CC BY
42
ВЕТЕРИНАРНЫЕ НА УКИ
УДК 636.5:612.335
Т.Ю. Понкратова, В.В. Семченко
Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина, Омск
МОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ КРОССА РОСС 308 ПО ИСТЕЧЕНИИ 15-х и 21-х СУТОК
ПОСТНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА
В статье представлены результаты морфометрического анализа двенадцатиперстной кишки цыплят-бройлеров РОСС 308 в возрасте 15 и 21 сут постнатального периода. В слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки имеются ворсинки пальцевидной и листовидной формы. Высота ворсинок после 15 сут постнатального развития в проксимальном (на расстоянии 5 мм от привратника желудка) и дис-тальном (на 10 мм ниже большого дуоденального сосочка) отделах двенадцатиперстной кишки неодинакова, после 21 сут происходит увеличение высоты ворсинок в проксимальном отделе (р < 0,05). Количество бокаловидных клеток в кишечном эпителии ворсинок двенадцатиперстной кишки в краниальном отделе после 15 сут меньше, чем по истечении 21 сут (р < 0,05). В собственной пластинке дуоденальные железы отсутствуют. Толщина собственной пластинки слизистой оболочки по истечении 15 и 21 сут в проксимальном и дистальном отделах имеет достоверные отличия (р < 0,05). При измерении толщины мышечной пластинки слизистой после 15 сут и 21 сут существенных изменений в показателях не отмечено. Толщина мышечной оболочки после 21 сут в проксимальном отделе на 15% больше, чем в дис-тальном (р < 0,05). Таким образом, в изучаемые возрастные периоды отмечены достоверные различия показателей количества кишечных ворсинок на единицу длины, высоты кишечных ворсинок, толщины собственной пластинки слизистой и ширины мышечной оболочки проксимального и дистального участков двенадцатиперстной кишки.
Ключевые слова: цыплята-бройлеры, двенадцатиперстная кишка, морфология, ворсинки, крипты, мышечная оболочка, гистология.
Введение
В современной России мясное птицеводство - наиболее устойчивая и динамично развивающаяся отрасль агропромышленного комплекса, обеспечивающая население страны высококачественной диетической продукцией [6]. Особое значение мясное птицеводство приобретает в условиях перехода на импортозамещение. К числу критериев оценки изменения продуктивности птицы, а также оценки потенциала создаваемого кросса относится гистологическая характеристика тонкого отдела кишечника, в том числе двенадцатиперстной кишки цыплят [1].
Клетки слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки секретируют компоненты кишечного сока, в его состав входят многочисленные ферменты, участвующие в расщеплении (переваривании) пищи. Также в двенадцатиперстной кишке происходит интенсивное всасывание минеральных солей, витаминов, а также аминокислот, жирных кислот, моно- и дисахаров. Быстрорастущие птицы имеют большую поверхность ворсинок [7].
© Понкратова Т.Ю., Семченко В.В., 2017
Для получения современных представлений о гистофизиологии пищеварительной системы и обоснования применения кормовых добавок и кормов относительно продуктивных качеств птицы требуется изучение особенностей гистологического строения кишечника, характерных для каждого кросса.
Цель исследования: изучить строение двенадцатиперстной кишки в её краниальном и каудальном отделах цыплят-бройлеров кросса РОСС 308 в возрасте 15 и 21 сут постнатального развития.
Объекты и методы
Исследование проведено в зимний период 2016 г. на базе Института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина на цыплятах-бройлерах кросса РОСС 308, взятых в ОАО «Птицефабрика Сибирская». Сформировано две группы цыплят-бройлеров: 15- и 21-суточного возраста (по шесть голов в каждой). Цыплята содержались на стандартном рационе. Птицу выводили из эксперимента путем декапитации, в условиях эфирного наркоза.
У цыплят каждой группы были взяты поперечные и продольные фрагменты краниального (на расстоянии 5 мм от привратника желудка) и каудального отделов (на 10 мм ниже большого дуоденального сосочка) двенадцатиперстной кишки. Взят материал в соответствии с приказом МЗ СССР от 12.08.1977 г. № 755 «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных». Материал фиксировали в 10%-ном нейтральном растворе формалина на фосфатном буфере фирмы ООО «Биовитрум», блоки заливали в парафин по общепринятой методике [2]. На ротационном микротоме Labo Cat 4055 (фирма Slee, Германия) готовили срезы толщиной 3-5 мкм, окрашивали их гематоксилином и эозином. Использовали сертифицированное лабораторное оборудование. Измерение гистологических структур проведено при помощи окулярной линейки микрометра МОВ-1-15х. Количество кишечных ворсинок и желез определяли на 10 мм длины кишки.
В работе применены описательно-оценочные методы и морфометрический анализ. Для статистической обработки данных использована компьютерная программа Statisticа-6.0 [4]. Морфометрические показатели структурных компонентов стенки двенадцатиперстной кишки приведены в таблице. Гистологическое строение стенки двенадцатиперстной кишки (дистальный отдел) цыплят-бройлеров по истечении 21 сут пост-натального периода на рисунке.
Гистологическое строение стенки двенадцатиперстной кишки (дистальный отдел) цыплят-бройлеров по истечении 21 сут постнатального периода. Ув. х 40: 1 - собственная пластинка слизистой оболочки; 2 - мышечная пластинка слизистой оболочки; 3 - подслизистая основа; 4 - мышечная оболочка
Морфометрические показатели стенки двенадцатиперстной кишки цыплят бройлеров кросса РОСС 308
Возраст цыплят-бройлеров 15 сут 21 сут 15 сут 21 сут
Показатель Проксимальный отдел, мкм Дистальный отдел, мкм
Высота ворсинки 1272,0 ± 154,3*** 1651,2 ± 152,4* 1461,3 ± 146,3*** 1631,0 ± 153,5**
Длина кишечной железы 236,3 ± 42,3 250,0 ± 31,9 232,2 ± 34,9 246,3 ± 28,3
Высота энтероци-тов в средней части ворсинки 22,0 ± 2,1 24,1 ± 3,3 21,7 ± 1,8 24,2 ± 2,4
Высота энтероци-тов в базальной части ворсинки 22,0 ± 2,0 20,1 ± 2,0 24,7 ± 1,6 20,0 ± 1,8
Толщина собственной пластинки 175,1 ± 17,0 210,3 ± 15,0 243,8 ± 25,3*** 257,0 ± 7,0***
Толщина мышечной пластинки слизистой оболочки 24,0 ± 6,3 24,3 ± 6,2 25,0 ± 7,7 30,5 ± 8,3
Толщина мышечной оболочки 234,3 ± 13,0*** 302,0 ± 54,7* 245,4 ± 30,9*** 286,0 ± 41,6**
Примечание. *р < 0,05 - достоверность различий между показателями проксимальных отделов двенадцатиперстной кишки у цыплят-бройлеров через 15 и 21 сут постнатального периода развития; **р < 0,05 - достоверность различий между показателями дистальных отделов двенадцатиперстной кишки у цыплят-бройлеров через 15 и 21 сут; ***р < 0,05 - достоверность различий между показателями проксимального и дистального отделов двенадцатиперстной кишки цыплят-бройлеров по истечении 15 и 21 сут.
Результаты и обсуждение
При изучении слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки обнаружено: после 15 сут постнатального периода у цыплят в наличии все четыре оболочки, свойственные для этого отдела кишечника. В слизистой оболочке количество кишечных ворсинок составляет 18 на 10 мм в краниальном отделе и 19 на единицу длины в каудальном отделе двенадцатиперстной кишки, после 21 сут 28 и 24 на 10 мм соответственно (р < 0,05 в краниальном отделе). Высота ворсинок в проксимальном и дистальном отделах неодинакова, ворсинки дистального отдела на 13% выше (р < 0,05). В слизистой оболочке у кишечных ворсинок пальцевидная и листовидная форма. Листовидные ворсинки располагаются в антимезентеральном участке поперечного сечения кишки, а пальцевидные преобладают в противоположном, брыжеечном, участке. В дистальном отделе также располагаются листовидные ворсинки. Кроме того, в дистальном участке обнаруживаются ворсинки с волнистой поверхностью. Через 21 сут происходит ряд изменений, связанных с ростом птицы и интенсивностью пищеварительных процессов. Высота ворсинок после 21 сут увеличивается (по сравнению с 15-ми сут) в проксимальном и дистальном отделах на 23 и 10% соответственно.
Характеристика кишечной ворсинки дана с выделением в ней трех частей: верхушечной, средней и базальной. Поверхность ворсинок двенадцатиперстной кишки выстлана однослойным призматическим эпителием, состоящим из высоких призматических клеток, на их апикальной поверхности имеется щеточная каемка. Высота каемчатых энтероцитов через 15 сут в средней части кишечных ворсинок в дистальном и проксимальном отделах одинакова (таблица), а высота энтероцитов в базальной части кишечных ворсинок в дистальном отделе равняется 24,7 ± 1,6 мкм, а в проксимальном -
22,0 ± 2,0 мкм. Среди каемчатых энтероцитов у цыплят через 15 сут появляются мигрирующие лейкоциты (преимущественно лимфоциты). По истечении 21 сут высота каемчатых энтероцитов в средней и базальной части ворсинок в проксимальном и дисталь-ном отделах определяется на одинаковом уровне (таблица). Количество бокаловидных клеток ворсинок двенадцатиперстной кишки в краниальном и каудальном отделе через 15 сут составляет 106,0 ± 7,0 и 130,0 ± 5,0 на 10 мм, через 21 сут 120,0 ± 5,2 и 140,0 ± 6,3 на единицу длины соответственно (р < 0,05 в краниальном отделе).
Длина кишечных желез от устья до основания через 15 и 21 сут не отличается (таблица). Длина кишечных желез через 15 сут в проксимальном отделе 320,0 ± 2,0 на 10 мм, в каудальном отделе 353,0 ± 3,3 на 10 мм, через 21 сут 344,0 ± 2,5 и 366,0 ± 3,2 на единицу длины соответственно (р > 0,05).
Через 15 сут постэмбрионального развития обнаружено два типа кишечных желез, гистологическое строение которых отражает характер их функции. Эпителий I типа кишечных желез от их основания до устья состоит преимущественно из бокаловидных экзокриноцитов, между ними недифференцированные клетки. Фигуры кариокинеза в таких криптах немногочисленны.
В кишечных железах II типа основу эпителия составляют крупные с оксифильно-зернистой цитоплазмой и круглым светлым ядром клетки (панетовские клетки). Очевидно, кишечные железы первого типа продуцируют преимущественно слизистый секрет, а второго типа содержат одноклеточные железы, секретирующие гидролитические ферменты. Подобное распределение по типам и функциям кишечных желез описано в литературе [5].
Через 15 сут в подслизистой основе дистального отдела двенадцатиперстной кишки антимезентерального участка ее стенки обнаружены диффузные участки лим-фоидной ткани. Располагается она между кишечными железами и врастает в ворсинки кишки, увеличивая в объеме их строму. В некоторых ворсинках лимфоидная ткань достигает верхушки. Толщина собственной пластинки слизистой оболочки через 15 сут в проксимальном и дистальном отделах 175,1 ± 17,0 и 243,8 ± 25,3 мкм, через 21 сут 210 ± 15,0 и 257 ± 7,0 мкм соответственно (р < 0,05).
В подслизистой основе во всех изученных участках двенадцатиперстной кишки дуоденальные железы не выявлены.
Толщина мышечной пластинки по истечении 15 сут определена на уровне 24,0 ± 6,3 и 25,0 ± 7,7 мкм, через 21 сут - 24,3 ± 6,2 и 30,5 ± 8,3 в проксимальном и дис-тальном отделах соответственно. Толщина мышечной оболочки через 15 сут в проксимальном и дистальном отделах одинакова (р > 0,05), а через 21 сут в проксимальном отделе на 15% больше, чем в дистальном (таблица).
Межмышечное нервное сплетение, расположенное между внутренним и наружным мышечными слоями, представлено интрамуральными нервными ганглиями крупных размеров и содержит нервные клетки и отростки нейронов.
Выводы
У цыплят-бройлеров РОСС 308 в постнатальном онтогенезе отмечены достоверные морфометрические изменения слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки; количество ворсинок через 15 сут в краниальном отделе - 18 на единицу длины, а через 21 сут - 28 на единицу длины (р < 0,05).
Высота кишечных ворсинок слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки в дистальном отделе через 15 сут на 13% выше, чем в проксимальном, а через 21 сут высота ворсинок проксимального отдела на 23% выше, чем в дистальном (р < 0,05).
Количество бокаловидных клеток в кишечных ворсинках в краниальном отделе через 15 сут 106,0 ± 7,0 на 10 мм, а через 21 сут - 120,0 ± 5,2 на единицу длины (р < 0,05).
В подслизистой основе отсутствуют дуоденальные железы.
Мышечная оболочка изменяется в процессе постнатального онтогенеза, ее толщина через 21 сут в проксимальном отделе на 15% шире, чем в дистальном.
Межмышечное нервное сплетение содержит крупные вегетативные нервные ганглии, расположенные с частотой 5-6 на единицу длины.
T. Yu. Ponkratova, V. V. Semchenko
Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin, Omsk
Morphometric characteristics duodenal of broiler chickens cross ROSS 308 after 15- and 21-day postnatal period
The article presents the results of morphometric analysis of broiler chickens ROSS 308 duodenal ulcer at the age of 15 and 21 days post-natal period. The duodenal mucosa villi are finger-like and leaf-shaped. The height of the villi after 15 days of postnatal development in the proximal (at a distance of 5 mm from the pylorus), and distal (10 mm below the major duodenal papilla) duodenum departments varies, 21 days is an increase in the height of the villi in the proximal (p < 0.05). The number of goblet cells in the intestinal villus epithelium of the duodenum in the cranial section after 15 days less than 21 days (p < 0.05). In the lamina propria of duodenal glands absent. The thickness of the lamina propria mucosa after 15 and 21 days in the proximal and distal have significant differences (p < 0.05). When measuring muscular mucosal thickness of the plate after 15 days and 21 days of significant changes in terms are not marked. muscular layer thickness after 21 hours in the proximal 15% more than in the distal (p < 0.05). Thus, age periods studied significant differences observed quantity indicators of intestinal villi per unit length of intestinal villi height, mucosal own plate thickness and width of the tunica muscularis proximal and distal portions of the duodenum.
Keywords: broiler chickens, duodenum, morphology, villi, crypts, muscular layer, histology.
Список литературы
1. Грозина А.А. Морфологическая оценка стенки кишечника цыплят кросса «КОББ 500» на фоне применения антибиотика и пробиотика / А.А. Грозина, В.В. Пронин, М.С. Дюмин // Сельскохозяйственные животные. - 2014. - № 4. - С. 16-17.
2. Гистологическая техника / В.В. Семченко [и др.]. - 3-е изд., доп. и перераб. - Омск : Омская обл. типография, 2006. - 290 с.
3. Фисинин В.И. Первые дни жизни цыплят: от защиты от стрессов к эффективной адаптации / В.И. Фисинин, П. Сурай // Птицеводство. - 2012. -№ 2. - С. 11-15.
4. Халафян А.А. Статистический анализ данных / А.А. Халафян. - 3-е изд. - М. : Бином-Пресс, 2007. - 512 с.
5. Хэм А. Гистология / А. Хэм, Д. Кормак / пер. с англ. - М. : Мир, 1983. - Т. 4. - 245 с.
6. Effects of chicory root pouder on growth performance and histomorphometry of jejunum in broiler chicks / H. Izadi [i dr.] // Veterinary Research Forum. -2013. - № 4 (3). - Р. 169-174.
References
1. Grozina A.A. Morfologicheskaja ocenka stenki kishechnika cypljat krossa "KOBB 500" na fone primenenija antibiotika i probiotika / A.A. Grozina, V.V. Pronin, M.S. Djumin // Sel'skohozjajstvennye zhivotnye. - 2014. - № 4. - S. 16-17.
2. Gistologicheskaja tehnika / V.V. Semchenko [i dr.]. - 3-e izd., dop. i pererab. - Omsk : Omskaja obl. tipografija, 2006. - 290 s.
3. Fisinin V.I. Pervye dni zhizni cypljat: ot zashhity ot stressov k jeffektivnoj adaptacii / V.I. Fisinin, P. Suraj // Pticevodstvo. - 2012. - № 2. - S. 11-15.
4. Halafjan A.A. Statisticheskij analiz dannyh / A.A. Halafjan. - 3-e izd. - M. : Binom-Press, 2007. -512 s.
5. Hjem A. Gistologija / A. Hjem, D. Kormak / per. s angl. - M. : Mir, 1983. - T. 4. - 245 s.
6. Effects of chicory root pouder on groshhth performance and histomorphometry of jejunum in broiler chicks / H. Izadi [i dr.] // Veterinary Research Forum. - 2013. - № 4 (3). - R. 169-174.
7. Gut microflora and intestinal morphology of commercial broiler chickens and Red Jungle Fowl fed diets containing palm kernel meal / I. Zulkifli i dr. // Arch. Geflugelk. - 2009. - № 73 (1). - Р. 49-55.
Понкратова Татьяна Юрьевна, аспирант, Омский ГАУ, [email protected]; Семченко Валерий Васильевич, д-р. мед. наук, проф., Омский ГАУ, [email protected].
7. Gut microflora and intestinal morphology of commercial broiler chickens and Red JUngle Foshhl fed diets containing palm kernel meal / I. Zulkifli i dr. // Arch. Geflugelk. - 2009. - № 73 (1). - R. 49-55.
Ponkratova Tatyana Yuryevna, Postgraduate, Omsk SAU, [email protected]; Semchenko Valery Vasilevich, Dr. Med. Sci., Prof., Omsk SAU, [email protected].
