CC BY
53
Химия растительного сырья. 2014. №4. С. 293-296.
DOI: 10.14258/jcprm.201404118
Краткие сообщения
УДК 615.322:581.6.011.4 НЕЙРОТРОПНЫЕ ЭФФЕКТЫ ЭКСТРАКТА АЛЬФРЕДИИ ПОНИКШЕЙ
© Р.Н. Мустафин1', И.В. Шилова2, Н.И. Суслов2, A.A. Бакибаев1, Д.М. Медведев1, Е.В. Дорожко1, Е.В. Булычева1, Е.Г. Черемпей1, К.А. Мичурина1
1 Национальный исследовательский Томский политехнический университет, пр. Ленина, 30, Томск, 634050 (Россия), e-mail: [email protected] 2НИИ фармакологии СО РАМН, пр. Ленина, 3, Томск, 634028 (Россия)
Целью работы являлось сравнение различных психоактивных эффектов экстрактов альфредии поникшей, определяющих действие растения. С помощью методов «стресс-подвешивание», «принудительное плавание с грузом», «приподнятый крестообразный лабиринт», «резидент - интрудер», «неизбегаемое плавание по Namura» было установлено, что экстракт альфредии обладает широким спектром психотропных эффектов. Ключевые слова: альфредия поникшая, нейротропное действие.
Работа выполнена при финансовой поддержке гранта ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 годы» Министерства образования и науки ГК № 14.В37.21.0566.
Ранее была установлена ноотропная активность экстракта альфредии поникшей Alfredia cernua (L.) Cass, Asteraceae [1]. Известно, что ноотропное действие включает различные церебро- и нейротропные радикалы. Целью работы явилось сравнение различных психоактивных эффектов экстракта альфредии.
В работе использовали надземную часть альфредии поникшей, собранной в период цветения. Дикорастущее растение собирали в окрестностях перевала Ябочанского Усть-Канского района Республики Алтай, культивируемое растение собрано на экспериментальном участке Сибирского ботанического сада при Томском государственном университете. Высушенное воздушным способом сырье измельчали и просеивали через сито с диаметром отверстий 0,63 мм. Экстракт получали экстрагированием измельченного сырья 95% этанолом трижды при нагревании с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин при соотношении сырье - экстрагент 1 : 15. Полученные извлечения объединяли и упаривали в вакууме при температуре не более 60 °С. Экстракт содержит 0,66% флавоноидов в пересчете на изокверцитрин.
Сухой остаток составляет не менее 16%.
Фармакологические исследования проводились на белых аутбредных мышах обоего пола и крысах-самках. Животные получены из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии (г. Томск, сертификат имеется). Животных содержали в стандартных условиях вивария на обычном рационе кормления. Умерщвление проводили передозировкой эфирного наркоза. Стресспротекторное действие изучали в тесте «стресс-подвешивание» [2]; адаптогенное действие экстракта исследовали в тесте «принудительное плавание с грузом» [3]; анксио-литическое действие исследовали в тесте «припод-
Мустафин Рустам Ниязович - аспирант, e-mail: [email protected] Шилова Инесса Владимировна - доктор фармацевтических наук, научный сотрудник лаборатории фитофармакологии Суслов Николай Иннокентьевич - доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий лабораторией фитофармакологии
БакибаевАбдигали Абдиманапович - доктор химических наук, профессор, заведующий кафедрой физической и аналитической химии
Медведев Дмитрий Михайлович - инженер кафедры
физической и аналитической химии
Дорожко Елена Владимировна - преподаватель кафедры
физической и аналитической химии
Булычева Елизавета Владимировна - студентка
Черемпей Елена Геннадьевна - научный сотрудник
Мичурина Ксения Андреевна - студентка
Автор, с которым следует вести переписку.
294
Р.Н. Мустафин, И.В. Шилова, Н.И. Суслов и др.
нятый крестообразный лабиринт» [4]; антидепрессантное действие исследовали в тесте «неизбегаемое плавание по Машига» [5]; антиагрессивное действие исследовали в тесте «зоосоциальное поведение» [6, 7]. Токсичность экстракта проверяли введением его мышам в дозах 5000 и 7000 мг/кг. Полученные данные обрабатывали статистически.
На фоне стресса, сопровождавшегося, помимо прочего, характерным изъязвлением слизистой оболочки желудка, введение экстракта способствовало достоверному снижению числа изъязвлений; противоязвенная активность (индекс Паулса в патологическом контроле / индекс Паулса в группе) экстракта составила 11,3 (табл. 1).
При изучении влияния экстракта на физическую работоспособность и адаптацию к нагрузкам установлено, что курсовое (5 дней) введение экстракта приводило к увеличению времени плавания (на уровне тенденции) и достоверно увеличивало время пребывания на плаву в условиях дезадаптации.
Исследование животных в условиях методики «приподнятый крестообразный лабиринт» показало, что такие показатели, как общее время в открытых/закрытых рукавах, вертикальная активность, которые характеризуют тревожную компоненту поведения, достоверно отличались от значений в интактном контроле и приближались по значениям к данным препарата сравнения - феназепама. Это свидетельствует о наличии у экстракта анксиолитического действия.
В тесте поведенческого отчаяния, применяемом для изучения антидепрессантных свойств фармакологически активных веществ, введение экстракта альфредии увеличивало основные показатели метода - количество оборотов вращающихся колес и время замирания - до уровня животных, получавших амитриптилин.
Исследования зоосоциального поведения мышей в модели «резидент - интрудер» показало, что при равном числе введение экстракта оказывало выраженное антиагрессивное действие, что проявлялось в отсутствии агрессивного поведения.
При изучении острой токсичности установлено, что разовое введение экстракта в высоких дозах (5000 и 7000 мг/кг) не вызывало гибели животных в течение 2 недель с начала эксперимента (табл. 2). Это говорит о низкой токсичности извлечения.
Таблица 1. Спектр нейропротекторных свойств экстракта альфредии поникшей
Тип фармакологического действия и используемый метод исследования Стресспротекгорное (тест «стресс-подвешивание») (п = 6) Адаптогенное (тест «принудительное плавание с грузом») (п = 8) Анксиолитическое (тест «приподнятый крестообразный лабиринт») (п = 6) Антидепрессантное (тест «неизбегаемое плавание по Ыашига») (п = 10) Антиагрессивное (тест «зоосоциальное поведение») (п = 8)
Опытная группа Показатели метода
Степень выраженности стресса, баллы Индекс Паулса Процент прироста времени плавания на 5-е сутки Процент убыли времени плавания при сшибке рефлекса Общее время в открытых рукавах, с Вертикальная активность Число оборотов колес Время замирания, с Число контактов Индекс агрессии
Интактный контроль, aq.pur. Патологический контроль, aq.puг. Экстракт альфредии, 100 мг/кг Ноотропил, 400 мг/кг Амитриптилин, 10 мг/кг Феназепам, 1 мг/кг 0 15 11 0 8,5 0,8 49,80% 59,20% 18,50% -56,90% -21,90% -31,30% 21,4±7,2 64,1±6,8* 104±14,1* 0,3±0Д 1,6±0,3* 1,6±0,3* 79,1±13,9 106,5±15,6 70,4±9,4 101,2±7,4 155,1±11,1* 153,7±19,4* 12,8±1,5 10,0±2,0 28,1±15,5 0
* различия достоверны в сравнении с интактным контролем (р < 0,05)
Нейротропные эффекты экстракта Альфредии поникшей
295
Таблица 2. Влияние на выживаемость и прирост массы тела мышей-самок при исследовании острой токсичности экстракта альфредии на 95% этаноле (X + т, п = 6)
Группа наблюдения, доза Прирост массы тела, % Количество погибших животных
7-е сутки 14-е сутки 7-е сутки 14-е сутки
Интактный контроль 5,61 ± 0,38 5,48 ± 1,2 0 0
Экстракт альфредии 5000 мг/кг 4,85 ± 0,87 3,12 ± 0,64 0 0
Экстракт альфредии 7000 мг/кг 1,7 ± 1,1* 2,3 ± 0,81 0 0
* различия достоверны в сравнении с интактным контролем (р<0,05)
Таким образом, показано, что экстракт альфредии обладает широким спектром психотропных эффектов и отвечает ряду классических требований, предъявляемых к поиску ноотропных средств [8]: среди радикалов его действия установлены психостимулирующий, антиастенический, транквилизирующий, антидепрессивный, ноотропный, адаптогенный радикалы. Кроме этого, следует отметить антигипоксический эффект [9], также включаемый в перечень радикалов ноотропного действия.
Список литературы
1. Мустафин Р.Н., Шилова И.В., Суслов Н.И., Кувачева Н.В., Амельченко В.П. Ноотропная активность экстрактов из дикорастущей и культивируемой альфредии поникшей // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2010. Т. 150. №9. С. 302-304
2. Добряков Ю.И. Скриниговый метод оценки антистрессорного действия препаратов. // Стресс и адаптация : Тезисы всесоюзного симпозиума. Кишинев, 1978. С. 172.
3. Бобков Ю.Г., Виноградов В.М., Катков В.Ф. и др. Фармакологическая коррекция утомления. М., 1984. 208 с.
4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2005. 832 с.
5. Середенин С.Б., Молодавкин Г.М., Воронин М.В. и др. Антидепрессивное действие афобазола в тестах Porsolt и Namura // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2009. Т. 72. №1. С. 19-21.
6. Войтенко H.H. Влияние пренатального повышения уровня дельта-сон индуцирующего пептида на агрессивное поведение в тесте резидент-интрудер и на моноаминооксидазу мозга среднеагрессивных мышей А/Не // Нейрохимия. 2007. Т. 24. №3. С. 224-231.
7. Михеев В.В., Шабанов П.Д Нейрофармакологический анализ межполушарной асимметрии мозга в регуляции поведения, болевой чувствительности и анальгезии у мышей разных генетических линий // Психофармаколо-гияибиологическая наркология. 2007. Т. 7, вып. 3-4. С. 2131-2145.
8. Нисс А.И. Место нейрометаболических стимуляторов (церебропротекторов) в современной систематике психотропных средств и основные виды их клинической активности // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1984. №5. С. 750-756
9. Мустафин Р.Н., Шилова И.В., Суслов H.H., Бакибаев A.A. Исследование антигипоксических свойств альфредии поникшей // Вестник Карагандинского университета. 2012. №4(68). С. 19-23.
Поступило в редакцию 17 октября 2013 г.
После переработки 27 марта 2014 г.
296
P.H. MyCTA®HH, H.B. fflH^OBA, H.H. CycnOB H flP.
Mustafin R.N.1*, Shilova I.V.2, Suslov N.I.2, Bakibaev A.A.1, Medvedev D.M.1, Dorozhko E.V.1, Bulicheva E.V.1, Cherempey E.G.1, Michurina K.A.1 NEUROTROPHIC EFFECTS OF COMPOUNDS OF ALFREDIA CERNUA EXTRACT 1National Research Tomsk Polytechnic University, pr. Lenina, 30, Tomsk, 634050 (Russia) 2Institute of Pharmacology SB RAMS, pr. Lenina, 3, Tomsk, 634028 (Russia) e-mail: [email protected]
The aim of the work was to compare the effects of different psychoactive of extract Alfredia and differentiation of the nature of the compounds that make up the plant. Using techniques of «stress - hanging», «forced swimming with a load», «elevated plus maze», «zoosocial behavior», «Namura swimming test» it was found that the extract Alfred bowed has a broad spectrum of psychotropic activity. It was concluded that pharmacological radicals of plant nootropic action caused by flavonols. Keywords: Alfredia cernua, neurotropic action, flavonols .
References
1. Mustafin R.N., Shilova I.V., Suslov N.I., Kuvacheva N.V., Amel'chenko V.P. Bjulleten'jeksperimental'noj biologii i mediciny. 2010, vol. 150, no. 9, pp. 302-304. (in Russ.).
2. Dobrjakov Ju.I. Stress i adaptacija : tezisy vsesojuznogo simpoziuma. [Stress and adaptation: Abstracts of the AllUnion Symposium]. Kishinev, 1978, p. 172. (in Russ.).
3. Bobkov Ju.G., Vinogradov V.M., Katkov V.F. i dr. Farmakologicheskaja korrekcija utomlenija. [Pharmacological correction of fatigue]. Moscow, 1984, 208 p. (in Russ.).
4. Rukovodstvo po jeksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniju novyh farmakologicheskih veshhestv. [Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances]. Moscow, 2005, 832 p. (in Russ.).
5. Seredenin S.B., Molodavkin G.M., Voronin M.V. i dr. Jeksperimental'naja i klinicheskaja farmakologija. 2009, vol. 72, no. 1, pp. 19-21. (in Russ.).
6. Vojtenko N.N. Nejrohimija. 2007, vol. 24, no. 3, pp. 224-231. (in Russ.).
7. Miheev V.V., Shabanov P.D. Psihofarmakologija i biologicheskaja narkologija. 2007, vol. 7, no. 3-4, pp. 21312145. (in Russ.).
8. Niss A.I. Zhurnal nevropatologii ipsihiatrii im. S.S. Korsakova. 1984, no. 5, pp. 750-756. (in Russ.).
9. Mustafin R.N., Shilova I.V., Suslov N.I., Bakibaev A.A. Vestnik Karagandinskogo universiteta. 2012, no. 4(68), pp. 19-23. (in Russ.).
Received October 17, 2013 Revised March 27, 2014
* Corresponding author.
