CC BY
25
ВЕСТНИК ВолГМУ
УДК 616-008.6-002.2.001.1-085.5:547.436
НАРУШЕНИЯ ТКАНЕВОГО ОБМЕНА ЛИПИДОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЭНДОТОКСИКОЗЕ
И ИХ КОРРЕКЦИЯ ТАУФОНОМ
В.В. Новочадов
Кафедра патологической анатомии ВолГМУ
Ранее было показано, что при хроническом эндотоксикозе (ЭТ) продукты нарушенного обмена липидов, оказывая повреждающее действие на паренхиматозные клетки печени, легких и почек, активно участвуют в формировании полиорганной недостаточности [4-6].
В последние годы представления о биологических эффектах бета-сульфоаминоэтановой кислоты (таурина) значительно расширились, в особенности в плане участия в процессах де-токсикации. Таурин и продукты его биотрансформации за счет ограничения медиаторного каскада и распространения эндогенных токсических веществ по организму способны к уменьшению органного повреждения и фиброгенеза в печени, легких, почках, миокарде на фоне хронических интоксикаций [8, 9, 10].
(Cavalier, Чехия) в соответствии с инструкциями производителя. Были выделены фракции фос-фолипидов, триглицеридов, свободных жирных кислот (СЖК), холестерина и его эфиров.
Активность триацилглицерол-липазы (КФ 3.1.1.3) определялась по скорости расщепления трио-леина, активность фосфолипазы А2 (КФ 3.1.1.4) -по скорости образования холина из фосфати-дилхолина в слабокислой среде в присутствии ионов Ca2+. Концентрация малонового диальде-гида (МДА) в тканях определялась по реакции с тиобарбитуровой кислотой [2]. Интенсивность свободно-радикального окисления липидов определяли методом биохемолюминесценции на аппаратном комплексе "BIOLUM" (Биоавтоматика, Россия) с индукцией перекисью водорода и сульфатом железа [1].
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучение изменений липидного обмена в тканях печени, легких и почек при хроническом ЭТ и возможности их коррекции препаратом таурина.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты были выполнены на 24 белых крысах обоего пола массой 180-220 г. Животным трех опытных групп (по 6 крыс каждая) вводили липополисахарид S.Thyphi (Sigma, USA) внутрибрюшинно по 0,1 мг/кг массы ежедневно. Интоксикацию ЛПС сочетали с введением препарата Тауфон (Курскфарм, Россия) из расчета 50 мг/кг в сутки, препарата Эссенциале (Berlin Chemie, Германия) из расчета 0,1 мл/кг в сутки или стерильного физиологического раствора. Шесть крыс контрольной группы получали только инъекции физиологического раствора. В качестве интегральных показателей развития эндотокси-коза было использовано определение веществ среднемолекулярной массы (ВСММ) и их олиго-пептидной фракции так, как это описано в [3], а также активности ацилазы (КФ 3.5.1.14) в тканях почек и печени [7]. Гистологическому исследованию подвергали ткани печени, почек и легких. Содержание общих липидов в биологическом материале определяли фосфорнованили-новым методом с использованием наборов Lachema (Чехия), липидный спектр - тонкослойной хроматографией на пластинках "Силуфол"
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
К 30 суткам эксперимента у крыс регистрировались достоверные признаки ЭТ (табл. 1) в виде увеличения содержания в крови ВСММ и олиго-пептидной фракции, сниженной активности тканевых ацилаз печени и почек, развития жирового гепатоза с начальными проявлениями фиброза, хронической интерстициальной токсической пневмонии и дисметаболической нефропатии.
В ткани печени Тауфон уменьшал накопление липидов при ЭТ в 1,65 раза, Эссенциале -в 1,27 раза. Тауфон оказывал влияние не только на содержание в печени фосфолипидов и СЖК, но и на обмен триглицеридов, активность свободно-радикального окисления липидов и содержание МДА (табл. 2).
В ткани легких, для которой при ЭТ характерным являлось умеренное уменьшение содержания холестеринового пула и активности липаз при увеличении содержания фосфолипидов, СЖК и МДА, лишь применение Тауфона оказывало частичное корректирующие влияние. Обращало на себя внимание также относительно высокая активность тканевых липаз легких.
Использование Эссенциале сопровождалось увеличением содержания липидов в легких преимущественно за счет триглицеридов и неэс-терифицированного холестерина, существенного изменения активности тканевых липаз и свобод-норадикального окисления не наблюдалось.
12
2004
ВЕСТНИК ВолГМУ
Таблица 1
Показатели выраженности эндотоксикоза у крыс при хроническом введении ЛПС на фоне экспериментальной терапии таурином (М+т)
Показатели Контрольная Группа Хронический эндотоксикоз (30 сут.)
Без коррекции Ежедневное введение
Тауфон Эссенциале
ВСММ плазмы, усл. ед. Олигопептиды, мг/л, МДА, нмоль/г липидов Ацилаза печени мкКат/г белка Ацилаза почек мкКат/г белка 0,18+0,02 124,5+9,3 5,61+0,42 26,42+2,13 38,98+3,64 0,28+0,03* 201,6+16,7* 14,57+1,27* 12,99+1,16* 25,71+3,14* 0,19+0,02# 176,5+19,0* 7,61+0,68*# 22,69+2,70# 25,46+2,21* 0,20+0, 02# 189,8+16,0* 11,15+1,31* 20,02+2,23# 24,91+2,56*
Примечание. Здесь и в табл. 2:
* - достоверные различия с показателями в контрольной группе,
# - по сравнению с группой без коррекции
Таблица 2
Изменения липидного обмена в тканях печени, легких и почек у крыс при хроническом ЭТ на фоне экспериментальной терапии таурином (М+т)
Контрольная группа Хронический эндотоксикоз (30 сут.)
Показатели Без коррекции Ежедневное введение
Тауфон Эссенциале
Ткань печени
Липиды, % 6,03+0,16 8,31+0,50* 6,53+0,55# 7,08+0,65
Фосфолипиды, мкмоль/г 3,53+0,27 2,11+0,17* 2,84+0,25 3,71+0,40#
Триглицериды, мкмоль/г 1,65+0,17 4,33+0,35* 1,82+0,16 1,97+0,20
СЖК, мкмоль/г 2,60+0,22 1,16+0,15* 2,27+0,20# 2,51+0,23
Холестерол, мкмоль/г 3,62+0,29 2,75+0,30* 2,96+0,31 3,07+0,25
Эфиры холестерина, мкмоль/г 1,57+0,18 4,51+0,37* 2,79+0,24 2,26+0,15
Триглицероллипаза, мкКат/г белка 24,33+2,55 19,50+2,21 16,97+2,03 16,02+1,93
Фосфолипаза, мкКат/г белка 35,31+4,23 39,80+4,55 30,75+2,74# 38,82+4,05#
МДА, мкмоль/г липидов 4,00+0,22 8,75+0,91* 6,64+0,62 10,43+1,11
Амплитуда вспышки, мВ 1,24+0,11 2,96+0,14* 1,14+0,10 3,20+0,27*
Светосумма, усл. ед. 9,33+0,52 16,24+1,05* 7,59+0,52*# 19,30+1,03*
Ткань легких
Липиды, % 5,58+0,30 4,15+0,36* 5,83+0,41# 6,64+0,51*#
Фосфолипиды, мкмоль/г 1,70+0,16 2,40+0,15* 2,15+0,14 2,47+0,30*
Триглицериды, мкмоль/г 1,64+0,29 1,91+0,22 1,57+0,17 2,54+0,22*#
СЖК, мкмоль/г 1,30+0,21 2,66+0,30* 1,84+0,20# 2,77+0,23*
Холестерол, мкмоль/г 2,64+0,37 2,09+0,35 1,97+0,22 3,63+0,45*#
Эфиры холестерина, мкмоль/г 3,21+0,07 1,64+0,38* 2,96+0,15 2,67+0,15#
Триглицероллипаза, мкКат/г белка 16,80+1,70 11,40+1,26 * 41,34+3,77*# 26,74+3,33#
Фосфолипаза, мкКат/г белка 25,20+3,30 19,05+1,76 * 34,88+4,01*# 27,51+3,08
МДА, мкмоль/г липидов 4,09+0,34 12,59+1,53* 5,70+0,50# 9,35+0,37#
Амплитуда вспышки, мВ 2,15+0,14 2,30+0,21 1,88+0,15 2,15+0,14
Светосумма, усл. ед. 12,29+0,89 12,50+1,16 10,25+0,72*# 13,15+1,29
Ткань почек
Липиды, % 7,54+0,42 5,75+0,60 5,49+0,40 6,52+0,46#
Фосфолипиды, мкмоль/г 3,32+0,34 2,52+0,27 3,03+0,25 3,21+0,28
Триглицериды, мкмоль/г 2,06+0,38 2,49+0,31 2,11+0,18 2,46+0,19
СЖК, мкмоль/г 2,47+0,29 4,50+0,70 3,12+0,44 3,38+0,41
Холестерол, мкмоль/г 3,77+0,13 3,71+0,33 3,88+0,40 3,50+0,38
Эфиры холестерина, мкмоль/г 4,05+0,40 2,57+0,26 2,80+0,33 2,45+0,26
Триглицероллипаза, мкКат/г белка 9,83+0,80 40,70+5,12* 28,91+3,02*# 17,55+0,90#
Фосфолипаза, мкКат/г белка 15,00+1,60 49,30+6,17* 27,44+2,66*# 24,90+2,31 #
МДА, мкмоль/г липидов 3,96+0,42 9,61 + 1,14* 6,59+0,61*# 9,19+0,93
Амплитуда вспышки, мВ 3,44+0,25 3,22+0,24 2,40+0,16* 3,85+0,26
Светосумма, усл. ед. 24,12+1,37 22,75+1,34 16,38+1, 16*# 31,54+1,70*#
4848532323232323232323234823
48532323482353232323232323232323
ВЕСТНИК ВолГМУ
12
2004
В ткани почек, где изменения тканевого обмена липидов при ЭТ в целом сходны с тканью легких, за исключением относительно более высокого уровня липолитической активности, применение Тауфона вызывало весьма умеренные изменения в сторону нормальных показателей. Применение Эссенциале оказывало еще менее выраженное влияние.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При хроническом ЭТ применение Тауфона способно оказывать положительное влияние на тканевой обмен липидов, частично нормализуя состав липидов, активность липолитических ферментов и выраженность свободнорадикаль-ного окисления липидов. По своему эффекту он сопоставим, а по отдельным моментам превосходит метаболическое действие препарата Эс-сенциале. Положительные метаболические эффекты Тауфона наиболее активно проявляются в ткани печени и легких, в меньшей степени - в ткани почек.
ЛИТЕРАТУРА
1. Журавлев А.И. // Вопр. мед. химии - 1996. -№ 1. - С. 9-15.
2. Камышников В.С. Руководство по клинико-биохимической лабораторной диагностике. В 2 т. -Минск, 2000. - Т. 1. - 495 с.
3. Малахова М.Я. Метод оценки эндогенной интоксикации. - СПб., 1995. - 72 с.
4. Новочадов В.В. Патология липидного обмена при эндотоксикозе: Автореферат дисс. ... доктора мед. наук. - Волгоград, 2001. - 35 с.
5. Новочадов В.В. // Вестник Волгоградской медицинской академии. - № 7. - Волгоград, 2001. - С. 26-28.
6. Новочадов В.В. // Фундаментальные исследования. - 2004. - № 1. - С. 113-114.
7. Фролов В.И., Жуков С.А., Новочадов В.В. Способ определения токсичности химических веществ: АС СССР № 1163264. - Опубл. 23.10.91. Бюлл. № 39.
8. Eppler B., Dawson R. Jr. // Biochem. Pharmacol. -2002. - Vol. 63, № 6. - P. 1051-1060.
9. Kim S.K., Kim Y.C. // Food Chem. Toxicol. -2002. - Vol. 40, № 4. - P. 545-549.
10. Sato S, Yamate J., Saito T, et al. // Naunyn. Schmiedebergs. Arch. Pharmacol. - 2002. - Iss. 365 (4). -P. 277-283.
Novochadov V.V. Disturbances of tissue lipid metabolism in chronic experimental endotoxicosis, and their correction by Taufon // Vestnik of Volgograd state medical University. - 2004. - № 12. - P. 10-12.
Modeling the endotoxicosis by chronic administration of low doses of bacterial lipopolysaccharide it was shown that Taufon (beta-sulfoaminoethane acid) might partially correct disturbances of tissue lipid metabolism. Taufon improved the alterations of lipid content, activity of lipases, and free radical oxidation in tissues of inner organs. liver, lungs, kidneys. Their metabolic effects were compared to Essenciale drug.
УДК 616.381-002.001.6-092:599.323
СОДЕРЖАНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1 а В КРОВИ И ТКАНЯХ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРИТОНИТЕ У МЫШЕЙ
И.А. Фастова, И.Ф. Ярошенко
Кафедра патологической физиологии ВолГМУ
Как известно, интерлейкин-1 (ИЛ-1) продуцируется моноцитами, макрофагами, естественными киллерами, В-клетками, нейтрофила-ми, фибробластами, клетками Лангерганса, дендритными, эндотелиальными, синовиальными и гладкомышечными клетками. Они индуцируют лихорадку, анорексию, продукцию и секрецию других цитокинов и острофазных белков, экспрессию интегринов, хемотаксис грану-лоцитов [4].
Развитие острого гнойного перитонита, безусловно, сопровождается увеличением содержания ИЛ-1 в крови [6]. В то же время данные о содержании ИЛ-1 в других органах практически отсутствуют.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Провести сравнительное изучение содержания ИЛ-1 в различных органах и жидких средах у мышей при остром перитоните.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проводили под нембутало-вым наркозом на 25 белых мышах-самцах, средней массы 22,5 г, с соблюдением принципов гуманного обращения с лабораторными животными (приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.77). Среди экспериментальных животных выделяли 5 групп. В контрольной группе были 4 интактные мыши, того же генотипа, пола и возраста. В остальных 4 группах было по 5 мышей. 2 группа была выведена из эксперимента через 1 час от начала опыта; 3-я - через 3 ч; 4 - через 6 ч; 5 - через 24 ч. Перитонит вызывали путем интраперитонеально-го введения 1 мл 7 %-й аутокаловой смеси с 1 каплей скипидара в физиологическом растворе [2, 5]. Биоптаты тканей массой 10 мг гомогенизировали на холоде и центрифугировали в пробирочном буфере при 2000 д в течение 10 мин [1, 3]. Для анализа отбирали супернатант. Кровь собирали в стеклянные пробирки без стабилизаторов при
