.11 1.82±0.14* 1.57±0.16* 1.78±0.11 *
При введены 1_-Агд перед вщтворенням 18-годинно!' ГТКН (табл. 4), як \ за умов 6-годинно!'
ГТКН, виявляеться обмеження продукцп 02 мн кросомальним \ мпч)хондр1альним ЕТЛ - вщповщно на 9.5% (р<0,02) та 9.2% (р<0,01) у пор1в-нянш з даними друго!' серп. Введения Ь-Бет за умов 18-годинно!' ГТКН
достов1рно не впливае на продукцш 02 м1кросомальним ЕТЛ - на 13.0% (р<0,02) та НАДФН-оксидазною системою лейкоцит1в у тканинах тонко!' кишки, проте обмежуе вироблення
О^ мп"0Х0ндр1альним ЕТЛ (на 19.9%, р<0,001).
Таким чином, збтьшуеться ктькють 02, вироблення якого пов'язано з участю пероксиштриту. Висновки
1. ЫО-синтазний мехашзм утворення оксиду азоту суттево впливае на продукцш супероксидного анюн-радикала м1кросомальним електро-нно-транспортним ланцюгом у тканинах тонко!' кишки бтих щур1в за умов моделювання и гост-
poï непрохщност1. Застосування неселективного ¡Hri6iTopy NO-синтаз (L-NAME), селективних ¡нп-6iTopiB ¡NOS (амшогуанщину) та nNOS (7-нпрошдазолу) попереджуе ¡стотне збтьшення продукцп супероксидного анюн-радикала MiKpo-сомами.
2. Пперпродукц1я супероксидного анюн-радикала мп"охондр1альним електронно-транспортним ланцюгом у тканинах тонко!' кишки бтих щур1в за умов и гостро!' непрохщносп (протягом 6 годин) пов'язана з функцюнуванням ¡н-дуцибельно!' ¡зоформи NO-синтази. Застосування селективного ¡нпбпчэру ¡NOS (амшогуаш-дину) попереджуе збтьшення вироблення супероксидного анюн-радикала мп"охондр1альним електронно-транспортним ланцюгом. Застосування неселективного ¡нпбпчэру NOS (L-NAME) пщвищуе вироблення супероксиду, що вказуе на роль конституцшних NOS у попереджены у цей термш патолопчного процесу пперпродукцп супероксидного ан1он-радикала мп"охондр1ями.
3. У п1зньому nepiofli розвитку гостро!' тонкоки-шково!' непрохщност1 (через 18 годин) rinepnpo-
дукц1я супероксидного анюн-радикала м1тохонд-р1альним електронно-транспортним ланцюгом у тканинах tohkoï кишки бтих щур1в пов'язана з функцюнуванням як ¡ндуцибельно'Г, так i нейро-нально'| ¡зоформи NO-синтази. Застосування неселективного ¡нпбпчэру NO-синтаз (L-NAME), се-лективних ¡Hri6iTopiB ¡NOS (амшогуанщину) та nNOS (7-нпрошдазолу) обмежуе вироблення супероксиду мп"0Х0ндр1ями.
4. Застосування L-apriHiHy обмежуе rinepnpo-дукцш супероксидного анюн-радикала MiKpoco-мальним i мп"охондр1альним електронно-транспортними ланцюгами у тканинах tohkoï кишки бтих щур1в за умов моделювання и гост-poï HenpoxiflHOCTi.
5. Утворення пероксиштриту неоднозначно впливае на генерацш супероксидного анюн-радикала р1зними електронно-транспортними ланцюгами у тканинах tohkoï кишки бтих щур1в за умов моделювання ïï гостро'Г непрохщностг Застосування скевенджеру пероксиштриту (L-селенометюншу) обмежуе пперпродукцш ц1е'| речовини мпч)хондр1ями (за умов 6- та 18 годин-ного процесу) та збтьшуе вироблення супероксиду НАДФН-оксидазою лейкоцит1в (за умов 6-годинно! HenpoxiflHOCTi).
.Штература
1. Дробшська О. Вплив L-apriHiHy на ураження в слизовш оболонц1 шлунка, спричинеж cepoTOHiHOM / О. Дробшська, Л. Остапченко, О. Цирюк [та ¡н.] // BicH. Льв1в. ун-ту. Сер. бюл. - 2004. - Вип. 38. -С. 201-204.
2. Жданов С. М. Комплексне лкування гостроТ тонкокишковоТ не-npoxiflHOCTi з використанням ранньоТ ентеральноТ Tepaniï (KniHi-ко-експериментальне дослщження) : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. мед. наук : спец. 14.01.03 "Xipyprifl" / С.M. Жданов-к., 2008.-21 с.
3. Левков A.A. Енергетичний обмш у тканинах tohkoï кишки за умов ÏÏ гостроТ HenpoxiflHOCTi та змши функцюнальноТ активност1 NO-синтаз / A.A. Левков // Актуальш проблеми сучасноТ медицини: BicH. УкрашськоТ мед. стоматол. академм. - 2009. - Т.9, №2. -С.86-90.
4. Пат. 21676 А Украша, МПК А61В 17/00, А61В 17/12. Cnociö моделювання гостроТ тонкокишковоТ HenpoxiflHOCTi / Л1гоненко О.В.,
Реферат
NO-ЗАВИСИМЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРОДУКЦИИ СУПЕРОКСИДНОГО АНИОНА-РАДИКАЛА В ТКАНЯХ ТОНКОЙ КИШКИ В УСЛОВИЯХ ЕЕ ОСТРОЙ НЕПРОХОДИМОСТИ Левков А.А, Костенко В.А.
Ключевые слова: острая тонкокишечная непроходимость, супероксидный анион-радикал, оксид азота, NO-синтазы, пероксинитрит
В эксперименте на 70 белых крысах исследована продукция супероксидного анион-радикала (.02) в тканях тонкой кишки при ее острой непроходимости и изменениях функционального состояния NO-синтаз (NOS). Выявлено, что применение неселективного ингибитора NO-синтаз (метилового эфира нитро-1_-аргинина, L-NAME), селективных ингибиторов индуцибельной (аминогуанидина) и нейро-
нальной (7-нитроиндазола) NOS предупреждает существенное увеличение продукции . 02 микросомами. Применение селективного ингибитора ¡NOS предупреждает увеличение выработки . 0 2 мито-
хондриальной электронно-транспортной цепью. Применение L-NAME повышает выработку . 02 при 6 часовой непроходимости, что указывает на роль конституциональных NOS в предупреждении в данный срок гиперпродукции . 02 митохондриями. В позднем периоде развития непроходимости (через
18 часов) гиперпродукция . 02 митохондриальной электронно-транспортной цепью связана с функционированием как индуцибельной, так и нейрональной NOS. Применение неселективного ингибитора NOS, селективных ингибиторов ¡NOS и nNOS ограничивает выработку . 02 митохондриями. Отме-
Жданов С.М., Дмитрук О.М., Чорна I.O. - № U200611924 ; заявл. 2006.11.13; опубл. 2007.03.15. Бюл. № 3
5. Цебржинский О.И. Дифференцированное спектрофотометриче-ское определение продукции супероксида в тканях НСТ-тестом / О.И. Цебржинский // Актуальш проблеми сучасноТ медицини: BicH. УкраТнськоТ мед. стоматол. академи. - 2002. - Т. 2, №1. -С.96-97.
6. Чернов B.H. Острая непроходимость кишечника (патогенез, клиническая картина, диагностика и лечение) / B.H. Чернов, Б.М. Велик// - М. : Медицина, 2008. - 512 с.
7. Alp N.J., Channon К.М. Regulation of endothelial nitric oxide synthase by tetrahydrobiopterin in vascular diseases / N.J Alp, K.M.Channon // Arterioscl. Thromb. Vase Biol. - 2004. - V.24. -P.413-420.
8. Dijkstra G. Targeting nitric oxide in the gastrointestinal tract / G. Dijkstra, H. van Goor, P.L. Jansen, H. Moshage // Curr. Opin. Inves-tig. Drugs. - 2004. - V.5, №5. - P. 529-536.
9. Forstermann U. Janus-faced role of endothelial NO synthase in vascular disease: uncoupling of oxygen reduction from NO synthesis and its pharmacological reversal / U Forstermann // Biol. Chem. - 2006. - V.387, №12. - P.1521-1533.
10. Kathy K. NAD(P)H oxidase: Role in cardiovascular biology and disease / K. Kathy // Circ. Res. - 2000. - V.86. - P.494-502.
11. Klink M. Signal transduction pathways affected by nitric oxide donors during neutrophil functional response in vitro / M. Klink, K. Bednarska, K. Jastrzembska [et al.] // Inflamm. Res. - 2007. - V. 56, №7. - P. 282-290.
12. Laude K. NO produced by endothelial NO synthase is a mediator of delayed preconditioning-induced endothelial protection / K.Laude, J.Favre, C. Thuillez [et al.] // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. -2003. - V.284, №6. - P.2053-2060.
13. Murphy M.P. How mitochondria produce reactive oxygen species / M.P. Murphy // Biochem. J. - 2009. - V.417. - P.1-13.
14. Palasthy Z. Intestinal nitric oxide synthase activity changes during experimental colon obstruction / Z. Palasthy, J. Kaszaki, G. Lazar [et al.] // Scand. J. Gastroenterol. - 2006. - V. 41, №8. - P.910-918.
15. Pou S. Mechanism of superoxide generation by neuronal nitric-oxide synthase / S. Pou, L. Keaton, W. Surichamorn, G.M. Rosen // J. Biol. Chem. - 1999. -V. 274, №14. - P.9573-9580.
16. Sergeeva S.V. Effect of selenolipoic acid on peroxynitrite-dependent inactivation of NADPH-cytochrome P450 reductase / S.V. Sergeeva, I.A. Slepneva, V.V. Khramtsov // Free Radic. Res. - 2001. -V.35, №5. - P.491-497.
17. Szabo S. Peroxynitrite: biochemistry, pathophysiology and development of therapeutics / C.Szabo, H.lschiropoulos, R.Radi // Nature Rev. - 2007. - V. 6. - P.662-680.
18. Takeuchi K. Role of endogenous nitric oxide (NO) and NO synthases in healing of indomethacin-induced intestinal ulcers in rats / K.Takeuchi, R.Hatazawa, M.Tanigami [et al.] // Life Sci. - 2007. - V. 80, №4. - P.329-336.
19. Xia Y. Superoxide generation from endothelial nitric-oxide synthase: A Ca2+/calmodulin-dependent and tetrahydrobiopterin regulatory process / Y. Xia, A.-L. Tsai, V. Berka, J.L. Zweier // J. Biol. Chem. -1998. - V.273, №40. - P.25804-25808.
чена способность L-аргинина ограничивать гиперпродукцию . 02 микросомальной и митохондриаль-ной электронно-транспортными цепями. Применение скевенджера пероксинитрита (L-селенометионина) ограничивает гиперпродукцию . 02 митохондриями (при 6 - и 18 часовой кишечной
непроходимости) и увеличивает выработку . 02 НАДФН-оксидазой лейкоцитов (при 6 - часовой непроходимости).
Summary
NO-DEPENDENT CHANGES IN SUPEROXIDE ANION-RADICAL PRODUCTION IN THE SMALL INTESTINE UNDER CONDITIONS OF ITS ACUTE OBSTRUCTION Levkov A.A., Kostenko, V.A.
Key words: acute intestinal obstruction, superoxide anion-radical, nitric oxide, NO-synthase, peroxynitrite.
Superoxide anion-radical production (.O^) in small intestine under its acute obstruction and NO-synthase functional activity changes have been studied in experiment on 70 white rats. We have found the use of nonselective NO-synthases inhibitor (NG-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME), selective inhibitors of inducible
(aminoguanidine) and neuronal (7-nitronidazole) NOS prevents excessive increase in production . O^ by microsomes.
The use of a selective inhibitor of iNOS prevents increasing in . О ¡generation by mitochondrial respiratory chain. Application of L-NAME increases . O^ production for 6-hour obstruction, which indicates the role of the constitutional NOS in the prevention . O^ mitochondrial overproduction at given period. At the late period of obstruction (18 hours) . O^ mitochondrial hyperproduction associated with the action both inducible and neuronal NOS. Application of nonselective inhibitor NOS, iNOS and nNOS selective inhibitors restricts . О~ mitochondrial overproduction. We have found L-arginine limits . O^ overproduction by both microsomal and mitochondrial electron transport chain. Peroxynitrite scavenger (L-selenomethionine) administration limits . O^ mitochondrial hyperproduction (under 6th- and 18th-hour intestinal obstruction), and increases . O^ production by NADPH oxidase of leukocytes (under 6th- hour occlusion).
УДК: 616.5-001.28/.29-085.275-085.454.1-092.9
МЕМБРАН0ПР0ТЕКТ0РН0Е ДЕЙСТВИЕ МАЗИ ТИ0ТРИА30ЛИНА ПРИ ДЕЙСТВИИ НА КОЖУ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ
Звягинцева Т.В., Миронченко С.И., Нардид O.A., Желнин Е.В.
Харьковский национальный медицинский университет, Харьков, Украина
Изучено влияние мази тиотриазолина на барьерные функции клеточных мембран кожи с помощью метода электронного парамагнитного резонанса при локальном ионизирующем облучении. Методом электронного парамагнитного резонанса подтвержден мембраноповреждающий эффект ионизирующего излучения. У облученных животных выявлены нарушения проницаемости клеточных мембран кожи, проявляющиеся резким уменьшением интенсивности и уширением спектра электронного парамагнитного резонанса. Мазь тиотриазолина при действии на кожу ионизирующего излучения оказывала мембранопротекторное действие. Характер изменения спектров электронного парамагнитного резонанса при применении мази тиотриазолина свидетельствовал об отсутствии повреждающего действия облучения на барьерные свойства клеточных мембран.
Ключевые слова: кожа, ионизирующее излучение, электронный парамагнитный резонанс, тиотриазолин
При лучевой терапии онкологических больных, Ранние лучевые повреждения кожи, развива-работе с ионизирующими источниками, угрозе ющиеся после однократного воздействия иони-лучевых поражений во время техногенных ава- зирующего излучения, внешне схожи с ожогами, рий кожные покровы обязательно подвергаются но отличаются от них преобладанием симпто-воздействию ионизирующего излучения, что мов, обусловленных альтерацией и гибелью может приводить к развитию местных лучевых тканей; поздним развитием отграничения пора-повреждений [1-3]. жения и восстановления тканей, частым замед-
* Зв'язок публмацП'з плановими науково-досл!дними роботами - eidnoeidHO до план1в науково-дослЮних poöim Харк'тського нацюнального медичного университету МОЗ УкраГни «Досл)дження шлях:в фармаколоячноТ корекцп несприятливих nacnidxie стресу» (№ державно)' реестрацп 0103U004548); «Створення, досл)дження та патогенетичне обфунтування застосування нових комб/нованих лкарських засоб)в та лкарських засо6)в пол)тропно)' дп» (№ державно)'реестрацп 0109U001748).
